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Studies on tire Gas Chromatographic Retent on index of Volatile Component of Nutgrass Galingale(Cy perus rotundus)

香附挥发性成分气相色谱保留指数的研究



全 文 :香附挥发性成分气相色谱保留指数的研究
天津市药品检验所      金智珠  屈 颖 蔺 勇
摘要 用毛细管气相色谱法 , 对香附的挥发性成分进行了研究 , 建立了香附挥发性成分的标准气
相色谱图和气相色谱保留指数谱 。 可用于鉴别香附真伪及判别混乱品种。 侧定了种不同 产地 的
香附 个组分的  的  纬  , 平 均为。     。
关镇词 香附 毛细管气相色谱法 挥发油 保留指数
香附为莎草科植物莎草   。     “。 “    的干燥根茎〔〕, 具有行气 解郁 , 调经止痛
的功效 , 是中医常用的妇科要药 , 还用于治疗肝郁滞 , 消化不 良等症 。 中国药典   年版一
部收载 。 山东产的传统称为东香附 , 根茎含挥发油约  。
    保留指数    〔〕用于鉴别  峰〔 , ‘〕, 美国     实 验 研 究室出版了标准
  一 数据库〔 〕, 把   一  正式作为各类化合物的标准化数据 。
目前  已普遍地应用于植物挥发油的化学成分分析 , 但还未见对药材挥发性成分的 
作系统研究的报道 。本文采用了两种不 同极性的毛细管色谱柱 , 对香附挥 发性成分的 进行测
定并编标准  图和 一 潜 , 对香附的鉴别和检定是一项客观有益的诣标 。现用 中国药典
年版方法不能鉴别香附真伪及混乱品种 , 本方法可提供  年版药典作参考 , 业 为 住  的
应用方面开创 了一个新领域 。
 仪器和试剂
日本岛津  一  型气相色谱仪 , 岛津   一  型分流器 ,  一  型数 据 处 理 机 ,
       型计算机 , 正构烷烃  。    , 范为中国药品生物制品检定所 标 准 品, 乙
醚  级 , 预处理除去过氧化物 。
 实验部分
   色 谱 条 件  色 谱 柱  ,    一 熔融石英毛细管柱 美国 公 司        , 常
数与  一  、   一 相同 ,              卜 , 流速  载气为纯氮 , 线速度       ,
尾收氮气     , 氢气      , 空气       , 分流比     , 柱温范围       
℃ , 升温速率℃ ,          检测温度   ℃ , 进样口温度   ℃ 。
色谱柱    一 熔融石英毛细管柱美国 公司 ,         ‘ 常数与       
  相同 ,           欠   卜  流速  载气为纯氮 , 线速 度       , 尾收氮气  
  , 氢气      , 空气      , 分流比   ,   柱 温 范 围   一  ℃ , 升温速率
 ℃ ,  ℃        检测温度   ℃  进样口温度   ℃ 。
   实验材料及挥发油提取     香附  山东省 济宁 市汉上县 东香附  , 由 我所中药
室鉴定 ,     香附  湖南省衡山县 , 经湖南省药检所鉴定     香附  广西 柳州地区武
宣县 , 经广西壮族 自治区药检所鉴定 。 上述 种药材按 中国药典 要 求 , 秋季采挖 , 分别鉴定
为香附    !        的干燥根茎     香附  同   为春季 采 集 ,    竹节
香附  黑龙江省尚志县 , 经黑龙江省药检所鉴定 为两头尖毛莫科植物多彼 银莲花  。。。 
         的干燥根茎  ,    大香附  广东省徐闻县 , 为粗根茎莎草        
 汀 !   的干燥根茎 。 将 以上 种药材 , 分别用水蒸汽 蒸讯 法提取 , 再 用不含过氧化
物的 乙醚多次萃取 , 经无水硫酸钠干燥后 , 在室温通氮下挥千 乙醚 , 所得挥发油用安瓶分装 ,
                 ,                                ,      
充氮 熔封 , 避光冷藏 。
   样品制备及测定  正 构烷烃内标溶液 色谱 柱 用 , 。   。测定    、 药材挥发油用
 。一     , 色谱柱 用       , 分别按        或  ! 左右的浓度配成2份乙醚溶
液 , 备用 。
样品溶液 : 分别取 l体积挥发油 与7 体积的2 种内标溶液 , 混合 , 组成2份混合液 , 备用
( 挥发油浓度为12.5 % ) 。
测定 : 分别取以上6种挥发油的12 份样品溶液 , 按上述色 谱 条件 , 进罗样1协左右 , 在2根
色谱柱上用2~ 4种不同的升温速率 , 分别制备成2 张色谱图 , 选含量较高的组分(1柱 选37 个 ,
2 柱选2 个 ) , 根据各烷烃 和组分的tR , 用计算机按 B as ic a语言的程序算出各组分的R l。
2
.
