全 文 ：广 西 植 物 Guihaia 29(3)：413— 416 2009年 5月
草多糖含量测定及其抗氧化性研究
王新风1，杨 芳 一，戈群妹 ，陈珊珊1
(1．淮阴师范学院 生物系资源微生物研究所 ，江苏 淮安 223300；2．南京师范大学
生命科学学院 微生物工程重点实验室，南京 210097)
摘 要：对 8月和 1o月采集的蓓草全草、嫩头、叶和茎中多糖含量进行测定 ，并对各部位提取纯化的多糖进行
体外抗氧化作用研究。结果表明，8月份嫩头中多糖含量最高，达到(42．897±2．996)mg／g；浓度为 5 mg／mL
的各部位薇草多糖溶液，对Fenton反应生成的羟自由基具有较强的清除能力，达 85．15 ～98．52 ；对邻苯
三酚自氧化法产生的超氧阴离子 自由基也有较好的抑制能力，达 57．15 ～67．54 。薇草多糖对羟 自由基和
超氧阴离子 自由基具有较高的清除能力。
关键词：律草 ；多糖 ；抗氧化性
中图分类号：Q946．3 文献标识码：A 文章编号：1000—3142(2009)03—0413—04
Content and antioxidant activity of polysaccharide
extracted from J}j mulus scandens
WANG Xin-Feng ，YANG Fang 一，GE Qun-Mei ，CHEN Shan-Shan
(1．Institute of Resource Microorganism，Huaiyin Teachers’College，Huaian 22330，China；2．Key Laboratory of
Mi~obial Engineering，College of Li Sciences，Na ing Normal University，Naniing 210097，China)
Abstract：The contents of polysaccharide in the whole plant，apic bud，leave and stam of Humulus scandens in August
and October，the scavenging effect of its purified polysaccharide on 0 ·and ·OH were investigated．The results
showed that the content of polysaccharide in apic bud in August was the highest，reached(42．897士2．996)mg／g．
The concentration of 5 mg／mL polysaccharide of H．scanalens can scavenge hydroxyl free radical formed in Fenton
raction，and the elimination rate reached 85．15 一98．52 ．Oxygen free radicals of self-oxidantion of pyrogalol was
well inhibited by the polysaccharide，and the elimination rate reached 57．15 一67．54 ．The polysaccharide of H．
scandens had antioxidant activities on 0 ·and ·OH．
Key words：Humulus scandens；Polysaeeharide；antioxidant activity
蓰草(Humulus scandens)是桑科薇草属一年生
缠绕草本植物(候宽昭，1984)，别名有拉拉秧、锯子
草、五爪龙、降龙草等。全草含木樨草素，葡萄糖甙，
胆碱，天冬酰胺及挥发油；球果含蓰草酮，蛇麻酮；叶
含木樨草素一7一葡萄糖甙，大波斯菊甙和牡荆素(中
华本草编委会 ，l999)。蓰草 的药性为：味甘、苦，性
寒。其主要的药理作用有清热解毒，利尿通淋，主治
肺热咳嗽、肺痈、虚热烦渴、热淋、水肿、小便不利、湿
热泻痢、热毒疮疡、皮肤瘙痒等(朱晓明等，2004；尹
佳等，2006)。蓰草生命力强，资源丰富，广泛分布于
全国除青海、新疆以外的地区(王桃云等，2005)。目
前，国内关于j擎草的研究主要集中在荏草的化学成
分、药理作用和药用作用的研究(尹海波等，2001)，
段国峰等(2006)对蓰草多糖进行了纯化，得到了四
种组分的粗多糖，并对各组分粗多糖的分子量及各
自单糖组成进行了研究。尹海波等(2001)提出，蓰
收稿日期 ：2008—02—25 修回日期：2008—12—07
