全 文 ：广 西 植 物 Ｇｕｉｈａｉａ ３２（１）：１３８－１４２ ２０１２ 年 １ 月
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－３１４２．２０１２．０１．０２７
罗汉果根多糖的分离纯化、结构
鉴定及抗肿瘤活性研究
颜小捷１，２，卢凤来１，陈换莹１，２，李典鹏１＊
（１．广西植物功能物质研究与利用重点实验室 （广西植物研究所），广西 桂林５４１００６；
２．广西师范大学 生命科学学院，广西 桂林５４１００４）
摘 要：采用水提醇沉法提取、ＤＥＡＥ－５２纤维素柱粗分离罗汉果根粗多糖（ＣＰＳ），纸层析结合高效液相色谱
分析ＣＰＳ的单糖组成；同时研究ＣＰＳ对小鼠 Ｈ２２皮下种植性肿瘤的影响。结果表明：采用ＤＥＡＥ－５２纤维素
柱粗分离得到５个多糖组分；ＣＰＳ的单糖组成为：葡萄糖、阿拉伯糖、木糖，其中以葡萄糖为主；与模型对照组
比较，ＣＰＳ各剂量组无明显的抑制肿瘤生长作用（抑瘤率均低于５０％）；与模型对照组比较，ＣＰＳ各剂量组小
鼠的胸腺指数显著提高，差异极显著（Ｐ＜０．０１）；而脾脏指数显著降低，差异极显著（Ｐ＜０．０１）。
关键词：罗汉果根；多糖；分离纯化；单糖组成分析；抗肿瘤
中图分类号：Ｑ５３９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００－３１４２（２０１２）０１－０１３８－０５
＊ Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｉｓｏｌａｔｉｏｎ、ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ、ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｉｄｅｎｔｉｆｉ－
ｃａｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｔｓ ａｎｔｉｔｕｍｏｒ ａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ
ｆｒｏｍ Ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉ ｓｗｉｎｇｌｅ’ｓ ｒｏｏｔ
ＹＡＮ Ｘｉａｏ－Ｊｉｅ１，２，ＬＵ Ｆｅｎｇ－Ｌａｉ １，ＣＨＥＮ Ｈｕａｎ－Ｙｉｎｇ１，２，ＬＩ Ｄｉａｎ－Ｐｅｎｇ１＊
（１．Ｇｕａｎｇｘｉ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ Ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ Ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，Ｇｕａｎｇｘｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｂｏｔａｎｙ，
Ｇｕｉｌｉｎ ５４１００６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ｌｉｆｅ ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｇｕａｎｇｘｉ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕｉｌｉｎ ５４１００４，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ（ＣＰＳ）ｏｆ Ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉ ｓｗｉｎｇｌｅ’ｓ ｒｏｏｔｓ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ－ａｌｃｏｈｏｌ
ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ ｔｈｅｎ ｗａｓ ｐｕｆｉｆｉｅｄ ｂｙ ＤＥＡＥ－５２ｃｅｌｕｌｏｓｅ．Ｔｈｅｉｒ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ｂｙ ｐａｐｅｒ ｃｈｒｏ－
ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ａｎｄ ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ（ＨＰＬＣ）．Ａｎｄ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＣＰＳ ｏｎ Ｈ２２ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ
ｐｌａｎｔｉｎｇ ｏｆ ｍｉｃｅ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：ＣＰＳ ｗａｓ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｉｎｔｏ ｆｉｖｅ ｆｒａｃｔｉｏｎａｔｅｓ ｂｙ ＤＥＡＥ－５２ｃｅｌｕｌｏｓｅ ｃｏｌｕｍｎ ｃｈｒｏｍａ－
ｔｏｇｒａｐｈｙ，ｉｔｓ ｓｉｍｐｌｅ ｓｕｇａｒｓ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ｉｎｃｌｕｄｅｄ ｇｌｕｃｏｓｅ，ａｒａｂｉｌｏｓｅ ａｎｄ ｘｙｌｏｓｅ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｅａｃｈ
ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐ ｈａｄ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｆｕｎｃｔｉｏｎｓ ｉｎ ｓｕｐｐｒｅｓｓｉｎｇ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ（ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ＜５０％）；Ｂｅｓｉｄｅｓ，Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ
ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ，ｅａｃｈ ｄｏｓｅ ｇｒｏｕｐ ｈａｄ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｎ ｔｈｅ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ｔｈｙｍｕｓ（Ｐ＜０．０１），ｂｕｔ ｈａｄ ｒｅｄｕｃｅｄ ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｎ
ｔｈｅ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ｓｐｌｅｅｎ（Ｐ＜０．０１）．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉ ｓｗｉｎｇｌｅ’ｓ ｒｏｏｔ；ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｉｓｏｌａｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａ－
