全 文 ：· 药剂与工艺 ·
辽宁产中国林蛙油 、卵产量及蛋白质含量动态分析
复旦大学环境与资源生物学系 (上海 2 0 0 4 3 3) 蒋朝元
’ 方武雄 王寿兵
屈云芳 经佐琴 吴千红
摘 要 研究 1 一 3 龄中国林蛙 (R a na : hen si ne ns i: )哈士蟆油 、卵产量以及油 、卵和去内脏躯体中粗
蛋 白含量 。结果表明 : 3 龄蛙的含油量和绝对含卵量显著较高 , 而相对含卵量 2 龄蛙最高 。粗蛋白含
量在 不同蛙龄 、不同部位间都有差异 , 不同部位的变化趋势也不一样 , 其中卵中蛋白质含量最高 ,
油中蛋 白质含量相对较稳定 。 去内脏躯体中也有很高的蛋白质含量 , 且雌雄躯体间无明显差别 。 越
冬前后相比较 , 油的产量及油中蛋白含量都无明显差异 , 卵的产量越冬后显著较高 . 卵中蛋白含量
差异不显著 。
关键词 中国林蛙 蛋白质含量 变异系数
中国林蛙俗称哈士蟆 , 是具有重要经济
意义的两栖类蛙科动物 。 其干燥输卵管—哈士蟆油富含蛋 白〔,〕 , 是我国东北特产的一
种驰名中外的名贵食疗性中药〔2〕, 有滋补强
壮作用 。 哈士蟆去内脏全体也可入药 。
中国林蛙原产我国东北地区 。 多年来由
于过量捕捉和生态环境的破坏 , 野生资源急
剧减少〔3〕。 从珍贵药材资源及生物多样性保
护和经营决策两方面来看 , 都应合理地利用
有限的野生哈士蟆资源 。据文献记载〔‘〕 , 哈士
蟆生长期一般 5一 7 年 , 以第 1 、 2 年 内产卵最
多 , 有谓 3 年才能打捞 , 因 3 年油质佳 , 产季
以降霜期最好 , 此时油量最 多 、 质好 。 雷必
武〔5〕等测定了黑龙江宁安县和牡丹江地区的
哈士蟆含油量 , 认为药用哈士蟆油应捕捉单
只干重 12 · 5g 以上的雌性哈士蟆 剥油 , 哈士
蟆商品干货单只越重 , 含油量比例越高 。唐稚
英〔C〕等分析了取出哈士蟆油后的黑龙江产中
国林蛙残体的营养成分 , 发现不论蛙体或 卵
巢 粗 蛋 白含 量 都很 高 , 分 别 为 6 3 . 2 6 % ,
54
·
46 %
。 但对哈士蟆油 、卵产量及蛋白质含
量动态变化的研究尚未见报道 。
本文以越冬前霜降期的辽宁产中国林蛙
为材料 , 动态分析哈士蟆油 、卵产量及粗蛋白
含量 , 并对 3 龄蛙越冬前 、后 (尚未产卵)进行
比较 , 以期为野生哈士蟆资源的有效利用提
供进一步的依据 。
1 材料与方法
1
.
1 材料来源 : 本试验用 中国林蛙为 1 9 9 5
年 3 月中旬和 n 月初从辽宁新宾产地捕获
的鲜活蛙 。
1
.
2 方法
1
·
2. 1 性状测定 : 用 T N 型托盘式扭力天平
称取体重 , 用直尺测量其体长 (吻端至泄殖
孔 )后 , 剥油取卵并分别称重 。
1. 2. 2 蛙龄鉴定 : 按马常夫川方法 , 根据体
长和发育程度划分年龄 , 并用 t 检验法分析
各龄蛙平均体重 、平均体长差异的显著性 。
L 2. 3 样品处理 : 去内脏躯体反复捣碎后 ,
50 一 6 o C烘干 , 再 经反复粉碎 , 过 60 目筛 ;
油 、卵则直接烘干 , 再反复粉碎过筛 。
1. 2. 4 粗 蛋 白测 定 : 粉碎过 筛后 的样 品
50 C 烘干 8 一 10 h , 各样 品分别准确称取 约
0. 29 两份 。 用强化 (过氧化 )凯氏定氮法即 ,
.
