全 文 ：白眉蝮蛇毒 “ 类凝血酶” 的抗炎作用
海军蛇毒研究中心 ( 大连0 1 1 1 4 6) 许伟国 . 王晓林 朱仕祯 吕爱琴 李风阁
摘娜 用多种实验模型 , 观察了 白眉 蝮蛇毒类凝血酶对急慢性炎症的影响 。 结果表明 : 其能抑
制冰醋酸 、 二甲苯 、 蛋清所致的急性渗出性炎症 , 对慢性肉芽组织增生的炎症也有明显的抑制作
用 。 能增加小鼠的免疫器官重量 , 明显提高小鼠对静注碳粒的廊清指数 , 增强网状内皮系统功能
的活性 , 提示其抗炎作用与免疫促进作用有关 。
关健词 蛇毒 类凝血酶 抗炎作用 碳粒廓清
“ 类凝血酶 ” ( T h r o b i n 一 L i k e E n z y m e : , 简称 T L E ) 系从白眉蝮蛇理g k￡、 t r o d o n h a ly :
ber 沂 c a u d u : st ej n e g er 毒中分离得到的一种蛋白酶 , 具有很强的抗凝 、 去纤和改善微循 环 的
作用〔`〕 , 我们曾报道本品具有明显的镇静 、 镇痛和解热等药理作用〔 2 〕。 本文报道其抗炎作
用。
1 实验材料
动物 : 昆明种小鼠 , 体重 10 ~ 2 9 , 成年大鼠体重 1 40 一 2 5叱 , 雌雄兼用 , 本中心动物房
提供 。
药物 : T L E 由本实验室从白眉蝮蛇毒中分离 , 主要成分为精氨酸醋酶 , 使用时以 生 理
盐水稀释。
仪器 : 7 21 型分光光度计 。
2 方法与结果
2
.
1 对小鼠腹腔注射冰醋酸诱发炎症的影响 。 小鼠 40 只均分 4组 , 分别腹腔注射 T L E 、 氢
化考的松 ( H C ) 或生理盐水 ( N S ) , 3 o m i n 后静脉注射 0 . 5%伊文氏蓝 o . l m l / 1 0 9 , s m i n后
腹腔注射 1%冰醋酸 0 . 2 m l/ 1g0 , 20 m i n后处死小鼠 , 打开腹腔 , 用与生理盐水洗涤腹腔 、 洗
涤液用滤纸过滤 , 加 o . l m l 0 . l m ol / L N a O H液后用分光光度计 ( 5 9 0n ) m比色测定每只小鼠腹
腔中伊文氏蓝的量 , 将所得吸收度直接作统计学处理 、 结果见表 1 , T L E 6m g / k g对醋酸所致
腹腔毛细血管通透性增高 .有抑制作用 。
2
.
2 对二甲苯所致小鼠耳部炎症的影响 : 参照鼠耳肿胀法〔 3〕 , 将小鼠按体重均分 3组 ,腹腔
注射药物或等容量的生理盐水 , 30 m in 后用二甲苯 0 . 02 m l均匀涂抹整个右耳壳 , 左耳作对照 ,
4 h后处死 。 用直径 s m m 的打孔器分别在同一部位打两耳园片 ,称重 , 以两耳重量之差值表示
小鼠耳部的炎症肿胀程度 。结果见表 2 。 T L E对二甲苯所致小鼠耳部炎症有显著的抑制作用 。
2
.
3 对蛋清性大鼠足坏肿胀的影响 : 取大鼠 15 只 , 按体重随讥分为 3组 , 分别腹腔注射不同
剂量的药物或等容量生理盐水 , 30 m in 后 , 给大鼠左躁关节处皮下注入 20 %的新鲜鸡蛋清 0 . 1
m l
, 致炎 s m i n 后 , 开始测量给药后 0 . 5 、 1 . 0 、 2 . 0 , 3 . 0 、 4 . o h足肠关节的周长 ( m m ) , 以
右关节周长为正常值 , 观察足环肿胀的变化 ( 肿胀度 = 左拓周长一右环周长 ) 。 结果见表 3 。
T L E有显著白城允蛋清性足肠肿胀的作用。
2
.
4 对大鼠腋下埋藏棉球诱 发肉芽组织增生侧炎症的影响 : 取大鼠 40 只 ,均分 4组 , 用乙醚麻
醉 , 在无菌条件下 , 将 20 m g棉球 2个分别埋藏于两侧前肢腋窝下 , 然后缝合 , 并于当天 哗腔
注射药物 , 每 日 l 次 , 连续 7 d , 于最 后 1次给药后 30 m in , 将大鼠处死 , 取出棉球肉芽组织 ,
*
A d d r e s s : X u W
e i g u o
,
N a v y R e s e a r e h C e n t e r o f S h a k e V e n o m
,
D 压 l i a n
.
