全 文 ：· 药理实验与临床观察 ·
复方蛇制剂急性毒性及镇痛抗炎药效研究
天津医科大学药理教研室 ( 3 0 0 07 ) 0
杭州市药物研究所
刘艳霞 寮 白凤菊 姿建石 康 毅 韩永 晶
吴红兵 徐水林 方涌强 叶军妹 徐仲仙
徐声林 方迪荣
摘 要 实验观察了复方蛇制剂的急性毒性及其镇痛 、抗炎作用 。 结果表明 : 口服复方蛇制剂 ,小
鼠的最大耐受量为 1 20 9 k/ g , 是病人临床常用剂量的 1 0 9 1倍 , 该制剂基本无毒 。 复方蛇制剂使醋酸
所致小鼠扭体次数极 显著减少 , 使电刺激小鼠痛闭值明显提高 , 其镇痛作用与剂量相关 。 复方蛇制
剂使角叉菜引起大鼠足踢炎性肿胀显著减轻 , 使二甲苯所致小鼠右耳炎性肿胀显 著减轻 , 结果表
明 :复方蛇制剂确有抗炎作用 , 且在一定范围内效应随剂量增加而增强 。
关键词 复方蛇制剂 急性毒性 镇痛作用 抗炎作用
复方蛇制剂是 由乌梢蛇 Z ao cy , d h u m -
n a d e s ( C a n t o r )
、 蝮蛇 A g k i s t r o d o n h a ly s ( p a l -
l a s )的醇提取 物辅 以中药黄蔑 、 当归 、 生地 、
七叶一枝花 、 仙灵脾等制成的口服制剂 ,具有
益脾补肾 、 化疲通脉之功效 , 临床用于治疗风
湿病 (痹症 )有较好的疗效 。 本实验观察复方
蛇制剂急性毒性及镇痛抗炎作用 。
1 材料
1
.
1 动物 : 昆明种小 鼠 2 1 4 只 , W i s t a r 大鼠
4 2 只 ,雌雄兼用 , 由天津 医科大学实验动物
部提供 。
1
.
2 药品 : 1 0 0 %复方蛇制剂 ,相当于每毫升
含生药 g1 , 由杭州市药物研究所提供 , 用时
以 蒸 馏水 分 别 稀 释 至 75 % 、 50 %和 25 % ;
25 %薪蛇药酒做为阳性对照药 ,浙江台州制
药厂生产 ;醋酸 ,二 甲苯 ,分析纯 ,天津化学试
剂二厂 ; 角叉菜粉 , iS g m a 公司 , 使用时以无
菌生理盐水配成 1%溶液 。
2 方法与结果
2
.
1 统计学方法 : 实验数据以均数士标准差
( x 士 s )表 明 。 各组间显著性差异采用成组资
料 t 检验和方差分析 ; 给药前后均数间显著
性差异采用配对资料 t 检验 ; 扭体反应发生
率显著性差异采用 厂 检验 。
2
.
2 复方蛇制剂急性毒性实验
2
.
2
.
1 半数致死量 ( L D S。 )测定 : 小鼠 30 只 ,
随机分为 3 组 , 每组 10 只 。 分别 以 1 0 % 、
7 5%和 5 0 %复方蛇制剂溶液 , 按 0 . 2m l / 1馆
体重给小鼠灌胃 ,观察给药后动物的反应 , 连
续观察 d7 。 结果 : 小鼠全部存活 ,未见异常 。
故未能测出该药 L D : 。 。
2
.
2
.
2 最大耐受量测定 : 小鼠 24 只 ,雌雄各
半 。用 10 %复方蛇制剂溶液 ,按每次 0 . 4m l/
10 9 体重给小鼠灌 胃 , 2 4 h 内共给药 3 次 , 连
续观察 d7 。 结果 : 动物仍全部存 活 ,未见异
常 。 计算小鼠对复方蛇制剂的最大耐受量为
1 2 09 k/ g
。 临床 使用 复方 蛇制 剂 的浓度 为
0
.
0 7 79 / m l
,
l后床 用量为 2 5一 s o m l , 每 日两次。展每次 50 m l 计算相当于每 日服用生药
量为 7 . 79 。 若人以 7 o k g 体重为标准 ,小鼠的
最大耐受量是人临床常用剂量的 10 9 1倍 。故
复方蛇制剂基本无毒 。
2
.
