全 文 ：广 西 植 物 Guihaia　Jan．２０１４,３４(１):１３９－１４２　　　　　　　　　　 http://journal．gxzw．gxib．cn　
DOI:１０．３９６９/j．issn．１０００Ｇ３１４２．２０１４．０１．０２７
罗争辉,蔡百祥,梁益敏,等．花生茎叶酚性成分研究[J]．广西植物,２０１４,３４(１):１３９－１４２
LuoZH,CaiBX,LiangYM,etal．StudyonphenolicconstituentsofstemsandleavesfromArachishypogaea[J]．Guihaia,２０１４,３４(１):１３９－１４２
花生茎叶酚性成分研究
罗争辉１,２,３,蔡百祥１,２,３,梁益敏３,刘劲松１,２,３,王国凯１,２,３,王　刚１,２,３∗
(１．安徽中医药大学 药学院药物化学系,合肥２３００３１;２．安徽省中医药科学院 药物化学研究所,
合肥２３００３１;３．国家中医药管理局 中药化学重点学科,合肥２３００３１)
摘　要:运用大孔树脂对花生茎叶提取液进行富集,不同浓度乙醇洗脱,硅胶、RPＧ１８、SephadexLHＧ２０等多
种材料进一步分离纯化,研究花生茎叶化学成分,并通过理化方法和光谱分析对化合物进行结构鉴定.结果
表明:从花生茎叶大孔树脂１０％乙醇洗脱部位中分离并鉴定了１０个化合物,分别为邻苯二甲酸二异丁酯(１)、
水杨酸(２)、儿茶酚(３)、对羟基苯甲酸(４)、(反)Ｇ３,４Ｇ二羟基苯丙烯酸(５)、对羟基苯酚(６)、邻苯二甲酸二丁酯
(７)、３,４Ｇ二羟基苯乙醇(８)、对羟基苯乙醇(９)、３,４Ｇ二羟基苯甲酸(１０).除化合物１、２和４外,其余均为首次
从该植物中分离得到.
关键词:花生茎叶;大孔树脂;酚性成分;结构鉴定
中图分类号:Q９４６．８　　文献标识码:A　　文章编号:１０００Ｇ３１４２(２０１４)０１Ｇ０１３９Ｇ０４
Studyonphenolicconstituentsofstems
andleavesfromArachishypogaea
LUOZhengＧHui１,２,３,CAIBaiＧXiang１,２,３,LIANGYiＧMin３,
LIUJinＧSong１,２,３,WANG GuoＧKai１,２,３,WANG Gang１,２,３∗
(１．DepartmentofPharmaceuticalChemistry,AnhuiUniversityofChineseMedicine,Hefei２３００３１,China;２．Institute
ofPharmaceuticalChemistry,AnhuiAcademyofChineseMedicine,Hefei２３００３１,China;３．KeyDisciplinesof
TraditionalChineseMedicine,StateAdministrationofTraditionalChineseMedicine,Hefei２３００３１,China)
Abstract:PhytochemicalinvestigationofthestemsandleavesfromArachishypogaealedtotheisolationof１０
knowncompounds．Basedonspectroscopicandchemicalevidences,theirstructureswereidentifiedas１,２ＧbenzenediＧ
carboxylicacidＧbisＧ(２Ｇmethylpropyl)ester(１),２Ｇhydroxybenzoicacid(２),１,２Ｇbenzenediol(３),４Ｇhydroxybenzoicacid
(４),(E)Ｇ３,４ＧdihydroxyＧcinnamicacid(５),４Ｇhydroxyphenol(６),phthalicaciddibutylester(７),３,４ＧdihydroxyＧphenＧ
ethylalcohol(８),４Ｇhydroxyphenylethanol(９),３,４ＧdihydroxyＧbenzoicacid(１０)．Exceptfor１,２and４,theothercomＧ
poundswereisolatedfromA．hypogaeaforthefirsttime．
Keywords:Arachishypogaea;macroporousresins;phenolicconstituents;structuralidentification
　　花生茎叶为豆科落花生属(Arachis)植物落花
生(A．hypogaea)的地上部分,为民间一常用草药,
始见于«滇南本草»,其后«福建药物志»和«浙江药用
植物志»等都有相关功效的记载.花生茎叶具有清
热解毒,宁神降压功效.主治跌打损伤,痈肿疮毒,
失眠,高血压等病症(国家中医药管理局«中华本草»
编委会,１９９９).现代药理及临床研究表明花生茎叶
对失眠症有非常明显的疗效(王翘楚,１９９９;张慧清
收稿日期:２０１３Ｇ０９Ｇ２９　　修回日期:２０１３Ｇ１１Ｇ２４
基金项目:安徽高校省级自然科学研究重点项目(KJ２００８A３１ZC)
作者简介:罗争辉(１９８７Ｇ),男,安徽濉溪人,硕士,从事天然活性物质研究,(EＧmail)１３５１５６０３６５０＠１６３．com.
