全 文 ：克 白配中补骨脂素和异补骨脂素的 H P LC测定
海军 4 1 0医院 (青岛 2 6 6 071)方 子季 ’ 纪松岗 林 静 衰娜华 代育存
摘 要 样品水浴燕发后 以二抓 乙烷萃取 , 采用 C I。键合柱反 相色谱方 法 , 以抓霉素作内标物 , 测
定克 白配 中的补骨脂紊和异补骨脂 素 。 R S D < 2 % , 线性范围均 为 10 一 20 拌g / m L , 补骨脂可 r 一
0
.
9 9 9 9
, 异补骨脂配 r = 0 . 9 9 9 9 。 回 收率分别为 9 6 . 7 %和 1 0 0 . 3 % 。
美挂词 克 白配 补 骨脂素 异补骨脂素 二抓 乙烷萃取 H P L C 法
克白配系海军 4 01 医院 自制的治疗 白瘫
风系列制剂之一 , 主要含补骨脂 、 红花等数种
中药 , 临床应用疗效较好 。 国内已有补骨脂配
含量测定方法的报道川 ,但 克白配 除含补骨
脂外 , 尚含多种其它中药 。 本文建立 了 H P L C
法测定克白配中的补骨脂素和 异补骨脂素含
量的方法 。
1 仪器与试剂
日本岛津公 司 L C 一 6 A 高效液相色谱仪 。
克白配 : 海军 4 01 医院制剂室提供 。 补骨脂素
和异补骨脂素对照品 : 中国药 品生物制品检
定所提供 。 氯霉素 : 青岛医药公 司提供 。 甲醇 :
紫外光学纯 。 无水乙醇 : 分析纯 。
对照 品贮 备液 : 精 密称取 10 5 ` C干燥 至
恒重 的补骨脂素和异补骨脂素对照品适量 ,
用无水乙醇配成浓度分别为 2 . 4 和 2 . 0 m g /
m L 的溶液 , 置 4℃冰箱备用 。
内标贮 备 液 : 精 密称 取 氯霉 素 配 制成
1
.
0 m g /m L 的无水 乙醇溶液 , 置 4 ℃冰箱备
用 。
2 方法和结果
2
.
1 色谱条件 : 大连依利特公司 Y W G 色谱
柱 ( 4 . 6 m m X 2 5 0 m m ) , 大连依利特公司 C 1 8
保护柱 , 柱温 35 ℃ , 流动相 甲醇 一水 (4 : 6) ,
流速 1 . 3 m L /m i n , 检测 波长 2 9 5 n m , 量程
0
.
0 4 A U F S
, 纸速 1 m m / m i n 。
补骨脂素和异补骨脂素的保留时间分别
是 1 5 m i n 和 1 7 m i n , 分离度 1 . 6 7 ,理论板数
分别 为 2 13 0 和 3 8 2 5 , 内标 峰保 留时 间是
5
.
4 m i n
。
2
.
2 回归方程的测定 : 准确配制 6 种不同浓
度对照 品无水乙醇溶液 ( 1 0 , 2 0 , 4 0 , 8 0 , 1 6 0 ,
2 0 0 拌g /m L ) ,加适量内标使成 8 0 拌g /m L , 每
次进样 6 拜L ,进样 3 次 。 记录色谱 图 , 求得对
照品峰面积为内标物峰面积的关于进样浓度
的回归方程 。 补骨脂素回归方程 : Y ~ 2 . 3 76
X 1 0 一 “ + 3
.
7 4 1 X 1 0一 ZX , r = 0
.
9 9 9 9
。 异补骨
脂素 回归方程 : Y 一 3 . 9 35 X 1 0 一 “ + 3 . 6 8 6 X
1 0 一 ZX
, r = 0
.
9 9 9 9
。
2
.
3 加样 回 收率试 验 : 取克 白配 25 m L 3
份 ,分别加人对照品贮备液适量 ,按样品测定
方法处理并加人 内标物后 , 按样品测 定项下
方法 3 份样品各重复测定 3 次 。 计算得补骨
脂素平均 回收率为 96 . 7% , R S D 一 1 . 6% ,异
补 骨 脂 素平 均 回 收率 为 10 0 . 3肠 , R S D ~
o
·
7 5%
。
2
.
4 样品测定 : 精密量取克 白配 25 m L ,水
浴蒸 干 , 加水 10 m L 使 剩余 物 混悬 , 置 50
m L 分 液漏斗 中 , 加 二抓 乙 烷萃取 , 每 次 15
m L
, 共萃取 3 次 ,合并萃取液 , 水浴蒸干 , 剩
余物分 次加人无水乙醇溶解 , 并移至 25 m L
量瓶 中 ,加人内标液适量使成 80 m g /m L , 加
无水乙 醉至刻度 , 摇匀 , 以 干燥滤纸过滤 ,弃
初滤液 s m L 取续滤液 6 拜L 进样 , 求得样品
,
A d
r e s s : F a n g Z IJ i
,
T h e N a v y N o
.