ｔｉｏｎ；ａｎｔｉｔｕｍｏｒ
＊ 收稿日期：２０１１－０７－０５ 修回日期：２０１１－１０－０８
基金项目：中国科学院“西部之光”人才培养计划专项（科发人教字［２００９］２４号）；药用资源化学与药物分子工程教育部重点实验室资助（桂科能
０７１０９００１－１３）；广西植物研究所基本业务费 （桂科植１００３）［Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ Ｗｅｓｔ Ｌｉｇｈｔ Ｄｏｃｔｏｒａｌ Ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（２００９）；
Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ（Ｇｕａｎｇｘｉ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ），Ｍｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ ｏｆ Ｃｈｉｎａ
（０７１０９００１－１３）；Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｕｎｄ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｂｏｔａｎｙ（１００３）］
作者简介：颜小捷（１９８５－），女，广西玉林人，硕士，主要从事植物资源开发与利用研究，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｘｉａｏｊｉｅ１２８＠１２６．ｃｏｍ。
＊通讯作者：李典鹏，男，博士，研究员，主要从事中药，天然药物和天然植物的化学研究，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｌｄｐ＠ｇｘｉｂ．ｃｎ。
罗汉果（Ｍｏｍｏｒｄｉｃａ ｇｒｏｓｖｅｎｏｒｉ）又名拉汉果、
假苦瓜、光果木鳖、罗汉表、苦人参等，是葫芦科罗汉
果属草质藤本植物（卜春文等，２００４；张更秋，２００４；
刘丽华等，２００９）；其营养丰富，保健效果好，经济价
值高，是我国传统出口创汇药材之一，在港澳地区，
日本、东南亚和欧美等国家久负盛名，颇受欢迎，有
“长寿之果”和“东方神果”之称（陈全斌等，２００３；杨
华等，２０１１）。
已往人们对罗汉果的开发研究，仅局限于对其
果实的提取分离和应用，未考虑其根的开发与利用。
罗汉果根肥大，味苦、性微寒，有清热祛湿、通络止
痛、抗炎、解疼、降酶等作用，对风湿性关节炎的疗效
较为显著，对口腔细菌转糖链球菌有较强的抑菌活
性，其罗汉果酸乙成分在体外具明显的抗肿瘤活性
（斯建勇等，１９９９）。植物多糖来源广泛，毒副作用
低，安全性好，无致癌作用，具有增强免疫、抗肿瘤、
抗栓、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血压、降血脂及活
血等生物功能，其中增强机体免疫是大多数活性多
糖的共同特性；多糖对机体具有双向调节作用，适当
浓度的多糖能提高机体的特异性和非特异性免疫功
能，其作为免疫调节剂具有良好的应用前景（Ｗａｎｇ，
２００１；Ｈｕ等，２００６；Ｃｈｅｎ等，２００９；Ｃｈｏ等，２０１０；
Ｐｒｉｙａｄｈａｒｓｈｉｎｉ等，２０１０）。其中，罗汉果多糖具有清
除羟自由基的能力，可调节免疫系统自由基水平，对
机体的细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫均有明