3 复方蛇制剂的镇痛作用
2
.
3
.
1 小鼠扭体法川 :雌性小 鼠 5 只 ,体重
20
.
1士 3 . 0 9 , 随机分为 5 组 。 1一 5 组依次为
蒸 馏 水 、 25 % 、 50 % 、 10 。%复 方 蛇 制 剂 和
`
A d d r e s s
:
L i u Y a n x l a
,
D e p a r t m e n t o f P h a r m a e o lo g y
,
T ia n ii
n M e d ie a l U n iv e r s i t y
,
T ia n j i n
《中草药 》 1 9 9 6 年第 27 卷第 9 期 · 5 3 9 ·
25 %薪蛇药酒组 。 每 日均以 0 . Zm l/ 10g 体重
的剂量按不同组别给小鼠灌 胃给药 1次 ,连
续 7d ,末次给药后 h1 ,给每只小 鼠腹腔注射
新配制 0 . 6%的醋酸溶液 0 . 2m l ,计算 15 m in
内小鼠扭体次数 。 结果见表 1 。 与蒸馏水组相
比 , 各浓度复方蛇制剂和 25 %薪蛇药酒均有
明显的镇痛作用 ;与 25 %薪蛇药酒组相比 ,
各浓度的复方蛇制剂组小 鼠扭体次数也显著
减少 ,故上述各浓度的复方蛇制剂的镇痛作
用均比阳性对照药强 。
表 1 复方蛇制剂对醋酸所致小鼠扭体反应的效果
组 别 动物数
(只 ) 扭体次数
扭体反应发生率
蒸馏水
25 % 复方蛇制剂
5 0 % 复方蛇制剂
10 。% 复方蛇制剂
25 写 薪蛇药酒
{:
28
.
50士 5 . 8 5
10
.
8 9士 5 . 9 0
1 3
.
33士 4 . 0 3
1 3
.
0 0士 7 . 1 8
2 1
.
0 0士 6 . 5 7
书 , 一 △△
, , . △△
}:
1 0 0
5 0 圣
. △△ 斗
1 0 0
与蒸馏水组相 比 ` 尸< 。 . 05 , , . P < 0 . 0 01
与 25 %薪蛇药酒组相 比 △尸< 。 . 05
2
.
3
.
2 小鼠电刺激法 〔 , 〕 : 雌性小鼠 60 只 ,体
重 20 . 9士 2 . 69 。 给药前先将小鼠置于电惊厥
仪中 , 用 Y S D 一 4 型药理生理多用实验仪电刺
激小鼠足环部筛选小 鼠 。 电刺激参数为 : 电压
1 2 0一 1 4 o V , 波宽 Zm s ,频率 I H : 。 以电刺激
开始到小 鼠发出第一声尖 叫的时间为痛 阂
值 ,大于 1 55 仍未发出叫声者剔除不用 。 筛选
后保留 46 只小鼠随机分为 4 组 。 1一 4 组依
次为蒸馏水 、 25 % 、 10 0%复方蛇制剂和 25 %
薪蛇药酒组 。 各组给药方法同上 。 末次给药
后 hl , 采用与给药前相 同的参数 电刺激 小
鼠 ,记录给药后动物的痛阂值的变化 。与给药
前相 比 ,各浓度的复方蛇制剂组和阳性对照
药组 小 鼠电刺激痛闭值 明显提高 (表 2 ) 。
1 0 0%复方蛇制剂组小鼠痛闭值亦明显高于
25 %复方蛇制剂和 25 %薪蛇药酒组 ,故高浓
度复方蛇制剂镇痛作用较强 。
△△△尸 < 0 . 0 0 5 与 50 %复方蛇制剂组比
表 2
△△尸 < 0 . 0 1
+ 尸 < 0 . 0 5
复方蛇制剂对电刺激小里痛阅值的影响
组别 动物数
(只 )
给药后痛
闭值 ( s )
差值
( s )
给药后痛
闹值 ( s )
蒸馏水
25 % 复方蛇制剂
1 0 0 % 复方蛇制剂
25 % 薪蛇药酒
与蒸馏水组相 比
+ + 尸 < 0 . 0 1
{:
{:
给药前痛
闭值 ( s )
7
.