4 0 1 H o s p i t a l
,
Q in g d a o方子季 男 , 64 岁 , 主任药师 。 1 9 5 5 年毕业于中国人 民解放军第七 军医 大学 (现第 三军 医大学 )药学系 。 从 事医院药学工
作 40 余年 , 曾因主持新药研究工作于 1 9 8 7 年 、 1 9 9 7 年分别获得军队科技进步二等奖及三等奖各 1 项 . 发表论文 10 余篇 ,主持和参加编写 出版论著各 1 部 , 均担任副主编 , 现在主要从事中药制剂的质 t 控制研究工作 .
( 中草药 》 1 9 9 9 年第 3 0 卷第 9 期 . 6 6 5 ·
峰面积与 内标 峰面积的 比值 , 代人回归方程
计算样品含量 。 结果见表 1 。
表 1 克白可含 . 测定结果 (n 一 3)
高均会使补骨脂素与异补骨脂素的分离度降
至 1 . 5 以下 ,影响分离效果 。
品名 批号 补骨脂素 RS D 异补骨脂素 R S D
(拜g / m L ) (% ) (产g / m L ) (% )
补骨脂可 9 4 100 4 100 . 3 1 . 6 98 . 7 0 . 50
补骨脂配 9 41 00 4 100 . 2 1. 8 10 0 . 1 0 · 8 1
补骨脂配 9 41 00 4 9 7 . 5 1 . 1 99 , 6 1 . 2 0
3 讨论
3
.
1 作者 曾实验水浴蒸干 , 加水混悬 , 加氯
仿提取法 ; 以及水浴蒸干 ,加 2 . 5%碳酸钠碱
化 ,加石油醚脱脂后 以盐酸中和 , 再以抓仿提
取法图 ; 水浴蒸干 , 以 乙醇溶解经中性氧化铝
柱层析等方法进行样品的前处理 ,但均不够
理想 ,柱层析处理虽除去一些杂质峰 , 但与未
经处理配剂一样在补骨素前有一个含量大的
峰 , 不能完全分离 , 影 响测定结果 , 而上述二
种抓仿提取法 , 因氯仿提取时易乳化 ,影 响测
定结 果 , 测得含量仅 为理论量 的 50 写左右 ,
而用本法处理样 品含量与理论量相符 , 且干
扰峰少 ,不影响测定 , 故选用本法 。
3
.
2 溶剂的比例若水的比例下降或柱温升
时间 “ ~ )
A
一对照 品 B一经柱层析 C一经抓仿萃取 D 一经二抓 乙
烷萃取 1一内标 2一补骨 脂素 3一异 补骨脂素 4一杂
质峰
圈 1 样品 H P L C 圈
今 考 文 献
1 谭 生建 , 等 . 中国中药杂志 , 1 9 9 5 ; 2( 2 0) : 9
2 阴 建 ,等 . 中药现代 研究与临床应 用 . 北京 : 学苑出
版社 , 1 9 9 3 : 3 8 2
( 1 9 9 9
一
0 2
一
0 5 收稿 )
新疆甘草深度开发工艺的研究
新肠师范大学生 物系 (乌鲁木 齐 8 3 0 0 54) 惠寿年 . 圣 阿玲 徐晓晶 祝长青
摘 要 针对甘 草主要有效成分的提取及 生产甘草甜素中存在的问题 ,研究出一条甘草深加工 、
生产高纯度甘草甜素 , 同时得到黄 酮类化合物的新工艺 , 为甘草 的综合利用开发提供中试依据 。
关扭 词 甘草 深度开发 工艺 甘草甜素 黄酮类化合物
甘草系多年生草本植物 ,药用历史悠久 ,
是最常用的中草药品种 。 甘草的研究引起了
国内外学者 的广泛重视 。 目前 ,对甘草中三菇
类 化合物 (甘草甜素类 ) 研究得较清楚 , 而对
甘草黄酮类化合物的研究成为新焦点 1j[ 。 二
者作为甘草的主要有效成分 ,具有很多生理
活性 , 如抗炎 、 抗溃疡和抗病毒等 2[, “〕 。 传统的
甘草甜素生产工艺经改良就可同时提取黄酮
类化合物闭 。 笔者还探讨 了溶媒 、 水量 、 温度 、
粒度 、 终止 p H 等对产品得率及提取完全程
度 的影响 , 确定了深加工甘草产品的最佳工
艺流程条件 。
1 仪器和材料
1
.
1 仪器与色谱条件 : 岛津 H P L C 一 6 A 高效
A d d r e s s
;
H u i S h o u n i a n
,
eD p
a r t m e n t o f B i o lo g y
,
X i n ji a n g N o r m a l U n i v e r s i t y
.
W u l u m u q i
.
6 6 6
·