免费文献传递   相关文献

AM fungal genetic diversity in seven medicinal plant rhizospheres in Anguo City of Hebei Province

河北安国7种中药材AM真菌遗传多样性研究



全 文 :中国生态农业学报 2012年 2月 第 20卷 第 2期
Chinese Journal of Eco-Agriculture, Feb. 2012, 20(2): 144−150


* 河北省自然科学基金项目(C2010000273)和河北省教育厅重点项目(ZH2006007)资助
贺学礼(1963—), 博士, 教授, 主要从事药用植物及菌根生物技术研究。E-mail: xuelh1256@yahoo.com.cn
收稿日期: 2011-05-05 接受日期: 2011-08-31
DOI: 10.3724/SP.J.1011.2012.00144
河北安国 7种中药材 AM真菌遗传多样性研究
贺学礼 王雅丽 赵丽莉
(河北大学生命科学学院 保定 071002)
摘 要 为探明药用植物根围 AM 真菌遗传多样性, 于 2010 年 8 月在河北省安国市 3 个样地(中药材种植基
地、霍庄、大户村)用随机抽样法采集 7 种中药材根围土壤样品 , 分离筛选双网无梗囊霉(Acaulospora bi-
reticulata)为试验菌种, 进行孢子 DNA提取、PCR扩增、序列测定及聚类分析, 研究了双网无梗囊霉遗传多样
性与土壤因子的关系, 并选取两条代表菌株所测序列, 连同从 NCBI 数据库中下载的 4 属 28 种 AM 真菌相应
序列构建系统发育树。结果表明, 双网无梗囊霉可侵染不同样地不同宿主植物, 3个样地 7种中药材双网无梗
囊霉 DNA 相似性达 99.2%以上, 其遗传特征保持了高度稳定性, 双网无梗囊霉在样地和植物间具有广谱性。
同一样地不同中药材根围土壤因子相似性很高, AM 真菌 DNA 碱基序列相似系数也很高, 而不同样地同一中
药材根围 AM真菌 DNA碱基序列相似系数低于前者, 可见遗传多样性与土壤因子密切相关。土壤因子对双网
无梗囊霉基因序列的影响大于宿主植物的影响。
关键词 双网无梗囊霉 系统发育 遗传多样性 土壤因子 中药材 河北安国
中图分类号: Q938 文献标识码: A 文章编号: 1671-3990(2012)02-0144-07
AM fungal genetic diversity in seven medicinal
plant rhizospheres in Anguo City of Hebei Province
HE Xue-Li, WANG Ya-Li, ZHAO Li-Li
(College of Life Sciences, Hebei University, Baoding 071002, China)
Abstract To shed more light on the genetic diversity of AM fungi associated with medicinal plants, soil samples were collected in August
2010 in the 0~30 cm depth soil rhizosphere of 7 medicinal plants in Planting Site, Huozhuang Village and Dahu Village of Anguo City, He-
bei Province. Acaulospora bireticulata was used for spore DNA extraction, PCR amplification, sequence determination and cluster analysis
to determine the relationship between genetic diversity of A. bireticulata and soil factors. The 2 fungus DNA sequences from Scutellaria
baicalensis and Dendranthema morifolium were used for tree phyletic evolution derived by phylogenetic inference analysis of 18S rRNA
gene (partial) to 28S rRNA gene (partial) nuclear ribosomal sequences. The measured DNA regions were 18S rRNA (partial), ITS1, 5.8S
rRNA, ITS2 and 28S rRNA (partial). The results showed that AM fungi likely infected all host plants, with 99.2% similarity in A. bireticulata
DNA sequences in 3 sampling plots. A high generation stability was noted, indicating a broad spectrum of A. bireticulata. In the 18S, 5.8S
and 28S regions, A. bireticulata DNA was highly conservative, with 10 strains having no difference in gene position spot. A significant gene
variation was noted in the ITS1 and ITS2 regions. When ITS1 region position spot was located in 291~379 bp, A. bireticulata DNA sequence
exhibited 1~4 bp difference. Also when ITS2 region position spot was located in 538~742 bp, DNA sequences for 10 strains exhibited 0~5 bp
difference. Cluster analysis showed that the similarities of A. bireticulata DNA sequences among different medicinal plants in the same
sampling plot were higher than those among different sampling plots of the same medicinal plant. The similarities in A. bireticulata DNA
sequences among different medical plants in the same sampling plot were very high; some as high as 100%. On the contrary, the similarities
in A. bireticulata DNA sequences of the same medical plants among different sampling plots were low. This suggested that A. bireticulata
DNA sequences were closely related with soil factors. Because of the combined effect of soil texture and host plant, A. bireticulata DNA
sequences were remarkably different. The highest difference in DNA sequence was in the Huozhuang-based S. baicalensis and Plant
Site-based Bupleurum chinense; with difference up to 7 bp in 1 700 bp.
Key words Acaulospora bireticulata, Phyletic evolution, Genetic diversity, Soil factors, Chinese medicinal plant, Anguo
第 2期 贺学礼等: 河北安国 7种中药材 AM真菌遗传多样性研究 145