4士 3 . 3
7
.
0士 3 . 9
8
.
2士 3 . 3
7
.
4士 3 . 5
6
.
2士 2 . 6
1 7
.
5士 9 . 0
3 3
.
7士 16 . 0
1 9
.
2士 1 3 . 4
一 1 . 3士 3 . 5
10
.
1士 10 . 0 ,
2 5
.
5士 1 4 . 9 开 .
1 1
.
8士 13 . 1 .
6
.
2士 2 . 6
17 5士 9 . 0 二
3 3
.
7士 1 6 . 0 唇 . △△ + +
19
.
2士 1 3 . 4 ’ 苍
’ 尸 < 0 . 0 5 “ P < 0 . 0 1 与 25 %复方蛇制剂组比 劫 P < 。 . 01 与 25 %薪蛇药酒组相比
2
.
4 复方蛇制剂的抗炎作用
2
.
4
.
1 角 叉苹所致士 鼠 .早拓奋性肿胳洛 t1J ,
大 鼠 42 只 ,体重 1 7 .5 3 士 29 . 69 , 雌雄兼用 。
随机分为 4 组 。 `一 4 组依次为蒸馏人版%
薪蛇药酒 、 1 0 %和 25 %复方蛇制剂组 。 每习
以 l m l / 1 0 0 9 体重的剂量按不同组别给小鼠
灌胃给药一次 ,连续 d6 。 末次给药后 h1 , 以
1%角叉菜溶液 。 . 08 m l 在每只大鼠右足踢
中部做皮下注射 ,造成足坏部炎性肿胀 。并分
别于致炎前 、 致炎后 2 、 4 、 6 、 s 、 20 及 2 4h 用改
良容积法测定每只大 鼠右足的肿胀程度 。 肿
胀度以右足体积与左足体积之差表示 。结果 :
1 0 % 复方蛇制剂组致炎后各时间点大 鼠右
足肿胀度与相应时间点的阴性对照组相比均
显著减轻 ,但复方蛇制剂不改变炎症的进程 ,
如图所示炎症仍以由轻到重再渐轻的规律演
变 。结果表明 : 大剂量复方蛇制剂有抗角叉菜
所致大鼠足拓炎性肿胀的作用 。
.2 .4 2 二 甲苯所 致小 鼠耳 肿胀法川 : 小 鼠
4 5 只 ,体重 18 一 2 29 , 雌雄兼用 。 随机分为 魂
组 。 实验分组与角叉菜所致大鼠足肠炎性肿
胀实验相同 ,给药方法与镇痛实验相同 。末次
给药后 h1 以二 甲苯 0 . o 15 m l 涂抹右耳全耳
内外侧面 。 涂耳后 h2 ,将小鼠颈椎脱臼处死 ,
以直径 gm m 的打孔器分别在左右耳同一部
位打下耳片并称重 , 以右耳与左耳重量的差
值计算右耳的肿胀度 。结果 : 与蒸馏水组和阳
J性对照组比较 , 1 0 %复方蛇制剂组小鼠右耳
·
5 4 0
·
肿胀度显著减轻 (表 3),表 明 : 高浓度的复方
蛇制剂有抗二 甲苯所致小鼠耳肿胀的作用 。
表 3
复方蛇制剂对大鼠足拓炎性肿胀的作用
1一蒸馏水 2一 25 %薪蛇药酒
3一 2 5% 复方蛇制剂 4一 1 0 %复方蛇制剂
复方蛇制剂对小鼠右耳平均肿胀度的影响
组别 动物数 (只 ) 右耳肿胀度 ( m g )
蒸馏水 1 2 7 . 6 4士 4 . 70
2 5 % 薪蛇药酒 1 1 8 . 3 4 士 4 . 63
10 。 % 复方蛇制剂 n 2 . 13 士 2 . 89 二 △△
25 肠 复方蛇制剂 n 4 . 54 士 3 . 12 △
与蒸馏水组相 比 “ 尸 < .0 01
与 25 %薪蛇药酒组相 比 △尸 < 。 . 05 △△尸 < 。 . 01
3 讨论
实验证实 : 复方蛇制剂能使醋酸所致小
鼠扭体次数显著减少并使动物扭体反应发生
率明显降低 ,使 电刺激小鼠痛阑值明显提高 ,
疗效明显优于阳性对照药 25 %薪蛇药酒 ;复
方蛇制剂还使角叉菜所致大 鼠足肠炎性肿胀
和二 甲苯所致小 鼠耳肿胀明显减轻 , 提示该
药具有镇痛和抗炎作用 。
复方蛇制剂乃乌梢蛇及蝮蛇的醇提取物
辅以中药而成 。 早在明代 《本草纲 目 》中就有
记载 : 乌梢蛇肉 ,气味甘平 ,主治 “ 诸风顽痹 ” 、
“ 功与白花蛇同 ,而性善无毒 。 ” 白花蛇就是中
药薪蛇 ,主治 “ 骨节疼痛 。 ”蛇 又称尬 ,即为蝮
蛇 , 主治 “ 疗痹 ” 〔 2〕 。 乌梢蛇是游蛇科动物乌梢
