全 文 ：粒剂含量标准为含桅子昔 0 . 29 4写以上 。
5
.
3处理样 品所用 P T 一C 1 8色谱预处理小柱
为市售 , 可以反复使用 , 以 甲醇再生 。
参 考 文 献
1 凌俊英 ,等 . 中草药 , 1 9 9 4 ; 2 5 ( 1 0 ) : 5 5 6
葛建华 , 等 . 中国药 科大 学学报 , 1 9 9 0 ; 2 1 ( 3 ) : 1 8 5
T 安伟 , 等 . 中药材 , 1 9 9 5 ; 18 ( 1 1 ) : 5 6 2
杨瑞琪 , 等 . 中国中医药科技 , 19 96 ; 3 (5 ) : 27
( 1 9 9 7
一
1 1
一
1 3 收稿 )
雷公藤擦剂的稳定性研究
福建省 医学科学研究所 (福州 3 5 0 0 0 1 )
福建省级机关 医院
林 绥
刘丹红
邓思珊
摘 要 雷公藤中的 主要有效成分之 一雷公藤 内醋醇 , 其结构 中含有 不稳定 的三元 环醚 , 易水解
开环而 降低擦剂 的质 量 , 为 此 , 我 们应用化 学动力 学为基 础的经典 恒温法 对雷公 藤擦剂 的稳 定性
进行 了研究 。 结果 表明雷公藤 内醋醇 的热稳定性 良好 , 水解反 应的活化能 E 一 1 5 . 46 k c al / m ol 。 计
算测定贮存期 为 870 d 。
关键词 雷公藤 雷公藤擦剂 稳定性
雷 公 藤 T r iP te ry g 爪m w iolf dr “ H 。 。 k
.
f
. 系卫矛科雷公藤属植物 , 临床应用雷公藤
制剂治疗类风湿性关节炎 、 红斑狼疮 、 银屑病
等 , 显示 了较好 的疗效 〔` ’ 2 〕 , 但药理实验证明
雷公藤 内醋醇也是 引起 中毒 的主要因素 〔 3〕 。
雷 公 藤 擦 剂 通 过 透 皮 吸 收达 到 治 疗 的 目
的 〔4 〕 ,取得较好的疗效 , 避免了因 口服雷公藤
制剂引起的消化道症状和药物在肝脏代谢引
起 的全身性的毒副作用 。 已知有效成分之一
雷 公藤 内醋醇结构 中含有 不稳定 的三元环
醚 , 易水解开环而降低擦剂的质量 , 为此 , 我
们应用化学动力学为基础的经典恒温法对雷
公藤擦剂的稳定性进行 了研究 。
1 仪器 、 试剂与药品
薄层 色谱扫 描仪 ( 岛津 C S 一 9 30 型 ) , 微
量 点样器 ( 1 拜L 一 5 拌L , D r u m m o n d ) , 高效薄
层板 (青 岛海洋化 工厂生产 ) , 雷公藤 内醋醇
纯 品由本所药物研究室提供 , 其余均使用分
析纯化学试剂 。
2 实验条件的选择
雷公藤内酷醇用 K e dde 试剂显色 , 斑点
呈紫红色 , 不稳定 , 在空 气中 20 m in ~ 30 m in
后逐渐消退 ,所以斑点展开后直接进行扫描 ,
不需通过显色 。 实验表明以 乙醚 、 氯仿 一乙醚
( 3
: 1 ) 和氯仿一乙醚 (9 : 1) 为展开剂均有较
好的分离效果 ,但以氯仿 一乙醚 (3 : 1) 展开效
果 更为理想 , 分 离效果较好 , 斑点无拖 尾现
象 。
3 标准曲线的绘制
精 密 称 取 雷公 藤 内醋 醇对 照 品 12 . 1
m g
,置于 10 m L 容量瓶中 , 用无水 乙醇稀释
至刻度 , 即得 1 . 21 拜g /拌L 的对照品溶液 ,在
经过预选 的高效硅胶板上 ,用 1 、 2 拜L 对照品
液点样 ,薄层板在层析缸中饱和 Z h ,用氯仿 -
乙醚 ( 3 : 1 ) 上行展开 , 入S = 2 1 8 n m , 入R = 3 2 0
n m
, 狭缝 Z m m X Z m m , 以 反射法锯齿形扫
描 , S x 一 3 , 测 定斑点 的吸 收峰面积 , 以 积分
值为纵 坐标 , 点 样量 为横 坐标 , 绘制标准 曲
线 ,求得 回归方程 : Y 一 1 3 3 2 8X 一 1 5 . 0 。
4 样品的含 t 测定
A d d r e s s
:
I
_
i n S u i
,
F u ii a n In
s t i t u t e o f M
e
d i e a l S e i
e n e e s , F u
z
h o u林一蔺一妥一 3言乡’ ,富响秀死员 ,主要参 与福 建省重点攻关项 目“ 雷公藤的 应 _用研寒 ’ , ,井担继要担不`冲毯到三爽,里住道丝赓分 的缺究砚“ ,;J蓟抗月俪肴,效.后虹分~的丽i究孔 . `雷公藤治疗实体瘤 肝癌 、 胃癌的研究 ” , “ 雷公藤明碱等免疫 作用研究 ” 等多项卫生厅 资助课题 , 发表论文 20 多篇 。
·
6 7 2
.