∗通讯作者:王刚,教授,硕士生导师,从事天然药物化学的教学和科研工作,(EＧmail)kunhong_８＠１６３．com.
等,２０１０).前期研究表明,其对小鼠镇静安眠的作
用机理是提高小鼠脑内的５ＧHT含量(刘劲松等,
２０１２).但目前对其物质基础的研究相对较少,为此
对花生茎叶进行了系统的化学成分研究,本研究改
进了提取分离方法,采用大孔树脂初步分段,进而分
离纯化,以期获得更多化合物,为阐明花生茎叶镇静
催眠的物质基础提供依据.
１　材料与方法
熔点由四川大学科学仪器厂XRCＧ１型显微熔
点仪测定,温度计未校正;１m３提取罐及５００双效浓
缩罐为常熟制药机械厂;质谱由VGAutoSpecＧ３０００
质谱仪测定;核磁共振由BrukerAVＧ４００和DRXＧ
５００测定,内标为TMS;分析型和制备型 HPLC为
Agilent１１００HPLC,色谱柱为AgilentZorbaxSBＧ
C１８和 YMC柱;柱层析硅胶(８０~１００目和２００~
３００目)以及GF２５４薄层硅胶板均为青岛海洋化工厂
生产;反相材料 LichroprepRpＧ１８(４０~６３μm)为
Merck公司生产;SephadexLHＧ２０为瑞典 AmerＧ
shamBiosciences公司生产;显色方法为紫外灯下
波长２５４nm和３６５nm处观察荧光,１０％硫酸乙醇
溶液、磷钼酸乙醇溶液和硫酸香草醛处理后加热显
色及碘蒸气显色.
花生茎叶２０１２年７月采集于安徽省濉溪县,经
安徽中医药大学药学院方成武教授鉴定为豆科落花
生属(Arachis)落花生(A．hypogaea)地上部分.
２　提取分离
阴干的花生茎叶５０kg,提取罐提取,分别以
１２,１０,８倍７０％乙醇提取３次,滤过,浓缩至无醇
味,浓缩液过滤后用５０L水稀释为每１mL０．５g生
药,上 DＧ１０１大孔树脂柱,依次用蒸馏水、１０％、
３０％、５０％、７０％、９０％乙醇梯度洗脱,流速３０mL􀅰
minＧ１,浓缩,干燥,分别得到洗脱部位２３５７、５４８、
４９７、６４０、１６６、２１４g.
