全 文 ： 辽宁省自然科学基金项目（２００３２０９３）资助
该作者现在辽宁省农业科学院植物保护研究所工作
通讯作者
收稿日期 ：２００４１１２４ 改回日期 ：２００４１２２５
黄瓜内生细菌 E1 ～ E4 防治黄瓜枯萎病研究
苗则彦 吕国忠 赵奎华 刘长远 梁春浩
（沈阳农业大学 沈阳 １１０１６１） （辽宁省农业科学院植物保护研究所 沈阳 １１０１６１）
Biological control of wilt disease of cucumber by endophytic bacteria E1 ～ E4 ．MIAO ZeYan ，LU GuoZhong（Shenyang
Agriculture University ，Shenyang １１０１６１ ，China） ，ZHAO KuiHua ，LIU ChangYuan ，LIANG ChunHao（Plant Protec
tion Institute ，Liaoning Academy of Agricultural Sciences ，Shenyang １１０１６１ ，China） ， CJEA ，２００６ ，１４（４） ：２６１ ～ ２６２
（Received Nov ．２４ ，２００４ ；revised Dec ．２５ ，２００４）
内生细菌是植物体自然生态系成员［１］ ，是微生态系统的天然组成成分 ，作为生防微生物效果显著 。 有
益内生细菌与植物在长期共同进化过程中建立了一种和谐的关系 ，从植物体内获得充分的营养 ，占居有利
的生态位 ，在植物保护下不易受外界环境条件影响 ，并可以经受住植物防卫反应［２］ 。 利用有益的植物内生
细菌作用于植物微生态系 ，进行微生态调控 ，可达到抗病［３ ，５ ，６］ 、促进植物生长［６］的目的 。 目前国内在棉花 、
水稻 、番茄 、辣椒 、花生 、小麦 、烟草 、甘蔗 、马铃薯等作物中分离到内生细菌并作了相关研究 ，但对黄瓜内生
细菌的研究未见报道 。本研究从黄瓜内生微生物资源中 ，筛选出具有抗黄瓜枯萎病［ Fusarium oxysporum
（Sshl ．）f ．sp ． cucumerinum Owen］和促进植物生长的黄瓜内生细菌 E１ 、E２ 、E３和 E４ 。
1 试验材料与方法
种子和植株体内生细菌的分离试验 。试验材料选用黄瓜品种“山东密刺”的种子和花期健康植株根系 ，
将种子和根系分别用 ５ ％ 次氯酸钠进行表面消毒 ５min ，然后用无菌水冲洗 ３次 ，将种子和根系取出分别加入
研钵中（其中含有灭菌的石英砂） ，再加入无菌水 ，将种子和根系浸没 ，检查无杂菌后［４］研磨 ，取汁液 ５０μL 涂
于 NA平板培养基中 ，６d后将平板中出现的细菌分别采用培养皿稀释分离法 ，挑取单个菌落保存在 NA 斜
面中备用 。
筛选具有防治黄瓜枯萎病的内生细菌试验共设 ７ 个处理 。 将黄瓜枯萎病菌接种在麦粒培养基中 ，２４ ℃
下恒温培养 １５d ，加蒸馏水 ，配制浓度为 ２００ 万个／mL 的病原菌孢子悬浮液 。分别将筛选出的内生细菌 E１ 、
E２ 、E３和 E４转接在 NA 平板培养基中 ，培养 ３d后 ，用蒸馏水稀释成浓度为 １０７cfu／mL 的内生细菌悬浮液 。
处理 A 、B 、C 、D是分别将种子置于用内生细菌 E１ 、E２ 、E３和 E４液浸湿的滤纸上 ，在 ２５ ℃ 恒温箱中催芽 ２８h
后播于装有自然土壤的塑料筐（１１５cm × １１５cm × ４５cm）中 。 筐内土壤播种前 ７d 定量浇入病原菌悬浮液
（以土壤湿透为止） ，播种时分别定量浇入内生细菌 E１ 、E２ 、E３ 和 E４（以土壤湿透为止） 。 处理 CK１ 、CK２ 、
CK３是分别将种子置于用清水浸湿的滤纸上 ，相同条件下催芽 。处理 CK２ 、CK３的土壤播种前 ７d 定量浇入
病原菌悬浮液 ，处理 CK１土壤浇入的为清水 。 处理 CK２土壤在播种时定量浇入药剂西瓜重茬剂 ６００ 倍液 。
处理 CK１ 、CK３在播种时定量浇入清水 。 ７d后调查出苗率 ；３０d后调查病害发生率 ，并记录内生细菌和 CK１
处理的植株高度 、鲜重和根系鲜重 。
2 结果与分析
从种子中共分离到 １０５株内生细菌 ，从植株根系中共分离到 １２１株内生细菌 ，通过防病及促进植物生长
的内生细菌筛选试验 ，共筛选出 ４ 株内生细菌 ，代号为 E１ 、E２ 、E３ 、E４ ，其中 E１ 、E２ 为植株体内生细菌 ，E３ 、
E４为种子内生细菌 。筛选出的内生细菌对黄瓜枯萎病防治效果的试验结果表明 ，应用 E１ 、E２ 、E３ 、E４ 处理
第 １４卷第 ４期 中 国 生 态 农 业 学 报 Vol ．１４ No ．４
２ ０ ０ ６年 １ ０月 Chinese Journal of EcoAgriculture Oct ．， ２００６