A d d r e s s
:
Jia
S h
n g C h a o g u a n g
,
D e p a r t m e n t o f E n v ir o n m e n t a l a n d R e o u r e e s B io lo g y
,
F u d a n U n iv e r s ity
,
a n g h i
.
5 9 0
.
比色测定蛋白氮 . 蛋 白质含量用 N x 6 . 25 换
算 。
1
.
2
.
5 数据分析 : 根据测得的数据 , 分析辽
宁产中国林蛙油 、卵及其蛋 白质含量 的变化
趋势 , 对不同年龄进行差异显著性测定 。
2 结果与分析
2
.
1 中国林蛙体重 、体长测定及年龄划分 :
根据辽宁产中国林蛙体重 、体长测定 的分析
结果 (表 1 ) , 各龄蛙之 间体长 、体重的差异都
极其显著 。 3 龄蛙越冬后的体长 、体重都较越
冬前大 , 其中体长的差异也达到 了极 显著的
水平 , 而体重的差异则不明显 。从变异系数来
看 , 各龄蛙体重的变异系数都较大 (> 10 % ) ,
而体长的变异系数都较小 (< 10 % ) , 表 明同
龄蛙的体长相对较稳定 , 依据体长划分中国
林蛙年龄有较好的客观性 。
衰 1 不同年龄中国林蛙体 , 、体长测定
性状 蛙龄 丁士 5 C V
冬前后油的差异也不明显 , 卵的相对 含量则
有明显的差异 , 说明冬眠期间 , 营养物质主要
积累在卵子中 , 以供受精后胚胎正常发育需
要 。 卵油比高低顺序为 1 龄 > 2 龄> 3 龄 (越
冬后 )> 3 龄 (越冬前 )与卵的相对含量变化
基本一致 , 基中 1 、 2 龄蛙的卵油比都大于 1 。
表 2 不同年龄中国林蛙油 、卵产t
性状 蛙龄 牙士 5 占体重百分比
卵重 比
油重
油重
(g )
0
.
4 5 士 0 . 1 1
1
.
5 7 士 0 . 2 8 ‘ 件
5
.
0 3士 0 . 9 4 “ .
5
.
8 0士 1 . 2 9 . 番
卵重
(g )
1
.
0 0士 0 . 3 1
2
.
6 8士 0 . 7 1 . 件
3
.
7 2士 0 . 90 . 书
4
.
4 5士 0 . 8 5 份 .
2 4
,
5 7 7
.
6 7
17
.
9 6 10
.
4 4
番 妥
18
.
6 3 18
.
0 6
于 书
2 2
.
2 5 19
.
0 4
粉 “
3 1
.
0 7 16
.
7 3
2 6
.
5 2 1 7
.
8 3
2 4
.
1 1 13
.
3 5
带 书
1 9
.
0 1 14
.
7 4 甘
注 : 1 龄蛙只计入有油和卵的个体 。
宇润切枯以一鲜,国韶贪侧
体重
( g )
5
.
2 0 士 1 . 5 8
1 5
.
0 3士 2 . 64 二
2 7
.
8 7士 3 . 78 二
3 0
.
2 4士 3 . 8 3 份 .
体长
( e m )
3
.
8 8 士 0 . 3 8
5
.
4 7 士 0 . 4 2 . 份
6
.
7 6 士 0 . 2 5 . ,
7
.
4 5 士 0 . 1 5 . 苍
3 0 3 3
17
.
5 4
13
.
5 8
12
.
6 8
9
.
7 9
7
.
7 0
3
.
7 0
2
.
0 4
蛙 转 (日
注 : 3 , 表 示越冬后的 3 龄蛙 , ‘ 尸< 0 . 05 ” 尸< 。· 01
(下同 ) . 1 龄蛙数据包括无油和卵的个体 , 实验中有油和卵
的最小个体为 :体长 3 . 7c m , 体重 4 . 59 。 体重对体 长线性回
归 : Y一 7 . 3 7 9 1X 一 2 3 . 8 78 , r 一 0 . 9 8 4 1 。
2
.