3 10
-
表1 LT E对小鼠腹腔毛按血管通透性
的影响 ( 了 士 5 0 )
表 2 LT E对二甲苯致小鼠耳肿胶的璐晌
( 牙 士 5 0 )
组别 剂量
( m g / k g )
伊文氏蓝量 ( O D ) 抑制率
( % )
组别 剂量
( m g / k g )
动物数
(只 ) 肿胀度 抑度率(% )
0 0 6 4 士 0 。 0 10
0
。 0 5 9 士 0 。 0 1 3
0
。 0 4 7 士 0 . 0 0 9 *
0
.
0 3 0 士 0 . 0 1 1 , 巾
2 6
。
5 6
5 3
。
1 3
N S
T L E
T L E ::
9
。
7 9 土 2 。 1 5
6
.
5 1 土 1 。 7 .
4
。
4 7 士 1。 2 8 * . ::
nn“
:
ōó
弓JnO`
N S
T L E
T L E
H C
。 二 , 。 与 N s组比扩 · 尸 < 。 . 。 1;’ 几尸 < 。 . 。。 , 在 6 。℃烤干称重 。 结果见表 4。 T L E与氢化考
( 下同 ) 的松相似 , 都有明显抗慢性炎症的作用 , 但后
者较前者强的多 。
表 3 T L E对蛋清致大限足肿胀的影晌 ( 份 土 s D )
组别 剂量
( m g / k g ) 0
.
5
不同时间 ( h )足肿胀程度 ( m m )
1 2 3 4
N S
T L E
T L E
H C
4
。 7 8 士 0 。 5 4
4 。 4 3 士 0 。 2名
3
。
1 6 士 0 。 57
3
。
0 6 土 0 . 3 1
3
。
9 2 士 0 。 3 5
2
。
8 6 土 0 . 2 9 巾
2
。
7 1士 0 。 6 8内
2
。
1 3 士 0 。 了4 * 中
3
。
1 2 士 0 。 15
2
.
5 4 士 0 . 4 1 ,
2
.
1 1 士 0 。 5 9 十
1
。
7 4 士 0 。 6 3 水中
2 。 9 4 士 O 。 8 5
2
。
0 5 士 0 . 2 3 *
1
.
16 士 0 。 3 6 . 巾
0
。
8 1 士 0 。 2 5 巾 中
2
。
5 3 士 0 。 5 7
1
。
6 6 士 0 。 3 5 .
1
。
0 7 士 0 。 1 6 * *
0 。 5 9 士 0 。 3 8 巾 中
2
.
5 对小 鼠免疫器官重量的影响 : 将 l 。只小鼠随机分成 2组 , 分别腹腔注射 T L E 3m g / k g和
生理盐水 , 每天 1次 , 连续给药沮后处死 , 摘取脾和胸腺 , 称重 , 结果 T L E明显增加小鼠脾
和胸腺重量 ( 表 5 ) 。
表 4 T L E对大鼠棉球肉芽肿的影晌
〔 、 士 S D )
抗炎 平
又% )
表 5 T L E对小鼠免疫器官重且的影晌
( 及 土 S D )
组别 剂 量( m g / k g 。 d 、
动物数
(只 )
棉球肉芽组织
千重 ( m g) 组另l]
剂量 动物数
(m g / k g
.
d ) (只 ) 脾脏( m g / g ) 胸腺( m g / g )
N S 1 0
T L E 3
、
7 1 0
T L E S
又 7 10
H C 2 0 7 1。
6 2
。
5 士 3。 5 4
5 0
.
3 士 7 . 0 7 幸
透5 . 7 士 5 。 1 2 “ 今
3 3
.
1士 8 . 7 “ 尔
1 9
·
5
N S 5 3
.
4 5 士 0 . 3 5
T L E 3 x 7 5 4
.
3 5 士 0 . 6 2中
1
。
3 士 0 。 2
1
.
8土 0。 2 8 .
26
。
9
17
.
0
2
.
6 对小鼠静注碳粒廓清作用 的影响 : 取小
鼠 1 0只 , 均分 2组 , 分别腹腔注射药物或等量生
理盐水 , 连续 7 d , 末次给药 3 o m i n 后由尾静脉注射中华墨汁 o . l m l / x o g , 注 射 后 2 ( t l ) 、 7
( t
:
) m i
n分别各从眼眶静脉取血 2 0拼 l , 溶于 Zm l o . 1 % N a : e o 。 ,和 ,在 7 2 1型分光光度计 6 5 o n m
处测定吸收度 ( O D ) , 计算廓清指数 K值〔K = ( l g 0 D : 一 l g O D Z ) / ( t : 一 t : ) 〕。 结果 N S组的
K值为0 . 0 2 5 士 0 . 0 5 , T L E 3m g / k g x 7组为 0 . 0 5 9 土 0 . 0 2 2 ( p < 0 . 0 1 ) 。 表明 T L E能显 著 提
高小鼠对静注碳粒的廓清指数 , 增强 网状内皮系统功能的活性 。
3 讨论
本文应用多种实验模型 , 证实 T L E对急慢性炎庄有明显的抑制作用 。 对醋酸诱发的急性
渗出 , 二甲苯诱发小鼠耳壳的发红肿胀 , 及蛋清诱 发大 鼠足环肿胀与抗炎药氢化考的松相似 ,
都有明显的抗急性炎症作用 。 对慢性肉芽组织增生的炎症 , 也有明显的抑制作用 。 T L E还能
增加小鼠的免疫器官 , 显著捉高小鼠对静注碳粒的廓清指数 , 增强网 状 内皮系统功能的活
性 , 提示其对非特异性免疫功能有促进作用 , 其抗炎作用可能与免疫促进作用有关 。
己知组织受损或炎症时 , 产生和释放前列腺素 , 前列腺素是一种极强的致热物质 , 与慢
( 下转 第3 1 9页 )
《 中草药 》 19“ 年第 25 卷第 6期 · 3 1 1 ·
2
.