显的免疫增强作用（李俊等，２００８ａ；张玲等，２００９）；
而罗汉果根含有大量的多糖类物质，但由于缺乏人
们的关注，所以缺少对其专门的、较深入的研究，导
致每年大量的罗汉果根被废弃，造成自然资源极大
的浪费。为此，笔者以天然植物分离方法结合现代
药理学实验阐明罗汉果根多糖的活性组分及其抗肿
瘤活性，以求为其进一步的开发提供科学依据。
１ 材料与方法
１．１材料
干燥罗汉果根（采自桂林市永福县，室内阴干后
６０℃下烘干）；昆明种小白鼠（ＳＰＦ级，雌雄各半，体
重２０～２２ｇ，由广西医科大学动物实验中心提供，证
号：ＳＣＸＫ桂２００３－０００３）；Ｈ２２腹水种植瘤（购自中
国典型培养物保藏中心，由桂林医学院药理教研室
传代培养）。
１．２方法
１．２．１罗汉果根粗多糖的提取 称取５００ｇ干燥罗
汉果根，按ｗ／ｖ＝１∶８加水煎煮１．５ｈ后用纱布和
棉花过滤，残渣中再加４Ｌ水煎煮１．５ｈ后用纱布
和棉花过滤，合并两次所得滤液，４ ０００ｒ／ｍｉｎ，离心
１０ｍｉｎ，所得上清液于旋转蒸发仪７０℃下减压浓缩
至８００ｍＬ。接着加入２００ｍＬ体积比为４∶１的三
氯甲烷／正丁醇混合液，超声震荡１０ｍｉｎ，４ ０００ｒ／
ｍｉｎ，离心１０ｍｉｎ取水相部分，重复该操作３次去除
杂蛋白。所得水相部分，于旋转蒸发仪７０℃下减压
浓缩至２００ｍＬ（浓缩液），浓缩液中加入无水乙醇至
含醇量达到８０％，边加边搅拌，得灰白色絮状沉淀。
４℃下隔夜静置，倾出上层清液，余下部分４ ０００ｒ／
ｍｉｎ，离心１０ｍｉｎ得沉淀，回收上层乙醇溶液。沉淀
部分用少量无水乙醇洗涤４次，６０℃下烘干即得罗
汉果根粗多糖（ＣＰＳ），称重。
多糖得率（％）＝所得粗多糖质量（ｇ）／所用干
燥罗汉果根质量（ｇ）×１００
１．２．２多糖含量测定 （１）供试品溶液的制备：精密
称取ＣＰＳ ２０ｍｇ，先加去离子水５ｍＬ溶解，然后加
入６ｍｏｌ／Ｌ磷酸５ｍＬ，置沸水浴中冷凝回流水解１
ｈ，冷却后滴加１滴酚酞指示剂，用６ｍｏｌ／Ｌ氢氧化
钠溶液调至微红，定量转移至１００ｍＬ容量瓶中，用
去离子水稀释至刻度，摇匀，离心，所得上清液备用。
（２）标准曲线的制作：精密称取１０５℃下真空干燥至
恒重的无水葡萄糖１００．０ｍｇ，置１００ｍＬ容量瓶中
加去离子水溶解并稀释至刻度，摇匀，得浓度为１
ｍｇ／ｍＬ的对照品储备液。精密移取１ｍＬ对照品
储备液置于１０ｍＬ容量瓶中，用去离子水稀释至刻
度，摇匀，得浓度为０．１ｍｇ／ｍＬ的对照品溶液。分
别精密吸取０、０．１、０．２、０．４、０．６、０．８ｍＬ对照品溶
液于试管中，加去离子水稀释至２ｍＬ，摇匀，加入
５％的苯酚ｌ ｍＬ，混匀，迅速垂直加入浓硫酸５ｍＬ，
振荡混匀，静置３０ｍｉｎ，冷至室温，以去离子水管作
为空白对照，４９０ｎｍ波长下测定吸光度，以葡萄糖
含量为横坐标，以其吸光度值为纵坐标，得葡萄糖含
量测定标准曲线，并得到回归方程。
１．２．３罗汉果根粗多糖的分离纯化 （１）ＤＥＡＥ－５２
树脂和透析袋的预处理：树脂处理方法同文献（梁丽
君，２００８）；透析袋置于去离子水煮沸１０ｍｉｎ后，６０
℃去离子水洗冲洗２ｍｉｎ，最后置４℃去离子水中
待用。（２）上柱分离：称取３ｇ ＣＰＳ用适量去离子水
超声溶解上样，依次用去离子水，０．１、０．２、０．５ｍｏｌ／
９３１１期 颜小捷等：罗汉果根多糖的分离纯化、结构鉴定及抗肿瘤活性研究
Ｌ氯化钠溶液，０．５ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠溶液洗脱，流速
约为６０ｍＬ／ｈ，分部收集，每１００ｍＬ收集１份，每
份取０．４ｍＬ采用苯酚－硫酸法检测其多糖的含量，
以分部收集的洗脱体积为横坐标，其吸光度值为纵
坐标，分别作出多糖的洗脱曲线。柱层析分出的各