2 1 ~ 3 龄 中国林蛙油 、卵产量 : 不同年龄
中国林蛙油 、卵平均重量 , 变异系数及相对含
量见表 2 。 1一 3 龄中国林蛙的油 、卵绝对产量
依次升高 ,并且相互之间的差异都极显著 。 3
龄蛙越冬后的油 、卵重量都较越冬前高 , 这可
能与产卵前生殖器官营养物质的进一步积累
有关 。 油的相对含量的动态与绝对产量的动
态表现一致 ( 图 1 ) , 而卵的相对含量以 2 龄
蛙最高 ( 1 7 . 8 3 % ) , 其次是 1 龄蛙 ( 1 6 . 7 3 % ) ,
越冬前 3 龄蛙最低 ( 1 3 . 35 % ) 。差异显性检验
表明 , 1 、 2 龄蛙卵的相对含量差异不显著 ;越
《中草药》1 9 96 年第 27 卷第 10 期
图 l 不同年龄中国林蛙油 、卵产量
1一油绝对含量 3一卵绝对 含量
2
一油相对含量 4 一卵相对 含量
么 3 1一 3 龄 中国林蛙蛋 白质含量 : 表 3 中
分析资料表明 , 中国林蛙油 、卵及去内脏躯体
的粗蛋白含量都较高 , 均高于牛羊肉 (含蛋白
质 16 % 一 21 % )和鸡蛋 白 (含蛋 白质 14 % ) ,
不同年龄 中国林蛙蛋 白质含量时空动态 图
(图 2) 显示 , 3 个部位的蛋白质含量顺序是卵
> 躯> 油 。不同年龄的中国林蛙中 , 这三者的
变化趋势又不一样 , 随蛙龄增长油和卵蛋 白
含量都呈递减趋势 , 而去内脏躯体的粗 蛋白
含量基本上从 1 龄到 3 龄依次提高 。 从图 2
可以看出 , 卵和去内脏躯体中蛋白质含量 的
变化方 向相反 、幅度相近 , 并且至 3 龄蛙越冬
5 9 1
-
户月如葛口洲
后两个部位的蛋白质含量接近相同 。 显著性
测定表明 : 除越冬后 3 龄油与 1 龄油蛋白质
含量差异极显著外 , 油中蛋 白质含量相对稳
定 , 越冬后蛋白含量较越冬前略低 。卵中蛋白
质含量变化幅度较大 , 但邻近年龄间 、越冬前
后均无显著差异 , 只是以越冬后为低 。躯体的
表 3 不同年龄中国林蛙蛋白质含t ( % )
样品 蛙龄 于士 5 C V 平均
蛋 白质含量变化也较大 , 雌雄躯体均是越冬
后较越冬前含量高 , 其中雄体越冬前后 的差
异达到了显著水平 。平均来看 , 两性躯体蛋白
质含量相近 。
53
.
92 士 0 . 4 0
5 ]
.
58 士 0 . 1 2
5 飞. 3 5 士 1 . 7 3
5 0
.
9 8士 0 . 3 5 . 钾
7 5
.
3 5士 2 . 2 3
7 2
.
8 0士 0 . 3 0
6 9
.
4 3士 1 . 8 9 否 件
6 5
.
8 5士 0 . 5 4 . 怪
5 7
.
1 7士 2 . 5 9
5 4
.
8 7士 2 . 5 5 . 苍
6 2
.
0 3士 0 . 9 8
64
.
8 5 士 1 . 7 5 .
54
.
34 士 1 . 7 1
5 8
.
6 1士 0 . 17
5 9
.
2 5士 0 . 4 9
6 5
.
2 6士 0 . 1 6 “ .
0
.
7 4
0
.
2 3
3
.
3 7
0
.
6 9
2
.
9 6
0
.
4 1
2
.
7 2
0
.
8 2
4
.
5 3
4
.
6 5
1 5 8
2
.
7 0
3
.
1 5
0
.
2 9
0
.
