全 文 ：是经校正后的长度。即:胶柱长度= 蛋白质迁移距离×
原胶柱长 (固定前 )
现胶柱长 (固定后 )各样品固定后的电泳谱带位置经校
正后 ,再分别与 pH梯度曲线对应 ,可方便地得到各
样品蛋白质成分的 PI,见表 2。我们先期的实验已经
证明该方法的精确性和可靠性 [ 5]。
表 2　 IFE各样品主要蛋白质成分的 PI
样品
固定前
胶长 ( cm)
固定后
胶长 ( cm)
电泳谱带
位置 ( cm)
PI
金钱白花蛇 9. 5 10. 2 7. 71; 8. 77; 10. 0 7. 0; 7. 5; 8. 1
水赤链游蛇 9. 5 10. 1 7. 29; 8. 35; 9. 62 6. 8; 7. 3; 7. 9
阿胶 8. 5 9. 2 2. 54; 3. 30; 6. 33; 7. 90 4. 56; 4. 82; 6. 35; 7. 09
龟胶 8. 9 9. 3 3. 26; 6. 60; 7. 99 4. 89; 6. 48; 7. 13
猪皮胶 8. 5 9. 2 6. 38; 7. 99 6. 37; 7. 13
鹿角胶 8. 8 9. 3 2. 70; 6. 48; 8. 33 4. 63; 6. 42; 7. 29
伪品胶 8. 5 9. 2 3. 10; 6. 24 4. 82; 6. 30
4. 6　样品蛋白质成分 PI均值的显著性测验:为获
得可靠的科学结论 ,将金钱白花蛇与其它蛇 ,阿胶与
其它胶蛋白质成分的 PI均值进行显著性测验 ,由于
实验的重现性好 ,故其显著性测验十分灵敏的结果
均为 P < 0. 01。
5　结果讨论
5. 1　 SDS-PAGE具有凝胶过滤和普通 PAGE分离
的双重效应 ,可灵敏地分离亚基分子量不同的蛋白
质 ,从图 1可见 ,不同来源的胶类、蛇类药材的电泳
图谱存在着显著的差异 ,可根据谱带的位置、数目、
着色程度方面来区别胶类、蛇类药材。 同时依据
SDS-PAGE技术的特点 ,可快速测定各样品中主要
蛋白质成分的分子量。
5. 2　大多数蛋白质在 SDS中是可溶的 ,如果一种
蛋白质是由相同的亚基所构成 ,那么未折叠的比折
叠的蛋白质对二硫键还原剂的还原作用更灵敏 ,其
在电场中的泳动位置更接近标准分子量的蛋白质电
泳位置。故用普通 PAGE难以获得清晰电泳图谱的
胶类药材 ,用 SDS-PAGE则可获得。
5. 3　蛋白质结合 SDS的量 ,受溶液 pH、离子强度
和缓冲液组分的影响 ,所以用 SDS-PAGE测定蛋白
质分子量时 ,在统一的条件下进行。
5. 4　 IFE两性电解质的加入是为了在电泳支持物
上产生“平滑”的 pH梯度 ,实践证明 ,只有在“平滑”
的 pH梯度的胶柱上 ,才能获得分辨率高的 IFE谱
带。
5. 5　 IFE即可获得分辨高的电泳图谱 (如图 2) ,也
可依据 IFE技术的特点测定样品蛋白质成分的 PI
(如表 2)。 PI确定后 ,我们可以将正品与伪品的 PI
作均值显著性测验 ,所得结论均 P < 0. 01。从而提示
我们 ,金钱白花蛇及其它蛇、阿胶与其它胶的 PI数
据可以做为二者内在质量的指标之一。 从而使难以
用传统方法鉴别真伪的动物类及其它种类的中药进
行电泳技术鉴别既有直观的图谱又有相应精确的定
量数据。
参考文献:
[1 ]　徐康森 ,郝苏丽 . SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法在药物分析中的
应用—— 蛋白及酶的分子量测定及其实验误差 [ J ]. 药物分析
杂志 , 1982, 2( 4): 193.
[ 2 ]　陈振江 ,张香梅 . 中药青葙子、土鳖虫的等电聚焦电泳研究
[ J] .中草药 , 1996, 27( 10): 593.
[ 3 ]　袁晓华 ,杨中汉 .植物生理生化实验 [ M ] . 北京:高等教育出
版社 , 1983.
[4 ]　陈振江 ,刘静芬 ,邹志凌 .阿胶及其伪品的 IFE研究 [ J ]. 中成
药 , 1998, 20( 12): 31.
[5 ]　陈振江 ,陈科力 ,王　曦 ,等 . 金钱白花蛇可溶性蛋白凝胶电泳
图谱的研究 [ J] .中草药 , 2000, 31( 5): 374.