１０％乙醇洗脱部位５４８g硅胶色谱柱分离,以
三氯甲烷Ｇ甲醇梯度洗脱,TLC检识,合并相同流分
得９个组分(A１ＧA９).组分 A３用硅胶柱色谱分
离,以石油醚Ｇ丙酮(４∶１)洗脱,TLC检识,合并相
同流分得３个组分(A３１ＧA３３).组分 A３１经反复
硅胶柱色谱分离,经反相Ｇ高效液相色谱制备柱色谱
得到化合物１(３．２mg).组分A４用硅胶柱色谱分
离,以三氯甲烷Ｇ甲醇(８∶１→１∶１)梯度洗脱,TLC
检识,合并相同流分得７个组分(A４１ＧA４７).组分
A４２经反复硅胶柱色谱分离,经SephadexLHＧ２０
柱色谱,以三氯甲烷Ｇ甲醇(１∶１)洗脱,反复纯化得
到化合物２(１．２mg).组分 A４３经反相Ｇ高效液相
色谱法制备柱色谱得化合物３(２６．４mg),４(１０．４
mg).组分A４４经反复硅胶柱色谱分离,经SephaＧ
dexLHＧ２０柱色谱,以三氯甲烷Ｇ甲醇(１∶１)洗脱,
反复纯化得到化合物５(２８．３mg).组分A４６经反
复硅胶柱色谱分离,经SephadexLHＧ２０柱色谱,以
三氯甲烷Ｇ甲醇(１∶１)洗脱,反复纯化得到化合物６
(７．３mg).组分A５用硅胶柱色谱分离,以氯仿Ｇ甲
醇(１０∶１)洗脱,TLC检识,合并相同流分得７个组
分(A５１ＧA５７).A５２反复硅胶柱色谱,再经SephaＧ
dexLHＧ２０柱色谱,以三氯甲烷Ｇ甲醇(１∶１)洗脱,
反复纯化得到化合物７(３．７mg).A５２反复硅胶柱
色谱,再经反相Ｇ高效液相色谱法制备柱色谱得到化
合物８(０．５mg).A５５反复硅胶柱色谱,再经反相Ｇ
高效液相s色谱法制备柱色谱得到化合物９(３．５
mg).组分 A６用硅胶柱色谱分离,以氯仿Ｇ甲醇
(８∶１)洗脱,TLC检识,合并相同流分得４个组分
(A６１ＧA６４).A６２反复硅胶柱色谱,再经反相Ｇ高效
液相色谱法制备柱色谱得到化合物１０(７．１mg).
３　结构鉴定
化合物１　白色无定型粉末(氯仿).ESIＧMS
m/z:２７７[MＧH]－ ;１H NMR(５００MHz,CDCl３)δ:
７．７３(２H,dd,J＝３．２,５．５Hz,HＧ３,６),７．６２(２H,
dd,J＝３．２,５．５Hz,HＧ４,５),４．０５(４H,d,J＝６．５
Hz,HＧ１,１′),２．０２(２H,m,HＧ２,２′),０．９９(１２H,d,
J＝６．５Hz,HＧ３,３′,４,４′).以上数据与胡静(２０１２)
的数据报道一致,确定该化合物为邻苯二甲酸二异
丁酯.
化合物２　无色针晶(甲醇).ESIＧMSm/z:
１２５[MＧH]－ ;１H NMR(４００MHz,CD３OD)δ:７．９４
(１H,dd,J＝１．５,８．０Hz,HＧ６),７．５３(１H,d,J＝
１．５,８．０Hz,HＧ４),７．０２(１H,d,J＝８．０Hz,HＧ３),
６．９４(１H,t,J＝ ８．０Hz,HＧ５).以上数据与吴斌
(２００４)的数据报道一致,确定该化合物为水杨酸.
化合物３　无色针晶(甲醇).ESIＧMSm/z:
１０９[MＧH]－ ;１HNMR(４００MHz,CD３OD)δ:６．７４
０４１ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３４卷
图１　化合物结构图
Fig．１　Structuresofcompounds
(２H,m,HＧ３,６),６．６４(２H,m,HＧ４,５).以上数据
与王素娟(２０００)的数据报道一致,确定该化合物为
儿茶酚.
化合物４　无色针晶(甲醇).ESIＧMSm/z:
１２５[MＧH]－ ;１H NMR(５００MHz,CD３OD)δ:７．８６
(２H,d,J＝８．０Hz,HＧ２,６),６．７９(２H,d,J＝８．０
Hz,HＧ３,５).以上数据与吴斌(２００４)的数据报道一
致,确定该化合物为对羟基苯甲酸.
化合物５　黄色粉末(甲醇).ESIＧMSm/z:
１７９[MＧH]－ ;１H NMR(５００MHz,CD３OD)δ:６．１９
(１H,d,J＝１６．０Hz,HＧ２),６．７７(１H,d,J＝８．０Hz,
HＧ８),６．９１(１H,dd,J＝１．９,８．０ Hz,HＧ９),７．０２
(１H,d,J＝１．９Hz,HＧ９),７．５２(１H,d,J＝１６．０
Hz,HＧ３).以上数据与牟明月(２００９)的数据报道一
致,确定该化合物为(反)Ｇ３,４Ｇ二羟基苯丙烯酸.
