全 文 ：骨刺劳损膏中阿托品含量的双波长薄层扫描法测定
天津同仁堂制药厂 (3 1 0032 )邵世 宏 . 徐路青” 李永仓 葛万 霞
摘要 采用氯仿洗脱膏层 , 用萃取法提取橡皮膏中阿托品 , 薄层展开后 扫描测定其含量 , 方法快
速简便 , 灵敏度高 , 测定结果可靠。 平均回收率为1 0 . 57 % , 变异系数 3 . 8 % 。
关键词 骨刺劳损膏 阿托品 薄层扫描法 含量测定
骨刺劳损膏是天津同仁堂制药厂最新开发研制的复方中药橡皮膏制剂 , 具有活血消肿 ,
祛风止痛的作用 , 用于治疗骨质增生 、 肌肉劳损 、 脊椎炎 、 关节炎等风寒外伤引起的疼痛 。
方中含有颠茄流浸膏 , 其主要成分阿托品具有 镇 痛 解 痉的作用 。 为保证疗效 , 提高产品质
量 , 用薄层扫描法测定了阿托品的含量 。
1 样品溶液的制备
取 6 . 5 x 5 e m 2的橡皮膏一。张 , 以氯仿 1 5 0垃 l分 5次 ( 6 0 、 4 0 、 3 0 、 3 0 、 Z o m l ) 洗脱膏层 ,
洗脱液置于分液漏斗 中 , 渣用 5 % H : S O 4 6 o m l洗 3次 ( 3 0 、 2 0 、 l o m l ) , 合并至分液 漏 斗中 ,
渣弃去 。 洗脱液用 5 % H多 O扫 0m l分 5次萃取 , 合并萃取液置另一分液漏斗 中 , 再 以 50 m l氯
仿分 2次 ( 30 、 20 m l ) 萃取酸液 , 弃去氯仿液 。 用氨水将酸液调至弱碱 性 ( p H S一 9 ) , 再
用氯仿 90 m l分 4次 ( 40 、 30 、 20 、 10 m l ) 萃取 , 合并氯仿液 , 水浴挥干氯仿 , 用 乙醇定容于
5 m l容量瓶中。
2 标准溶液的制备
精密称取硫酸阿托品对照品 ( 中国药品生物制品 检 定所 ) 5 0 . o o m g , 置于 2 5 m l容量瓶
中 , 用 乙醇溶解并加至刻度 , 摇匀 , 即得 。
3 扫描条件
岛津 C S一 93 0双波长薄层扫描仪。 双波长反射法锯 齿 扫 描 。 肠 : 5 4 0n m , 几R : 6 5 0n m 。
狭缝 1 . 2 x x . Zm m , S x = 7 , 灵敏度 : 中。
4 线性化范围实验
将对照品液稀释一倍后 , 用微量进样器吸取该液 0 . 5 、 1 、 1 . 5 、 2 、 3归 , 分 别 点于同一
块高效硅胶 G 板 ( 青岛海洋化工厂 ) 上 , 置于层析缸中 , 以氯仿一丙酮 一甲醇一氨水 ( 7 0 : 10 :
1 5 , 1 ) 为展开剂 , 饱和 10 m in 后上行展开 】oc m , 取出挥干展开剂 , 以改 良碘化秘 钾溶液显
色 , 显色 后立即覆以同样大小的清洁玻璃板 , 并以透 明胶带 固 定 四 周 , 置薄层扫描仪中扫
描 。 以对照品点样量 ( 微升数 ) 和扫描面积值作图 , 得硫酸阿托 品的标准曲线 。 求得回归方
程为 : A = 一 0 . x 4 o + 2 . 4 6 4 C 。
5 样品的含量测定
在同一高效硅胶 G 板上 , 用微量进样器点标 准 液 0 . 5协1 , 样品液 5件1 , 相互问隔 cZ m 。 置
于层析缸中 , 以上述展开剂展开 、 扫描 、 测定 。 计算侮片橡皮膏中阿托 品含量 。 见表 。
6 加样 回收试验
取骨刺劳损膏 2片 , 准确加入 0 . 5m l硫酸阿 托 品 标 准 液 ( Zm g / m l ) , 按 “ 样品液的制
备 ” 项下操作 , 然后按 “ 样品液的含量测定 ” 项下操作 。 测得量减去成药中含阿托品的量 ,
·
A d d
r e s s : S h a o S h i h o u g
,
T i a n j i
n T o n g r e n t a n g P h a r m a e o u t i e a l F执 c t o r y , T i a n j i牡
二 天津乐仁堂制药厂
《 中草药 》 19 9 4年第 25 卷第 7 期
3马7
衰 骨刺劳损裔中阿托品含最测定结果
样品批号 样品液中阿托品浓度( m g / m l ) 样
品中阿托品含量
( ng /片 )
,曰`任几」J任月今直,1一弓`占唯.…
与加入量计算回收率 。结果回收率为 10 1 . 2%,
C V = 3
.