期 , 并与实验贮存 的进行对照 ,结果见表 3 。
表 1 雷公藤擦剂在各温度下的水解实验结果
T t ( d ) 含量 (% ) lg C 回 归结果
4 0 ℃ 0 3
2 0
4 0
8 0
1 6 0
5 0 ℃ 0
0
.
5 92 2
0
.
5 8 7 7
0
.
5 84 3
0
.
5 7 7 5
0
.
5 62 3
0
.
5 92 2
0
.
58 4 3
0
.
5 74 0
0
.
5 5 9 9
0 5 2 5 0
0
.
5 9 2 2
0 5 7 4 5
0
.
5 6 7 0
0
.
5 5 0 2
0
.
5 1 5 8
0
.
59 2 2
0
.
5 75 2
0
.
5 58 7
0
.
5 3 7 8
0
.
4 7 5 0
0 5 9 2 2
0 5 7 4 0
0
.
5 5 9 9
0
.
5 3 5 3
0
.
4 8 7 5
r = 0
.
9 9 1 2
,
k = 4
.
2 7 又 10 一 4
r
= 0
.
9 9 8 3
,
k = 9
.
7 2又 10
r = 0
.
9 9 14 , k = 2
.
0 2 火 1 0 一 3
1一I山’ I占八6巴d连5njl乃sqóSQ口刁!O口OR门了月匕JtQ了o八勺乃内气妇QU
.…饰0no八CJd几Jaj舀介O乃ó
r
= 0
.
9 8 7 5
,
k 一 3 . 4 7 丫 1 0
r 一 0 . 9 9 0 3 , k ~ 5 . 8 1 丫 1 0
O石只Qé11ù匕na几ōhón月咔O口Qt了产庄占门.-…qjn乃Q自J自凸ja
2048160
。1()5
表 2 雷公藤擦剂的有效期
温度 ( ℃ ) 有 效期 孙 9 ( d)
丫n只钊袱J任n乃
精密吸取雷公 藤擦剂 2 0 m L , 浓缩 ,将
浓缩液吸附于 2 5 0 9 中性氧化铝 中 , 挥干溶
剂 。 将吸附有样品的氧化铝装于索氏提取器
中 , 用氯仿 回流提 取 6 h 。 将氯仿 液浓缩 至
干 , 用无水乙 醇溶解 , 定容至 10 m L , 为样 品
溶液 。 用微量点样器吸取各批号样品溶液 2 、
3 拼L 及对照品液 2 、 3 川 J , 点样于同一活化的
高效薄层板 上 , 照标 准曲线实验项的参数 进
行测定 。
5 原料的热稳定性
平 行 称取 雷公 藤 内醋 醇 原料 两 份 , 置
( 1 0 0士 1 ) ` C 烘箱中分别加热 2 4 h 和 4 8 h , 原
料 的晶形和色泽未发生变化 , 经溶解并定容
后进行测定 , 高效液相色谱 图 上未检出雷公
藤 内醋醇的分解产物峰 , 且经含量测定为原
料称取量的 ( 1 0 0 士 0 . 8 3 ) % 。
6 雷公藤擦剂有效期的预测
采用经典恒温法 〔气」进行预测实验 。
将供试雷公藤擦剂各 1 20 O m I J 分别置
于 ( 4 0 ` C 、 S O C 、 6 0 C 、 7 O C 、 8 0 毛 士 1 ℃ )
恒温水浴 中 , 间隔一定时间取出 2 0 0 m L , 冷
却后进行含量测定 。 以各实验温度下的 nI C
对 t 作线性 回归 , 均得到符合 一级反应的直
线方程 ,从而求出各实验温度下 的水解速度
常数 k , 结果见表 1 。
以各温度下的 馆k 对其绝对温度的倒数
1 / T 作 回归分析 . 得直线方程 l g k 一 7 . 4 04 一
3 3 7 8
.