4 方法确立 的研究:
2 .4.1 内标系列的选择和样品溶液浓度试验: 先作预 试 验 , 在上述设定条件下 , 根据挥发
油中各组分的出峰时 间 , 选择相应的一系列烷烃作为内标物 。 业试验了挥发油与内标溶液的
不同体积比 , 结果以 1份挥发油加7份内标溶液最为合适 , 能达到内标峰高为满刻度的1/4~ 1
/3, 挥发油主峰不超过满刻度的要求 。
2
.
4
.
2 色谱条件试验: 柱温 : 先作预试验 , 根据挥发油中各组分的沸点和固定 液的最高使
用温度, 选定U lt ra一2 柱用70 ~ 260 ℃ , 由于最高使用温度的限制H P 一20 M 柱设定为80 一 250
℃ 。
升温速率和对R l的影 响: 分别试验了2℃ 、 4 ℃ 、 5 ℃ 、 8 ℃/m in 4种不 同的 升温速率 ,
用以上2根色谱柱分别测定东香附挥发油 , 并计算R l , 4 种不同升温速率之间 一各 组 分 R l 的
c v ( % ) 分别为0 .09一 0.66 ( 用色谱柱1 ) 和0.07一0 .9 5 ( 用色谱 柱2 ) , 选 用4℃ , 5 ℃/
m in , 这2 种升温速率相近 , 色谱图形变化不大 , 可互相复核 。
2
.
4
.
3 色谱塔板数 , 分离度和柱稳定性能考察: 用上述色谱条件测 定 , U h r a 一2 柱: C l。理
论塔板数为26456/m ; C , , 与C l.之 间 的 分 离 度24 .74 , 范的R l为1507.97 ( 用 C , 6与 C l。计
算 ) 。 H P 一Z o M 柱: C 15理论塔板数 为18 03/m , C , 5与 C l。之间的分离度为12.5 1, 危的R l为
923.17 ( 用C 。与C l。计算 ) 。 每次分析样品前用危作为标 准物测定R l , 用来考察色谱柱的稳
定性 , u l t r a 一2 柱4次测定R l的C V ( % ) 为0.023 , H P 一Z o M 柱C v ( % ) 为0.035(n = 10 )
3 结果与讨论
3.1 香附的标 准G C 图与G C 一R l潜 (表 l ) : 通过试验 , 说明建立这两项指标作为一种药材 。
鉴定方法的可 行性 , 似可推广应用于其它中药材 。
3
.
2 实验结果表明: 山东 、 湖南和广西 3个不同产地的香附 , 其挥发性成分的G C 图与G C -
R l谱一致 (表2 ) , 3 种香附37 个组分R l的C V ( % ) 平均值分别 为。~ 0 . 24 , 说明这两 项指
标可 以作为香附的标准图谱和标准数据作鉴别用精度非常高 。 表中有星号的为含量较高的l
个主要组分 , 3 种香附15 个主要组分的含量都较高 , 可从量的角度来 说 明不 同产地香附挥发
性成分的 一致性
3 .3 竹节香附与香附的G C 图与G C 一R l谱不同 ( 表3 ) , 说明它 们 是2种 不 同 的 品 种 , 这
2项指标还可用来鉴别香附的真伪 。 竹节香附挥发性成分的含量低 , 样品 溶 液浓度需增加至
50 % 才能出峰 , 所含低沸点成分多而 且含量高 , 在C 。~ C : ‘之间比香附多出12 个峰 , 但 36 个组
分中的19 个与香附的R l一致 , 说明2种挥发油有部分组分相似 。
3
.
4 大香附在广东沿海地区又称咸香附〔“〕, 在当地有将其代香附用的习惯 , 但商品销住外省
则作伪品处理 , 从G C 与G C 一R l谱分析 ( 表3 ) , 说明大香附与香附的挥发 性 成 分 基 本 一
‘ 中草药 》 1 9 9 ;年第25我第 l期
衰1 N 0 1 山东产 ( 秋季 )香附的G C 一R l谱
顺序峰号的保 留指数 R l
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2 二3 9 . 4
.2 二5 3 . 2
致 , 其 中15 个主要组分的含量都较高 , 可望
作为香附的一种代用 品, 以开发新资源 。
3
.
