全 文 ：药学学报 A。 taP 五ar m a e eu t笼 ea Sin i c 忘 18 9 9 , 24 ( 8 ) : 568~ 5锐
雷公藤春碱和雷公藤新碱的免疫抑制作用
郑幼兰 徐 娅 林建峰
(福建省医学科学研究所 , 福州 3 5 0 0 0 1 )
提要 雷公藤春碱 (w i l f o r t r i n e ) 和雷公藤新碱 ( e u o n i n e ) i p 连。 及 5 0 m g / k g对以溶 血
素反应为指标的体液免疫具有明显的抑制作 。用雷公藤春碱 iP 160 m g / k g 对 G v H R 为指标的细胞
免疫也具有抑制作用 。 雷公藤新碱对 D N C B 所引起迟发超敏反应具有显著的抑制作用 , 并且 能
够降低小鼠碳廓清率和脾脏 、 胸腺的重量 .
关健词 雷公藤春碱 ; 溶血素 ; 雷公藤新碱 ; 移植物抗宿主反应 ; 迟发超敏反应 ; 碳廓清率
雷公藤植物 中含有多种生物碱 “ ~ 3 ’ , 但对免疫功能的影响却报道很少 。 张覃沐等` 咯 ’ 曾
报道 盲公 潺内醋 (t r i p t ol i d e ) 0 . 2 0 . 25 m ` / k g iP 对溶血素反应为指标的体液免疫具 有明
显抑制作用 , 并且认为雷公藤内醋是其中的免疫抑制成分 。 张罗修等 ` 5 ’ 报 道 雷 公 藤 红 素
( tr i p t
e r in e )对小鼠淋巴细胞增生具有抑制作用 。 作者曾报道雷公藤 “碱 c ” 的免疫功能及其
毒性 ` “ , 。 近年来 , 我们对雷公藤中各种生物碱 , 通过筛选发现雷公藤春碱 ( w il f o r t r ine )
和雷公藤新碱 ( 。 u o n i n e ) ` ? ’ (结构式见下 ) 具有较强的活性 , 本文报道它们对免疫的抑 制
作用 。
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R 二 一 C曰 :丁雷公 , “ “ W ” `。而 n e ,
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R 二 A C 霄公藤新俄 ( e 。 o n i n e )
材 料
雷公藤春碱 (简称 “ 春碱 ” ) 和雷公藤新碱 (简称 “ 新碱 ” )由本所植化室采用福建泰宁
县产雷公藤 ( T : iP t o r y小“ m 、 “ f。 , id ￡ H 。 。 k . f . ) 根皮干粉经化学提取而得 。 。 春碱 ” 无 色
片状结晶 , m p 2 35 一 23 7 ’ C , “ 新碱 ” 是属于倍半菇生物碱 , 无 色棱柱状结晶 , m p 15 5 一
,
57
.
C
, 在雷公藤植物中是首次发现 。 环磷酞胺 , 白色结晶针剂 , 上海第十二制药厂出品 (批
号 8 51 1 1 9 ) 。 印度墨汁 I C R , c 57 B L 及昆明种小 鼠均购自北京医学实验动物中心 。
本文于 19 88年9月19日收到。
药学学报 Ae t aP h a r二 ae e ut ie aS in ic a9 1 89 ; 24( 8 ) :5 8 6~ 5甲 25 69
方 法 和 结 果
一 “ 春碱 ” 和 “ 新碱 ” 对溶血案形成的影晌
雄性 Ie R小 鼠 3 6只 , 体重 2 2 士 1 9 。 以 5肠 绵羊红细 胞 ( S R B C ) 0 . 2 m l i p 作 为 抗
原 ,于致敏后 d2 开始用药 , i p “ 春碱 ” 和 “ 新碱 ” 40 及 80 m g / k g q d X 4 d ,另设环磷酸胺和对
照组 ( 20 肠 丙二醇 ) 。停药后次 日行眼球摘除取血 ,分离血清 , 并于 56 O C 水浴中放置 30 m i n ,
以灭活补体成分 。 取灭活小鼠血清 0 . 2 m l 用生理盐水成倍稀释 ( 1 : .2 · · … 1 : 2 0 4 8 ) , 每 管
加入 l , 3 0 S R B C 0 . 2 m l 及 l , 5 豚鼠血清 0 . 2 rn l , 摇匀置 3 7 O C 中孵育 30 m i n , 观 察溶血
反应 (4 ) :
结果表明 , 对照组的最大溶血稀释度为 1 : 2 0 48 ; “ 春碱 ” 和 40 及 80 m g / k g组的最大溶
血稀释度分别下降至 1 : 51 2 和 l : 2 56 , 环磷酸胺组亦可使最大溶血稀释度下 L降至 1 : 25 6 。 表 l
提示 “ 春碱 ” 和 “ 新碱 ” 对溶血素形成均具有明显的抑制作用 。
T a b 1
.
