全 文 ：· 药剂与工艺 ·
中药蒲公英的质t 标准研究
海军 总医院药剂科 (北京 1。。。3 7) 凌 云 ’ 范 国强 ” 肖 批 . ” 郑俊华” ’
摘 要 用 H P LC 法测定蒲 公英中咖啡酸和绿原酸的含量 。 采用 H P H yp er sil C I :色谱柱 , 2 0 0 m m
x Z
.
l m m
,
5 拌m , 流 动相 : 甲醇 一磷酸 盐缓冲溶液 (pH ~ 4 . 2 ) 2 3 : 7 7 , 检测 波长 : 3 23 n m , 柱温 : 4 0
℃ , 流 速 : 1 . 0 m L / m in 。 该法 咖 啡 酸 平 均 回 收率 ” . 80 % , 双S D 2 . 14 % ; 绿 原 酸平 均 回 收率
9
.
54 %
, 双S D 2 . 69 % 。 本法稳定可靠 , 为药典建立蒲公英药材的质 量标准提供 了依据 。
关键词 蒲公英 H PLC 咖啡酸 绿原酸 质量标准
S tu d ies o n Q u a lity S ta n d a r d o f D a n d e lio n s (T a ra x a c u m W e be
r )
L in g Y u n
,
Fa n G u o q ia n g
,
X ia o Y u e
, e t a l
.
(De p
a r tm e n t o f P ha rm a e y
,
N a v y G e n e r a l H o s p ita l
,
Be ijin g
1 0 0 0 3 7 )
A加tr a e t T h e e s t a b lis hm e n t o f a q u a lity st a n d a rd b y H PL C fo r e a ffe ie a e id a n d e hlo r o g e n ie a e id in
d a n d e lio n s
,
T a ra xa
c u m W
e be r
,
w a s r e Po r te d
.
T h e s a m Ple w a s e x t r a e te d w ith m e th a n o l u n d e r u ltr a so n ie
m a n a g e m e n t fo r 3 0 m in
.
C hr o m a t o g r a ph ie e o n d it io n s : YM S
一
O D S C ls e o lu m n
,
2 0 0 m m 又 2 . 1 m m , 5 拌m , a
m o b ile ph a s e c o n s is te d o f m e th a n o l a n d p o t a s s iu m p h o s p ha te (2 3 : 7 7
,
p H 4
.
2) ; a fl o w r a te o f 1
.
0 m L / m in ;
a d e t e e tin g w a补e le n g th a t 3 2 3 n m a n d th e e o lu m n te m p e r a tu r e a t 4 0 ℃ . T h e m e a n re e o v e r y r a te o f e a ffe ie a e id
w a s 9 9
.
8 0 %
,
RS D 2
.
1 4 %
.
T he m e a n r e e o v e r y ra t e o f e hlo r o g e n ie a eid w a s 9 9
.
5 4 %
,
RS D 2
.
6 9 %
.
T he
m e th o d w a s v e ry s t a b le
, a e e u r a t e , a n d e a n b e u s e d a s a q u a lity s t a n d a rd fo r d a n d e lio n s
.
K e y w o r d s 7
,
a r a 二 a c u m W e b e r H P LC e a ffe ie a e id e h lo r o g e n ie a e id
蒲公英为常用清热解毒的 中药 , 药理实
验表明蒲公英具有广谱抗菌作用 , 临床用于
各种急慢性感染 。 中华人 民共和国药典 (1 9 9 5
年版 )规定 : 本 品为菊科植物蒲公英 T 口ra x -
a c u m m o n g o lic u m H a n d一M a z z . 、 碱 地 蒲公
英 T . : in icu m K it a g 或同属数种植物的干燥
全草 。 但未详细说明究竟有哪几种植物可作
为蒲公英人药 [lj 。 原植物采集和商品调查发
现 , 在 国内的不同地 区 主要有蒲公英属植物
17 种作为蒲公英人药 。 它们是否具有同等的
临床功效 目前 尚不清楚 , 中华人民共和 国药
典亦无蒲公英药材的质量标准 。
我们对蒲公英 的化学成分研究 , 从 中分
得咖啡酸和绿原酸川 。 咖啡酸和绿原酸具有
广谱抗菌作 用 [aJ , 测定蒲公英中其含量可作
为 评 价 蒲公 英 质 量 的 依据 。 我 们 建 立 了
H PLC 法测定蒲公英 中咖啡酸和绿原酸的含
量 , 为药典建立蒲公英药材的质理标准提供
了依据 。
1 仪器和试药
1
.
