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Experimental Studies on Effect of Bee Venom in Promoting Blood Circulation to Remove Blood Stasis

蜂毒活血化瘀作用的实验观察



全 文 :f
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.
蜂毒活血化痪作用的实验观察△
江西中医学院 (南昌 3 3 0 0 0 6) 徐 彭 帝 欧 阳永伟 肖 诚
摘 要 蜂毒能明显增加兔红细 胞膜的流动性 , 显著降低兔全血及血浆粘度 , 加快红细胞的电泳
速度 , 降低红细胞的刚性指数 。 这些结果表明 , 蜂毒能明显改变家兔血液流变学的一些特性 ,具有
一定的活血化疲作用 。
关键词 蜂毒 血液流变性 活血化疲
天然药物蜂毒是蜜蜂从尾部鳌针排出的
一种毒液 ,含有若干种多肤 、 酶 、 生物胺和其
他物质 ,具有广泛的生物学作用和众多的临
床用途 。蜂毒对神经系统 、 心血管系统和免疫
系统的功能有明显影响 ,有较强的溶血 、 抗凝
血 、 抗炎及抗辐射作用和一定的抗菌 、 抗肿瘤
作用 〔 , 〕 。 本文通过观察蜂毒对家兔血液流变
学特性的影响 , 以探讨蜂毒对血液系统的作
用 。
1 材料
1
.
1 试药 :蜂毒 ( B e V en o m )购自浙江省绪
云县蜂业实验 厂 , 系 由蜜蜂 AP is m el l ife ar
L
. 的工蜂从鳌针排出后 ,经干燥所得的黄褐
色粉末 。 干燥器内常温下保存 ,实验时 ,用生
理盐水或磷酸盐缓冲液配成所需浓度 。
1
.
2 试 剂 : Zm ol / L 磷酸 盐 缓 冲液 ( P B S ,
p H 7
.
2一 7 . 3 ) 。 荧光探剂 l , 6一二苯基 1 , 3 , 5 -
己三烯 ( D P H ) 为 lF u k a 产品 , 以四氢吠喃配
成 Z x 1 o一 3m ol / L 溶液 , 其余试剂均为 国产
分析纯 。
1
.
3 动物 : 雄性家兔 , 体重 1 . 5一 3 . Ok g , 由
本院动物室提供 。
1
.
4 仪器 : R F 一 5 40 型荧光分光光度计为 日
本岛津产品 。 X X 一N l 型锥板式粘度计 、 S A -
B C 可调恒压力毛细管粘度计 、 S A 一 B C 型 显
微细胞 电泳仪及 S A 一B C 型血液流变学测试
软件 3一 2 版等均为江西省新元开发技术公司
产品 。
2 方法与结果
2
.
1 蜂毒对家兔红细胞膜流动性的影响 : 红
细胞膜流动性的测定 , 参照文献〔2 〕的方法进
行 ,用前述 P BS 新制备家兔红细胞悬液 (4 X
1 0
7 个细胞 /m l) 和蜂毒溶液 , 每管加 2m l 红
细胞悬液沼m l D P H 标记液和 0 . sm l 供试液
(对照组为 P B S 、 蜂毒低剂量组为 4 . s m g / L
蜂毒溶液 、 蜂毒高剂量组为 9 . 6m g / L 蜂毒溶
液 ) , 混匀 , 于 25 ℃下保温 3 om in ,保温毕 , 离
心 ( Z 0 0 0 r /m i n )弃去标记残液 ,用 P B S 洗涤
细胞 2 次 , 最后用 4m l P B S 悬浮细胞 , 并立
即在荧光分光光度计上测定 ,采用氨灯光源 ,
根据扫描确定激发光波长为 3 6 nI m ,发射光
波长为 4 6I n m , 在 25 ℃下 , 依文献 〔 3〕方法测
`
A d d r e s s
:
X u P e n g
,
J ia n g x i C o ll e g e o f T r a d i t io n a l C h in e s e M e d ie in e
,
N a n e h a n g
△ 国家中医药管理局青年基金课题
·
5 4 2
·
定各管悬浮液的红细胞膜的荧光偏振度 p, 动性 L F V 卿 。 结果见表 1 (n 一 9) 。
并计算出红细胞膜微粘度 甲〕和红细胞膜流
表 1 蜂毒对家兔红细胞膜流动性的影响 ` 士 s )
组别 药物浓度 ( m g l/ ) 荧光偏振度 红细胞膜微粘度 红细胞膜流动性
对照组 一 0 . 3 5 7士 0 . 0 0 6 6 . 97 0士 0 . 5 36 1 . 12 3士 0 . 0 8 7
蜂毒低浓度组 0 . 5 3 0 . 3 4 2士 0 . 0 2 0 . 5 . 98 6士 1 . 2 70 . 1 . 3 8 0士 0 . 3 3 8 .