组分的高峰部分分别合并，各组分减压浓缩至１００
ｍＬ左右后装入透析袋中，自来水透析２４ｈ，去离子
水透析４８ｈ，每４～６ｈ换一次水。离心除去不溶性
杂质，旋转蒸发仪６０℃下减压浓缩，最后真空冷冻
干燥得纯化多糖ＣＰＳ－Ｈ、ＣＰＳ－０．１、ＣＰＳ－０．２、ＣＰＳ－
０．５、ＣＰＳ－０．５Ｈ，分别称重。
１．２．４罗汉果根粗多糖的单糖组成分析 （１）纸色
谱分析：新华中速色谱滤纸，展开剂系统为正丁醇－
吡啶－水，显色剂系统为苯胺－邻苯二甲酸－正丁醇。
称取ＣＰＳ ２００ｍｇ，溶于６ｍＬ浓度为３ｍｏｌ／Ｌ硫酸
中，置沸水浴中冷凝回流水解８ｈ，水解液以饱和碳
酸钡溶液中和，４ ０００ｒ／ｍｉｎ，离心１０ｍｉｎ，上清液７０
℃下减压浓缩得浓缩液，进行纸色谱分析（用常见标
准单糖作对照：分别称取标准单糖样品于６０℃烘干
至质量恒定，用超纯水配制成浓度为１０．０ｇ／Ｌ的对
照液）。（２）高效液相色谱分析：样品预处理（同纸色
谱分析处理），取１０ｍＬ浓缩液，同时加入０．８ｇ
ＨＹ－Ｍ２００７强碱性阴离子树脂，０．４ｇ ＨＹ－Ｍ１００１
强酸性阳离子树脂和０．０２ｇ活性碳进行脱盐净化，
不断搅拌，直至电导率低于５μｓ／ｃｍ；滤纸过滤，滤
液过０．４５μｍ微孔滤膜，超声振荡５ｍｉｎ后进行高
效液相色谱分析（用常见标准单糖作对照）。色谱条
件：Ｗａｔｅｒｓ ５１０高效液相色谱仪，４１０示差折光检测
器；色谱柱：ＢＣ－１００碳水化合物Ｃａ２＋柱；流动相：超
纯水；流速：１ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：８０℃。
１．２．５罗汉果根粗多糖对小鼠 Ｈ２２皮下种植性肿
瘤的影响 （１）小鼠皮下种植瘤模型的建立：无菌条
件下，于小鼠腹腔接种Ｈ２２细胞株（１×１０６ 个细胞／
ｍＬ）０．４ｍＬ，形成腹水后抽取腹水，生理盐水稀释，
１ ０００ｒｐｍ／ｍｉｎ离心５ｍｉｎ，洗涤细胞２次，调整
Ｈ２２细胞浓度为５×１０６ 个／ｍＬ，于小鼠右腋部进行
皮下无菌接种，接种量每只为０．２ｍＬ。（２）罗汉果
根粗多糖对移植瘤模型小鼠瘤组织的影响：取接种
Ｈ２２腹水瘤２４ｈ后模型小鼠５０只，随机分为５组，
每组１０只，分别为模型对照组、环磷酰胺组（２０．０
ｍｇ／ｋｇ）、ＣＰＳ组（６００．０、３００．０、１５０．０ｍｇ／ｋｇ），环
磷酰胺组腹腔注射给药，其余各组灌胃给药，一天１
次，连续１０ｄ（环磷酰胺组隔天给药），末次给药后次
日小鼠称重并处死，剥取瘤组织、胸腺和脾脏，电子
天平称重，按下列公式计算抑瘤率、胸腺指数和脾脏
指数（李学臣等，２０１０；郝习等，２０１１）：抑瘤率＝［（对
照组瘤重－给药组瘤重）／对照组瘤重］×１００％；胸
腺指数＝小鼠的胸腺重（ｍｇ）／小鼠的体重（ｇ）；脾脏
指数＝小鼠的脾脏量（ｍｇ）／小鼠体重（ｇ）。（３）统计
学处理：应用ＳＰＳＳ统计软件分析，实验数据以表
示，各组实验数据用ｔ检验。
２ 结果与分析
２．１葡萄糖标准曲线的制作
制作葡萄糖标准曲线如图１所示。
图１ 葡萄糖标准曲线
Ｆｉｇ．１ Ｓｔａｎｄａｒｄ ｃｕｒｖｅ ｏｆ Ｇｌｕｃｏｓｅ
２．２ＤＥＡＥ－５２纤维素柱对罗汉果块根粗多糖的分离
采用传统的水提醇沉法，从５００ｇ罗汉果块根
中提取得ＣＰＳ １６．８ｇ，得率为３．３６％，ＣＰＳ经ＤＥ－
ＡＥ－５２柱分离纯化后，去离子水洗脱部分得到一个
纯化多糖组分ＣＰＳ－Ｈ（７７１．８２ｍｇ），不同浓度氯化
钠梯度洗脱得到三个纯化多糖组分 ＣＰＳ－０．１
（３６３．０７ ｍｇ）、ＣＰＳ－０．２（２１９．８ ｍｇ）、ＣＰＳ－０．５
（２５４．９７ｍｇ），氢氧化钠洗脱部分得到一个纯化多
糖组分ＣＰＳ－０．５Ｈ（４４０．８８ｍｇ）；其洗脱曲线分别见
图２，图３和图４。