1 仪器 : 美国 H P IO g OM 型高效液相色谱
仪 , 自动进样器 , 二 阶阵列检测器 , 3 0 0 系列
微处理机 ; C X 一25 0 型超声波清洗机 。
1
.
2 试药 : 常用纯种蒲公英品种均由作者从
野外采集并鉴定 , 蒲公英商品药材各地购买 ,
经作者鉴定通常是常用蒲公英 1 ~ 4 种植物
的混合物 , 标本存放于北京医科大学药学院
生药学教研室标本室 。 咖啡酸和绿原酸对照
A d d re s
s :
L in g Y u n
,
De p
a r t m e n r o f Ph a r m a ey
,
N a
v y G e n e r a l H o s p it a l
,
Be iji
n g
’ ‘ 北京市中药科学研究所
, “ 北京医科大学药学院
《中草药》1 9 9 9 年第 3 0 卷第 12 期 . 8 9 7 .
品均 由中国药品生物制品检定所提供 。
甲醇为色谱纯 , 磷 酸和磷酸二氢钠为分
析纯 , 水为重蒸去离子水 。
2 实验方法与结果
2
·
1 色谱条件 : 色谱柱 : H y p e r s il C l, 柱 , 2 0 0
m m X 2. 1 m m
,
5 拌m , 流动相 : 甲醇 一磷酸盐缓
冲溶液 (PH 一 4 . 2 ) (2 3 : 7 7 ) , 检测波长 : 3 2 3
n m
, 柱温 : 4 0 ‘C , 流速 : 1 . 0 m L / n m in 。
在此 色谱 条 件 下 咖啡 酸 的 t ; 一 17 . 60
m in
, 绿原酸的 tR ~ 1 2 . 0 1 m in 。
2
.
2 标准 曲线 : 标准溶液的配制 : 精密称取
咖啡酸对 照品 L s m g 于 50 m L 容量瓶 中 ,
加甲醇至刻度 , 摇匀 , 作为对照品溶液备用 。
精 密 吸取 咖啡 酸对 照 品 溶 液 2 . 5 , 5 ,
7
.
5
,
10 拜L , 按上述色谱条件测定峰面积 , 以
咖啡酸的进样量为横坐标 , 峰面积为纵坐标 ,
绘制标准 曲线 , 得一接近通过原点的直线 , 其
回 归 方 程 为 Y = 8 5 0 3 . 7 2X 一 5 . 7 3 2 , r =
0
.
9 9 9 9
, 具有 良好的线性关系 。
精密称取绿原酸对照品 1 . 0 m g 于 2 m L
容量瓶 中 , 加 甲醇至刻度 , 摇匀 , 作为对照品
备用 。 精密吸取绿原酸对照品溶液 1 , 2 , 3 , 4 ,
5 拌L , 按上述色谱条件测定峰面积 , 以绿原酸
的进样量为横坐标 , 峰面积为纵坐标 , 绘制标
准曲线 , 得一接近通过原点的直线 , 其回归方
程为 Y = 3 8 1 7 . 2 3 3X 一 6 . 2 6 1 , r ~ 0 . 9 9 9 9 , 亦
具有 良好的线性关系 。
2
.
3 回 收率试验 和精密 度 : 采 用加样 回收
法 , 精密称取 已知含量的蒲公英样品适量 , 添
加一定量的咖啡酸和绿原酸对照品 , 按 “样品
含量测定 ”项下的方法进行处理测定 , 咖啡酸
平均 回 收率为 98 . 80 写 , R S D 一 2 . 14 % (n -
4 ) ; 绿 原酸 为 9 9 . 5 4 % , R S D = 2 . 6 9 % (n ~
4 )
。 实验结果表明本法 回收率好 , 方法可行 。
精密称取样品 5 份 , 按 “样 品含量测定 ”
项下的方 法进行处理测定 , 考察方法的精 密
度 , 咖 啡 酸 为 R S D ~ 1 . 8 8 % , 绿 原 酸 为
R S D = 0
.
7 2 3 %
。
2
.
4 样品含量测定 : 蒲公英样 品 60 ℃干燥
后粉碎成细粉 , 过 1 0 0 目筛 。 取生药粉末 0 . 5
.