1 6条, : 一 。 . 9 9 1 5 。 该方程完全符合实以 . ` 以 一 ` ” 了” ’ ” ’ “ ` ’ ` “ “ ~ / 廿 ’一 / 目 ~ ’ J 只 入
验 温度 对反 应 速度 影 响的 A r he in u S 公 式
2 5
2 0
1
.
1 6 9丫 1 0 一 4
7
.
4 8又 1 0
1
.
7 9 又 1 0 一 5
表 3 留样的测定和贮存期对照
贮 存条件 留样批号 含量 (% ) 预测贮存期 ( d )
实际贮
存 期 ( d )
In k = In A 一 E
R T
’ 由此可导出室温或其它温度
下相应 的 k 值 , 进而根据一级反应速度方程
式求出相应温度下药物降解至一定比率的时
间 。 表 2 列出 了雷公藤擦剂在几个温度下的
有效期 。
7 留样的测定 和对照
取置于室温贮存 (平均 25 C ) 的 留存 3
个批号雷公藤擦剂进 行测定 ,按标示量计算
其含量 , 取平均值 。依照一级反应速度方程式
由相对百分含量求 出该种温度下的预测有效
《中草药 》 1 9 9 8 年第 29 卷第 10 期
室温 9 2 1 0 0 8 3 . 5 2 9 0 1 8 7 5
室温 9 2 1 0 0 9 3 . 5 1 9 0 1 8 6 8
室温 9 2 1 0 1 0 3 . 5 3 9 0 1 8 8 3
8 结果与讨论
8
,
1 雷公藤 内醋醇原料的热稳定性 良好 ,它
在溶液 中的水解反应为伪一级反应 , 由 A r -
r h e in u s 公式算得雷公藤擦剂的水解反应的
活化能 E = 1 5 . 4 6 k e a l /m o l
8
.
2 留存雷公藤擦剂的预测贮存期与实际
贮存期吻合 ,说 明实验的有 效期预测结果对
临床应用有实用价值 。
·
6 7 3
·
参 考 文 献
严碧玉 , 等 . 第一军医大学学报 , 1 9 8 6 ; 6 (3 ) : 21 4
秦万章 , 等 . 中医杂志 , 1 9 8 2 ; 2 3 ( 3 ) : 1 7 1
郑幼兰 , 等 . 中国药理学报 , 1 9 8 1 ; 2 ( 1 ) : 7 0
朱钦文 , 等 . 福建医 药杂志 , 19 9。 ; 1 2 ( 3 ) : 49
庞贻 慧 , 等 . 药物 稳定性 预测 方法 . 北京 : 人 民卫 生出
版社 , 1 9 8 4 : 3 5
又1 9 9 7一 1 1一 4 收稿 )
黄蔑根 、 茎 、 叶中总皂昔含量比较
佳木斯 医学 院 ( 1 5 4 0 0 3 )
齐齐哈尔铁路中心 医院
黑龙江省武警总 队 医 院
张 宇 王凤芝 张粉粉
陈玉娟
李玉莲
生 药 黄 蔑 为 豆 科 植 物膜荚 黄 蔑 A对 ar g al us
m e m bar
n a c e u 、 ( F is e h
.
) B g e
. 和 蒙 古 黄 蔑
A
.
m on g ho lc
u , B g e
. 的干燥 根 。 皂昔 为黄蔑的主要
化 学成分之一 。 黄蔑 的人药部位为根 。 我们通过实验
分析 比较黄蔑 根 、 茎 、 叶 中总皂 昔含 量 , 为开发黄蔑
地上 部分 , 扩大药物资源提供科学依据 。
1 仪器和材科
仪器 : 721 型分光光度计 。
药品 :黄蔑 甲昔 ( A SI )标 准品 ( 7 81 一 90 01 , 中国药
品生 物制品检定所 ) ;黄蔑根 、 茎 、 叶来 自大 兴安岭野
生黄 蔑 (膜英黄蔑 ) 。
2 方法和结果
2
.
