全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 27(6)：941— 943 2007年 l1月
黄根醇提物对小鼠实验性肝损伤保护作用的研究
邓家刚1，周程艳 ，郑作文1
(1．广西中医学院，南宁 530001；2．华北煤炭医学院，河北 唐山 063000)
摘 要：以黄根醇提物为实验药物，对其进行了最大耐受量试验(MTD)和小 鼠实验性急性肝损伤的研究 ，结
果表明黄根醇提物最大耐受量为 2 080 g生药／kg，并能显著降低 CCL4、D-GaIN所致的小鼠血清中 ALT、
AST升高(P
中图分类号：Q946 文献标识码：A 文章编号：1000—3142(2007)06—0941—03
Acute toxicity and protective effects of alcohol
extract from Pr smatomeris tetrandra on
● J l l ● ● ● ● ●
eXDenm ental liver ln1ury in inlce
DENG Jia—Gang ，ZHOU Cheng-Yan ，ZHENG Zuo—Wen
(1．Guangxi Traditional Chinese Medical Uiversity，Nanning 530001，China；2．North
China Coal Medical College，Tangshan 063000，China)
Abstract：Base on the acute toxicity of the alcohol extracted from 尸rismatomeris tetrar~ra，the protect effects on a—
cute experimental liver inj ury in mice were studied．The MTD of the alcohol extract from P．tetrandra is 2 080 g
drogen／kg．The alcohol extract from P．tetrandra can remarkable decrease ALT，AST in serum on acute liver inj ury
induced by CCL4 and D-GalN(P~0．01)，and effect of the low dosage is the best．It can also obvious decrease ALT，
AST activities in serum and MDA levels in liver tissue(Pd0．01)；improve SOD activities and GSH levels in liver tis—
sue On immunological liver injury(P~0．01)．These experiments of the article are the first report for P．tetrandra．
Key words：Prismatomeris tetrandra；acute toxicity；liver injury
黄根，为茜草科植物三角瓣花(Prismatomeris
tetrandra)的根，性微苦，味凉，具有软坚散结、凉血
止血、祛瘀生新、强壮筋骨和利湿退黄等功效，广西
民间多用以治疗慢性肝炎 (广西壮族 自治区卫生局 ，
1974；合山矿务局疗养院，1977)。本文对黄根醇提
物急性毒性实验进行 了研究，并采用四氯化碳
(CCL )、D-氨基半乳糖(D—GalN)、卡介苗(BCG)和
大肠杆菌脂多糖(LPS)造成小鼠实验性肝损伤，来
探讨黄根醇提物对肝组织的保护作用。
1 材料
1．1实验动物
SPF级昆明种小鼠，雌雄各半，体重 18～22 g。
由广西医科大学实验动物 中心提供，合格证号：
SCXK桂 2003—0003。
1．2药品
丙氨酸 转氨 酶 (ALT)和天冬 氨酸转氨 酶
收稿日期 ：2006—06-27 修回Et期 ：2007—08—21
基金项目：广西科技攻关项目(0235023-1，0630006-5A)[Supported by Key Technologies Research and Development Program of Guangxi(0235023-1
0630006-5A)]
作者简介；邓家刚(1953一)，广西合浦人 ，教授，博士生导师，主要研究中药基础理论与药效研究，(E-mail)jgdeng@gxtcmu．edu．cn。
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942 广 西 植 物 27卷
(AST)试剂盒(批号 20060120，20060720)，超氧化
物歧化酶(SOD)测试盒(批号 20060410)，丙二醛
(MDA)测试盒 (批 号 20060515)，谷胱甘肽过 氧化
物酶(GSH)测试盒和 考马斯亮 兰蛋 白测定 试剂盒
(批号2OO6O62O)，以上试剂盒均为南京建成生物工
程研究所产品。联苯双酯，为北京协和药厂产品，批
号0503026。四氯化碳(CCL4，分析纯)，重庆川江化