8 98
.
g
, 精密称定 , 置 10 m L 具塞试管 中 , 精密加
人含 5 % 甲酸的甲醇溶液 s m L , 超声提取 30
m in
, 用脂溶性微孔滤膜过滤 , 取 5 拌L 进样 。
在上述色谱条件下测定峰面积 , 代人 回归方
程计算样品中咖啡酸 、绿原酸的含量 , 结果见
表 1 , 2 。
衰 1 国内蒲公英常用 17 个晶种 . 呼吸和
绿原胜的含 , (月 = 3)
序号 植物名称 学 名 . 呼吐含t 绿原破含t
(吨/ g ) (哪/ g )
8
9
l 0
l l
l2
l 3
l 4
l 5
l 6
l 7
策古蒲公英 T . m , 脚ic “ m
孩地蒲公英 T . :认 ic u m
东北蒲公英 T . oh ~ 朋m
白缘瀚公英 T . Pla tyP ec id “ m
反苞蒲公英 T . g ry 户os ,
兴安储公英 T . fa lc il说沁,
亚洲瀚公英 T . as ia t。“
芥叶蒲公英 T . 如“介“闷￡. 二
川甘浦公英 T . lu g “阮
台清蒲公英 T . 为r用osa n u 二
多裂蒲公英 T. di sseCt “m
药用薄公英 T . 叨论如以云
红梗蔺公英 T . 刃功叫耐止. m
白花蒲公英 T J郎ant h. 加
白苹蒲公英 T . 州妒心创。
西截箱公英 T 汪泛加止口。二
大头瀚公英 T . ‘司口砒记‘。 m
0
.
34 5
0
.
4 10
0
.
19 7
0
.
40 2
0
.
2 29
0
.
5 59
0
.
1 37
O
。
2 53
0
。
2 79
0
.
12 6
0
。
14 5
0
。
39 2
徽t
0
.
20 1
0
.
09 5
0
.
35 0
徽t
9
.
12 9
6
.
36 3
4
.
40 0
37
.
8 19
4
.
18 0
2
.
5 10
10
.
32 8
6
.
60 9
8
.
10 6
2
。
74 5
6
.
73 2
2
.
91 1
8
.
228
7
.
0 60
0
.
6 79
14 1 80
0
。
3 63
衰 2 国内蒲公英 12 种商品药材中 . 啡酸
和绿原咬的含t (二~ 3)
序号 采购地点 咖啡酸含t
(m g / g )
0
.
0 8 9 4
0
.
14 9 8
徽量
0
。
2 24
0
.
1 54 5
0
。
4 64 8
0
。
1 4 2
0
.
0 9 96
0
.
2 8 98
0
.
2 4 60
徽 t
0
.
3 7 2 3
绿原酸含t
(m g / g )
1
2
3
4
5
6
7
8
9
l 0
l l
1 2
江苏常熟
辽宁凤城
映西宝鸡
内象巴 盟
昆 明
广 州
河北安国
成 都
哈 尔 滨
西截昌都
银 川
四 川甘孜
1
.
6 55
1
.
4 4 1
1
.
9 8 7
2
。
5 4 9
1
。
8 2 9
2
。
9 3 7
5
。
3 3 7
0
。
8 3 9
4
。
9 5 3
8
.
6 68
3
。
7 6 6
9
。
0 3 9
3 小结与讨论
3
.
1 蒲公英为常用清热解毒的中药 , 对应西
医的药理作用就是具有广谱抗菌活性闭 。 咖
啡酸和绿原酸具有广谱抗菌作用 , 因此选择
测定蒲公英中咖啡酸和绿原酸的含量作为评
价蒲公英质量的依据 。
3
.
2 作者 选定 含 5 % 甲酸的 甲醇溶液作 为
溶 剂超声 提取 , 因为咖啡酸和绿原酸往往 以
游离和盐的形式存在于生物体 内 , 加酸提取
更完全 。 在流动相的选择 中 , 经过反复摸索 ,
选择酸性流动相 , 因咖啡酸和绿原酸均是有
机酸 , 酸性可抑制其 电离 , 使峰形稳定 , 分 离
度好 。
3
.
