全 文 :2013年 第 49卷 第 7期 Animal Health·动物保健
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(Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Beijing Academy of
Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097, China)
Abstract: The objective of this study was to evaluate the effect of supplementation of Lactobacillus saliarius on apparent
nitrogen digestibility and serum indices of growing pigs. Eighty one crossbred ( Landrace× Large White) growing pigs with
(35.22±0.86) kg were selected and randomly distributed into three groups with three replicates per group and nine pigs
per replicate comprising of control (basal diet), and 0.20% and 0.40% Lactobacillus saliarius supplementation treatments.
The experiment lasted 30 d. The results showed that the Lactobacillus saliarius at two level of 0.20% and 0.40% could
significantly improve the apparent nitrogen digestibility (P<0.05); Feeding the diets containing the Lactobacillus saliarius
could significantly decrease the globulin ratio (P<0.05) when compared with the control diet, the Urea-N, LDH and CK
value in serum in 0.20% and 0.40% Lactobacillus saliarius groups were significantly decreased by 14.77% and 13.42%
(P <0.05), 16.92% and 20.0%(P <0.05), 28.96% and 23.00%(P <0.01), respectively . This experiment indicated that
Lactobacillus saliarius at 0. 20% level may be the most appropriate and feasible level with regard to enhance the
apparent nitrogen digestibility and promote the serum indices of growing pigs.
Key words: Lactobacillus saliarius; apparent nitrogen digestibility; serum index; growing pigs
近年来研究发现,植物的次生代谢产物如苯丙 素类、醌类、黄酮类、单宁类、萜类等,具有抗生素样
功能和抗氧化作用而作为饲料添加剂广泛应用于动
物生产以及食品中。
止痢草(Origanum heracleoticum L.,过去也称
Origanum vulgare spp hirtum)是一种广泛分布于地中
海地区的唇形科芳香植物。从止痢草叶片和花中蒸汽
蒸馏加工得到的精油具有抗氧化活性[1]。香芹酚和百
——————————————
收稿日期:2012-07-23;修回日期:2012-09-29
资助项目 :横向课题研究项目 “家禽中草药制剂的研究 、开发与
推广”(2012211001); 辽宁医学院奥鸿大学生科技活动基金项目