8 2
0
.
2 5
5 1
.
9 8
,一 纽一之矛李L
挂附 ( 。 )
7 0
.
8 6
雌躯 5 9。 7 3
雄躯 5 9 . 3 7
图 2 不同年龄中国林蛙蛋白质含t
1
一油 2 一卵 3 一雌 4 一雄
2. 4 油 、卵产量及蛋白质含量与体重 、体长 、
蛙龄的关系 : 油 、卵产量及蛋 白质含量与体
重 、体长 、蛙龄的相关系数的统计结果见表
4
。 油 、卵产量与体重 、体长 、蛙龄表现为极显
著的正相关 , 雌雄体蛋白质含量与这三者的
关系也为正相关 , 而油和卵中蛋白质含量与
体重 、体长 、蛙龄呈极显著的负相关 , 进 一步
说明中国林蛙生殖器官 (主要是卵巢 )与躯体
的粗蛋白含量之间有相互消长的关系 。
表 4
性状
体重
体长
蛙龄
油重
油 、卵产皿及蛋白质含 t 与体盆 、体长 、蛙龄的相关系数 ( r )
卵重 油中蛋白含量 卵中蛋 白含量 雌体蛋白含量 雄体蛋白含量
0
.
9 8 7 2
0
.
9 6 6 3
0
.
9 5 8 8
0
.
9 9 7 2
0
.
9 9 8 4
0
.
9 9 0 9
一 0 . 9 9 9 7
一 0 . 9 9 77
一 1 . 0 0 0 0
一 0 . 9 7 2 5
一 0 9 7 1 7
一 0 . 9 9 6 8
0
.
8 4 94
0
.
8 0 3 5
0
.
6 6 4 8
0
.
8 9 5 4
0
.
9 2 1 2
0
.
9 19 7
3 小结
辽宁产 1一 3 龄中国林蛙的含油量及含
卵量均有显著性差异 。 其 中哈士蟆油的绝对
含量和相对含量都以 3 龄蛙最高 , 相对含量
分别为 1 龄蛙 、 2 龄蛙的 2 . 35 、 1 . 73 倍 , 从这
方面考虑 , 宜有选择地捕捉 3 龄 (体长 6 . sc m
以上 , 鲜重 2 49 以上 ) 以上 的蛙取油 , 3 龄 以
下的雌蛙不宜利用 。
卵的绝对重量随蛙龄递增 , 但相对含量
以 2 龄最高 。各龄蛙的卵油比表明 . 卵的产量
与油的产量接近 , 甚至最高 ,而卵的粗蛋白含
量均高于相应的油 , 躯体的蛋白含量也高于
油 。 因此 , 中国林蛙在取油的同时 , 卵和去内
·
5 9 2
·
脏躯体 (包括雄体 )也可作为高蛋白食品加以
利用 。
从蛋白质含量的动态变化看 , 油中蛋白
质含量相对稳定 , 而卵和躯体中粗蛋白的变
化较大 , 变化趋势正好相反 , 变化幅度则较接
近 , 表现出相互消长的关系 , 这可能与中国林
蛙生长发育过程中 , 蛋 白质成分的再分配有
关 。
3 龄中国林蛙 越冬前后的 比较显示 , 越
冬后的油 、卵产量略高于越冬前 , 但无明显差
异 , 蛋 白质含量也未表现出明显的差异 , 其它
营养成分的动态变化有待深入研究 , 以便进
一步确定合适的采油季节 。
参 考 文 献
四川省生物研究所 , 等 . 经 济两栖爬行动物 . 七海 : 上海
科学技术出版社 , 1 9 7 8 . 14
李成义 , 等 . 氮基酸杂志 , 19 9 2 . (1 ) : 4 8
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徐 国钧 , 等编著. 药材学 . 北京 : 人民卫生出版社 , 1 9 60 .