蛇除去内脏的干燥全体 ,具有祛风湿 、 定惊搐
的功效 ,常用于治疗风湿痹痛等症 〔3〕 ,现代医
学证明 , 乌梢蛇提取液具有抗炎 、 镇痛 、 镇静
作用 。 乌梢蛇尚有通络之功效 〔们 。 蝮蛇有祛
风 、攻毒功效 , 民间将蝮蛇用作滋补强壮 、 恢
复疲劳 、 解毒药 , 用于治疗风湿痹症 ; 现代医
学常用于抗炎 、 抗血栓 、 抗癌等 〔5〕 。 蝮蛇提取
物能降低毛细血管的通透性 ,减少炎症时的
渗出〔` 〕 , 其所含棕搁酸和 月桂酸等成分可能
是抗炎的有效成分 ,它们可能通过刺激神经 -
垂体一肾上腺皮质功能而发挥作用 〔5 〕 。 此外 ,
前列腺素是体内的生物活性物质 , 与炎症 、 疼
痛均有密切的关系 ,复方蛇制剂是否可能通
过抑制前列腺素而发挥镇痛和抗炎作用 , 尚
有待于进一步研究 。 有报道 〔 , 〕 ,关节的功能活
动取决于经脉通畅 , 气血充足 ,故治疗风湿痹
症常采用益气 、 养血 、 通络法 。 复方蛇制剂方
中黄茂补气升阳 ,益卫固表 ; 当归及丹参活血
祛癣 ;仙灵脾补肾壮阳 , 祛除风湿 ,故复方蛇
制剂在临床应用中取得较好的疗效 。 实验证
实复方蛇制剂基本无毒 , 并有 明显的镇痛和
抗炎作用 ,为临床使用提供了可靠依据 。
参 考 文 献
1 徐叔云 , 等 . 药理学实验方法 . 北京 : 人民卫生出版社 , 第
二版 , 1 99 1 . 7 0 0 、 7 14 、 7 1 9
2 李时珍 , 等 . 本草纲 目 (校点本 ) . 第 1版 . 北京 : 人 民卫生
出版社 , 19 8 8 · 2 4 0 1
3 胡熙 明 , 等 . 中 国药物大 全 . 北京 : 人民卫 生 出版社 ,
19 9 1
.
1 20
4 顾剑萍 , 等 . 浙江药学 , 一9 8 6 , 3 ( 4 ) : 4
5 钟正 贤. 中草药 , 1 9 9 4 , 2 5 ( 5 ) ; 2 7 2
6 李延忠 , 等 . 中草药 , 1 9 92 , 2 3 ( 8 ) : 4 2 5
7 任 峰 . L海中医药杂志 , 19 9 4( 7 ) : 41
( 1 9 9 5
一
0 9
一
2 1 收稿 )
A e u t e T o x i e i t y A n a l g e s i e a n d A n t i i n f l a m m a t o r y E f f e e t s o f S n a k e C o m p o u n d
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n a k e e o m p o u n d ( S C ) c o n s i s t e d o f t h e a le o h o li c e x t r a e t o f Z a o 心沙 : 己入u m n a de , ,八 g 乏i s t or do n 人a ly , ( P a l la s )
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《中草药 ) 1 9 9 6 年第 2 7 卷第 9 期 · 54 1 ·
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-
e r e a s e d s i g n i fi e a n t ly a n d t h e p a in t h r e s h o ld o f e le e t r ie a l s t im u l i in e r e a s e d m a r k e d l y b y S C in m l e e
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s w e ll in g o f e a r in m ie e w e r e a ll e v ia t e d d r a m a t ie a l l y b y S C
.