(201110001)。
作者简介:史东辉(1970-),女,辽宁人,硕士,教授
*通讯作者
唇形科植物提取物对肉鸡血清抗氧化
功能和鸡肉脂类氧化的影响研究
史东辉1,陈俊锋2,赵连生3,许云贺1,王佳丽1
(1.辽宁医学院畜牧兽医学院,辽宁锦州 121001;2.美瑞泰科/美瑞康生物科技
有限公司,广东广州 510080;3.辽宁省盖州市动物卫生监督所,辽宁盖州 115200)
摘 要:本试验旨在研究唇形科植物止痢草提取物对肉鸡血清的抗氧化作用和鸡肉脂类氧化影响。 试验选用1日
龄同批孵化AA+2400只,采用单因子试验设计,随机分为6个处理。 对照组无抗生素,抗生素组在基础日粮中添加
抗生素(恩拉霉素10 g/t,硫酸抗敌素20 g/t),试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别在基础日粮中添加100、150、200、250 g/t止痢
草植物提取物(OS)。试验期为42d。结果表明:整个试验期间,添加OS各试验组的血清总抗氧化能力(T-AOC)均显
著高于对照组和抗生素组(P<0.05);肉鸡21日龄时,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清超氧化物歧化酶(SOD)活性高于对照组
(P<0.05)和抗生素组 (P>0.05),试验Ⅲ组丙二醛 (MDA)浓度显著低于对照组 (P<0.05);肉鸡42日龄时 ,试验Ⅲ
组血清SOD活性显著高于对照组和抗生素组(P<0.05),添加OS各组的血清谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px)活性
均高于对照组和抗生素组 (P>0.05),试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清MDA含量均低于对照组 (P>0.05)和抗生素组 (P<
0.05)。 所有试验各组整个贮藏期间腿肌比胸肌更容易氧化, 无论是胸肌还是腿肌的鲜样、-20℃贮藏1、3、6个
月,添加OS试验各组MDA浓度均显著低于对照组和抗生素组(P<0.05)。可见。日粮中的止痢草植物提取物提高
了血清中抗氧化酶的活性,有效地延缓了肉中脂类的氧化。
关键词:止痢草植物提取物;血清;抗氧化功能;脂类氧化;肉鸡
中图分类号:S831.5 文献标识码:A 文章编号:0258-7033(2013)07-0063-05
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里香酚是止痢草精油中2种主要的酚类物质,占78%~
82%。止痢草植物提取物具有显著的抗氧化作用[2],并
能降低脂肪的自动氧化 [3],并且精油中的其他次要成
分在抗氧化方面发挥着重要的协同作用 [4]。
研究表明,止痢草植物提取物能更有效地延缓
肉仔鸡脂质氧化,而不受贮藏时间的影响。Amir等 [5]
报道,饲粮中添加止痢草植物提取物能提高肉鸡血
清抗氧化活性。止痢草、百里香和迷迭香提取物可
以提高鸡肉和鸡蛋的氧化稳定性 [3,6-7]。
本试验通过测定21、42日龄肉鸡的血清总抗氧
化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘
肽过氧化物酶(GSH-Px)、过氧化氢酶(CAT)和丙
二醛(MDA)含量的变化,检测42 d 屠宰后肉鸡的
胸肌、腿肌在-21℃条件下贮藏0、3、6个月丙二醛
(MDA)含量的变化,探讨止痢草植物提取物对肉
鸡抗氧化功能的影响,旨在揭示其可能作用机理,
为止痢草植物提取物添加剂在肉鸡生产的临床应
用提供理论参考。
1 材料与方法
1.1 试验动物与日粮 试验选用1日龄同批孵化
AA2 400只,采用单因子随机分组试验设计,随机分
为6个日粮处理,每个处理8个重复,每个重复50只
仔鸡,公、母各半。试验期42 d,阶段日粮采取逐渐过
渡的方式,试验无预试期。
玉米-豆粕型基础饲粮参照2004我国肉仔鸡饲
养标准和美国NRC(1994)家禽营养需要配制,见表
1。试验分6组,对照组无添加抗生素和止痢草提取
物的基础日粮组,抗生素组在基础日粮中添加恩拉
霉素10 g/t和硫酸粘杆菌素20 g/t,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ
组分别在基础日粮中添加100、150、200、250 g/t止痢
草提取物。止痢草植物提取物(Orego-Stim,简称
OS,中文名好力高)由美瑞康(广州)生物科技有限
公司生产。该天然植物提取物添加剂从止痢草亚种
中提取出来的精油与特殊载体经专利技术加工而
成。肉小鸡和肉大鸡全程采用全价破碎配合饲料。
1.2 饲养管理 试验期42 d,试验肉鸡各组环境条
件一致,全程采用网床饲养。每天24 h持续光照,鸡
舍第1周温度保持在33~35℃,以后每周平均降低2℃
至22℃,保持此温度至试验结束;环境湿度70%,自
由采食,换料前2 d逐渐过渡,自由饮水。日常管理与
免疫程序按鸡场常规进行。
表1 基础饲粮组成和营养成分
项目 1~15 d 16~42 d
饲粮组成/%
玉米 66.4 72.6
豆粕 24.6 18.9
大豆油 2.4 2.2
玉米蛋白粉 2.0 2.0
磷酸氢钙 1.4 1.0
石粉 1.2 1.3
预混料及其他① 2.0 2.0
合计 100 100
营养成分②
代谢能/(MJ·kg-1) 13.18 13.39
粗蛋白/% 19.3.0 17.10
钙/% 0.88 0.80
总磷/% 0.64 0.55
非植酸磷/% 0.37 0.30
总赖氨酸/% 1.1.0 0.95
总蛋氨酸/% 0.48 0.42
注:①每千克配合饲料中含:维生素A l2 000 IU,维生素D3 2 500 IU,
维生素E 30 mg,维生素K3 3 mg,维生素B1 3 mg,维生素B2 8 mg,维
生 素 B67 mg,维生素Bl2 0 .03 mg,泛酸 20 mg,烟酸 50 mg,生物
素 0.18 mg,叶酸 1.5 mg,维生素C 10 mg,氯化胆碱 1000 mg;锌
110 mg,锰l20 mg,铁100 mg,铜15 mg,钴0.2 mg,硒0.3mg,碘1mg。 ②营养成
分为计算值
1.3 样品采集 于试验第21、42天分别从每个处理
组随机抽取16只体重接近该组平均体重的试验肉鸡
(每重复2只,公、母各1只),共96只鸡,无菌翅静脉
采血,凝固后离心(3 500 r/min离心10 min)吸取上清
液,分装,4℃保存,2 d内完成抗氧化酶的指标测定;
第42天从每个处理组随机抽取16只体重接近该组平
均体重的试验肉鸡(每重复2只,公、母各1只),共96
只鸡,禁食12 h,鸡只致昏后放血、屠宰,胴体称重,
去除骨和结缔组织,剥皮,4℃冷却。取右侧胸肌和腿
肌4℃冷却后检测MDA含量,同时留样真空包装,
于-20℃冰箱中冷冻保存。贮藏1、3、6个月后检测胸
肌和腿肌的MDA含量。
1.4 检测指标与方法
1.4.1 血清氧化应激指标 血清T-AOC采用比色
法,SOD活性测定采用黄嘌呤氧化物酶法、GSH-Px
采用二硫代二硝基苯甲酸法;MDA含量测定采用硫
巴比妥酸法(TBA)。测定试剂均采用南京建成生物
工程研究所生产的试剂盒,具体操作方法对照试剂
盒说明书。
1.4.2 胸肌和腿肌氧化应激指标 分别检测新鲜
及在-20℃贮藏1、3、6个月后的胸肌和腿肌的MDA
含量。将样本在4℃条件下解冻12 h,准确称取胸肌
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2.1.2 止痢草植物提取物对42日龄肉鸡血清抗氧
化功能的影响 从表3可以看出,肉鸡血清T-AOC
活性试验Ⅱ组最高,试验Ⅲ组次之,显著高于其他各
组(P<0.05);添加OS各试验组间差异并不显著(P>
0.05)。血清SOD活性以对照组最低,抗生素组次之,
试验Ⅲ组最高;对照组、抗生素组比试验Ⅲ组分别降
低了15.58%和14.35%(P<0.05);对照组和抗生素组
间血清SOD活性没有明显差异。添加OS各组的血清
GSH-Px活性均高于对照组(P>0.05),同时也高于抗
生素组(P>0.05)。以试验Ⅲ组最高,分别比对照组和
抗生素组提高了2.59%和3.76%(P>0.05)。除抗生素
组外,各试验组肉鸡血清MDA含量均低于对照组
(P>0.05)。试验Ⅱ组、试验Ⅲ组和试验Ⅳ组血清MDA
含量分别比抗生素组降低了 18.10%、25.75%和
20.27%(P<0.05)。
2.2 止痢草植物提取物对肉鸡肌肉MDA的影响 由
表4可知,屠宰后即检测胸肌MDA的含量,抗生素组略
低于对照组(P>0.05);而添加OS的试验各组比对照组
分别降低了 13.23%、18.39%、24.08%和 24.77%(P <