２．３罗汉果根粗多糖的单糖组成分析
２．３．１纸色谱分析 分析结果如图５所示，从左到
右依次为：乳糖、果糖、阿拉伯糖、半乳糖、鼠李糖、木
糖、甘露糖、葡萄糖、ＣＰＳ；其中，阿拉伯糖、木糖显紫
红色，其余标准单糖多呈棕色，鼠李糖在该展开剂条
件下未展出；根据 Ｒｆ值和显色一致性，结果：ＣＰＳ
中检出阿拉伯糖、葡萄糖、甘露糖三组分。
０４１ 广 西 植 物 ３２卷
图２ ＣＰＳ的ＤＥＡＥ－５２水洗脱曲线
Ｆｉｇ．２ Ｔｈｅ ｗａｔｅｒ ｅｌｕｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅ ｏｆ ＣＰＳ ｏｎ ＤＥＡＥ－５２
图３ ＣＰＳ的ＤＥＡＥ－５２氯化钠梯度洗脱曲线
Ｆｉｇ．３ Ｔｈｅ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｇｒａｄｉｅｎｔ ｅｌｕｔｉｏｎ
ｃｕｒｖｅ ｏｆ ＣＰＳ ｏｎ ＤＥＡＥ－５２
图４ ＣＰＳ的ＤＥＡＥ－５２氢氧化钠洗脱曲线
Ｆｉｇ．４ Ｔｈｅ ｓｏｄｉｕｍ ｈｙｄｒｏｘｉｄｅ ｅｌｕｔｉｏｎ
ｃｕｒｖｅ ｏｆ ＣＰＳ ｏｎ ＤＥＡＥ－５２
２．３．２高效液相色谱分析 将常见标准单糖制备后
逐个进入ＨＰＬＣ检测，保留时间分别为葡萄糖（ｇｌｕ－
ｃｏｓｅ）１１．７４２ｍｉｎ，甘露糖（ｍａｎｎｏｓｅ）１２．２１３ｍｉｎ，木
糖 （ｘｙｌｏｓｅ）１３．５４６ ｍｉｎ，阿 拉 伯 糖 （ａｒａｂｉｌｏｓｅ）
１５．５４３ｍｉｎ，果糖（ｆｒｕｃｔｏｓｅ）１５．６１３ｍｉｎ。ＣＰＳ按
１．２．４项处理后经ＨＰＬＣ检测，结果如图６所示，根
据各峰保留时间与标准单糖保留时间的一致性，确
定ＣＰＳ中含有低聚糖（峰１）、葡萄糖（峰２）、木糖
（峰３）、阿拉伯糖（峰４）。其中以葡萄糖为主，５号
峰可能为甘油类物质。
图５ ＣＰＳ的纸色谱分析
Ｆｉｇ．５ Ｔｈｅ ｐａｐｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＣＰＳ
图６ ＣＰＳ的高效液相色谱分析
Ｆｉｇ．６ Ｔｈｅ ＨＰＬＣ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ＣＰＳ
２．４罗汉果根粗多糖对移植瘤模型小鼠瘤组织的影响
表１结果显示：与模型对照组比较，环磷酰胺组
的肿瘤重量差异显著（Ｐ＜０．０５），胸腺指数和脾脏
指数的差异不显著（Ｐ＞０．０５）；ＣＰＳ各剂量组的肿
瘤重量没有显著差异（Ｐ＞０．０５），但胸腺指数和脾
脏指数的差异极显著（Ｐ＜０．０１），即ＣＰＳ各剂量组
无明显的抑制肿瘤生长作用（抑瘤率均低于５０％），
但可显著提高小鼠的胸腺指数，并显著降低小鼠的
脾脏指数。
３ 结论与讨论
（１）ＣＰＳ经ＤＥＡＥ－５２纤维素柱分离，得到５个
纯化多糖组分：ＣＰＳ－Ｈ（７７１．８２ ｍｇ），ＣＰＳ－０．１
（３６３．０７ ｍｇ）、ＣＰＳ－０．２（２１９．８ ｍｇ）、ＣＰＳ－０．５
１４１１期 颜小捷等：罗汉果根多糖的分离纯化、结构鉴定及抗肿瘤活性研究
（４５４．９７ｍｇ），ＣＰＳ－０．５Ｈ（２４０．８８ｍｇ）；（２）在纸层
析色谱中，ＣＰＳ各单糖组分分离效果不是很好，推
测其原因可能是：样品中各单糖含量差别较大，其某
一单糖含量远高于其它单糖组分的含量，从而影响
到其它单糖组分的分离；进一步的试验中，根据各单
糖的螯合分配系数不同采用高效液相色谱分析，发
现其中葡萄糖含量较高（从实验中发现，甘露糖和葡
萄糖两者在纸层析中 Ｒｆ值相近，且两者在 ＨＰＬＣ
中的保留时间亦相近，根据 ＨＰＬＣ保留时间１２ｍｉｎ
左右呈一左右对称单峰，且葡萄糖为最为常见的单
糖组分，判断其最可能为葡萄糖）；因此：用纸层析结
合高效液相色谱分析ＣＰＳ的单糖组分，其单糖组成