S C s h
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e n t o f w i n d
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d a m p n e s s s y n d r o nr e a n d a n t h r a lg ia s y n d r o m e i n e li n ie
.
蜂毒活血化痪作用的实验观察△
江西中医学院 (南昌 3 3 0 0 0 6) 徐 彭 帝 欧 阳永伟 肖 诚
摘 要 蜂毒能明显增加兔红细 胞膜的流动性 , 显著降低兔全血及血浆粘度 , 加快红细胞的电泳
速度 , 降低红细胞的刚性指数 。 这些结果表明 , 蜂毒能明显改变家兔血液流变学的一些特性 ,具有
一定的活血化疲作用 。
关键词 蜂毒 血液流变性 活血化疲
天然药物蜂毒是蜜蜂从尾部鳌针排出的
一种毒液 ,含有若干种多肤 、 酶 、 生物胺和其
他物质 ,具有广泛的生物学作用和众多的临
床用途 。蜂毒对神经系统 、 心血管系统和免疫
系统的功能有明显影响 ,有较强的溶血 、 抗凝
血 、 抗炎及抗辐射作用和一定的抗菌 、 抗肿瘤
作用 〔 , 〕 。 本文通过观察蜂毒对家兔血液流变
学特性的影响 , 以探讨蜂毒对血液系统的作
用 。
1 材料
1
.
1 试药 :蜂毒 ( B e V en o m )购自浙江省绪
云县蜂业实验 厂 , 系 由蜜蜂 AP is m el l ife ar
L
. 的工蜂从鳌针排出后 ,经干燥所得的黄褐
色粉末 。 干燥器内常温下保存 ,实验时 ,用生
理盐水或磷酸盐缓冲液配成所需浓度 。
1
.
2 试 剂 : Zm ol / L 磷酸 盐 缓 冲液 ( P B S ,
p H 7
.
2一 7 . 3 ) 。 荧光探剂 l , 6一二苯基 1 , 3 , 5 -
己三烯 ( D P H ) 为 lF u k a 产品 , 以四氢吠喃配
成 Z x 1 o一 3m ol / L 溶液 , 其余试剂均为 国产
分析纯 。
1
.
3 动物 : 雄性家兔 , 体重 1 . 5一 3 . Ok g , 由
本院动物室提供 。
1
.
4 仪器 : R F 一 5 40 型荧光分光光度计为 日
本岛津产品 。 X X 一N l 型锥板式粘度计 、 S A -
B C 可调恒压力毛细管粘度计 、 S A 一 B C 型 显
微细胞 电泳仪及 S A 一B C 型血液流变学测试
软件 3一 2 版等均为江西省新元开发技术公司
产品 。
2 方法与结果
2
.
1 蜂毒对家兔红细胞膜流动性的影响 : 红
细胞膜流动性的测定 , 参照文献〔2 〕的方法进
行 ,用前述 P BS 新制备家兔红细胞悬液 (4 X
1 0
7 个细胞 /m l) 和蜂毒溶液 , 每管加 2m l 红
细胞悬液沼m l D P H 标记液和 0 . sm l 供试液
(对照组为 P B S 、 蜂毒低剂量组为 4 . s m g / L
蜂毒溶液 、 蜂毒高剂量组为 9 . 6m g / L 蜂毒溶
液 ) , 混匀 , 于 25 ℃下保温 3 om in ,保温毕 , 离
心 ( Z 0 0 0 r /m i n )弃去标记残液 ,用 P B S 洗涤
细胞 2 次 , 最后用 4m l P B S 悬浮细胞 , 并立
即在荧光分光光度计上测定 ,采用氨灯光源 ,
根据扫描确定激发光波长为 3 6 nI m ,发射光
波长为 4 6I n m , 在 25 ℃下 , 依文献 〔 3〕方法测
`
A d d r e s s
:
X u P e n g
,
J ia n g x i C o ll e g e o f T r a d i t io n a l C h in e s e M e d ie in e
,
N a n e h a n g
△ 国家中医药管理局青年基金课题
·
5 4 2
·