5 5 % (
n = 3 )
。
了 讨论
7
.
1 由于中药橡皮膏多系大复方 , 含 药 量
少 , 基质组成复杂 , 且基质 与其它成分对指
标性成分的测定会产生干扰 , 过去很少进行
9 0 1 1 0 1
9 0 1 1 0 2
9 0 1 10 3
9 0 1 10 4
2 8 4
2 8 9
1 8 5
2 9 4 0
.
1 4 7
指标性成分的定量检测 , 故有关报道资料少 。 本实验采用萃取法提取硫酸阿托品 , 是经过多
次反复的摸索和试验总结出的一种较为合适的方法 。 经过反复处理 , 排除了层析过程中因基
质和其它成分产生的千扰。 该法简便快速 , 回收率稳定 ,便于制剂工艺考察和质量控制 。
7
.
2 在层析过程中 , 展开剂中氨的使用量对样品分 离影响很大 。 样品中阿托品是以游离状
态存在的 , 展开剂中氨量过少时 , 碱性弱不足以克服硅胶的酸性 , 使斑点拖尾严重 , 若氨量
过大 , 则容易使斑点随溶剂推向前沿 , 分离效果差 。 经反复摸索 , 对于高效硅 胶G 板 , 以展
开剂氯仿两酮一甲醇一氨 ( 70 : 1 0 : 15 : 1 ) 分离效果最佳 。 由于氨极易挥发 , 因而展开剂必
须随用随配 。
7
.
3 阿托品经显色后 , 斑点在空气中不稳定 , 加盖玻璃板密封 , 4 h 内斑 点 颜色一直稳定。
( 1 9 9 4刁 2 一 0 1 收稿 )
( 上接 第3 5 6 页 )
表 3 样品含 , 浏定结果 ( n = 3 )
样 品
成 分
补 骨 脂 白 蚀 丸 白 瘫 风 补骨脂配
补骨脂素
0
。
4 0 7 4
0
。
6 7 9 0
3
。
3
异补骨脂素 异补骨脂素 补骨脂素 异补骨脂素
X (卜 g )
百分含量 (% )
C V ( % )
0
。
4 0 7 1
0
。
6 7 8 3
1
。
5
补骨脂素
0
。
15 2 0
0。 25 3 8
2
。
8
异补骨脂素
0
。
1 7 5 8
0
。
2 9 2 3
1
。
3
补骨脂素
0
。
0 2 7 9 2
0
。
1 16 0
0
。
6 3
0 2 8 2 4
1 1 7 4
。
3 47 2
。
17 3 6
。
0 7
3 4 3 3
17 17
1 4
6 讨论
6
.
1 采用高效液相色谱法测定中成药中 2 成分含量 , 具有样品预处理简单 、 出峰时间短 、 灵
敏 、 准确等优点 。
6
.
2 文献报道〔 2〕用苯作为补骨脂的提取溶剂 , 但在本文所采用的色谱条件下 , 苯在 10 m in 左
右出峰 , 延长了分析时间 , 另外提取效果不如甲醇 , 不宜采用 。 我们选用了甲醇作为提取溶
剂 , 效果较好 , 且甲醇提取液的色谱图亦较为简单 。
6
.
3 本实验中采用超声振荡提取较其它提取方法有提取完全 , 快速 , 简便等优点 。
6
.
4 在以流动相作介质时 , 补骨脂素和异补骨脂素最大紫外吸收波长均为 2 4 5n m , 为增加检
出灵敏度 , 故选用 2 4 5 n m 为检测波长 。
6
.
5 取补骨脂 2 个浓度的标准液连续进样 6次 , 测得日内变异系数补骨脂素小于 1 . 5 % , 异补
骨脂素小 于 1 . 6 % 。 在低温冰箱 ( 一 1 8 O C ) 中保存 Z d后 , 连续进样 6次 , 测得 日间变 异 系数
补骨脂素小 于 1 . 8 % , 异补骨脂素小于 2 . 0% , 表明本法测定补骨脂素的含量重现性好 , 稳定
性高 , 能满足分析的需要 。
今 考 文 献
1 江苏新医学院编 . 中药大辞典 . 上册 . 上海 :
民 出版社 , 19 7 7 . 1 17 7
2 黄新生 , 等 . 中药 通报 , 2 9 5 7 , 2 2 ( z ) :
上海人 8 吴 焕 . 中草药通讯 , 19 7 8 , ( 10 ) : 3 2
( 2 9 9 3一 0 8刁 7收稿 )
3 5 8