0.05),比抗生素组降低了12.66%、17.86%、23.58%和
24.28%(P<0.05)。添加OS的试验各组的MDA值在-20℃
贮藏1、3个月后有小幅度的增加(P>0.05),均明显低
于对照组和抗生素组(P<0.05)。胸肌样本-20℃冷冻在
6个月后,对照组、抗生素组和添加OS组的MDA浓度均
显著增加(P<0.05),与添加OS各试验组相比,对照组
和抗生素组尤其明显。
从表5中可以看出,对照组、抗生素组腿肌MDA
浓度显著高于添加OS的试验各组(P<0.05)。样本
在-20℃贮藏1、3、6个月后的情况亦相同(P<0.05)。
从表4和表5可知,屠宰后试验各组测定MDA的
浓度,腿肌均高于胸肌(P<0.05)。试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组胸
肌和腿肌MDA含量均显著低于对照组、抗生素组和
试验Ⅰ组(P<0.05)。试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组胸肌和腿肌
MDA浓度在贮藏1个月后有出现比鲜样降低的现
象,可能是检测误差,也可能是止痢草植物提取物持
续抗氧化作用的结果。
3 讨 论
3.1 止痢草植物提取物对肉鸡血清抗氧化能力的
影响 动物机体在新陈代谢中不断产生自由基,自
由基对机体维持正常生理功能有重要的作用,但过
量的自由基会使动物产生氧化损伤,如脂质过氧化、
蛋白质交联聚合、DNA损伤,既而导致细胞结构改变
和功能破坏、DNA产生突变,生产中表现为疾病,免
和腿肌重量,按重量体积比加9倍生理盐水制成10%
的匀浆,2 000 r/min离心10 min,取上清待测。测定试
剂采用南京建成生物工程研究所生产的试剂盒,具
体操作方法对照试剂盒说明书。组织匀浆中蛋白含
量采用双缩脲法测定。
1.5 统计分析 试验数据采用Excel处理,应用
SPSS13.0软件One-Way ANOVA方法进行统计分析,
并采用LSD法多重比较,P<0.05作为差异显著的标
准,结果均以平均值±标准差表示。
2 结 果
2.1 止痢草植物提取物对肉鸡血清抗氧化功能的影响
2.1.1 止痢草植物提取物对21日龄肉鸡血清抗氧
化功能的影响 如表2所示,肉鸡血清T-AOC活性
以对照组最低,试验Ⅲ组最高;添加OS试验各组的
血清T-AOC活性随着OS添加剂量的增加而增加,但
试验Ⅳ组血清T-AOC值有所下降,显著低于试验Ⅲ
组(P<0.05);试验Ⅱ组和试验Ⅲ组血清T-AOC值显
著高于其他各组(P<0.05)。试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组血清
SOD活性分别比对照组显著提高了12.31%、15.74%
和14.68%(P<0.05),比抗生素组分别提高了8.64%、
11.96%、10.94%(P>0.05)。试验Ⅲ组肉鸡血清GSH-
Px活性明显高于对照组(P<0.05);试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ组
血清GSH-Px活性比对照组和抗生素组均有提高的
趋势。各试验组肉鸡血清MDA含量均低于对照组。
试验Ⅲ组比对照组和抗生素组血清MDA的含量下降
了20.75%(P<0.05)和16.51%(P>0.05),其他各组间
差异均不显著(P>0.05)。
项目 对照组 抗生素组 试验Ⅰ组 试验Ⅱ组 试验Ⅲ组 试验Ⅳ组
T-AOC/(U·mL-1) 14.73±1.36d 16.82±0.74c 17.09±0.65c 19.39±1.04ab 20.38±1.11a 18.13±1.35bc
SOD/(U·mL-1) 143.12±6.25b 147.95±9.27ab 148.71±7.62ab 160.74±7.63a 165.65±7.37a 164.13±10.99a
GSH-Px/(μmol·L-1) 278.49±15.46b 284.00±10.61ab 289.10±10.67ab 292.06±11.05ab 295.36±8.99a 290.14±10.20ab
MDA/(nmol·mL-1prot) 4.53±0.43b 4.3±0.42ab 3.97±0.59ab 3.81±0.59ab 3.59±0.69a 3.75±0.64ab
表2 止痢草植物提取物对21日龄肉鸡血清抗氧化功能的影响