学试剂厂产品，批号 20050426，实验时用花生油配成
0．08 CCL4溶液。I)_氨基半乳糖(D-GalN)，为 Sig—
ma公司产品，实验时用生理盐水配制成 5 (500 mg／
kg)的溶液，并用 1 mol／L的氢氧化钠溶液调其 pH
值为7。卡介苗(BCG)，为中国生物技术集团公司上
海生物制品研究所产品，批号 2005030902。大肠杆菌
脂多糖(LPS)，为Sigma公司产品。
1．3黄根
黄根，由广西中医学院医药会展中心从南宁当
地购进，经广西中医学院药用植物教研室韦松基教
授鉴定为茜草科三角瓣花的根。
1．4仪器
Biofuge strutos型高速低温离心机(Kendro La—
boratory products)。JY92—2D型超 声波细胞 粉碎机
(宁波新芝科器研究所)。YKH-I型液体快速混合器
(江西医疗器械厂)。A~lent8453紫外分光光度计。
ZFQ-85A型旋转蒸发仪(上海安亭电子仪器厂)。
2 方法(徐淑云等，2002)
2．1黄根醇提物的制备
将黄根粉碎成粗粉，用乙醇加热回流提取 2次，
合并提取液，滤过，浓缩至无醇味，加水稀释致所需
浓度，于 4℃冰箱保存备用。
2．2对小鼠急性毒性的实验研究
经反复预试，因其毒性较低，一次灌喂给药(ig)
无法测出其 LD 。，故改做小 鼠最大耐受量试验
(MTD)。取小鼠4O只(早舍各半)，给药容量为0．4
mL／10g／次。禁食不禁水，12 h后灌胃给药，间隔 6
h一次，共2次，使其 日累积剂量达到 2 080 g生药／
kg。给药后让小鼠自由摄食及饮水，并观察小鼠的
死亡、行为活动、皮毛、呼吸、大小便、食欲及摄食量、
饮水、体重、鼻、眼、口腔有无异常分泌物等情况，每
天上、下午各观察 1次，连续 7 d。给药后第 8天处
死小鼠，观察内脏器官的变化情况。
2．3对 CCL 致小鼠肝损伤的影响
小鼠 6O只 ，雌雄各半 ，随机分为 6组，每组 1O
只，即正常组、模型组、阳性组、高剂量组、中剂量组、
低剂量组。各组每天 1 g，给药容量为 2O mL／kg／d，
连续 10 d。正常组和模 型组给予蒸馏水，阳性组给
予联苯双酯 0．6 g／kg，高、中、低剂量组分别给予黄
根醇提液 16、8、4 g生药／kg。末次给药后禁食不禁
水，8 h后，除正常组外，其余各组均腹腔注射(ip)
0．08 CC L4花生油溶液 0．1 mL／10g，12 h后眼球
取血，分离血清，检测 ALT、AST的活性。
2．4对 D-GaIN致小鼠肝损伤的影响
分组及给药方法同2．2。末次给药后禁食不禁
水，8 h后，除正常组外，其余各组均 ip 5％ D-GalN
0．1 mL／10g，16 h后眼球取血，分离血清，检测
ALT、AST的活性。
2．5对 BeG和 LPS致小鼠免疫性肝损伤的影响
分组及给药方法同2．2。首次给药前，除正常组
外，其余 5组每只小鼠尾静脉注射(i．v)BCG(BCG，5
人份 1l安瓿配至22 mL)0．2 mE／只，注射完BCG后
2 h开始灌胃给药。第 1O天，末次给药后 1 h，再尾i．
v LPS溶液 4／．tg／只(O．2 mL／只)。并于注射 LPS 10
h后取血，离心分离血清，检测血清 ALT、AST的活
性。取肝组织制备 1O 肝匀浆，离心后取上清液，检
测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)的活性，丙二醛
(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH)的水平 。
2．6数据处理
各组实验数据均以表示，采用统计软件 SPSSI3．
0进行组间 t检验，P
3．1对小鼠急性毒性的实验结果
小鼠反应情况见表 1。小鼠经受试药物 2次灌
胃后，活动正常，未见明显毒性反应；7 d内小鼠活
动自如，行为、精神状态正常，毛色光亮，摄食饮水情
况良好，无震颤、扭体及翘尾；鼻、眼、口腔无异常分
泌物，未出现其他不良反应和死亡情况。7 d后断
颈处死，经解剖和尸检未发现内脏器官异常。结果
提示 ：黄根醇提物 MTD为 2 080 g生药／kg，相当于
成人(50 kg)临床用量(O．6 g生药／kg)的 3 466倍。
3．2对 CCL 致小鼠肝损伤的影响
结果见表 2。黄根醇提物能显著对抗 CCL 导
致的小鼠急性肝损伤血清中ALT、AST升高(与模
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6期 邓家刚等：黄根醇提物对小鼠实验性肝损伤保护作用的研究 943
表 1 黄根醇提取物最大耐受量试验小鼠反应情况
Table 1 Maximum tolerated dose(MTD)of the alcohol extract from Prismatomeris tetrandra in mice(n一10)
性别 四肢活动 体毛 饮水 摄食 粪便 尿液 分泌物 呼吸 死亡
GrouP Sex Limbs Body hair Drinking water Food Excrement Urine Secreta Breath Die
对 照组 Control
实验组 Experimental
