全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbMDrugs第36卷第lo期2005年10月· 567·
毛细管气相色谱法测定雷公藤中雷公藤甲素
饶毅。，魏惠珍1，席毅1，欧阳辉2，吕爱平1，杨世林a
(1．中药固体制剂制造技术国家工程研究中心，江西南昌 330006I3．江西中医学院，江西南昌 330004)
雷公藤TripterygiumwilfordiiHook．f．又名
黄藤、黄藤木、黄腊藤等，属卫茅科植物，是目前临床
治疗类风湿关节炎的中药材。雷公藤甲素(tripdio—
lide)是从雷公藤中分离的二萜内酯化合物，是治疗
类风湿关节炎的主要活性成分之一。目前雷公藤甲
素测定方法主要采用HPI。C法口。]。本实验采用柱
前衍生化气相色谱法对雷公藤甲素进行测定研究，
方法操作简便、重复性好、结果准确。
1仪器与试药
Agilent6890N气相色谱仪t包括63Ni电子捕获
检测器，安捷伦色谱工作站)；HP一5弹性石英毛细管
柱(30m×0．32mm×0．25pm，J&W，Temperature
I，imits：一60～325C)；KQ250DB型数控超声清
洗器(昆山超声仪器有限公司)；MetlerABl04一N分
析天平(梅特勒一托利多仪器有限公司)；雷公藤甲素
对照品(中国药品生物制品检定所，批号：1566—
200201)；氮气(体积分数99．999％，江西华东特种
气体研究所){雷公藤药材，购于江西益民大药房，产
地江西，经江西中医学院中药鉴定教研室葛菲教授
鉴定。
2方法与结果
2．1衍生化的原理：雷公藤甲素有一个羟基，极性
较大，导致其气相直接分离不是很好，通过与三氟乙
酐(TFAA)进行衍生化，产生三氟乙酐酯，雷公藤甲
素峰分离效果得到改善，和其他共存物分离良好。
2．2色谱条件与系统适应性实验：迸样口温度290
c，检测器温度320C，柱升温程序为初始温度100
c，保持1rain，以30C／rain升至290℃，保持15
mln；分流比50：1，载气为高纯氮，进祥量1pL，外
标法定量。理论塔板数不低于1×106，两个相邻色
谱峰的分离度应大于1．5。
2．3对照晶溶液的制备：精密称取经干燥至恒重的
雷公藤甲素对照品适量，加乙腈制成0．1mg／mL的
对照品溶液。精密移取对照品溶液0．3mI．于具塞
离心管中，氮气吹干，加入100pL四氢呋喃，40止
三氟乙酐，密闭。常温下反应35rain，氮气吹干，精
密加甲苯lmL溶解，即得。
2．4供试品溶液的制备：取雷公藤药材粉末2g，精
密称定，置100mI。具塞锥形瓶中，精密加入醋酸乙
酯50mL，称质量，超声处理45rain，放冷，再称定质
量，用醋酸乙酯补足减失质量，滤过，精密量取续滤
液25mL，水浴上浓缩至1～2mL，过中性氧化铝柱
(干法)(100～200目。3g，内径1～1．5cm)，用
50mL醋酸乙酯洗脱，收集洗脱液浓缩至1～2mL，
转移到具塞刻度离心管内，氮气吹于，加四氢呋哺
100ttI，，三氟乙酐40pL，密闭，衍生化35rain，氮气
吹干，以甲苯lmI．溶解，进样。以同法不加入样品
进行衍生化制得空白样品，进样，空白无干扰。色谱
图见图1。
图l重公藤甲素(A>和霄公藤药材(B)气相色谱丽
Fig．1GCChromatogramsoft ipdiolide(A)and
T．wilfordii(B)
2．5线性关系考察：分别取质量浓度为0．1rag／
mL对照品溶液2．5、5、10、40、80、100I。于5mL
具塞刻度离心管内，氮气欧干，加四氢呋喃100pI．，
三氟乙酐40止。密闭，衍生化35rain，氮气吹干，以
甲苯1mL溶解，进样。以进样量为横坐标(x)，峰面
积为纵坐标(y)，绘制标准曲线。得回归方程y=
136．0451x+11579 ，r一0．9998，表明雷公藤甲
素线性范围为0．0062～o．2480ng。
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作者简介。T饶el；嚣品；臀五蠢器’鼍要喜帛垒；骜鬟慧毖盖妻宴：告P分析化学专业博士研究生·研究方向为药物质量控制与新药开发
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万方数据
·1568· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第lo期2005年10月
2．6检测限的确定：用雷公藤甲索对照品溶液逐级
稀释后进样，用峰高相当于3倍噪音时对照品的质
量浓度表示，最低检测限为2．7ng／mL。