1 总皂昔 的提 取与纯化 : 取黄蔑根 、 茎 、 叶粗粉干
燥 至恒重 , 分别精确称取根 、 茎 、 叶样 品约 5 9 (精 确
至 l m g ) , 用 95 写乙 醇在索 氏提取器 中回流 6 h , 提
取液蒸 干 , 残渣 用 甲醇定容为 1 0 . 0 0 m L , 供纯化 用 。
称取 4 9 1 05 C 活化 30 m in 层 析用 中性 氧 化
铝 , 装人 内径 约为 0 . 8 c m 的层 析柱 中 , 将 上述提 取
液小 心倒 人 层 析柱 中 ,再用 50 % 的 甲醇 50 m L 洗
脱 , 洗脱液蒸干 , 残渣 以无水 乙 醇定容 。 根 、 茎 、 叶定
容分别为 2 0 . 0 0 、 1 0 . 0 0 和 1 0 0 . 0 0 m L , 供定 量用 。
2
.
2 总皂 昔 的含量 测定 : 参见 南京 医科大学 学报 ,
1 9 9 4 ; 1 4 ( 2 )
:
2 1 7
。
2
.
2
.
1 标 准曲线的制作 : 精确吸取 A SI 标准液 (0 . 4
m g /m L ) 0
.
0 0
、
0
.
1 0
、
0
.
2 0
、
0
.
3 0
、
0
.
4 0
、
0
.
5 0 m L 于 6
支磨 口试管中 , 水浴加热 挥去溶剂 , 在 每支试管 中分
别加人 0 . 20 m L S %香草醛 冰醋 酸 溶 液 , 0 . 80 m L
高抓 酸 , 密塞 。 然后于 7 0 ℃ 水浴恒温加热 20 m in , 取
出后立 即用流水冷却 , 加冰醋酸 5 . 0 0 m L , 摇匀 。 于
波长 5 6 0 n m 处分别测定 吸收度 , 得 回 归方程 :
A = 一 5 . 4 只 1 0 一 3 + 3 . 5 3 5 X 3 . 5 3 5 一 3 C , r =
.
6 7 4
-
0
.
9 9 9 9
。 故 C 与 A 的 直 线 方 程 为 C 一 1 . 53 +
2 8 2
.
s g A ( C 为 A S I 的质量 拜 g ) 。
2
.
2
.
2 总皂昔 的含量 测定 :精确 吸取根 、 茎 、 叶定容
液 0 . 10 m L 于磨 口试管中 , 置 水浴 上 蒸干 , 按标 准
曲线制作 项下方 法操作 , 用 7 21 型分 光光度计 测定
吸收度 , 按直 线方程 求出 C , 再按 下式计算 黄茂根 、
茎 、 叶 中总皂昔含量 , 测定结果见表 1 。
总 皂昔含量 ( m g / g ) 一 1 0 一 3 C V 定容 5/ V 样 。
表 1 总皂昔含且测定结 果
次 数 根 茎 叶
1 0
.
4 0 5 0
.
6 4 7 0
.
4 6 5
2 0
.
4 3 6 0
.
6 5 6 0
.
4 7 5
3 0
.
4 2 4 0
.
6 5 1 0
.
4 7 0
4 0
.
4 0 0 0
.
6 5 0 0
.
4 7 5
5 0
.
4 2 5 0
.
6 5 0 0
.
4 7 3
6 0
.
4 4 8 0
.
6 5 1 0
.
4 7 0
均值 ( A ) 0 . 4 2 3 0 . 6 5 1 0 . 4 7 1
皂昔含量 ( m g / g ) 4 . 8 4 8 3 . 7 13 2 6 . 9 5 4
2
.
2
.
3 回收率实验 : 取 A SI 标准 液 1 0 . ()0 m L 水浴
蒸 干 , 用 甲醇 定容 为 10 . 0 0 m I J 。 取 4 9 l o 5 C 活化
0
.
s h 中性 氧化铝加人内径 为 0 . 8 c m 的层析柱 中 ,
将上述 甲醇液小 心加 人层析柱 中 , 再 用 50 % 甲醇 50
m L 洗 脱 , 洗 脱 液 蒸 干 , 残 渣 以 无 水 乙 醇 定 容 为
1 0
.
0 0 m L
。
取 上 述 无 水 乙 醇 定 容 液 0 . 0 、 0 . 10 、 O . ZG 、
0
.
3 0
、
0
.
4 0
、
0
.
5 0 m l
子
6 支磨 口试管 中 , 置水 浴上 蒸
干溶剂 , 按标准 曲线项下 方法测定吸收度 , 计算回 收
率为 9 7 . 3 2% , R S D 一 0 . 5 7 % ( n = 5 ) 。
3 结 果
实验证 明 , 黄茂 叶中总皂 昔含量 是根 中的 5 倍
一 6 倍 , 茎 中总皂昔 含量略低于根 。 因此 , 建议开发
黄茂地上部分 。
( 1 9 9 7
一
1 0
一
2 0 收稿 )