In h i b i t i o n o f h e m o ! y s i n f o r m a t i o n by w i. f o r t r i n e a n d e u o n i n e 又n “ 6 )
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二 . “ 春碱 ” 对移植物抗宿主反应的影响
实验用 C 5 7 B L ( 占 )和 I e R ( 早) 2 1士 1 9 小鼠杂交第一代 ( F 丈) 乳鼠 , 占C 5 7B L 小鼠
给予 i p “春碱 ” 5 0 及 2 6 0 m g / k g q d , 连续 9 天 。 以不给药的 e 5 7 B L 小鼠 ( 占) 和给药
C 57 B L 小鼠作为亲代供脾者 ` 将鼠龄为 10 天的乳 鼠 i p 接种浓度为 1 X l o s/ m l 的脾细 胞 悬
液 0 . 1 m l . 将乳鼠分为 3 组 , 即正常 (不作任何处理 ) 、 注脾对照组和注脾给药组 (给予 “ 春
T a b 2
.
E f f e c t o f w i lf o r t r i n e o n g r a f t v s h o s t r e a c t i o n i n m ic e ( X 土 S D )
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.
5上0 . 5 * 巾 * 2 0 . 5士 5 . 1* . * * 3 。 7士0 . 8
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1士 0 . 4 】1 . 9士 2 。 5
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.
6士 0。 2 * * * 3 2 . 8士 7 . 9… 5 . 8士 1 . 4
W i l f
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.
2土 0。 4* * * 3 2 。 9 士 3 。 7二 * 4 。 0 士 0 . 4 *
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.
05 ;
。 o nt p a r e d , i t红 n o r m a l: . * * p < 0 . 001 .
药学学报 A。 t a外 r a二 e ae o t ie aS i n ie a9 18 9; 24(8 ) :5 68 ~5 7 2
碱 ” )一 于接种后 d Z处死 , 称取脾重和体重 , 计算脾指数 “ ’ .
结果表明 , “春碱 ” 80 m g / k g i p 的脾指数较注脾对照组为低 , 但 差 别 不 显 著 ( p >
0’ 05 ) . “ 春碱 ” 1 60 m g / k g i p 的脾指数较注脾对照组明显降低 (表 2 ) ,差 别 显 著 ( p <
0
.
0 5 )
·
三 . “ 断玻 ” 对二硝甚级笨 (O N C )B 所致迟发组皮肤超敏反应的影晌
昆明种小鼠 2 1土 l ` 3 0 只 , 分为 s 组 。 “新碱 ” s o m ` / k ` i p 环磷酞胺 Z o m ` / k g i p 与
对照组 。 于颈部剃毛的皮肤上滴 50 肠 D N C B 丙酮溶液 2 川 /只致敏 , 并同时给药 ,连 续 10
天 ,停药次 日 ,在小鼠腹部脱毛的皮肤上 , 滴 2 . 5肠 D N c B 丙酮溶液 20 协l/ 只进行攻击 。 48
h 后尾 i v l肠 E V A N S 蓝 1 0 m l / k g , 3 0 m i n 后处死小鼠 , 取下腹部蓝染皮肤 , 剪碎 , 用
l : 1 丙酮生理盐水棍合液浸泡 24 h , 过滤后 , 滤液用 7 2 型光栅分光光度计 ( 入 61 0 n m )
测定光密度值 ( . ) 。
结果表明 , “ 新碱 ” 和环磷酞胺对小鼠 D N C B 所致迟发型皮肤超敏反应均有明显的抑制
作用 (表 3 ) 。
T a c 3
.
E f f e c t s o f e u o n in e o n d e l a y e d h y p e r s e n s it i v it 梦 r e a e t i o n in d u c e d b y d i n it r o c h lo r o -
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d 节 i t h c o n t r o l : * . p ( 0 . 01 ; … p ( 0 . 001
四 . “ 春碱 ” 和 “ 新碱 ” 对小限碳脚清率的形晌
I e R 小鼠 4 0只 , 早占兼用 , 体重 2 0 土 2 9 , 分为 4组 : “春碱 ” s o m ` / k g i p ; “ 新碱 ”
8 0 m g / k g i p
; 环磷酸胺 3 0 m `八 9 i p 与对照组 . q d x 4 d 于末次给药后 10 m i n , 每鼠 经
尾 iv 印度墨汁 (用生理盐水稀释 10 倍 ) 10 m l/ k g , 注后 1 和 10 m in 各从眼眶静脉取血 20
林l , 溶于 2 m l 0 . 1肠 N a : C O : 溶液 中摇匀 , 静置 2 4 h , 用 7 2 2 型光栅分光光度计 ( 入 6 8 0
T a b 4
.