City of Hebei Province
(Received May 5, 2011; accepted Aug. 31, 2011)
AM真菌广泛分布于陆地生态系统中 , 能与绝
大多数高等植物形成共生体系[1−2]。大量研究证实,
AM真菌能够扩大植物根系吸收面积 , 增强宿主植
物对土壤养分和水分的吸收利用, 提高植物抗病性
和抗逆性, 促进植物生长发育[3−4]。目前有关药用植
物AM真菌资源、生态分布和共生关系的研究倍受人
们关注[5−7]。
我国药用植物资源丰富 , 但对药用植物与AM
真菌共生关系的研究较少 , 尤其是从分子水平对
AM真菌遗传多样性的研究少见报道。本研究采集河
北省安国市7种中药材根围土壤 , 以双网无梗囊霉
(Acaulospora bireticulata)为AM真菌代表种, 通过提
取AM真菌孢子DNA, PCR扩增 , 序列测定与比对 ,
研究了双网无梗囊霉遗传特征及其与宿主植物和土
壤因子的相关性 , 以便为进一步阐明AM真菌与植
物共生关系及优良菌种筛选提供依据。
1 材料与方法
1.1 研究地概况与土样采集
河北省安国市位于太行山山麓平原 , 东经
115°20′, 北纬38°24′, 属暖温带半湿润季风气候, 年
均气温12.2 ℃, ≥10 ℃积温4 349 ℃, 年均降水量
570 mm, 年无霜期约210 d[8], 适合野生和人工栽培
中药材植物生长。
2010年8月选取安国市中药材种植基地、大户村和
霍庄3个样地种植的菊花(Dendranthema morifolium)、
丹参(Salvia miltiorrhiza)、白芷(Atractylodes macro-
cephala)、柴胡(Bupleurum chinense)、金银花(Lonicera
japonica) 、 黄 芩 (Scutellaria baicalensis) 和 沙 参
(Adenophora stenanthina)等7种中药材, 去除根围土
壤表层杂物, 采集0~30 cm土层土样, 带回实验室阴
凉处自然风干后过2 mm筛备用。
1.2 AM真菌孢子形态鉴定
用湿筛倾析–蔗糖离心法[9]从土样中分离AM真
菌孢子, 根据孢子形态特征(大小、颜色、表面特征
等)进行分类鉴定, 各类孢子分别在蒸馏水中于4 ℃
保存。
1.3 挑取双网无梗囊霉孢子
本研究以双网无梗囊霉孢子为代表种, 研究其
遗传特征。选用双网无梗囊霉孢子具有以下优势 :
孢子表面有明显双层网纹, 网孔呈多角形, 形态学
特征明显, 利于准确辨认, 保证了研究中选用的是
纯种孢子 ; 孢子壁薄柔软 , 易碎 , 易提取DNA; 孢
子壁外不易附着土壤杂质, 利于孢子表面彻底清洗
消毒, 保证了DNA样品的纯度。
1.4 孢子 DNA提取
用镊子夹取或用移液枪吸取 10个双网无梗囊霉
孢子, 用无菌水漂洗 5 次, 将其放入无菌的 1.5 mL
离心管中 , 加入 4 µL TE 缓冲液 (10 mmol·L−1
Tris-HC1, 1 mmol·L−1 EDTA, pH 8.0)和 2 µL 20%
Chelex-100, 以减少金属离子对 DNA 的影响。用磨
棒将孢子充分捣碎, 95 ℃水浴 5 min, 冰浴 3~5 min,
12 000 r·min−1离心 10 min, 吸取上清液到新离心管
中, 置于−20 ℃保存, 备用[10]。
1.5 AM真菌种特异性引物设计
根据 AM 真菌 18S、ITS1、5.8S、ITS2 和 28S
区测序及系统发育分析结果 , 利用 internet 和
Primer5.0软件选择、设计 AM真菌种特异性引物[11−12],
上游 : 5’-ATTACGTCCCTGCCCTTTGTACA-3’, 下
游: 5’-TGGTCCGTGTTTCAAGACG -3’, 由上海生
工生物工程有限公司合成。
1.6 PCR扩增
20 L混合反应体系中包括 1 μL模板DNA, 正向
和反向引物各 1 μL, 10 μL 2×Taq MasterMix(北京康
为试剂生物科技有限公司提供 ), 含有 Taq DNA
Polymerase, 2×Taq PCR buffer, 3 mmol·L−1 MgCl2和
400 μmol·L−1 dNTP混合物, 10 μL去离子水。
PCR反应条件: 94 ℃预变性5 min; 94 ℃变性30 s,
55 ℃退火 35 s, 72 ℃延伸 1 min 50 s, 35个循环; 72
℃延伸 10 min[13−14]。
PCR扩增结果用 1.0%琼脂糖凝胶电泳检验, 并
用 DNA纯化试剂盒纯化。
1.7 PCR产物 rDNA/ITS序列测定及序列 Blast搜索
测序工作由北京三博远志生物技术有限公司完
成。所测区为 18SrRNA(partial)、ITS1、5.8SrRNA、
ITS2和 28SrRNA(partial), 总长度为 1 700 bp。将序
列在GenBank数据库中进行Blast搜索, 得到一系列
具有一定相似性的序列[15], 确定所测种为 Acaulospora
bireticulata。
1.8 菌株聚类分析及 AM真菌系统发育学分析
对所测结果使用 Contig CExpress软件进行序列
拼接, 拼接好的 DNA序列采用 ClustalX软件进行同
源比对, Se2 2Al v210a11 对比对结果编辑校正, 切
除两端多余序列, 并在保留原序列信息基础上对测
146 中国生态农业学报 2012 第 20卷


