全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 30(2)：284— 286 2010年 3月
桑叶不 同化学成分的降血糖作用
徐健飞 ，义祥辉1，陈全斌2
(1．桂林师范高等专科学校 ，广西 桂林 541002；2．广西师范大学 环境与资源学院，广西 桂林 541004)
摘 要：桑叶是一种重要的降血糖药用植物资源。以秋桑叶中提取的六种活性化学成分为材料，研究了六种
提取物对四氧嘧啶诱导的糖尿病小鼠的降血糖效果。结果显示，各提取物均有一定的降血糖作用，其中以桑
叶总多糖的功效最为显著，桑叶生物碱及桑叶黄酮苷类效果次之。
关键词：桑叶；化学成分；降血糖；HPLC
中图分类号：Q946．3 文献标识码 ：A 文章编号：1000—3142(2010)02—0284—03
Effect 0f different chemical compositions from
mulberry leaf 0n decreasing glucose in blood
XU Jian-Fei1，Ⅵ Xiang-Hui1，CHEN Quan-Bin2
(1．CmilinTeachers College，Guilin 541002，China；2．DepartmentofNaturalResources
and Environment，Guangxi Normal Universty，Guilin 541004，China)
Abstract：Mulberry leaf is one kind of important medicinal plant resources for decreasing glucose in blood．Based on
the six medical chemical compositions of mulberry leaf，the thesis studied their effect on lowering glucose in blood by
testing on the Aloxan induction diabetes mice．The study showed that all these medical chemical compositions had
the function of reducing glucose in blood，among which，mulberry leaf total polysaccharide was listed top 1 and the fol—
lowing was the mulberry leaf alkaloid and mulberry leaf flavanone glucoside class．
Key words：mulberry leaf；chemical composition；decreasing glucose in blood；HPLC
桑叶异名铁扇子，为桑科桑属(Morus)植物桑
(Morus alba)的叶子。本属植物在我国广泛分布，
以江浙养蚕地区为主。随其商用的快速发展与价值
的体现，促使东桑西移，目前西部各省已有大规模种
植。自古以来中医就以桑叶作为治疗消渴症的中药
应用于临床，近代也常用桑叶配伍于中药复方应用
于临床，均有获效(江苏新医学院，1997)。国家卫生
部也将其列为药食两用品种(中国医学科学院药物
研究所，1990)。现代药理研究证明桑叶可抑制血糖
升高(李向荣等，2003；吴志平等，2005)，具有预防和
治疗糖尿病的作用。本文运用 HPLC法对桑叶的
药用化学成分进行深度分离提取，并与盐酸二甲双
胍进行降血糖作用对比，以探究桑叶活性生理物质
中的降血糖药用部位，为桑叶药用提取及药理作用
的深入研究提供依据。
1 实验材料与仪器
1．1材料
2007年 10月采集桂林甲山桑园多株桑树的叶
片(均采各部位新鲜成叶)，将桑叶置于烘箱中，6O℃
恒温脱水 24 h，冷却待用 。实验动物：NIH 种小 鼠，
体重 25~27 g，雌雄兼用 ，由广西 中医药研究所动物
室提供 。
1．2仪器
CP255D型电子天平 (德国赛多利斯公司)，
收稿日期 ：2008-06-10 修回日期：2009—07—25
基金项目：广西教育厅科研基金(2004—20)[Supported by Scientific Research Foundation of Education Department of Guangxi(2004—20)]
作者简介；徐健飞(1963一)，男 ，广东广州市人，副教授，主要从事植物提取与分析的教学与科研工作
2期 徐健飞等：桑叶不同化学成分的降血糖作用 285
P200Ⅱ型高效液相色谱仪(大连依利特)，722型光
栅分光光度计(上海分析仪器三厂)。主要药物和试
剂：盐酸二甲双胍(北京中惠药业有限公司产，批号：
20040410)；四氧密啶(英国 BDH公司产)；血清葡
萄糖测定试剂盒(四川省迈克科技有限责任公司产，
批号 ：040322)。
2 桑叶各化学成分的提取
2．1总生物碱的提取
取桑叶 380 g，以蒸馏水煮沸提取 3次(李向荣
等，2003)，合并提取液，进行离子交换，用 0．5 mol／L
氨水溶液洗脱(在洗脱液 pH>9时开始收集)，洗脱
液减压浓缩，用正丁醇 8OO mL萃取洗脱液，萃取 3
次。合并萃取液，减压浓缩，挥干溶剂。得黑色粉末