蜂毒高浓度组 1 . 0 7 0 . 3 2 8士 0 . 0 2 0 二 5 . 10 8士 1 . 0 8 2 “ 1 . 6 3 3士 0 . 3 5 5 ` .
与对照组 比较 ’ 尸 < 。 . 05 ” 尸 < 0 . 01 井 二 尸 < 。 . 0 0 1 (下同 )
2
.
2 蜂毒对家兔血液粘度等特性的影响 :家 粘度 〔4 , , 测定红细胞的电泳时间〔5〕和血沉 、 血
兔 12 只 ,随机均分成两组 ,分别于耳缘静脉 细胞比积 “ , 。 并将上述测定数据输入计算机 ,
注射 0 . 1%蜂毒 (1 m g k/ g )溶液和等容量 的 用 S A 一 B C 血液流变学测试软件进行处理 ,求
生理 盐水 , 30 m in 后 , 心脏抽血 , 置于加有肝 得红细胞聚集指数和红细胞刚性指数 , 结果
素的硅化试管 内 , 即刻进行下述血液流变学 见表 2( n 一 6) 。
指标的测定 ,分别参照文献 ,测定全血及血浆
表 2 蜂毒对家兔血液枯度等特性的影响 x( 士 s )
全血粘度 (m aP s . s )
组别
2 0 0一 1 1 0 0一 l
血浆粘度
( m P
a s . s )
对照组
蜂毒组
6
.
75士 0 . 6 4
3
.
7 3士 0 . 1 6…
7 8 9士 0 . 8 3
4
.
0 4土 0 . 19…
1 3
.
7 5士 7 . 0 5
5
.
8 9士 1 . 2 6 份
1
.
3 1士 0 . 0 7
1
.
17士 0 . 1 2 1
红细胞电泳时间 ( s )
5 3
.
1士 7 . 16
4 3
.
1士 7 . 1 1 .
血沉 ( m m / h )
0
0
.
6 7土 0 . 8 2
1 0
.
2 7士 3 . 4 1
4
.
4 2士 0 . 44 二
红细胞压积 (% ) 红细胞聚集指数 红细胞刚性指数
4 4
.
7士 3 . 4
4 4
.
5士 2 . 8
1
.
6 3士 0 . 8 0
1
.
2 5士 0 . 4 9
1 6
.
0 3士 1 . 8 3
7
.
17士 0 . 2 9…
3 讨论
近年研究表明 ,血痕证者其红细胞膜微
粘度升高 、 流动性降低 ,无论是血癖模型动物
的红细胞膜 ,还是临床血癖证患者的红细胞
膜 ,其变化非常一致 。红细胞膜流动性还影响
红细胞的变形能力 , 血疲证者红细胞膜流动
性减小 , 使红细胞变形性降低 , 刚性 指数升
高 , 导致微循环障碍 ,并容易形成血栓 。 同时 ,
血疲证者还有 明显的血液粘度升高 , 红细胞
电泳速度减慢 ,这些均不利于血液在血管 内
的流动而形成血疲 。本研究表明 ,在离体实验
中 ,浓度为 。 . 53 m g l/ J 的蜂毒就 能使家兔红
细胞膜的微粘度明显降低 , 流动性增强 ,从而
增强红细胞的变形能力 。在整体实验中 ,剂量
为 1 · Om g / k g 的蜂毒能明显降低家免的全血
粘度和血浆粘度 ,加快红细胞的电泳速度和
降低红细胞的刚性指数 。 红细胞膜的流动性
增强和红细胞刚性指数的下降 , 提示红细胞
的变形能力增强 。上述实验结果 , 以及 已有资
《中草药 》 1 9 9 6 年第 27 卷第 9 期
料〔` 〕介绍的蜂毒具抗凝血等作用表 明 ,蜂毒
有利于血液 ,尤其是红细胞在血管内的流动 ,
从而有利于消除血疲 , 即蜂毒具有一定的活
血祛痕作用 ,这些也是蜂毒在临床上有广泛
应用的药理学基础之一 。
在众多的蜂毒成分 中 , 以蜂毒肤 ( m iel t -
it n ) 的含量最高 , 是蜂毒的主要活性物质〔` 〕 。
也可能是蜂毒具有上述活血化疲作用的主要
物质基础 。 蜂毒肤 由 26 个氨基酸组成 ,其分
子结构高度不对称 ,含有较多的疏水性组分
和具有较强的碱性 , 因此 , 对脂质及细胞膜具
有较强的亲和性 ,它掺入到细胞膜上 ,改变了
细胞膜的功能 , 一定量的蜂毒肤掺入到红细
胞膜上 ,不仅能降低红细胞膜的微粘度 ,增强
其流动性 , 而且能使红细胞膜上的阴电荷增
加 , 加快红细胞的电泳速度 ,从而表现出一定
的活血化癖作用 。
参 考 文 献
1 陈远聪 , 等 . 毒素的 研究 和利用 . 北京 : 科学 出版社 ,
·
5 4 3
·
1 9 8 8
.