序中的明显错误碱基进行编辑调整 , 之后用
PAUP410b10 进行最大简约性建树分析, 所有特点
被视为无序且权重相同, 空缺视为缺失信息, 采用
启发式搜索随机重复 500次, 然后用 Bootstrap重复
1 000 次评估各节点支持率[16−17], 对所测 10 株双网
无梗囊霉进行聚类分析。
为显示所测菌株与已知 AM 真菌间的亲缘关系
及其系统地位, 选取两代表菌株所测序列, 连同从
NCBI 数据库中搜索的 AM 真菌相应序列进行系统
发育分析。
2 结果与分析
2.1 双网无梗囊霉孢子形态特征
孢子球形至椭圆形, 直径 190~200 μm, 表面布
满多角形颗粒, 顶部反光。在低倍镜下灰绿色, 在油
镜下黄绿色。Melzer’s 试剂染色后呈橙黄色。扫描
电镜观察, 孢子外壁拱起, 形成连续的外周环闭脊
状凸起, 脊状结构围绕的中央略低, 偶见内壁呈球
面状凸起, 总体呈窗孔状或蜂窝状(图 1)。



图 1 光镜(a)和电镜(b)下双网无梗囊霉孢子形态特征
Fig. 1 Characteristics of A. bireticulata’ spore in optical
microscope (a) and electron microscope (b)

2.2 PCR扩增结果
引物S1/S2成功扩增出单一条带, 即位于双网无
梗囊霉的rDNA ITS区[18S rRNA(部分)、ITS1、5.8S
rRNA、ITS2和28S rRNA(部分)]的一段序列, 长度为
1 700 bp(图2)。



图 2 rDNA/ITS区 PCR扩增产物电泳图
Fig. 2 Amplification production of the rDNA/ITS sequences
Marker: DL2000 marker; 1: AM-1; 2: AM-2; 3: AM-3.