2．7重现性试验：取同一批号药材6份，制备供试
品溶液，按上述色谱条件进样分析，测定，计算雷公
藤甲素的质量分数，结果其RSD为2．66％(n一6)。
2．8精密度试验：精密吸取对照品溶液重复进样6
次，每次进样1止(分流比50：1)，测定雷公藤甲素
峰面积，计算得其RSD为0．94％(^=6)。
2．9稳定性试验：取供试品溶液，分别在0、2、4、8、
16、24h进样，每次进样1pL(分流比50：1)，测定
峰面积．结果雷公藤甲素峰面积RSD为1．78％，表
明供试品溶液在24h内稳定。
2．10加样回收率试验：精密称取含雷公藤甲素
7．79“g／g的药材粉末1g，共6份，按80％、100％、
120％水平分别精密加入雷公藤对照品，按供试品溶
液制备方法操作，按上述色谱条件进行测定，计算回
收率，结果雷公藤甲索的平均回收率为95．45％，
RSD为2．15％“一6)。
2．11样品测定：分别取不同批次的雷公藤药材约
2g，制备供试品，接上述色谱条件进行测定，3批药
材中雷公藤甲索的测定结果见表l。
袭1雷公藤中雷公藤甲素宙勺测定结果(H=3)
Table1 Determinationoftr pdiolideinsample(n一3)
3讨论
3．1色谱方法的选择：雷公藤甲素在药材中的量较
少，最大吸收波长为218nm，由于杂质干扰，很难采
用HPLC法做高灵敏度的检测；通过GC柱前衍生
法后进样，发现雷公藤甲素峰能达到较好的分离，灵
敏度明显增加，故采用柱前衍生法。
3．2提取条件的选择：根据雷公藤甲素的性质，提取
方式考察了超声，索氏提取等方法，并对不同溶剂、提
取时间、洗脱液用量进行了综合考察，同时考察了过
氧化铝色谱柱和不过氧化铝色谱柱对样品测定的影
响，最后确定了采用醋酸乙酯超声45min，过氧化铝
柱，洗脱液用量为50ml。为最佳提取方案。
3．3反应溶剂的考察：通过文献查找，采用四氢呋喃
和乙醚作为反应溶剂较多，本实验主要考察两者效果
间的差异。结果反应溶剂四氢呋喃明显优于乙醚。
3．4衍生时间的考察：雷公藤甲素与三氟醋酐在很
短的时间内就能达到很高的转移率，通过对雷公藤
甲素在衍生时间为lh内(5、10、20、30、40、60min)
量的变化情况比较，发现反应30min基本达到平
衡，最终把时问定为35min。
3．5升温程序选择：通过对升温程序的比较发现以
本实验采用程度升温时，雷公藤甲素峰和其他成分
分离良好，峰形较好。
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59．
(上接第1539页)
性结节的形成，造成前列腺增生。祖国医学认为前列
腺增生的病机之一为肾虚与湿浊内蕴，病久而常有气
滞与挟瘀，《医学心悟小便不通》日：“癃闭与淋证不
同。淋则便数而茎痛，癃闭则小便点滴而难通”。前列
通片由薜荔、两头尖、泽兰、黄芪、肉桂、小茴香、黄柏、
蒲公英、车前子、琥珀等10味中药组成。方中薜荔活
血通经、消痈，利尿通淋；两头尖活血祛瘀；泽兰活血
通经利尿，黄芪补气固本，配肉桂、小茴香通阳化浊。
兼用黄柏、蒲公英、车前子、琥珀清热解毒、活血散瘀、
利尿通淋以达到清利湿浊，化瘀散结的功效。现代药
理研究表明黄苠有利尿作用，能够降低生理性尿蛋白
的排泄。肉桂中桂皮醛有中枢及末梢性扩张血管的作
用，增强血液循环；肉桂油有抗菌作用。蒲公英、车前
子有利尿作用，蒲公英还有较强的抗菌和杀菌作用。
小茴香油可缓解痉挛、减少疼痛，还有抗菌作用。本实
验结果表明前列通片3个剂量对丙酸睾丸酮诱发的
小鼠前列腺增生和丙酸睾丸酮诱发的去睾丸大鼠前
列腺增生有抑制作用。均可使前列腺的质量及前列腺
指数降低，前列腺纤维组织增生减轻。其抑制前列腺
增生作用机制尚待深入研究。
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万方数据
毛细管气相色谱法测定雷公藤中雷公藤甲素
作者： 饶毅， 魏惠珍， 席毅， 欧阳辉， 吕爱平， 杨世林
作者单位： 饶毅,魏惠珍,席毅,吕爱平,杨世林(中药固体制剂制造技术国家工程研究中心,江西,南昌
,330006)， 欧阳辉(江西中医学院,江西,南昌,330004)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(10)
被引用次数： 1次

参考文献(3条)
1.Cheng H B;Tu S H;Yang G Improved RP-HPLC method of determination of triptiolide quantity in TWH
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