D e c r e a s e o f c le a r a n e e r a t e o f iv e h a r c o a l p a r t i c . e s by i p w i . f o r t r i n e a n d
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003 7士 0 。 001 5…
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: * P < 0
。
05 ; … P < 0 . 001
药学学报 A。 t a P五 r am ae e uti c aS i nie al蛇9; 2 4 (8) :砧8 ~57 2
nm) 测定光密度 。 按金绮芳等介绍方法 (.) 计算廓清指数 K值 。
结果表明 , “春碱 ” 和 “新碱 ” 80 m g / k g i p 均能够显著降低碳廓清指数 ,但是 “春碱 ”
的效果更为显著 . 与环磷酞胺 30 m g / k g i p 的作用相似 (表 4 ) 。 提示对网状内皮系 统 吞
噬功能具有抑制作用 。
五 . “ 春碱 ” 和 “ 新碱 ” 对小鼠免痊器官盆 t 的形晌
雄性 xe R 小 鼠 2 0 只 , 体重 1 8 士 2 9 分为 4 组 : “春碱 ” 8 0 m g / k g i p ; “ 新碱 ” 8 0 m g / k `
咖 环磷酞胺 10 m g / k g i p 和对照组 , q d x 4d 于末次给药后次日眼眶放血处死 , 解 剖 脾
脏和胸腺 , 以扭力天平称重 。
结果表明 , “春碱 : 、 “ 新碱 ” 和环磷酞胺均能显著减轻脾脏和 胸腺的重量 (表 5 ) 。
T a b 5
.
E f f e e t s o f w il f o r t r i n e a n d e u o n i n e o n t h e w e i g h t s o f s P le e n a n d t hy m u s in
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1士 1 . 8… 8 . 6土 2 . 6*
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: * p < 0
.
05 ; 二 p < 0 . 0 1 ; … p < 0 . 001
讨 论
雷公藤己广泛应用于治疗各种自身免疫性疾病如 肾炎 , 类风湿性关节炎等 ( `。 ” ` ’ . 本文
介绍 “ 春碱 ” 和 “新碱 ” 80 m g / k g i p 能够明显抑制溶血素抗体的形成 , 并且 “ 春 碱 ” 在
1 60 m g / k g 对移植物抗宿主反应为指标的细胞免疫也有一定的抑制作用 . “ 新碱 ” 80 m g / k g
i p 对 D N c B所致迟发型超敏反应具有明显 的抑制作用 。 提示 “ 春碱 ” 和 “ 新碱 ” 对体液 免
疫和细胞免疫均有抑制作用 。
本实验结果还发现 “ 春碱 ” 和 “ 新碱 ” 对免疫功能的影响与经典的免疫抑制剂环磷酸胺
相似 ( ` 2 ’ 。 “ 春碱 ” 和 “ 新碱 ” 均能够显著降低小鼠碳粒廓清速率 , 表明它们对网状内皮系
统吞噬功能具有抑制作用 , 这也显示对非特异性免疫功能也有影响 。 因此 ; 雷公藤免疫抑制
成分除菇类外 , 可能尚有生物碱等其它成分的参与 。
参 考 文 献
1
. 江苏新医学院编 . 中药大辞典 . 下册 。 第 1 版 . 上海 : 上海人民出版社 , 197 9 : 246 .9
2
.
B
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A zk
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:
15 85
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6
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金绮芳 ,
黎 磊石 ,
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( 3 )
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S h a n d E L
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T h
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I 月 t
5 81
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:4 8
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J l 仍沉u ” o P h a r 沉 a e o l 197 9 ; 1 : 1 65 .
IMMU N OSU P P R E S !V E E F F E C T S O F W ! L F O RT RIN E A N D
E U O N IN E
Y L Z h e n g
,
Y X u a n d J F L i n
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o r t r i n e a n d E u o n i n e i s o l a t e d f r o m T r 诬P亡e r 夕g i u 扭 叨葱乙f o r d i i
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d ) x 4d i p )
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a s i n d i C e s
.
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o r t r i n e ( 16 0 m g / k g
.
d x g d i p ) e x h i b i t e d a d e p r e s s a , ; t e f r e e t
o n ` r a f t v s h o s t r e a e t i o n ( G V H R ) , b u t w i l ro r t r i n e ( s o m ` / ( k g
.
d ) x g d i p )
s h o w e d n o d e f i n i t e e f f e e t
·
e u o n i n e ( 8 0 m g / ( k g
.
d ) X 10 d i p )
s h o w e d m a r k e d
s u p p r e 、 s a n t e f f e e t s o n D N C B i n d u e e d d e l a y e d h y p e r s e n s i t i v i t y r e a e t i o n o n
s k ; n i n m i e e
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d e e r e a s e d t h e e l e a r n e e r a t e o f e h a r e o a l p a r t i e l e s a o d t h e w e i g il t s o f s p l e e n
a n d t h y m u s
.
K e y w o r d s W i l f
o r t r i n e ; E u o n i n e
;
H e m o l y s i n ; G r a f t v s h o s t r e a c t i o n
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