4不同产地 、 不同生长年龄黄蔑的多糖含量比较 :见表 3。 同一年生的黄蔑 , 不同产地 ,
多糖含量不同 , 由南至北 , .生长速度快的万荣 表 3 不同产地 、 不同生长年龄黄蔑的
1年生黄茂含多粘量较少 , 为 2 . 9 7 7 ;幻 生长速 多箱含盆
度最慢的应县长城沟黄蔑多糖含量较多 , 为 5 · 一一一一一代厂一一一一飞厂一一一
32 1%
, 同一产地的黄蔑 , 随年龄 的增加 , 含糖量 含糖量 (% ) A B c D E
渐增 。 如万荣 裴 庄村一年生黄 茂 的 多 糖含 量 1 年生 5 3 2 1 5 . 0 0 1 3 . ` 6 6 3 . 0 2 4 2 . 0 7 7
2
.
9 7 7%
,
2年生的为 5 . 2 4 6%, 3年生的为 4 . 15 5%。 2 年生 5· 2 4 6 ” 2 4 6
3 小结 `年生 5 .5 “ .4 18
通过对我省 5产地黄茂的试验发现 , 生态环境的差异使黄茂在生长动态 、 根部纵 切 面结
构 、 不同年龄 、 不同产地多搪的含量等方面都存在差异 , 这正是中药材上灰强调的道地药材
的 “ 道地 ” 性 ( , 即生长环境对中药材 的生长和质量有明显影响 , 恒山黄茂的品质优势与其特
有的环境条件密不可分 。
( 19 9 5一 0 5 一 l 。收稿 )
( 上接 第3 1 1页 )
性疼痛 , 发热及炎症有密切关系〔` 〕。 T L E除有明显的抗炎作用外 , 还有镇痛和解热作用〔 2〕 ,
因此推测其作用可能是通过抑制前列腺素所致 。
参 考 文 献
许伟 国 . 中草药 , 19引 , 2 ( 10 ) : 4 70
许伟国 , 等 . 中草药 , 20 0 1 , 2 2 ( 1 1 ) : 5 06
徐淑云 , 等主编 . 药理实验方法学 . 北京 : 人民
卫生 出版社 , 19 8 2 . 5 25
4 沈雅琴 , 等 . 中草药 , 19 8 0 , 2 0 ( 6 ) : 2 2 )
( 19 9 3一0 5一 3 1收稿 )
猫儿屎中的三菇皂贰
K o n g J
,
e t a l
.
P h y t o e h e m
,
1 9 9 5
,
3 5 ( 2 )
:
4 2 7
木通科的猫儿屎 D 。 。 a i : n : “ f o r全 : i ; F , a 。 一 取部分有一定细胞毒作用 , 为此进行了有效成分的
hc 为传统中草药 , 盛产于我国西南地区 , 有 清 肺 分离工作 , 结果从其中分得 5个三菇皂贰 , 定 名 为
止咳 , 驱风除湿功能 。 近年来作者等发现其甲醉提 d ec ia s os id e A ~ E 。
( 史玉俊 摘译 )
太子参根中的 环 肤
谭宁华 ,等 . P h y t o e h o m , 1 9 9 3 , 3 2 ( 5 ) : 1 32 7
作者等前曾报道从太子参的根中分得棕搁酸 、
山箭酸 、 2一咄咯 甲酸 、 日一谷街醇和蔗糖等。 今 又
分得 2个新的环肤 h e t e r o p h y l l i n ( A ) 和 ( B ) 。
h e t e r o P h y l l i n A 为针状结品 , 用 6 m o l / L
H C I
,
1 1。 “ C水解得异亮氨酸和脯 、苏 、甘 、绷和苯丙
氨酸 。
h e t e r o p h y l l i n B 水解后得甘氨酸 、 脯氨酸和
异亮 、 亮及苯丙氨酸 。
( 史玉俊 摘译 )
《 中草药 》 1 9 9 4年第 25 卷第 6期 一 3 1 9 ·