基金项目：江苏省自然科学基础研究项目(07KJB350011)；淮安市科技局项目(SN0635)；淮阴师范学院教授基金(O8HSJsKO5)[supp0rted by Natural
Science Foundation of Jiangsu Province(07KJB350011)；Project of Science and Technology Bureau of Huaian(SN0635)：Professor Foundation of Huaiyin
％achers eolege(08HsJSK05)]
作者简介：王新风(1964-)，男 ，江苏涟水人．教授，从事微生物和药用生物技术研究，(E-mail)hywdwxf@sohu．tom。
414 广 西 植 物 29卷
草药源丰富，生命力旺盛，内含抗衰老成分，考虑到
多糖具有较高的抗氧化能力，因此我们进行初步纯
化的基础上，对蓓草多糖的抗氧化活性进行研究，以
期提高j搴草的附加值，促进我国律草深加工产业的
发展，同时也为蓰草多糖在天然抗氧化剂和功能性
食品领域的开发应用提供理论基础和实验依据，为
人类的健康和社会经济的发展贡献力量。
1 材料与方法
1．1材 料
于 2007年 8月和 1O月，分两次在淮阴师范学
院校园内采集无虫斑、无病变的律草茎叶，并经本院
生物系罗玉明教授鉴定。材料分类洗净后，6O℃烘
干，磨成粉末 ，过 60目筛，备用。
1．2主要试剂和仪器
蒽酮，水杨酸，邻苯三酚，三羟甲基氨基甲烷，均
为分析纯试剂。T6新世纪紫外分光光度计(北京普
析)，TDL一5000B离心机(海安亭科学医学仪器厂)，
电子天平BS210S(~京赛多利斯天平有限公司)。
1．3方法
1．3．1多糖测定方法 采用硫酸一蒽酮法(李群，
2000)，于 620 nm处测定吸光值。以吸光值为纵坐
标，以葡萄糖标准液浓度为横坐标，绘制标准曲线得
回归方程 Y一0．0084x一0．0037，R 一0．9996(在糖
浓度 O～8O／~g／mL之间时吸光值与糖浓度具有良
好线性关系)。
1．3．2律草中多糖的提取及其纯化 精确称取已研
磨好的薇草，用无水乙醇回流脱脂后，按 10：1加入
蒸馏水，摇匀后，8O℃恒温水浴浸提 2 h后取出用
滤纸过滤，残渣再重新提取一次，合并提取液一脱色
(终浓度 5 H O )一浓缩一脱蛋白(Sevage法)一
浓缩一95 乙醇沉淀一真空干燥一萑草多糖(段国
峰等，2006)。
1．3．3待测液的配制 用从蓰草不同部位提取的多
糖干品配制 5 mg／mL的多糖溶液作为待测液，备用。
1．3．4律草多糖对羟 自由基清除率的测定 利用
H O2与Fe。 混合产生羟自由基，即：H Oz+Fe抖
一 ·0H+H。O+Fe”。再在体系内加入水杨酸捕
捉羟 自由基并产生有色物质。该物质在 510 nm处
有最大吸收。用该吸光值来表示羟自由基的含量。
反应体系中含 8．8 mmol／LH：O2 1 mL，9 mmol／L
FeSO 1 mL，9 mmol／L水杨酸一乙醇 1 mL，待测溶
液 1 mL，其中 H：O。是最后加入并启动整个反应，
37℃反应0．5 h后，12 000 rpm离心 6 min，然后以
双蒸水作参比，在 510 nm下测定吸光度。考虑待
测溶液本身的吸光值不同，以 9 mmol／L FeSO 1
mL，9 mmol／L水杨酸一乙醇 1 mL，待测溶液 1 mL
和双蒸水 1 mL作为待测溶液的本底吸收值。清除
率计算公式为：清除率( )一( 一(Ax—A 。))／
×i00 。其中 为空白对照液的吸光度，Ax为加
入待测溶液后的吸光度，AX。为待测溶液的本底吸收
值。每一吸光值平行测 3次，取其平均值，结果用±
sd表示(陈留勇等，2004；1989；马晓华等，2005)。
1．3．5律草多糖对超氧阴离子清除率的测定 对超
氧阴离子的清除作用：采用邻苯三酚 自氧化法，取
0．05 mol／L pH8．2的 Tris—HCl缓冲液 4．5 mL于
试管中，置 25℃水浴 中预热 20 min，加人 0．1 mL
各供试液 ，2．5 mmol／L邻苯三酚 0．4 mL，混匀后在
25℃水浴中准确反应 4 min，立 即用 8 mol／L HC1
0．1 mL终止反应，并在波长 299 nm处测定吸光度
(A)值(以蒸馏水调零)，对照组用0．1 mL蒸馏水代
替供试液，同时设立试剂空白管。清除率( )一(A
对照一A样 品)／A对照 ×100 ，结果用±sd表示
(沈齐英等，2001)。
{E1 jr]．
全草 嫩头 叶 茎
律草部位 P Iace of HumuIus scana lens
图 1 不同月份律草不同部位中多糖含量
Fig．1 The content of polysaccharide in different fractions