5
. 不同季节采集的香附 , 其 G C 图 与G C
一R l谱基本一致 (表3 ) , 但2 种 挥 发 油某
些组分的含量高低有差异 。
以上 数 据 是 用U ltr a一2 柱 , 5 ℃/ m in
测定的结果 , 用其它 3组不同色谱条件 测 定
(U ltra一2 柱4℃/ m in ;H P 一Z o M 柱4℃m in和
5℃/m in 此处图谱和数据从略 ) , 得出的结
论 一与上述相同 。
. 2 , 7 3
.
*
2 2 8 5
.
2 2 2 2
.
3
2 2 之,
7
致谢: 本文承所我范积芬所长审核 , 并
提 出修 改意见 , 姚廉所 长协助 收集药材 , 我
所郭景强 同志鉴定东香附 , 吴贵华 同志提供
部分资抖 , 山 东省济宁市汉上县药检所 , 黑
龙 江省 药检所 , 广 西壮族 自治 区药检所 , 湖
南省 药检所 , 湖 南省 药材公司 , 广东省 徐闻
县药检所等单位 协助提供实验 样品 。
注 表中有.号的为含盆较高的 巧个主要组分
表2 3种不同产地香附挥发性成分的G C 一 R I谱 ( U ltra一2 柱SOC /m ln )
,、声C%峰 N 0 1
山东产(秋 )香附
保留指数R l
N O Z
湖南产香附
N O 3
广西产香附
R I

R I 百分含量( % ) R I 百分 含量(% ) R I 百分含量( % )
平均值
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注 : 表中有 中号的为含量较高的 15 个主要组分
表3 不同季节采集的香附和2个相关品种挥发性成分的G C 一R !谱 ( 川 tra一2 柱 SOC /m ln )
峰 N O I山东产 (秋 )香附
N 0 4
山东产 (春)香附
N O 弓
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N 0 6
大香附
号 R I 百分含t( % ) R I 百分含且(% ) R I 百 分含量(% ) R I 百分含量( % )
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雀中草药》1 9 9 4年第25 卷第 1期 . 土泛
续衰3
峰 N O I山东产 (秋)香附 N
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山东产(春)香附
N O S
竹节香附
N O 6大香附
号 R I 百分含量(% ) R I 百分含量(% ) R I 百分
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6 2
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注 : 表中有*号的 为含量较高的巧个 主要组 分
参 考 文 献
江苏新医学院编 。 中药大辞典. 下册. 七海 : 上海
人民出版社 , 1 9 7 7 . 1 6 7 2
奥那 卡F l , 等 . 毛细管气相色谱法. 北京:
学术 出 社 , 1 9 息9 . 1 80
T a r j a n G J 。 C h r o m a t o g r , 1 9 8 9 , 这7 2 ( l ) :
1
E v a n s M B , e t a l 。 J C h r o m a t o g r , 1 9 8 9 ,
4 7 2 ( 1 )
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温尚开 , 等 . 中药材 , 1 9 9 0 , 2 3 ( 2 2 ) : 9
(
1 0 5 3
一 0 7一 7收稿 )
《中西医结合肝病杂志》公开出版发行
《中西医结合肝病杂志 》经一年半的试刊和内部发行 , 现已由国家科委和新闻出版署批准正式刊号为
C N 42 一1322/R , 从92 年第四季度起向国内外公开发行 。 正式出版的 《中西医结合肝病杂志 》仍为季刊 ,
每期56 页 , 定价1.50 元 , 全年6元 。 欢迎广大医务工作者来稿和订阅 , 通讯地址为: 武汉市武昌区 云架桥
110号 ( 湖北中医学院内 ) 中西医结合肝病杂志社 , 邮编440061 、 帐号: 5选6 9 90 2 6 10 0 19 4 , 武汉 建设 银行
武昌支行 。
.
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i d ( 理 ) a n d s o y a s a p o g e n o l B ( 议 ) , 班 a o d lX 切 。r o i s o l a t e d f o r t h e f i r s r t i m e f r o m G . P a l t‘d if l -
o r a M a x i m . , 顶 15 a n e w eo m P o u n d , n a m e d g l y P a l l i d i f l o r i e a e i d .
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M a T ia n b o , L i u S i z h e n , X u G u o y o n g , e t a l
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d a P h n o d o r i n B ( 1 ) 。
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s o n t 卜e C ;le m {e a l C o n s士!t u e n ts o f L e a ve s o f
M a n e h u ria n W a ln u t ( J u g la , : 5 o a n d s 几uriea )
W u N aiju , C h . n H o n g y i n g a n d W a n g Z h e n g u o
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x c o 瓜P o u n d s w e re iso la te d f ro m th e lea v o s o f J “ g l a n s 川a ”d s h u r f c a M a x i m 。 。 T h o y w e r e
e h a r a e t . r i z e d b y t h
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e a l p r o p e r t i e s a n d s p e e t r a l d a t a a s
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E x c e p t j
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t h i s s e e 正ed to bo th e f irst re P o rted iso la tio n o f th e o th e r fiv e e o m P o u n d s f ro m th e title
P la n t to d a te 。
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r i g i n a l a r t i ( l e o n P a g e 1 0 )
S t u d : e
5 o n t h e G a s C h r o m a t o g r a p !