2.3 目的序列测序及菌株同源性比较
双网无梗囊霉菌株在 18S、5.8S 及 28S 区序列
高度保守, 该区域内 10株菌株序列无 1个位点存在
差异。菌株 ITS序列突变率相对较高, ITS1区和 ITS2
区均出现部分碱基变异 , ITS1 区碱基位点为
291~379, 在该区域中, 不同植物根围双网无梗囊霉
序列出现 1~4个碱基差异, 菌株 ITS2区碱基位点为
538~742, 该区域内 10 株菌株序列出现 0~5 个变异
位点(图 3)。
2.4 AM真菌系统发育分析
为显示本试验所测菌株与已知 AM 真菌间的亲
缘关系及其系统地位, 将测得序列分别在 GenBank
中进行同源序列比对[16,18]。选取两条代表菌株(基地
黄芩和霍庄菊花)所测序列, 连同从 NCBI 数据库中
下载的 4属 28种 AM真菌相应序列进行系统发育分
析。在用 ClustalX 软件做多重序列比对后, 去除所
有序列 5’和 3’端的非对位排列区, 基于MAGA软件
建立 AM真菌 4属部分种系统进化树(图 4)。



图 3 10株菌株的目的序列比较
Fig. 3 Goal sequences comparison of 10 strains
1: 保守区 Conservative region; 2~5: 非保守区 Non-conservative regions.

第 2期 贺学礼等: 河北安国 7种中药材 AM真菌遗传多样性研究 147




图 4 基于 rDNA ITS区[18S rRNA gene (部分)、ITS1、5.8S rRNA gene、ITS2和 28S rRNA gene (部分)]构建的
AM真菌系统发育树
Fig. 4 Consensus tree derived from phylogenetic in-ference analysis of 18S rRNA gene (partial), ITS1, 5.8S rRNA gene, ITS2 and
28S rRNA gene (partial) nuclear ribosomal sequences
1: GenBank FN547597.1; 2: GenBank FN547570.1; 3: GenBank FM876803.1; 4: GenBank AJ504639.1; 5: GenBank AJ243420.1; 6: GenBank
FM876836.1; 7: GenBank FN547622.1; 8: GenBank FM876839.1; 9: GenBank FR681932.2; 10: GenBank FN825912.1; 11: GenBank FN825909.1; 12:
GenBank FR772334.1; 13: GenBank FR772333.1; 14: GenBank FR772330.1; 15: GenBank FR681936.1; 16: GenBank FN547509.2; 17: GenBank
FN547523.1; 18: GenBank FN547519.1; 19: GenBank FN547517.1; 20: GenBank FN547516.1; 21: GenBank FM876793.1; 22: GenBank FM876791.1;
23: GenBank FM876787.1; 24: GenBank AM713416.1; 25: GenBank FN547498.2; 26: GenBank FN547628.1; 27: GenBank FN547501.1; 28: Gen-
Bank FN547499.1; 29: A. bireticulata JH, 基地黄芩 S. baicalensis in Planting Site; 30: A. bireticulata JH, 霍庄菊花 D. morifolium in Huozhuang.

2.5 双网无梗囊霉 DNA聚类分析
聚类分析结果显示, 同一样地的相似性系数很
高, 同一样地不同植物双网无梗囊霉 DNA聚在一起;
不同样地, 大户村与霍庄相似性系数较高, 此两样
地双网无梗囊霉DNA聚在一起, 后再与基地双网无
梗囊霉 DNA聚在一起(图 5)。
148 中国生态农业学报 2012 第 20卷




图 5 不同样地不同植物根围土壤双网无梗囊霉聚类分析
Fig. 5 Endrogram of soil samples of different plants rhizosphere
in different sampling plots based on A. bireticulata’s genetic
distance

2.5.1 同一样地不同植物比较
基地黄芩与金银花无 1 个碱基差异, 相似性达
100%; 霍庄黄芩与菊花、大户村沙参和白芷各有 1
个碱基差异, 均在 ITS1区; 基地 5种植物 DNA序列
中碱基变异最大的是柴胡, 柴胡与金银花和黄芩间
差异值为 0.004(表 1), 在 ITS区有 4个碱基对的差异。
2.5.2 不同样地同种植物比较
霍庄黄芩与基地黄芩间差异值为 0.005(表 1),
在 ITS 区有 4 个碱基对差异; 霍庄菊花和基地菊花
在 ITS1区有 2对碱基差异; 霍庄柴胡和基地柴胡在
ITS1和 ITS2区各有 1对碱基差异。
2.5.3 不同样地不同植物比较
由于土壤质地和宿主植物共同影响, 导致不同
样地不同植物根围双网无梗囊霉 DNA 序列差异显
著。霍庄黄芩与基地柴胡间的差异最大, 达到 7 个
碱基对的差异。
2.6 AM真菌遗传多样性与土壤因子的关系
由表 2 可知, 种植基地各植物根围土壤因子相
似性很高, 基地内不同植物根围真菌DNA碱基序列
相似系数也很高。可见遗传多样性与土壤因子密切
相关。种植基地土壤碱解氮、有机质、速效磷和 pH
显著高于其他样地 , 而霍庄和大户村土壤因子接
近。DNA 序列聚类分析得出, 霍庄与大户村双网无
梗囊霉相似性更高, 聚在一起。