1 2 8
法祥光 , 等 . 中华血液学杂志 , 1 9 8 4 ( 2 ) : 1 32
李 端 , 等 . 中药药理与临床 , 1 9 9 3 ,特刊 : 5 5
金永娟 , 等 . 中华血液学杂志 , 19 8 9 ( l ) : 47
翁维 良 , 等. 血液流变学研究方法 及其应用 . 北京 : 科学
出版社 , 1 9 8 9 . 14 3
6 李其英 ,等 . 实用临床医学检验 , 武汉 : 湖北人 民出版社 ,
19 7 9
.
2 4
( 1 9 9 5

0 9

2 7 收稿 )
E x P e r im e n t a l S t u d i e s o n E f f e e t o f B e e V e n o m i n P r o m o t i n g
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m i e r o e le e t r o p h o r e s is s p e e d a n d r e d u e in g e r y t h r o e yt e r ig id i t y in d e x in r a b b i t
.
T h e r e s u l t s s h o w e d t h a t b e e v e n
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o o d e ir e u l a t io n t o r e m o v e b l o o d s t a s i s
.
虎掌南星 、 白附片抗氧化作用的实验研究
浙江医科大学药学系 (杭州 3 1 0 0 31 ) 张企兰 朱 郑 英 ` ’ 张如松 蒋惠娣
摘 要 本实验对常用的天南星科药材虎掌南星 、 姜半夏 、 水半夏和 毛蓖科药材白附片、 九节营蒲
的醇提物进行抗脂质过氧化作用的研究 , 观察 了药物对亚油酸的空气氧化的抑制作用 , 发现这几
种药材具有较强的抗氧化性能 , 尤以虎掌南星和 白附片更为显著 。 药理实验显示这两种药材能 显
著增强小 鼠血中谷胧甘肤过氧化物酶和过氧化氢酶的活性 ,与对照组 比较 , 分别 尸 < .0 01 和 p <
0
.
05
, 研究表 明虎掌南星和 白附片是天然抗氧化剂 , 抗氧化作用可能是这些中药功效的现代药理
学基础 之一 。
类健词 虎掌南 星 白附片 亚油酸 抗氧化 谷胧甘肤过氧化物酶 过氧化氢酶
虎掌南星有祛风定惊 、 化痰散结的功效 ,
并有明显的抑制肿瘤的作用 〔` 〕 。 刘春梅等〔 2〕
报道其有效成分生物碱有清除超氧阴离子 自
由基抑制 鼠肝线粒体脂质过氧化反应 , 且天 ·
南星科植物微量元素 S e 、 Z n 、 C u 等含量普遍
较高 , 具有开发利用价值 。抗氧化的有效成分
不饱和脂肪酸 、 生物碱在毛食科植物中广泛
存在 , 但对此两科植物抗氧化性能研究未见
报道 , 本实验对天南星科和毛莫科植物常用
药材粗提物通过对亚油酸自动氧化过程的抑
制作用进行筛选 , 并进一步探讨该药对小鼠
血中谷胧甘肤过 氧化物酶 ( G SH 一 P x) 、 过氧
化氢酶 ( C A T )活性的影响 ,进行整体实验对
比研究 。
1 材料
1
.
1 药材 : 白附片 、 九节营蒲 、 姜半夏由浙江
省中医院提供 。 虎掌南星 、 水半夏 、 甘草由浙
江 医科大学生药教研室提供 。 以上药材经我
校生药教研室薛祥骥 、 孙红祥鉴定 。
1
.
2 动物 : N IH 种健康 雄性小 鼠 1 8一 2 29
50 只 , 由我校动物研究所提供 。
1
.
3 仪器 : 天津 WM 一 2 型无油气体压缩机 ,
.
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,
D e p a r t m
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, . 解放军 n 7 医院药剂科
` .
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·