of Humulus SCaTldeIts in August and October
2 结果与分析
2．1不同月份萑草各部位的多糖含量
从图 1中可知，8月份蓰草不同部位中的多糖
含量依次为：嫩头>全草>茎>叶，嫩头与叶中含量
差距最高，其比值达 3．09；10月份：叶>嫩头>全草
>茎，叶与茎中含量差距最高，其比值为 2．04。10
月份萑草不同部位中的多糖除了叶中的含量与八月
份相比基本持平外，其余各部位多糖含量显著低于
∞ ∞ ∞ O
o 一L 工oo叮∞ 一0Q o [0 亡00
一 ／暑 钿攀硪
3期 王新风等：蓓草多糖含量测定及其抗氧化性研究 415
8月份。8月份的嫩头多糖含量最高 ，达到(42．897
±2．996)rag／g。
2．2不同月份采集莓草多糖对超氧阴离子 自由基清
除率
研究蓰草不同部位提取的多糖干品配制的 5
mg／mL多糖溶液对超氧阴离子自由基的清除率，结
果见图 2。
全草 嫩头 叶 茎
i蕈草部位 PI ace of Humu／ SCan~ ns
图 2 多糖对超氧阴离子自由基 的清除率
Fig．2 Elimination rate of oxygen free radicals
scavenged by the polysaccharide
全草 嫩头 叶 茎
蓰草音B位 p I ace of 删“／us scana／ens
图 3 多糖对羟自由基的清除率
Fig．3 Elimination rate of hydroxyl free radicals
scavenged by the polysaecharide
图 2可知，8月份采收的蓰草不同部位浓度
为 5 mg／mL的多糖溶液抑制 OF·能力在 64 ～
67 之间，各部位之间的抑制能力差异极显著(P<
0．01)；相同浓度的 1O月份采收的蓰草各部位多糖
溶液抑制能力在 57 ～68 之间，抑制能力差异也
极显著(P<0．01)，但此期问各部分的抑制能力除
全草比8月份有显著上升(P<0．05)，其他的则比8
月份有下降(P2．3不同月份采集萑草多糖对羟自由基的清除率
由图 3可知，8月份的蓰草不同部位提取的多
糖溶液清除 ·OH能力在 91 ～98 之 间，各部位
的清除能力差异极显著(P<0．01)；10月份的清除
能力在 85 ～99 9，5之间，且各部位的清除能力差异
极显著(P月份有增强外(P<0．01)，其余各部位的多糖溶液
对羟自由基的清除能力除茎之外均比8月份有明显
减弱(P3 讨论
不同月份采集的律草不同部位多糖溶液对超氧
阴离子自由基(O ·)和羟 自由基(·OH)均具有明
显的清除能力。
贺亮等(2007)在对川楝子多糖的抗氧化性研究
中得出，质量浓度达到10 mg／mL时，川楝子多糖对
O ·的清除效率达到 63．7 ；对 ·OH的清除效率
可以达到 74．0 ，且随着多糖质量浓度的增加，对
O；-·及 ·OH 的清除效率也不断升高。柳红等
(2007)在研究超声提南瓜粗多糖对羟基 自由基的清
除能力时得出，当南瓜粗多糖浓度从 1～6 mg／mL
时清除 ·0H能力逐渐增加，但是到了8 mg／mL时
却呈下降趋势。本研究中得出8月份采集的蓰草嫩
头提取的多糖水溶液中多糖含量最高达到 0．429
mg／mL，其经脱蛋白、脱脂后得到的多糖配制成的5
mg／mL测试液，抑制超氧阴离子 自由基能力为最
大，达 66．90 ，清 除羟 自由基能力也最 大，达
97．36 。比较该浓度情况下，不同时期采集的不同
部位的蓰草多糖溶液的抗氧化能力发现，除了lo月
份提取的茎中多糖溶液的抑制 O；-·能力最低为
57．15 ，其余部位抑制 O ·能力都在 64 ～67
之间；而 lO月份提取的叶中多糖溶液的抑制 ·OH
能力最低为 85．15％，其它部位抑制 ·0H能力都
在 90．5 ～98．5 之间。我们得出不同月份采集
的蓰草不同部位多糖溶液对 ·OH清除能力强于
O ·的清除能力。相同浓度下的不同月份采收的
各部位多糖溶液对 O ·和 ·OH清除的差异，分析
原因一方面由于律草植株不同部位提取的多糖组成
成分存在差异，可能含有不同比例的蛋白等物质，从
而导致的抗氧化能力的差异；另一方面可能是由于
多糖是由 1O个以上多种单糖聚合而成的高分子物
质，当多糖分子以更加聚合的形式存在时，其抑制
O；-·和清除 ·OH能力更强(周林珠等，2002；黄梅
等，2006)。
综上所述，不同月份采集的律草各部位多糖含
●■■■■■I 一
= U
∞弱 ∞
0 o ∞ co ∞u_
一 一斛 煅 0
___．_
一 一 ■■●■■I
∞ ∞
卜{0．=Lo 0 ∞L co一 ∞ 一E
一斛 舌．
416 广 西 植 物 29卷
量有一定差异 ，且都具 明显的抗 氧化功能。蓓草在