为：葡萄糖、木糖、阿拉伯糖；其中以葡萄糖为主；（３）
与模型对照组比较，ＣＰＳ各剂量组都能抑制小鼠
Ｈ２２皮下种植性肿瘤的生长，且随剂量的增加其抑
制率有增加趋势，高、中、低 三个剂量组的抑瘤率分
表１ ＣＰＳ对Ｈ２２移植瘤模型小鼠瘤组织的影响
Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＣＰＳ ｏｎ Ｈ２２ｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｐｌａｎｔｉｎｇ ｏｆ ｍｉｃｅ（珚ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别
Ｇｒｏｕｐ
剂量
Ｄｏｓｅ（ｇ／ｋｇ）
肿瘤重量
Ｔｕｍｏｒ ｗｅｉｇｈｔ（ｇ）
抑瘤率
Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｒａｔｅ（％）
胸腺指数
Ｔｈｙｍｕｓ ｉｎｄｅｘ
脾脏指数
Ｓｐｌｅｅｎ ｉｎｄｅｘ
模型对照组 — ０．６７±０．１１ ０．０ ２．６７±０．３７ ６．７３±０．４４
环磷酰胺组 ０．０２ ０．２９±０．０５＊ ５６．７２ １．２３±０．２１ ６．７０±０．７９
多糖高剂量组 ０．６０ ０．４６±０．０９ ３１．３４ １４．８±１．５８＊＊ ２．６６±０．４７＊＊
多糖中剂量组 ０．３０ ０．４９±０．０８ ２６．８７ １２．８±０．９６＊＊ ３．３５±０．３３＊＊
多糖低剂量组 ０．１５ ０．５７±０．１９ １４．９３ １２．７±１．５２＊＊ ２．４９±０．４７＊＊
注：＊与模型对照组比较Ｐ＜０．０５，＊＊ 与模型对照组比较Ｐ＜０．０１。
Ｎｏｔ：＊Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｗｉｔｈ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ Ｐ＜０．０５，＊＊Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｗｉｔｈ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ Ｐ＜０．０１．
别为３１．３４％、２６．８７％和１４．３９％；同时ＣＰＳ各剂
量组小鼠的胸腺指数显著提高，差异极显著（Ｐ＜
０．０１），而脾脏指数显著降低，差异极显著（Ｐ＜
０．０１）。ＣＰＳ各剂量组对小鼠胸腺指数显著提高而
对脾脏指数显著降低，这一结果和已报道的罗汉果
多糖显著提高小鼠胸腺指数和脾脏指数（张玲等，
２００９）的结果有所不同，分析其原因可能是：首先，罗
汉果多糖的单糖组分为阿拉伯糖、鼠李糖、半乳糖、
木糖、葡萄糖和葡糖醛酸（李俊等，２００８ｂ），与罗汉
果块根单糖组分不同，故推测两者多糖的作用机理
可能不同；其次，实验中所用的ＣＰＳ为粗提物，其可
能含有少量免疫抑制剂成分（可使脾脏、胸腺萎缩），
而胸腺是中枢免疫器官，脾脏为外周淋巴器官，两者
的生理功能和结构有所不同，同一抑制剂对两者的
抑制机理不同。这与文献报道相似：与肿瘤对照组
相比，ＣＹ治疗组对小鼠的胸腺重量及胸腺指数具
有显著升高影响，而ＣＹ治疗组脾脏重量和脾脏指
数低于对照组（王永斌等，２０１０）。今后我们将进一
步对罗汉果根多糖进行纯化，鉴定其不同组分多糖
的分子量、单糖组成、抗肿瘤活性及对小鼠免疫功能
等药理研究的影响。
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２４１ 广 西 植 物 ３２卷
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