化合物６　无色针晶(甲醇).ESIＧMSm/z:
１０９[MＧH]－ ;１H NMR(５００MHz,CD３OD)δ:６．６０
(４H,s,HＧ２,３,４,５).以上数据与吴斌(２００４)的数
据报道一致,确定该化合物为对羟基苯酚.
化合物７　黄色油状物(氯仿).ESIＧMSm/z:
２７７[MＧH]－ ;１H NMR(５００MHz,CD３OD)δ:７．７３
(２H,dd,J＝３．２,５．６Hz,HＧ３,６),７．６２(２H,dd,J
＝３．２,５．６Hz,HＧ４,５),４．２９(４H,t,J＝５．５Hz,HＧ
１,１′),１．７２(４H,m,HＧ２,２′),１．４５(４ H,m,HＧ３,
３′),０．９８(６H,t,J＝７．２Hz,HＧ４,４′).以上数据与
杨杰(２０１３)的数据报道一致,确定该化合物为邻苯
二甲酸二丁酯.
化合物８　白色无定型粉末(甲醇).ESIＧMS
m/z:１５３[MＧH]－ ;１H NMR(５００MHz,CD３OD)δ:
６．６５(１H,dd,J＝２．０,８．０Hz,HＧ６),６．６３(１H,d,J
＝２．０Hz,HＧ２),６．５１(１H,dd,J＝８．０Hz,HＧ５),
３．６６(２H,t,J＝７．２Hz,HＧ８),２．６４(２H,t,J＝７．２
Hz,HＧ７).以上数据与姚尧(２０１２)的数据报道一
致,确定该化合物为３,４Ｇ二羟基苯乙醇.
化合物９　无色针晶(甲醇).ESIＧMSm/z:１３７
[MＧH]－;１HNMR(５００MHz,CD３OD)δ:７．０２(２H,d,
J＝８．１Hz,HＧ２,６),６．６８(２H,d,J＝８．１Hz,HＧ３,５),
３．６７(２H,t,J＝６．４Hz,HＧ９,１０),２．７０(２H,t,J＝６．４
Hz,HＧ７,８).以上数据与张树军(２００６)的数据报道
一致,确定该化合物为对羟基苯乙醇.
化合物１０　无色针晶(甲醇).ESIＧMSm/z:
１５３[MＧH]－ ;１H NMR(５００MHz,CD３OD)δ:７．４２
(１H,d,J＝２．０Hz,HＧ６),７．４０(１H,dd,J＝２．０,８．０
Hz,HＧ２),６．７９(１H,d,J＝８．０Hz,HＧ５).以上数
据与黄敏芳(２００９)的数据报道一致,确定该化合物
为３,４Ｇ二羟基苯甲酸.
４　结论与讨论
本课题组前期曾对花生茎叶的化学成分进行过
研究(刘劲松等,２００８a,b,２００９),也对花生茎叶不同
提取部位对小鼠的镇静催眠作用进行了探讨,并发
现其作用机理是提高小鼠脑内的５ＧHT含量(刘劲
松等,２０１２).因此,改进提取分离方法,进一步研究
花生茎叶镇静催眠活性的物质基础,意义重大.本
实验采用大孔树脂富集中小极性化合物后,再进一
步通过色谱分离的方法,结果分离并鉴定了花生茎
叶中首次分离得到的７个酚性化合物.