气相色谱法测定健心片中冰片的含量
许　妍 1 ,周彦如 2 ,章　红 1
( 1. 江西省药品检验所 ,江西 南昌　 330046; 2. 江西药都樟树医药集团公司 ,江西 樟树　 331200)
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1090 02
　　健心片为江西樟树制药厂产品 ,是由毛冬青、三
七、红花、丹参、冰片等 7味中药制成的片剂。具活
血、止痛的功效 ,适用于心肌劳损、心绞痛、动脉硬化
等症。本品种目前的国家药品标准中只有检查项 ,无
法控制产品质量。因此 ,用气相色谱法建立冰片的含
量测定 ,以便准确定量。
·1090· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 12期
收稿日期: 2001-07-10作者简介:许　妍 ,中国药科大学毕业 ,理学士学位 ,主管药师 ,主要从事药品检验、新药审批、各级标准的起草以及药品的仪器分析工作 ,在国内公开刊物上发表论文数篇。
1　仪器与试药
岛津 GC-14B气相色谱仪 ,岛津 C-R6A积分
仪。联苯 (中国药品生物制品检定所 ,批号 0843-
9501) ,右旋龙脑对照品 (由天然冰片精制而成 ,气相
色谱面积归一化法测定含量为 99. 90% )。试剂均为
分析纯。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件与系统适用性试验:色谱柱: 以甲基
硅橡胶 ( SE-30)为固定相 (涂布浓度 5% ) ,玻璃柱
( 3. 2 mm× 2 m ) ;柱温 130℃ ,进样口温度: 200℃ ,
F ID检测器温度: 200℃ ;载气 ( N2 ): 60 K Pa,氢气
( H2 ): 100 K Pa,空气 ( O2 ): 50 K Pa;衰减: 2,纸速:
2 mm /min,进样量 2μL。在上述条件下 ,冰片与内
标峰及其他杂质峰达到基线分离 ,分离度均大于
1. 5,理论板数按右旋龙脑峰计算应不低于 1 000。
2. 2　内标溶液的制备: 精密量取内标物联苯
400 mg置 100 mL量瓶中 ,加醋酸乙酯溶解稀释至刻
度 ,摇匀 ,即得。
2. 3　对照品溶液的制备:精密称取右旋龙脑对照品
40 mg置 10 mL量瓶中 ,加内标溶液溶解并稀释至刻
度 ,摇匀 ,即得。
2. 4　线性关系的考察: 精密吸取上述对照品溶液
0. 5, 1, 2, 3, 4, 5μL,注入气相色谱仪 ,以右旋龙脑的
量为横坐标 ,内标物与右旋龙脑的色谱峰面积比值
为纵坐标 , 绘制标准曲线 , 得回归方 程 Y =
0. 157 4 X - 0. 031 9, r= 0. 999 8,表明右旋龙脑在
2～ 20μg范围内具有良好的线性关系。
2. 5　精密度试验: 上述对照品溶液重复进样 6次 ,
内标与对照品峰面积比值的 RSD为 0. 6%。
2. 6　重现性试验: 取同一批样品 5份测定 , RSD为
0. 8%。
2. 7　回收率试验:样品加样回收率测定结果为平均
回收率为 98. 87% , RSD为 0. 9% (n= 5)。
2. 8　样品的测定:取本品去包衣后研细 ,精密称取
4 g ,加乙醚 40 m L,超声处理 20 min,滤过 ,滤液挥
干 ,残渣加内标溶液转移到 10 mL量瓶中 ,用内标溶
液定容 ,摇匀 ,按 2. 1项下色谱条件测定 3批样品 ,
结果冰片含量 ( mg /片 )分别为 2. 5, 2. 6, 2. 6( RSD
在 0. 8% ～ 1. 0% )。
3　讨论
3. 1　通过考察不同的固定液色谱柱 , PEG-20M虽
然能分开冰片中的龙脑和异龙脑 ,但重现性不理想 ,
而且出峰时间较晚 ,峰形拖尾 ,理论板数较低。 而
SE-30分离出的峰形较好 ,分离结果稳定。
3. 2　曾对薄荷脑、正己酮、正庚烷、正十一醇、正十
四烷、正十八烷和联苯作为内标物质进行了筛选 ,以
联苯最佳。
图 1　健心片气相色谱图
小儿咽扁颗粒的质量控制
赵慧萍 ,严　红 ,闫血梅
(天津中医学院第一附属医院制剂室 ,天津　 300193)
中图分类号: R927. 11　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1091 02
　　小儿咽扁颗粒是由我院根据部颁标准进行移植
的药品 ,由金银花、射干、金果榄、桔梗、玄参、麦冬、
片黄、冰片 8味药组成。 此方具有清热利咽 ,解毒止
痛之功效。用于肺实热引起的咽喉肿痛 ,口舌糜烂 ,
·1091·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 12期
收稿日期: 2001-04-06