A 2．30 g。用重量法(肖崇厚 ，2006)测其含量 ，桑叶
总生物碱平均含量为 27．1％。
2．2总多糖的提取
取桑叶 5O g用沸水 1 000 mL提取 3次，经过
D-101大孔吸附树脂，柱流液减压浓缩，用 95 的乙
醇静置 沉 淀 ，得 粗 总 多糖 (欧 阳 臻 等 ，2003)。用
Sevag法脱蛋白：将粗 总多糖 溶于 100 mL水 中，用
活性炭脱色 ，过滤，收集 滤液置于分液漏斗 ，加入氯
仿 ：正丁醇(4：1)400 mL，分离弃去有机层及交界
处的凝胶变性物质。重复直到水相部分与茚三酮反
应为阴性。将水相部分浓缩，用 95 乙醇静置沉
淀，沉淀先 乙醇后丙酮 ，反 复淋洗 至淋洗 液无 色，减
压干燥(60℃)，得精制桑叶总多糖 B 1．52 g(白色
无定形粉末)。用硫酸一蒽酮 比色法测定 ，桑叶精制
多糖 B的含量为 61．8 。
2．3总黄酮苷的提取
取桑叶 1．5 kg，沸水 15 L煮 3次 ，每次 1 h，合
并提取液过滤 ，滤液用 D-101大孔吸附树脂 吸附(8O
mmX800 mm，流速 10 mL／min)，至树脂 吸附饱和 ；
先用蒸馏水洗涤至无色 ，再用 8O 乙醇洗脱 。洗脱
液减压浓缩，干燥得桑叶粗黄酮(唐孟成等，1996)。
粗黄酮用无水乙醇回流提取 3次，第一次 1 h，第二、
三次各 0．5 h，合并提取液，过滤，滤液减压干燥得
精制黄酮 C 43 g。经 HPLC外标法定量，计算标样
中总黄酮含量为 27．3 。桑 叶精制黄酮 C含量分
析(陈全斌等，2006a)(图 1)。色谱条件：填料：Hy—
persil C18；流 量 ：1．00 mL／min；流 动 相 ：40
MeOH；压力 ：10．0 Mpa；柱长 ：250 mm；检测波长 ：
220 rim；柱径 ：4．6 mmi进样量 ：1O L。用 HPLC
法进行分离提取(陈全斌等，2006b)，得 C1(槲皮素一
3-()_p一葡萄糖苷)、C2(山奈 酚一3一O—p一葡萄糖 苷)、C3
(其他)三个样品。
1 6 20
Mi nuteS
图 1 黄酮 C HPLC图
Fig．1 Flavanone C Chart HPLC
1：槲皮素 Quercetin；2：山奈酚 Kaempferol
3 各化学成分降血糖药性研究
取“桑 叶提 取物 A(总生 物碱)、B(总多糖 )、C
(总黄酮)、C1(槲皮素一3一O— 一葡萄糖苷)、C2(山奈酚
一 3一O—J3一葡萄糖苷)、C3(其它)”等 6个样品，分别进
行四氧嘧啶所致糖尿病小鼠降血糖作用的筛选实
验，以确定其有效部位。
3．1样品处理
桑叶提取物 A、B、C、C1、C2、C3样品，称重分别
为 2．0，0．5，6．0，0．3，0．6，1．3 g。除了C1称取 200
mg用 1 CMC研磨配成 40 mL(1OO mg／kg)混悬
液外，其余 A，B，C，C2，C3样品均分别称取 400 mg
用 1 CMC研磨配成 4O mL(200 mg／kg)混悬液
供实验用 。
3．2各化学成分对四氧嘧啶糖尿病小鼠的影响
取体重 25~27 g NIH 种健康 小鼠 9O只，雌雄
各半。除正常对照组 10只小鼠外，其余 8O只小鼠均
从尾静脉注射糖尿病造型剂四氧嘧啶(72 mg／kg)，72
h后眼眶静脉丛取血，按试剂盒方法预测血清葡萄
糖水平，选用血糖值在 16 mmol／L以上者作研究
(孙峰等，2006；方晓等，1999)。小鼠分为正常对照
组 、模 型对 照 组、阳性 对 照药 盐 酸二 甲双胍 (150
mg／kg)组、桑叶提取物 A、B、C、C1、C2、C3组，共 9
组。各组小鼠灌胃给药，正常对照组和模型对照组
给予等体积蒸馏水，每天一次，连续 7 d。于末次给
286 广 西 植 物 3O卷
药后 l h，从小鼠眼眶静脉丛取血，离心取血清，用
临床试剂盒测定各组小鼠的血糖水平，所得数据作
组间 T检验统计学处理(吴志平等，2005)，根据其
显著差异性评价药物的降血糖效果(表 1)。
表 l 桑叶提取物对四氧嘧啶高血糖小鼠降血糖效果的比较
Table 1 Comparison among the effect of different chemical compositions from mulberry
leaf on lowering glucose in blood in alloxan mice(X—s，n=io)
与正常组比较：###P<0．O01；与模型组比较 ： P<0．05。##P<0．01。
比较桑叶六种提取物给药前后使小鼠的血糖值
下降百分率，以桑叶总多糖(B)降血糖效果最理想，
能明显抑制四氧嘧啶所致糖尿病小鼠的血糖升高，
血糖下降率为 24．54 ，与盐酸二甲双胍组的血糖
下降率 27．56 9／6相当，与模型对照组作 T检验，具有
显著差异性( P
用不够明显。
4 结论
四氧嘧啶是一种胰岛 B细胞毒剂，能引起动物
实验性高血糖，使动物表现出与人相近的糖尿病症
状，为糖尿病治疗药物的疗效研究的常用动物模型。
本结果表明，桑叶总多糖(B)能明显拮抗四氧嘧啶
所致的高血糖，与阳性药盐酸二甲双胍作用相当，对
糖尿病高血糖症状有明显的抑制作用，因此，桑叶提
取物 B(总多糖)值得采用其他实验模型做进一步的
降糖作用研究；桑叶总生物碱 A及精制黄酮 C3还
有待进一步分离以确定其降糖有效成分。
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