注:同行数据肩标不同字母者表示差异显著 (P<0.05),相同者为差异不显著 (P>0.05)。 下表同
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表4 胸肌样本在-20℃贮藏条件下丙二醛的变化 nmol·mg-1 prot
表5 腿肌样本在-20℃贮藏条件下丙二醛的变化 nmol·mg-1 prot
表3 止痢草植物提取物对42日龄肉鸡血清抗氧化功能的影响
项目 对照组 抗生素组 试验Ⅰ组 试验Ⅱ组 试验Ⅲ组 试验Ⅳ组
T-AOC/(U·mL-1) 18.27±0.88c 19.78±0.87bc 21.12±1.44ab 22.81±1.08a 22.38±1.24a 21.25±1.28ab
SOD/(U·mL-1) 150.21±8.18b 152.4±8.18b 159.33±8.22b 164.85±7.49ab 177.93±8.64a 168.03±10.2ab
GSH-Px/(μmol·L-1) 295.41±12.29 292.07±10.2 296.29±9.93 297.26±8.06 303.05±4.97 298.62±11.9
MDA/(nmol·mL-1prot) 5.73±0.76ab 6.02±0.82a 5.13±1.11ab 4.93±1.15ab 4.47±0.98b 4.80±0.73ab
月 对照组 抗生素组 试验Ⅰ组 试验Ⅱ组 试验Ⅲ组 试验Ⅳ组
0 2.300±0.077a 2.290±0.082a 2.000±0.082b 1.881±0.090bc 1.750±0.083c 1.734±0.082c
1 2.308±0.054a 2.320±0.100a 2.004±0.078b 1.859±0.056c 1.727±0.088c 1.722±0.082c
3 2.335±0.045a 2.368±0.129a 2.005±0.085b 1.898±0.082bc 1.743±0.107c 1.744±0.082c
6 2.711±0.115a 2.773±0.126a 2.201±0.163b 2.113±0.083bc 1.963±0.075c 1.983±0.085c
月 对照组 抗生素组 试验Ⅰ组 试验Ⅱ组 试验Ⅲ组 试验Ⅳ组
0 3.361±0.123a 3.484±0.131a 2.800±0.082b 2.539±0.086c 2.431±0.091c 2.438±0.065c
1 3.346±0.084a 3.481±0.086b 2.825±0.044c 2.565±0.089d 2.419±0.102d 2.420±0.067d
3 3.347±0.106a 3.503±0.082b 2.905±0.045c 2.604±0.082d 2.580±0.082d 2.533±0.041d
6 3.877±0.087a 4.089±0.083b 3.336±0.124c 2.837±0.084d 2.811±0.070d 2.803±0.068d
疫力、生产力、产品质量降低等。机体抗氧化防御系
统由酶促体系(谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶
等)和非酶促体系(维生素E、谷胱甘肽、维生素C等)
组成。该体系抗氧化作用的主要作用机制为以下4个
途径:直接淬灭自由基;与脂类、蛋白质、维生素等螯
合;调节机体内氧化酶活性;与金属离子络合 [8]。
T-AOC可反映抗氧化系统功能状况,本试验无
论是21日龄还是42日龄肉鸡,试验Ⅱ组和试验Ⅲ组血
清的T-AOC均显著高于对照组和抗生素组(P<0.05)。
说明日粮中添加150 、200 g/t止痢草植物提取物提高
了肉鸡血清的总抗氧化能力。有学者对止痢草植物提
取物抗氧化作用进行体外试验,发现其主要成分百里
香酚和香芹酚有很强的抗氧化性质,而其他次要成分
在抗氧化方面发挥着重要的协同作用 [4],止痢草植物
提取物和其糖苷配基显示很强的抗氧化性能并显著
抑制氢过氧化物的形成,这与本试验结果趋势一致。
SOD、GSH-Px是催化脂质过氧化物或H2O2还原
生成相应的醇和H2O,是防御体系中清除H2O2的主要
因素 [9]。血液中SOD、GSH-Px活力间接反映了机体清
除自由基的能力,在生理指标范围内,其活性越高,
越有利于动物机体健康。添加止痢草植物提取物在