3 国内蒲公 英常用 17 个 品种和薄公英
1 2 种商 品药材 中咖啡酸和绿原酸的含量差
别很大 , 含量低的蒲公英品种是否作为药用 ,
值得进一步探讨 。 药典应尽快建立蒲公英药
材的质量标准 , 规定含量下限 , 以保证蒲公英
临床用药的有效性和合理性 。
3
.
4 我们首次成功地应用 H PL C 同时测定
蒲公英 中的有效成分咖啡酸和绿原酸 的含
量 , 分离 良好 , 快速 、准确 、重现性好 , 可在 30
m in 内完成测定 , 为药典 建立蒲公英药材的
质量标准提供了依据 。
参 考 文 献
1 中华人 民共和国药典 . 一部 . 19 95 : 3 14
2 凌 云 , 等 . 中国药学杂志 , 1 9 97 , 3 2 (1 0 ) : 3 8 4
3 国家 医药管理局 中草药情报 中心站 . 植物 药有效成分
手册 . 北京 : 人 民卫生 出版社 , 19 86 : 121
4 李仪奎主编 . 中药药理实验方法学 . 上海 : 上海科学技
术 出版社 , 1 9 9 1 : 2 8 6
(1 9 9 9
一
0 8
一
17 收稿)
抗病毒红藻多糖的提取与测定
天津医科大学药学院(3 0 0 2 0 3)
南开大学生命科学 院
张 斌 ’
陈家童 白玉华 耿运琪
摘 要 从我 国沿海红藻 中提取 的粗多糖 , 经 D E A E 一纤 维素 柱层析得到 红藻多糖 R P : , 实验证实
有 明显抗病毒作用 。 通过气相色谱 、红外光谱 、 YaP he 测定方 法 , 证 明红 藻多糖 R P : 含硫酸基是一
种硫酸醋化多糖 , 其单糖组成为半乳糖和 3 , 6 一 内醚半乳搪 , 定量分析 含量分别 为 : 半乳糖 70 . 04 % 、
3
,
6
一内醚半乳糖 9 . 56 % 、硫酸基 1 7 . 3 0写 。
关扭词 红藻多糖 抗病毒 硫 酸醋化 多糖 艾滋病
E x tr a c tio n a n d C h a r a c te r iza tio n o f a V ir u s In h ib ito r
,
Su lfa te d Po lysa c c ha r id e s
E x tr a c ted f r o m R ed A lg a (H a ly m e m in sin e n sis )
Zh a n g B in
,
C h e n Jia t o n g
,
Ba i Y
u h u a
, e t a l
.
(C o lle g e o f Ph a rm a e y
,
T ia n ji
n U n iv e r s ity o f M
e die a l Sc i
-
e n e e s , T ia n jin 3 0 0 2 0 3 )
A hs t
ra e t A rh o d o p hy t a p o lys a e e ha r id e (R P , ) w a s e x t r a e ted a n d p u r ifie d fr o m r e d a lg a
, 月口ly m em in
sin e ns i
s T se n g e t
.
C
.
F二 Its e hr o m a t o g r a p h ie be ha v io r a n d e he m ie a l p r o p e r t ie s s u g g e s te d t ha t it 15 a su lfa te d
p o lys a e e ha rid e eo m p o s ed o f g a la e t o s e 7 0
.
4 4写 , s u lfo n a t e 1 7 . 3 0 % a n d 3 , 6 一a n h yd r o g a la e t o s e 9 . 5 6 % . P h a r -
m a e o lo g ie a l se r e e n in g p r o v e d th a t R P z 15 a v ir u s in h ib it o r
.
K e y wo
rd s rh o d o p h yta p o ly s a ee h a r id e (R P z ) v ir u s in h ibito r s u lfa te d p o lys a e e ha rid e A ID S
多糖作为免疫促进剂在临床上已广泛应
用 。 近年来研究发现多糖的衍生物特别是硫
酸脂 化多 糖具 有抗 凝 血作 用 [lj 、 抗 病毒 活
性川 , 它在艾滋病 (A ID S )治疗上的应用 已得
到证实阁 。 我国对 A ID S 的防治工作刻不容
缓 , 由于 H IV 基 因组具有高度的可塑性 , 其
A d d r e s s
:
Z ha n g Bin
,
De p
a r t m e n t o f Ph a r m a ey
,
T ia n jin U n iv e r sit y o fM e d ie a l Sc i
e n e e s , T ia n jin
《中草药 》1 9 9 9 年第 3。卷第 12 期 . 8 9 9 -