表 1 不同样地不同植物根围土壤双网无梗囊霉 DNA序列差异性矩阵图
Table 1 Distances of A. bireticulata’s DNA in soil samples of different plants rhizosphere in different sampling plots

基地金银花
L. japonica
in Planting
Site
基地黄芩
S. baicalen-
sis in Plant-
ing Site
基地菊花
D. mori-
folium in
Planting Site
基地丹参
S. iltiorrhiza
in Planting
Site
基地柴胡
B. chinense
in Planting
Site
大户村沙参
A. stenan-
thina in
Dahu Village
大户村白芷
A. macro-
cephala in
Dahu Village
霍庄柴胡
B. chinense
in Huoz-
huang
霍庄菊花
D. morifo-
lium in
Huozhuang
霍庄黄芩
S. baicalen-
sis in Huoz-
huang
基地黄芩
S. baicalensis in
Planting Site
0.000
基地菊花
D. morifolium
in Planting Site
0.000 0.001
基地丹参
S. miltiorrhiza
in Planting Site
0.002 0.001 0.003
基地柴胡
B. chinense in
Planting Site
0.004 0.004 0.004 0.004
大户村沙参
A. stenanthina
in Dahu Village
0.005 0.004 0.005 0.004 0.000
大户村白芷
A. macro-
cephala in
Dahu Village
0.004 0.002 0.004 0.004 0.003 0.004
霍庄柴胡
B. chinense in
Huozhuang
0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005 0.005
霍庄菊花
D. morifolium
in Huozhuang
0.005 0.005 0.007 0.008 0.008 0.008 0.005 0.001
霍庄黄芩
S. baicalensis in
Huozhuang
0.005 0.005 0.005 0.008 0.008 0.008 0.005 0.003 0.000
外缘基因
Outer gene 0.021 0.021 0.022 0.022 0.021 0.021 0.021 0.014 0.014 0.012

第 2期 贺学礼等: 河北安国 7种中药材 AM真菌遗传多样性研究 149


表2 采样点土壤基本性质
Table 2 Soil parameters of sampling plots
样地
Sample
宿主植物
Host plant
有机质
Organic matter
(g·kg−1)
碱解氮
Available nitrogen
(g·kg−1)
速效磷
Available phosphorus
(mg·kg−1)
酸性磷酸酶
Acid phosphatase
(g·kg−1)
碱性磷酸酶
Alkaline phosphatase
(mg·kg−1)
pH
柴胡
B. chinense 26.25a 39.12a 13.10a 8.54a 70.13a 8.56a
金银花
L. japonica 26.30a 39.13a 12.98a 8.30a 70.57a 8.68a
黄芩
S. baicalensis 26.31a 39.13a 12.99a 8.08a 70.52a 8.70a
丹参
S. miltiorrhiza 25.70a 38.48a 13.00a 7.94a 72.72a 8.30a
菊花
D. morifolium 26.48a 39.08a 13.28a 7.58a 71.63a 7.27c
中药材
种植基地
Planting Site
平均值 Mean 26.21a 38.98a 12.99a 8.01b 70.95b 8.52a
黄芩
S. baicalensis 17.46b 29.56b 7.95b 8.51b 65.38b 8.20b
菊花
D. morifolium 18.13b 29.08b 7.97b 9.13c 67.52b 8.19b
柴胡 B. chinense 17.34b 28.33b 7.31b 8.45b 66.99b 8.20b
霍庄
Huozhuang
Village
平均值 Mean 17.64b 28.99b 7.56b 8.60b 66.89b 8.19b
沙参
A. stenanthina 18.99b 29.71b 7.14b 8.54b 35.13c 8.27b
白芷
A. macrocephala 18.30b 28.13b 7.58b 9.30c 36.97c 7.68c
大户村
Dahu Village
平均值 Mean 18.64b 28.92b 7.35b 8.01b 36.00c 7.98b
表中同列数据不同字母表示在 5%水平上差异显著 Data with different letters in the same column indicate significant difference at 5% level.