一定程度上提高了血清中SOD、GSH-Px活性,其活
性随OS浓度的增加而增加,以试验Ⅲ组达到最高。
大量研究表明,止痢草植物提取物的高效抗氧化活
性是由于苯酚羟基基团在油脂氧化第一阶段作为氢
供体对过氧自由基生成起作用,从而阻碍了羟基过
氧化物的形成 [10]。这与本试验结果相一致。有学者进
一步发现止痢草植物提取物的抗氧化作用存在剂量
依赖关系[4,6]。但本试验中250 g/t的添加量反而使SOD、
GSH-Px活性比200 g/t略有下降,但下降幅度不大
(P>0.05)。这有待于进一步的试验研究。
MDA是体内自由基攻击生物膜中多不饱和脂肪
酸,引发脂质过氧化产生的一类较稳定的脂质过氧化
物。血液和组织中MDA的含量不但反映氧自由基介导
的脂质过氧化程度,也间接反映机体氧化损伤程度。
本试验肉鸡日粮中添加止痢草植物提取物降低了血
清中MDA的含量,特别是试验Ⅲ组血清中MDA浓度
显著降低,这可能是多种抗氧化成分进入循环系统、
分布和存留在组织中表现出抗氧化活性的结果;21
日龄肉鸡血清MDA含量以对照组最高,而42日龄却
以抗生素组最高。这也有待于后续的试验研究。
3.2 止痢草植物提取物对肉鸡肌肉MDA的影响
肉鸡平均含有3.5%~5.0%的脂肪组织,家禽脂肪中
多不饱和脂肪酸的含量高于其他饲养动物,这也是
禽肉易氧化变质的原因。脂类氧化导致肉在贮藏期
间质量下降,这是由于在自由基作用下产生的醛致
使肉出现酸败反应和颜色改变。试验在屠宰后即刻
检测肉中的MDA浓度低于贮藏1、3、6个月后,所有
样本中MDA浓度随贮藏时间的延长而增加,这与一
些学者的研究相吻合 [7]。本研究显示,新鲜样本也含
有MDA,这可能是饲料中含有的MDA在肉鸡体内的
沉积或肉鸡采食饲料后体内代谢产生的。
本试验也表明,整个贮藏期间腿肌比胸肌更易
氧化,无论鲜样,还是冷冻1、3、6个月,所有试验各
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组腿肌样本的MDA值均高于胸肌样本,这可能是与
腿肌含有更多的多不饱和脂肪酸有关 [11-12],也可能
是由于腿肌比胸肌含有更高的促氧化物质,这导致
了腿肌氧化稳定性下降 [6,13]。
饲料中加入止痢草植物提取物作为抗氧化剂显著
降低了肉中MDA的含量(P<0.05),鸡肉组织中较低
MDA值可能是止痢草植物提取物中不同的抗氧化成
分随血液循环进入机体组织,并结合在细胞膜中而表
现出抗氧化活性,这与其他研究者的报道相一致 [14-15]。
4 结 论
本研究结果表明,肉鸡日粮中添加止痢草植物
提取物可以提高血清T-AOC含量、SOD和GSH-Px活
性,降低血清和肌肉中MDA含量,表现了显著的抗
氧化能力;而在日粮中添加抗生素后,肉鸡的抗氧化
性能与对照组相比没有显著提高,反而降低了肉的
氧化稳定性。止痢草植物提取物具有抗氧化性是因
为其含有的活性成分经动物采食消化后进入了循环
系统。然而,贮存在肉中这些抗氧化成分的生物有
效性因缺乏相应的分析方法而无法鉴别和量化,这
有待下一步研究工作。
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欢迎报考中国农业大学动物科技学院在职专业硕士
招生领域:养殖领域和草业领域。
报考条件:国民教育序列大学本科毕业并取得毕业证书,应届本科毕业生也可报考。
报名方法 :在教育部学位与研究生教育发展中心网址 (http://www.cdgdc.edu.cn)和中国农业大学网 (http://www.cau.e-
du.cn)公布的时间进行网上报名,一般在7月中、上旬。现场报名一般在7月中、下旬。考生提供相关学历、学位材料(原件)
证明,到指定现场照相、确认报名信息。
考生将现场打印的资格审查表由所在单位人事部门签字盖章 (照片上加盖公章 ),然后将审查表 、相关学历 、学位证
书复印件,于规定时间寄到研究生院,地址:北京市海淀区圆明园西路2号中国农业大学专业学位办,邮编:100193。
考试方式:参加国家GCT考试和我校自行组织的专业考试和相关测试,考试时间预计10月份 。
学费标准:学制3年;学费共20000-24000元。
联 系 人:周建玉 电话: 010-62731338 13241277812 E-mail: dkcj@cau.edu.cn
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