我国资源巨大，目前除少量作为饲料外，大部分都未
得到有效合理的利用，因而对萑草进行深加工和功
能性产品的开发，具有十分广阔的前景。
参考文献：
中华本草编委会．1999．中华本草[M]．上海：上海科学技术出
版社，2 514—2 515
尹海波，王颖，郑太坤，等．2001．中国蓓草属植物的研究进展
[J]．辽宁中医学院学报 ．3(1)：6O一61
候宽昭．1984．中国种子植物科属词典EM]．北京：科学出版
社 ，238
Chen LY(陈留勇)，MengXJ(孟宪军)，Jiaw(贾薇)，eta1．2004．
The study on the antitumor activity and scavenging free radical
and immune effect of the water-soluble polysaccharides from A．
Persica var．seleropersica(黄桃水溶性多糖的抗肿瘤作用及清
除自由基提高免疫活性研)[J]．Food Sci(食品科学)，25(2)：
167～ 17O
Duan GF(段 国峰)，Li BJ(李 宝军 )，Zhai ST(翟松 涛)，et a1．
2006．Separation purification and composition analysis of poly—
saccharides from humulus scandens(蓓草多糖的分离纯化及组
成分析)[J]．Strait Pharm J(海峡药学)，18(5)：85—87
He L(贺亮)，Song XL(宋先亮)，Yin N(殷宁)，eta1．2007．Stud-
ies on extraction and anti-oxidation activities of flavonoids and
polysaccharide from toosendan(川楝子总黄酮和多糖提
取及其抗氧化活性 研究)i-j]．Chem Industry Fore Products
(林产化学与工业)，27(5)：78—82
Huang M(黄梅)，Wang XJ(王学军)，Yang K(杨凯)．2006．An—
tioxidants of chinese matefia medica and in vitro methods for as—
sessment of antioxidant activities(中药抗氧化成分及抗氧化活
性的体外评价方法)[J]．J Chongqing Univ Sci Tech(Nat Sci)
(重庆科技学院学报 ·自然科学版)，8(3)：1O9—112
Li Q(李群)．2000．Determination of holoside in toadstool using
authrone colorimetric method and evaluation to the test(蒽酮比
色法测定羊肚菌 多糖及实验评价 )EJ]．Chin J Health Lab
ch(中国卫生检验杂志)，10(1)：31—32
Liu H(柳 红)，Zhang J(张 静)．2007．Study on the scavenging
effect of diferent pumpkin polysaecharide on hydroxide free radi—
cals in vitro(不同南瓜多糖体外清除羟基自由基作用的研究)
l-J1．J Wuhan Bot Res(武汉植物学研究)，25(4)：356～359
Ma XH(马晓华)，Lian B(连宾)．2005．Hydroxyl radical scaven—
ging activities of several kinds of edible fungi(几种常见食用菌
清除羟基 自由基能力 的研究)[J]．Food Fermentation Indus—
tries(食品与发酵工业)，31(10)：25—29
Shen QY(沈齐英)，Shen QY(沈秋英)．2001．Study on the resis—
ting oxygen free rfldical and hydroxyl free radical effect of
Cordycepsmilitaris(~虫草抗氧 自由基和羟自由基作用的研
究)[J]．Guihaia(广西植物)，21(3)：252—254
WangTY(王桃云)，Ma HC(马红 昌)，Liu JY(刘江颖)．2005．
The optimization for extraction technique of leaf protein concen—
trate(LPC)from Humulus scandem(荇草叶蛋白提取工艺的优
