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Evaluation of in vitro antibacterial activities of Melaphis chinensis etc. 5 TCMs against 28 strains of enterococci with M-H agar medium

应用M-H琼脂进行五倍子等5种中药对28株肠球菌的体外抗菌活性观察



全 文 :mechanisms of SC.
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应用 M-H琼脂进行五倍子等 5种中药
对 28株肠球菌的体外抗菌活性观察
李仲兴 ,王秀华 ,张立志 ,岳云升 ,赵宝珍 ,陈晶波 ,李继红
(河北医科大学第二医院 ,河北 石家庄  050000)
摘 要: 目的 对五倍子、儿茶、乌梅、黄连和黄芩的体外抗菌效果进行比较。 方法 用新的中药抗菌实验方法 ,进
行五倍子等 5种中药对 28株肠球菌的体外抗菌活性检测。 结果与结论  5种中药对肠球菌的抑菌作用均较好 ,其
中以五倍子和儿茶的抑菌效果最好 ,其 M IC90均为 1∶ 640,而黄连、乌梅和黄芩的抑菌效果也较好 ,其 M IC90分别为
1∶ 320, 1∶ 320和 1∶ 160。
关键词: 五倍子 ;儿茶 ;黄连 ;乌梅 ;黄芩 ;肠球菌 ;抗菌活性
中图分类号: R285. 51; R286. 8   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1101 03
Evaluation of in vitro antibacterial activities ofMelaphis chinens is etc. 5
TCMs against 28 strains of enterococci with M-H agar medium
   LI Zhong-xing , WANG Xiu-hua, ZHANG Li-zhi; YU E Yun-sheng , ZHAO Bao-zhen, CHEN Jing-
bo, LI Ji-hong
   ( Second Hospital Affiliated to Hebei Univ er sity o f Medical Sciences, Shijia zhuang Hebei 050000, China)
Abstract: Object  To compa re the in vit ro antibacterial activities o f 5 TCMs including Melaphis chi-
nensis ( Bell) Bake, Acacia catachu ( L. ) Mi lld, Armeniaca mume Sieb, Coptis chinensis Franch and Scutel-
laria baicalensis Georgi. . Methods  Activi ties of the 5 drug s against 28 st rains o f Enterococci were deter-
mined by the new antibacterial test fo r TCM. Results and Conclusion  All 5 TCM s show ed antibacterial
activi ties against Enterococci , wi th M. chinensis and A. catachu being the most po tent. Both had the M IC90
o f 1∶ 640. A . mume, C. chinensis and S. baicalensis followed nex t wi th their M IC90 of 1∶ 320, 1∶ 320 and
1∶ 160 respectiv ely.
Key words: Melaphis chinensis ( Bell ) Bake; Acacia catachu ( L) Mi lld; Armeniaca mume Sieb; Coptis
chinensis Franch; Scutellaria baicalensis Geo rgi; Enterococci; antibacterial activi ty
·1101·中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 12期
收稿日期: 2001-02-10基金项目:国家中医药管理局重点课题资助项目 (编号: 97Z009)作者简介:李仲兴 ( 1938-) ,男 ,河北玉田人 ,教授 , 1958年毕业于张家口医专检验专业 ,现工作在河北医科大学第二医院 ,一直从事临床微生物检验工作。研究方向为“机会致病菌生理、生化特性研究 ;机会致病菌对抗生素、中草药敏感及耐药谱型研究”。在国内外发表论文 80余篇 ,著有《临床细菌学》及《诊断细菌学》等著作 ,获省部级科技进步奖 8项。