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e n t o ; 1 :
‘飞‘:。x o f V o !a 川e
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Jin Z h izhu , Q u Y i n g a n d L i n Y o n g
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T h e a v e r a g e C V ( % ) o f R l f r o m 3 7 s e t s o f C
. r o r u ” d “5 f r o m t h r e e
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《中草 药 》 19 9 4年第25 卷第 工期 . 5 3 .
仓。o d r e P 全o d u c ib il it y .
( O r岌9 In al a rt宜elo o n p a宫e 12 )
A n a ly sis o f A e t iv e C o n s t lt u e n t s in M y c e liu m a n d F e rm e n ta t lo n
B ro t h o f L in g z h i ( G a o o d er o a lu c id “m )
L i Z h a o la n a n d Z h e n g T a o
A e t iv e c o n s ti tu e n t s in m y e e liu m a n d f e rm e n t a tio n b r o t h o f G a ” o d e r 沉a
m ! n e d 。 R e s u l t s s b o w e d t h a t t h e a m o u n t o f P o l y s a e e h a r i d e s o b t a i n e d f r o m
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“e i d u 邢 w e re d e te r
m y e e liu m
L N a 0 H e x t r a e t io n a n d h o t一 w a t e r e x t r a e t i o n 、万 e r e 2 % a n d c 。 6 ‘% re s P e e t iv e l y , w h i l 。
b y l m o l /
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m e n t a t i o n b r o t h e o n t a i n s 0
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d s , t o t a l l i n g a t z 通。 了% 。 T h e f e r m e n t a t i o n b r o t h e o n t a i n s 2 9 k i n d s o f a m i n o a e i d s , t o t a l l i n g a t
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b r a i n , e r e i n e u L a t e d w i t h v a r y i n g e o n e e n t r a t i o n s o f d a P h n e t i n
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e 1 1 P r o t e i n k i n a s e A w a s
s i g n i f i
c a n t l y i n h i b i t
e d b y d
a P h n e t i n a t t h e e o n e e n t r a t i o n o f o

0 0 5 6 卜m o l/ L , w h i l e t y P e 1 P r o t ·
e i n k i n a s e A a n d p r o t e i n k i n a s e C w e r e i n h i b i t e d a t t b o c o n c e n t r a t i o n s o f s

6 卜m o l几 an d 56
p皿0 1/L , r e s P e e t i v e l y . T L e r e s u l t s i ” d i e a t o d t b a t d a P b n e t i n 功 ig h t b e u se d
b i to r o f t y P e 1 1 P r o t e i. k in a s e A -
压吕 a s P e e i f i c i n h i -
( O r ig i n a l a r t i e l e o n p a g e 2 3 )
P r o t e e t i v e E f f e c t o f 、C o m p o u n d A n t i o x i d a n t H e r b “ o n R a t
G a s t r i c I n j u r y C a u s e d b y S t r e s s
L i Y i f a n , S h i J i n , L u B i n g h u a i , e t a l
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a n t P r e s e r i P t i o n u s e d w a s e o m P o s e d
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r a t s u n d e r P r o t e 。t i o n o f t h e “ P r e s c r i P t i o n a n d i n j e 。t io n o f s a l v i a
” t h o i n d e x -
。 5 o f g a s t r i c m u e o s a i n j u r y , e r e 5
.
5 0 士 2 。 3 1 a n d 2 0 . 0 0 士 4 。 2 5 , L P O i n s e r u m w e r e 1 0 。 7 4 士 。。 9 4 a n d
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8 0 士 1 。 o 6 n m o l / m l r e s P e c t i v e l y 。 B o t h w e r e s i g n i f i c a n t l y d e e r e a s e d a s e o m p a r e d w i t h t h e e o -
n t r o l g r o u P ( 3 牙。 0 0 士 6 。 5 0 , L P O i , . 0 6 士 z 。 z o n m o l / m l ) 。 T h e s e r e s u l t s s i g n i f i e d t h a t t h e a n t i o x i d ·
a n t m e d i e i n a l h e r b s , e s P e c i a l l y i n e o 功P o u n d e d fo rm , m a y P r e v e n t g a s t r i e s t r e s s i n j u r y 。
( o r i g i n a l a
r t i c l e o n p a g e 2 6 )
.
6 4
.