注 ：“一”代表正常 Note：“一”represent normal
型组比较 P
CCL 导致的小鼠急性肝损伤有显著的保护作用。
表 2 对 CCL,致小鼠肝损伤血清中 ALT、AST活性的影响
Table 2 Effect of the a1coho1 extract from P．tetrandra
on ALT．AST activities in serum of liver—
injured mice induced by CCL4(n一10)
组别
Group A LT( U ~
躺
L-1) AST (U ~D1
酶
)
与正常组比较，一 P％0．01；与模型对照组比较，▲▲P％0．01。下同。
P％0．01 VS normal control group~▲▲P<0．01 VSmodel group．The
same as folows．
表 3对 D-GaIN致小鼠肝损伤血清中 ALT、AST活性的影响
Table 3 Effect of the alcohol extract from P．tetrandra
On ALT，AST activities in serum of liver-
inured mice induced by D-GaIN (n一10)
组别
Group 燕； A LT (U~躺I；1) AST (U ~Lq酶)
3．3对D-GaIN致小鼠肝损伤的影响
结果见表 3。与模型组比较黄根醇提物可显著
降低血清中ALT、AST的活性(与模型组比较 P<
0．01)，低剂量组效果最佳。结果提示：黄根醇提物
能显著抑制 D-GaIN对肝组织的影响。
表 4 对 BCG+LPS致小鼠肝损伤血清中 ALT、AST及肝组织中 SOD活性
的影响和肝组织中 MDA、GSH水平的影响 (n=1O)
Table 4 Effect of the alcohol extract from P．tetrandra on ALT，AST activities in serum and SOD
activities and MDA，GSH levels in liver tissue of liver—injured mice induced by BCG and LPS
3．4对 BCG和 LPS致小鼠免疫性肝损伤的影响
结果见表 4，表明黄根醇提物能明显对抗 BCG
和 LPS导致的小 鼠免疫性肝损伤血清 中 ALT、
AST和肝组织中 MDA的升高(与模型组比较 P<
0．01)，而肝组织中的 SOD的活力和 GSH的水平
亦能够明显增强(与模型组比较 P<0．01)。结果提
示：黄根醇提物对 BCG和 LPS致小鼠免疫性肝损
伤具有明显的保护作用。
4 讨论
(1)黄根醇提物小鼠最大耐受量测定结果表明，
各项观察指标在给药组与对照组之间无显著差异，
且未见毒性反应，故该药的小鼠1日最大耐受量为
2 080 g生药／kg，该药在此剂量范围内使用是安全、
(下转第 960页 Continue on page 960)
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96O 广 西 植 物 27卷
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O 2 4 6 8 1O 1 2 14
Time(min)
图 1 红丝线提取物中紫蓝素的 HPLC分析
Fig．1 HPLC analysis of zilanine in extract
of Peristrophe baphica
A．紫蓝素；B．红丝线提取物。
A．Zilanine；B．Extract of P．ba．phica．
表 2 红丝线提取物中紫蓝素的含量测定结果
Table 2 Content of zilanine in extract of
Peristrophe baphica (n一3)
(上接第 943页 Continue from page 943)
无毒的。(2)肝损伤实验研究结果表明，黄根醇提物
对实验性小鼠肝损伤有显著的保护作用。在各肝损
伤实验中有低剂量组较好的趋势，分析其原有二：①
黄根含有一定量的蒽醌类化合物，而蒽醌类化合物
有致泻的作用，在实验中高剂量组含有的蒽醌类化
合物要高于低剂量组，因此致泻的作用也就要强于
低剂量组，结果导致高剂量组药物吸收减少。而低
剂量组因含有较少的蒽醌类化合物，致泻的作用就
明显减轻，反而低剂量组吸收程度要比高剂量组好，
因此出现了高剂量组药效低于低剂量组的情况。②
同时在以前的一些实验中也曾经报道过黄根具有轻
剂系统作为流动相对样品进行分析，结果最佳的流
动相为(75 mmol／L乙酸铵 +0．5 mmol／L EGTA)
一 乙腈(92：8)，样品峰与杂质峰分离度好，专属性
强，保留时间合适，峰形尖锐，对称性好。
4．2检测波长的选择
本试验用二极管阵列检测器对紫蓝素色谱峰在
200~600 nm范 围内进行光谱扫描，在波长 250 nm
及 590 nm处有最大吸收，但波长 590 nm处响应值
比波长 250 nm处的响应值大，在 590 nm处杂质峰
少，故选择 590 nm作为检测波长。
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