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雷必武 . 野生动物 , 1 9 94 , (5 ) : 36
唐稚英 , 等. 野生动物 , 1 9 8 7 , (l ) : 3 0
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(1 9 9 6
一
0 3
一
0 8 收稿)
D yn a m ie A n a lysis of o v id u c t
,
E g
a n d P r o te in C o n ten ts 三n C h in e s e L in w a
(及. 月。 ‘彻月5 1扭口月5 15 )G ro w n in L ia o n in g P ro v in ee
Jia n g C h a o g u a n g
,
F a n g W
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,
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o v id u e t
, eg g a n d p r o t e in eo n te n t s o f l ~ 3 ye a r , o ld Ra
n a c he n si摊e n sis w e r e st u d ie d
.
R e su lt s sh o w e d th a t
th e o v id u e t e o n te n t a n d th e a bs o lu te v a lu e o f e g g s w e r e s ig n ifie a n tly h ig h e r in 3
一
y e a r o ld fr o g s
,
W h il
e t he r e la
-
tive
v a lu e o f e g g s w a s hig h e s t in 2 ye a r s o ld fr o g s
.
C r u d e p r o t e in e o n te n t v a r ie d in d iffe r e n t a g e d g r o u p a s w e ll
a s in d ife
r e n t p a r ts o f the bod y
,
w ith e g g s e o n ta in in g t he h ig h e s t a m o u n t
.
Pr o te in in o v id u e t w a s e o m p a r a tiv e
-
Iv e o n s is t a n t
.
Pr o t e in e o n te n t in d e v isc e r iz e d bo dy w
a s r a th e r h ig h w ith n o s ig n ifie a n t diffe r e n ee b e tw ee n m a le
a n d fe m a le
.
F r o g s be f
o r e a n d a fte r h ib e r n a tio n h a v e e s se n t ia lly s im ila r o v id u e t a n d p r o te in e o n te n t
,
b u t e g g
eo n te n t w e re s ig n ifi e a n tly hig he r a fte r h ibe r n a tio n
.
Pr o te in e o n te n t in e g g s w a s n o t n o ta b ly e ha n g e d
.
中药青箱子 、土鳌虫的等电聚焦电泳研究
湖北中医学院物化教研室 (武汉 4 3 。。61)
湖北中医学院附属 医院药剂科
陈振江 夸
张香梅
摘 要 应用等电聚焦电泳(is o e lec t rie fo e u s in g e le e t r o p ho r e s is 简称 IF E )技术 , 对果实种子类中
药青箱子Ce los ia a r g e n tea L . 和动物类中药土鳌虫 E uPo lyP ha g a si ne nsi W al k 进行 IF E 研究 。结果
表明 , 清晰的电泳谱带既可作为鉴别药物纯度及真伪的依据 , 也可用于确定药物样品所含主要蛋
白质成分的等电 p H , 从而为中药材及其制剂的生产 、贮藏提供定量参考数据 。
关 . 词 青箱子 土盆虫 等电聚焦电泳 等电 p H
在中医临床的应用上 , 果实种子类中药
和动物类中药 占有很大的 比重 , 所以应确保
用药质量 。 由于果实种子类和动物类中药材
均富含蛋白质 。 故可以认为它们疗效的好坏
与其所含蛋白质成分的性质密切相关 。 本实
验选用的果实种子类中药青箱子和动物类中
药土鳌虫为常用的中药材 。 在实际应用中经
常有混淆品出现 , 需用有效的方法加以鉴别
区分 ;此外 ,它们所含主要蛋白质成分性质如
等电 p H 的确定 , 对药材及制剂的生产 、贮藏
和使用有重要意义 。 IF E 技术可以满足这两
方面的要求 。
IF E 是比普通的聚丙烯酞胺凝胶电泳更
为先进的一种电泳技术 。 含有不同蛋白质成
分的各种中药及其制剂均可应用 IF E 技术
对其进行质量分析与鉴定 〔1 , 。 然而一般 的
IFE 需用的两性电解质价格昂贵 , 且需配备
较大功率的 电泳仪及与之配套的带有冷却装
. A d d r e s s : C he n Z h e n ji
a n g
,
De p
a r tm e n t o f P hy s iea l C he m is t ry
,
H u b e C o lle g e o f T r a d it io n a l C h in e s e
M
e d ie in e
,
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·
5 9 3
·