3 讨论与结论
自然条件下 7 种中药材植物根系均能与 AM 真
菌形成良好共生关系。rDNA ITS 区测序及 Bioedit
序列分析表明 , 土壤条件和宿主植物对 AM 真菌
DNA序列有一定影响, 在真菌 ITS区出现 0~8个碱
基差异, 但 3 个样地 7 种植物根围双网无梗囊霉
DNA 相似性在 99.2%以上, 基因序列保持了高度稳
定性。说明双网无梗囊霉对样地和宿主植物没有严
格依赖性和选择性, 在样地和植物间具有广谱性。
考虑土壤因子和宿主植物因素, Oehl等[19]和 Li
等[20]研究发现, 环境和土壤条件比宿主植物对 AM
真菌群落影响更大。聚类分析结果显示, 同一样地
双网无梗囊霉DNA相似性系数很高, 而同一样地土
壤因子非常接近, 说明双网无梗囊霉遗传特征与土
壤因子密切相关。
不同样地双网无梗囊霉DNA序列比较, 大户村
与霍庄相似性系数较高, AM真菌在分子水平上无显
著差异, 这两个样地先聚在一起, 而种植基地与其
他样地相似性系数较低, 后聚在一起; 样地间土壤
因子比较, 大户村与霍庄相似, 与基地差异大。进一
步说明序列差异受土壤因子影响大于宿主植物的影
响。可能是由于河北省安国地区为农田土, 采用人
工施肥, 同一样地土壤因子基本相同, 且植物为 1
年生, 故双网无梗囊霉DNA碱基差异受宿主植物影
响不明显。
参考文献
[1] O’Connor P J, Smith S E, Smith F A. Arbuscular mycorrhizas
influence plant diversity and community structure in a semi-
arid herbland[J]. New Phytologist, 2002, 154(1): 209–218
[2] Arines J, Quintela M, Vilariño A, et al. Protein patterns and
superoxide dismutase activity in non-mycorrhizal and arbus-
cular mycorrhizal Pisum sativum L. plants[J]. Plant and Soil,
1994, 166(1): 37–45
[3] 刘润进 , 陈应龙 . 菌根学 [M]. 北京 : 科学出版社 , 2007:
1–404
[4] 刘润进, 焦惠, 李岩, 等. 丛枝菌根真菌物种多样性研究进
展[J]. 应用生态学报, 2009, 20(9): 2301–2307
[5] 王森, 唐明, 牛振川, 等. 山西历山珍稀药用植物 AM真菌
资源与土壤因子的关系 [J]. 西北植物学报 , 2008, 28(2):
355–361
[6] 魏改堂, 王洪钢. VA 菌根真菌对药用植物曼陀罗(Daturast
ramonium L.)生长、营养吸收及有效成分的影响[J]. 中国农
业科学, 1989, 22(5): 56–61
[7] 高爱霞, 贺学礼. 河北中部药用植物 AM 真菌生态学研究
[J]. 干旱地区农业研究, 2007, 25(3): 196–202
[8] 贺学礼, 王凌云, 马晶, 等. 河北省安国地区丹参根围 AM
真菌多样性[J]. 生物多样性, 2010, 18(2): 175–181
150 中国生态农业学报 2012 第 20卷