参考文献:
国家中医药管理局«中华本草»编委会．１９９６．中华本草四卷
[M]．上海:上海科学技术出版社:３３３－３３４
HuJ(胡静),YangB(杨斌),YeJF(叶见凡),etal．２０１２．ChemiＧ
１４１１期　　　　　　　　　　　　　罗争辉等:花生茎叶酚性成分研究
calconstituentsofmarinespongeHalichondriasp．fromthe
SouthChinaSea(南海软海绵化学成分研究)[J]．NatProd
ResDev(天然产物研究与开发),２４:６１４－６１７
HuangMF(黄敏芳),LiN(李宁),NiH(倪慧),etal．２００９．StudＧ
iesonconstituentsofRhaponticumcarthamoides(Wild．)IIjin．
(鹿根的化学成分)[J]．JShenyangPharmUniv(沈阳药科大
学学报),２６(７):５２７－５２９
LiuJS(刘劲松),LiL(李莉),ChenAM(陈爱民),etal．２０１２．
DifferentextractsfromArachishypogaeaL．sedativeandhypＧ
noticeffectsinmicepreliminaryexploration(花生茎叶不同提取
部位对小鼠镇静催眠作用的初步探索)[J]．JChinMedMat
(中药材),３５(１１):１８３３－１８３６
LiuJS(刘劲松),WangG(王刚),DongC(董超),etal．２００８a．
StudiesonconstituentsofstemsandleavesfromArachishyＧ
pogaeaL．(花生茎叶化学成分研究)[J]．ChinTradPatMed
(中成药),３０(３):４１９－４５１
LiuJS(刘劲松),WangG(王刚),JinJH(金家宏),etal．２００８b．
StudiesonconstituentsofstemsandleavesfromArachishyＧ
pogaeaL．(Ⅱ)(花生茎叶化学成分研究)(Ⅱ)[J]．ChinTrad
HerbDrugs(中草药),３９(５):６６４－６６６
LiuJS(刘劲松),WangG(王刚),WangGK(王国凯),etal．２００９．
StudiesonconstituentsofstemsandleavesfromArachishyＧ
pogaeaL．(３)(花生茎叶化学成分研究Ⅲ)[J]．ChinTradPat
Med(中成药),３１(１２):１９０２－１９０３
MouMY(牟明月),ZhangQJ(张前军),KangWY(康文艺),et
al．２００９．Studiesonchemicalcompositionandbiologicalactivity
ofTeucriumpilosum(Pamp．)CY WuetSChow(长毛香科科
化学成分及生物活性研究)[J]．ChinJChinMatMed(中国中
药杂志),３４(１７):２１８９－２１９３
WangQC(王翘楚)．１９９９．StemsandleavesofArachishypogaea
L．treatmentofinsomnia(花生茎叶治疗失眠症)[J]．JTrad
ChinMedLit(中医文献杂志),(４):３－２９
WangSJ(王素娟),PeiYH(裴月湖)．２０００．StudiesonconstituＧ
entsofBetulaplatyphylla(白桦叶化学成分的研究)[J]．J
ShenyangPharmUniv(沈阳药科大学学报),１７(４):２５６－２５７
WuB(吴斌),WuLJ(吴立军),ZhangL(张磊),etal．２００４．StudＧ
iesonconstituentsofSeneciocannabifoliusLess．(１)(麻叶千里
光抗菌化学成分的研究Ⅰ)[J]．JShenyangPharmUniv(沈阳
药科大学学报),２１(５):３４１－３４５
YangJ(杨杰),JiRF(纪瑞峰),WangLL(王丽莉),etal．２０１３．
Chemicalconstituentsfromethylacetatefractioninstems
andleavesofArachishypogaea(落花生茎叶醋酸乙酯部位
化学成分研究)[J]．Drugs& Clin(现代药物与临床),２８
(２):１４７－１４９
YaoY(姚尧),WuC(吴春),HaoQ(郝倩),etal．２０１２．Studies
onconstituentsofCorrallodiscusflablellatus(Craib)Burtt(石胆
草化学成分研究)[J]．JKunmingUnivSciTechnol:NatSci
Edi(昆明理工大学学报􀅰自然科学版),３７(５):６４－６８
ZhangHQ(张慧清),FengF(冯峰),XieN(谢宁),etal．２０１０．
StudiesonconstituentsandpharmacologicaleffectsofArachis
hypogaeaL．(落花生化学成分及药理作用研究)[J]．Centr
SouthPharm(中南药学),８(１):４５－４８
ZhangSJ(张树军),ZhangJF(张军峰),WangJL(王金兰)．
２００６．StudiesonconstituentsofSyringaoblata(紫丁香籽化
学成分研究)[J]．ChinTradHerbDrugs(中草药),３７(１１):