化)[J]．J Univ Sci Tech Suzhou(苏州科技学院学报)，22(1)：
59— 64
Yin J(尹佳)，Wang RQ(王瑞琦)，He HJ(何海娟)，et a1．2006．
Values of intradennal skin test and serums IgE detection in diag—
nosing Humulus scandens polinosis(皮 内试 验和血清特异性
IgE检测在诊断律草花粉症中的临床价值)I-J]．NatMed J
China(中华医学杂志)，86(27)：1 906—1 911
ZhuXM(朱 晓 明)，Zhou B(周蓓 )，Wei QY(魏 庆字)．2004．
Summary of Humulus polinosis study(j奉革属花粉症研究概
况)[J]．Liaoning J Trad Chin Med(辽宁中医杂志)，31(7)：
6O1— 602
Zhou LZ(周林珠)，Yang XL(杨祥 良)，Zhou JY(周井炎)，et a1．
2002．Advancese of the antioxidative activities research of pol-
saccharides(多糖抗氧化作用研究进展)I-J]．Chin J Biochemi—
cal Pharrn(中国生化药物杂志)，23(4)：21O一212
(上接第 392页 Continue from page 392)
Liu Q(刘琴)，Sun H(孙辉)，He DW(何道文)．2005．Plant re—
sponses to the high temperature and moisture stress(干旱和高温
对植物胁迫效应的研究进展)[J]．J Chin West Norm Univ
(Nat Sci)(西北师范大学学报 ·自然科 学版)，26(4)：364—
368
Luo CK(罗成科 )，Peng 7_5(彭正松)，Cai P(蔡鹏 )．2007。In-
vitro regeneration of Pinellia ternata from leaf explants(三叶半
夏叶片一步成苗离体培养技术)[J]．Guihaia(广西植物)，27
(2)：260—264
Miao C(苗琛)，Li RQ(利容千)，Wang JB(王建波)．1994．Ultra—
structural study in leaf of Brasica oleracea var．capitata under
heat stress(甘蓝热胁迫叶片细胞 的超微结构研究 )I-J]．Acta
Bot Sin植物学报)，36(9)：730—733
Shi JX(石进校)，Zhao FY(赵福永)，Liu YD(刘应迪)，et a1．
2002．Activity of POD，SOD and content of MDA of Epimedium
sagitatum Maxim under temperature stress(温度胁迫下淫羊藿
的膜脂过氧化和保护酶活性)[J]．Li Sci Res(生命科学研
究)，6(2)：16O一162
Xue JP(薛 建平 )，Ding Y(丁勇)，Zhang AM(张爱 民)，et a1．
2004．The change of activity of protective enzyme around sprout
tumble of Pinellia ternate under high temperature stress(高温胁
迫下半夏倒苗前后保护酶活力 的变化)[J]．Chin J Chin Mat
Med(中国中药杂志)，29(7)：641—643
Zhang B(张斌)，Zhang TL(张桃林)，Zhao QG(赵其国)．1999．
Relationship between water potentials of red soiland crop leaves
under five farming systems and their responses to drought stress in
dry season(干旱季节不同耕作制度下作物红壤水势关系及其干
旱胁迫响应)[J]．Acta Pedol Sin(土壤学报)，2(1)：1O1—11O
Zhang YL(章艳玲)，Li GR(李关荣)，Wei YL(位运粮)．2007．
Advances in research of traditional chinese medicine Pinellia ter—
nata(中药半夏的研究进展)[J]．ChinAgdc Sci Bull(中国农
学通报)，23(7)：163～167