[9] Ianson D C, Allen M F. The effects of soil texture on extrac-
tion of vesicular arbuscular mycorrhizal fungal spores from
arid sites[J]. Mycologia, 1986, 78(2): 164–168
[10] 龙良鲲 , 羊宋贞 , 姚青 , 等 . AM 真菌 DNA 的提取与
PCR-DGGE分析[J]. 菌物学报, 2005, 24(4): 564–569
[11] Schwarzott D, Schüßler A. A simple and reliable method for
SSU rRNA gene DNA extraction, amplification, and cloning
from single AM fungal spores[J]. Mycorrhiza, 2001, 10(4):
203–207
[12] 刘永俊 , 冯虎元 . 不同演替阶段人工柠条林丛枝菌根真菌
分子多样性研究[J]. 中国沙漠, 2009, 29(6): 1141–1146
[13] 李河 , 周国英 , 刘君昂 . 双孢蘑菇褐腐病病原菌的分离及
分子鉴定[J]. 食用菌学报, 2009, 16(2): 74–76
[14] Mervyn S, Linh N, Megan J, et al. A method for assessing
arbuscular mycorrhizal fungi group distribution in tree roots
by intergenic transcribed sequence variation[J]. Plant Soil,
2007, 290(1/2): 259–268
[15] 蔡柏岩 , 接伟光 . 大豆根围丛枝菌根真菌鉴定[J]. 大豆科
学, 2009, 28(3): 484–486
[16] 张林 , 高健 , 侯成林 . 分离自安徽南部竹黄相关真菌的分
子鉴定及多样性分析[J]. 北京林业大学学报, 2009, 31(6):
20–26
[17] Renker C, Heinrichs J, Kaldorf M, et al. Combining nested
PCR and restriction digest of the internal transcribed spacer
region to characterize arbuscular mycorrhizal fungi on roots
from the field[J]. Mycorrhiza, 2003, 13(4): 191–198
[18] Msiska Z, Morton J B. Isolation and sequence analysis of a
β-tubulin gene from arbuscular mycorrhizal fungi[J]. My-
corrhiza, 2009, 19(7): 501–513
[19] Oehl F, Laczko E, Bogenrieder A, et al. Soil type and land use
intensity determine the composition of arbuscular mycorrhizal
fungal communities[J]. Soil Biology and Biochemistry, 2010,
42(5): 724–738
[20] Li L F, Li T, Zhang Y, et al. Molecular diversity of arbuscular
mycorrhizal fungi and their distribution patterns related to
host-plants and habitats in a hot and arid ecosystem southwest
China[J]. FEMS Microbiol Ecology, 2010, 71(3): 418–427

JJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJJ
中国科学院遗传与发育生物学研究所
农业资源研究中心研究生教育简介
1 概况
中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心(以下简称中心)的前身为始建于 1978年的中国科学院石家
庄农业现代化研究所。中心拥有中国科学院院士 1人, 研究员 17人, 引进中国科学院“百人计划”人才 3名。在读硕
士和博士研究生 80人。
中心沿北纬 38度带分别在河北省元氏县、栾城县和南皮县建立了 3个野外试验台站, 形成了具有不同生态类型的
山地丘陵区—山前平原区—滨海平原区农业科学研究基地。其中栾城农业生态系统试验站已于 2005年晋升为国家野外
试验台站, 同时也是中国科学院生态网络台站成员和国际 GTOS成员。中心拥有中国科学院农业水资源重点实验室、
河北省节水农业重点实验室和中国科学院小麦转基因研究试验基地。
自 2002年进入中国科学院知识创新工程以来, 中心面向国家水安全、粮食安全、生态环境安全的重大战略需求和农
业资源与生态学前沿领域, 以农业水资源高效利用为重点, 在节水理论与技术、农业生物技术、生态系统及信息管理等领
域, 开展应用基础研究, 集成创新资源节约型现代农业模式, 为区域农业持续发展做出了基础性、战略性、前瞻性贡献。
2 招生与培养
2.1 招生
每年秋季招收 1次生态学博士、学术型硕士和生物工程全日制专业学位硕士研究生。每年 8月左右开展免试生接
收工作。通过中心复试并获得拟接收资格的免试生, 若最终未获所在校外推指标者, 只要统考成绩通过中心的复试线,
可免复试直接录取。
2.2 培养与就业
中心十分注重培养质量, 改善人才成长环境, 努力提高学生的综合素质。每年有多位学生荣获中国科学院和中国科
学院遗传与发育生物学研究所的各种冠名奖学金。学生毕业后赴国内外大学和科研院所等企事业单位就职或从事博士
后研究工作。近 5年毕业生就业率达 96.59%, 其中 2010年毕业生就业率达 100%, 按期毕业率达 96%。
2.3 学生待遇
学生在学期间不仅不收取任何学费, 还享有相应的研究助理薪金, 硕士生奖/助学金 25000 元/年左右, 博士生 35000
元/年左右。优秀学生每年除可获得中国科学院研究生院奖学金、冠名奖学金等奖励外, 还可享有研究所设立的“振声
奖学金”和“益海嘉里奖学金”等。
学生拥有宽敞明亮并备有单独卫生间的住宿(两人间)环境和价位适中的学生食堂。
热忱欢迎地球科学、生物学、农学和林学等相关专业有志青年踊跃报考及推免!
3 联系方式
单位网址: http://www.sjziam.ac.cn 电话: 0311-85801050 传真: 0311-85815093
联系人: 王老师 E-mail: yzb@sjziam.ac.cn 邮政编码: 050022