１６２４－１６２６
􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟􀥟
(上接第１３８页Continuefrompage１３８)
　TribulusterrestrisbyHPLCＧELSD(HPLCＧELSD法测定蒺藜
粗皂苷中３种甾体皂苷元)[J]．ChinTrad HerbDrugs(中草
药),(１２):２４１７－２４１９
JiangZJ,HaoZB,WuQ,etal．２０１３．AnovelflowＧinjectionchemiＧ
luminescencemethodfordeterminationofandrographolideinanＧ
drographistablets[J]．DrugTestAnal,５(５):３４０－３４５
LauAJ,SeoBH,WooSO,etal．２００４．HighＧperformanceliquid
chromatographicmethodwithquantitativecomparisonsofwhole
chromatogramsofrawandsteamedPanaxnotoginseng[J]．J
ChromatogrA,１０５７(１Ｇ２):１４１－１４９
LiL,ZhangJL,ShengYX,etal．２００５．Simultaneousquantification
ofsixmajoractivesaponinsofPanaxnotoginsengbyhighＧperＧ
formanceliquidchromatographyＧUV method[J]．JPharmBiＧ
omed,３８(１):４５－５１
MaY(马艳),Tan WH(谭卫红),FengGD(冯国东),etal．２０１３．
Flowinjectionchemiluminescencedeterminationofprogesterone
(流动注射化学发光法测定黄体酮)[J]．JAnalSci(分析科学
学报),２９(１):１０５－１０８
ShangguanDH,HanHW,ZhaoR,etal．２００１．New methodfor
highＧperformanceliquidchromatographicseparationandfluoresＧ
cencedetectionofginsenosides[J]．JChromatogrA,９１０(２):
３６７－３７２
WanJB,LaiCM,LiSP,etal．２００６．SimultaneousdeterminaＧ
tionofninesaponinsfromPanaxnotoginsengusingHPLC
andpressurizedliquidextraction[J]．JPharmBiomed,４１
(１):２７４－２７９
WanJB(万建波),LiSP(李绍平),JianJC(简家荣),etal．
２００４．AnalysisofsaponinsfromPanaxnotoginseng using
pressurizedsolventextractioncoupledwithhighperformance
thinlayerchromatography(加压溶剂提取Ｇ高效薄层扫描法
测定三七中皂苷类成分)[J]．ChinJNatMed(中国天然药
物),２(４):２１５－２１８
XuanWD(宣伟东),ChenHS(陈海生),TanXQ(谭兴起),etal．
２００５．HPLCＧELSDmethodindeterminationofsteroidalspaonin
TTSＧ１２inTribulusterrestris(HPLCＧELSD法测定刺蒺藜中甾
体皂苷TTSＧ１２含量)[J]．AcadJSecMillMedUniv(第二军
医大学学报),２６(２):２２２－２２３
YangD(杨丹),CangJ(苍晶),HaoZB(郝再彬),etal．２００６．
FlowinjectionＧchemiluminescencedeterminationofsoybean
isoflavone(流动注射化学发光法测定大豆异黄酮)[J]．Chin
JAnalChem(分析化学),３４(８):１１１３－１１１５
ZhouLB,ChengZH,ChenDF．２０１２．Simultaneousdetermination
ofsixsteroidalsaponinsandoneecdysoneinAsparagusfilicinus
usinghighperformanceliquidchromatographycoupledwitheＧ
vaporativelightscatteringdetection[J]．ActaPharmSinB,２
(３):２６７－２７３
ZengHJ(曾华金),LiangHL(梁会丽),YouJ(游静),etal．
２０１３．Simultaneousdeterminationofascorbicacidandrutin
byflowＧinjectionchemiluminescence method usingpartial
leastsquaresregression(偏最小二乘法结合流动注射化学发
光法同时测定芦丁和维生素C)[J]．ChinJLumin(发光学
报),３４(３):３６９－３７４
２４１ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３４卷