* 河北省人民医院
  关于中药抗菌实验研究 ,许多学者做了大量的
研究工作 ,并积累了丰富的经验 [1, 2 ]。然而进行五倍
子等中药对肠球菌的抗菌作用研究 ,无论是定性检
测 ,还是定量测 M IC,以前则无报道 ,尤其使用数十
株菌株进行研究者更罕见报道。 由于肠球菌引起人
类感染的事例在不断增加 ,且其治疗尤为困难 ,为了
寻求中药治疗肠球菌感染的方法 ,增加用药途径。我
们将 28株临床分离的肠球菌 ,对 5种中药进行了敏
感性测定 ,结果表明 ,这 5种中药对肠球菌的抗菌活
性均较好。
1 材料与方法
1. 1 仪器、培养基等器材: 微量多点接种仪:北京医
科大学昆仑药物发展研究所生产。培养基: M ueller-
Hinton琼脂 (美国 BD公司生产 , BBL,简称 M-H琼
脂 )。五倍子等中药 (购自河北省药材公司 ) ,先将五
倍子等按常法做成煎液 ,即 100 g五倍子等 ,文火煎
后做成 200 m L煎液 (为 50% 五倍子等煎液 )备
用 [3, 4 ]。菌种: 从我院临床病人的血液、尿液、脓汁、痰
等标本分离的肠球菌共 28株。
1. 2 方法: 采用琼脂稀释法 ,用 M-H琼脂对五倍
子等进行定量抗菌实验 [5, 6 ]。
1. 2. 1 药液稀释: 排列无菌中试管 10只 ,于 2~ 10
只管中加无菌蒸馏水 10 mL,取 50% ( 1∶ 2)五倍
子等水煎液 20 m L,于第一管加入 10 mL,第 2管加
入 10 mL,于第 2管混合后取出 10 mL,加入第 3
管 ,再混合后取 10 mL放入第 4管 ,如此连续稀释
至第 9管取出 10 mL弃掉。 第 10管只有无菌蒸馏
水作对照。 这样 1~ 9管只含有不同浓度药液各
10 m L。
1. 2. 2 含药平板制备:用无菌操作将已溶化的无菌
M-H琼脂 900 m L分装于 10瓶 ,每瓶 90 mL,将第
1管含 10 mL 50% 五倍子等水煎液放入含 90 mL
培养基的瓶中 ,混合后倾注 4个平板 ,每个平板含
25 mL含药琼脂 ,第 2管以后的平板制备同第 1管 ,
凝固后备用。这样第一组的琼脂平板实际含五倍子
等 5% ( 1∶ 20) ,第二组为 1∶ 40,第三组为 1∶ 80……
含药培养基的药物浓度计算: 因各药水煎剂干重不
一 ,不好比较 ,故暂仍按生药与水之比计算。
1. 2. 3 菌液制备:将肠球菌等新鲜培养物 (菌落 )制
成菌液 ,浓度相当于 0. 5麦氏比浊管。
1. 2. 4 用多点接种仪分别吸取各种菌液并将菌液
点种于含不同药物浓度的琼脂平板上。 于 35℃ 培
养 18~ 24 h,如果对照菌全部生长 ,则观察最低抑
菌浓度 ( M IC) ,并统计出 M IC50和 M IC90的药物浓
度和累积抑菌百分率。
2 结果
五倍子等 5种中药对 28株肠球菌的抗菌效果
均较好 ,其中五倍子和儿茶的抗菌效果最好 ,对肠球
菌的 M IC90均为 1∶ 640,黄连、乌梅和黄芩对肠球
菌的 M IC90分别为 1∶ 320, 1∶ 320和 1∶ 160 (表
1)。五倍子等 5种中药对 28株肠球菌的累积抑菌率
见表 2。
表 1 五倍子等 5种中药对 112株
表皮葡萄球菌的抑菌情况
中药 M IC范围 MIC50 M IC90 MIC众数
五倍子   1∶ 1 280~ 1∶ 640 1∶ 640 1∶ 640 1∶ 640
儿茶 1∶ 640 1∶ 640 1∶ 640 1∶ 640
乌梅 > 1∶ 2 560~ 1∶ 320 1∶ 640 1∶ 320 1∶ 640
黄连 1∶ 320 1∶ 320 1∶ 320 1∶ 320
黄芩   1∶ 1 280~ 1∶ 80 1∶ 640 1∶ 160 1∶ 1 280
表 2 五倍子等 5种中药对 28株肠球菌的累积抑菌情况
中药 1∶ 20 1∶ 40 1∶ 80 1∶ 160 1∶ 320 1∶ 640 1∶ 1 280 1∶ 2 560
五倍子 生长菌株数 0 0 0 0 0 0 17 28
抑制菌株数 28 28 28 28 28 28 11 0
累积抑菌率 (% ) 100 100 100 100 100 100 39. 29 0
儿茶 生长菌株数 0 0 0 0 0 0 28 28
抑制菌株数 28 28 28 28 28 28 0 0
累积抑菌率 (% ) 100 100 100 100 100 100 0 0
黄连 生长菌株数 0 0 0 0 0 3 15 25
抑制菌株数 28 28 28 28 28 25 13 3
累积抑菌率 (% ) 100 100 100 100 100 89. 29 46. 43 10. 71
乌梅 生长菌株数 0 0 0 0 0 28 28 28
抑制菌株数 28 28 28 28 28 0 0 0
累积抑菌率 (% ) 100 100 100 100 100 0 0 0
五倍子 生长菌株数 0 0 0 1 3 9 17 28
抑制菌株数 28 28 28 27 25 19 11 0
累积抑菌率 (% ) 100 100 100 96. 42 89. 29 67. 86 39. 29 0
·1102· 中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 12期
3 讨论
肠球菌 ( Enterococcus)是医院感染的重要机会
致病菌 ,尤其在重症监护病房 ( inten si rcare Uni t,简
称 ICU )中是最主要的致病菌 ,据报道肠球菌感染
已占医院感染的 5. 63% , 1989- 1993年美国耐万
古霉素肠球菌 ( Vancomycin-resistant Enterococ-
cus,简称 VRE)增长了 26倍 (从 0. 3%上升至
7. 9% ) ,国内 VRE在 1994- 1996年已达 7%~
8%
[7, 8 ]。 VRE感染的并发症多 , 死亡率高达
36. 6% 。对 VRE的治疗尤为困难 ,由于其对多种抗
菌药物具有天然耐药和诱导耐药 ,因而很多常用的
抗菌药物均不能选用 ,只有在药物敏感实验指导下
选择用药 ,目前最有效的药物还是万古霉素和替考
拉宁 ( Teicoplanin)以及链阳性菌素 RP59500,这些
药物可用于严重感染患者的治疗 [9 ]。
由于肠球菌引起的感染难于治疗 ,必须研究与
开发新的治疗药物 ,以应急需。为此我们对临床分离
的 28株肠球菌 ,用新的中药抑菌实验方法筛选抗肠
球菌的中药 ,经过 18种中药筛选 ,五倍子、儿茶等 5
种中药对肠球菌的体外抗菌效果较好 ,尤其是五倍
子和儿茶 ,其水煎剂经 1∶ 640稀释 ,仍可 100%地
抑制肠球菌生长 ,其次黄连与乌梅的抑菌效果亦很
好 ,以此为研究基础 ,可望开发出新的抗肠球菌感染
的新剂型 ,这对于发挥中医药的抗感染作用具有重
要意义。
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民族药滇产回心草对大鼠实验性心肌缺血的保护作用
雷秀玲 1 ,张荣平 2 ,董雪峰 3 ,潘 琦 3 ,严启新 3 ,罗天浩 3 ,何广新 4
( 1. 昆明医学院 药理教研室 ,云南 昆明  650031; 2. 昆明医学院 药学系 ,云南 昆明  650031; 3. 云南中医学院 ,
云南 昆明  650011; 4. 昆明市药检所 ,云南 昆明  650034)
摘 要: 目的 研究滇产回心草的抗急性心肌缺血作用。方法 采用结扎大鼠冠脉造成心肌缺血的模型 ,动态观测
Ⅱ导联心电图 S-T段的变化 ,以 S-T段上抬为指标反映缺血程度 ,同时检测 LDH、 CPK、 SOD和 MDA。结果 回
心草显著减轻 S-T段上抬 ,以 2 g /kg组为显著 (P < 0. 05) ;其 1及 2 g /kg均使心肌梗死范围缩小 (P < 0. 05, P <
0. 01); LDH和 CPK也有所降低 ,以 CPK降低为显著 (P < 0. 05);回心草还使 SOD显著提高 (P < 0. 05) ; MDA
明显降低 (P < 0. 01)。 结论 回心草对大鼠心肌缺血具有一定程度的保护作用 ,此效应与其抗脂质过氧化作用
有关。
关键词: 回心草 ;心肌缺血 ; LDH; CPK; SOD; MDA
中图分类号: R286. 2   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1103 04
Protective effect of Yunnan folk medicine Rhodobryum roseum on
experimental myocardial ischemia of rat
LEI Xiu-ling
1
, ZHANG Rong-ping
2
, DON G Xue-feng
3
, PAN Qi
3
,
Y AN Qi-xin3 , LUO Tian-hao3 , HE Guang-xin4
   ( 1. Depa rtment o f Pharmaco lo g y, Kunming Medical Colleg e, Kunming Yunnan 650031; 2. Faculty o f Pharmacy, Kun-
ming Medica l Colleg e, Kunming Yunnan 650031, China; 3. Yunnan Traditiona l Chinese Medica l Colleg e, Kunming Yunnan
·1103·中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 12期
收稿日期: 2001-05-08基金项目:云南省科委应用基础青年基金资助项目 ( 96C076Q)作者简介:雷秀玲 ( 1962-) ,女 ,云南人 ,昆明医学院药理学副教授 ,硕士 ,主要从事心血管药理、免疫药理和天然药物药理研究。