全 文 ：广 西 植 物 G u i h a i a 4 ( i ) : 1 9一2 2一 , 5 4
圆叶娃儿藤离体组织培养的快速繁殖研究
邓 锡 青 梁 学 金 凌 征 柱
( 广西药用植物园 )
提婆 圆叶娃儿藤实生苗的上胚轴在 H + 6 一 B A Z 毫克 /升的培养基上可产生大蚤不定
芽 , 并发展成无根苗。 当无根苗转至 12/ M S + N A A 。 。 25 毫克 /升的培养基上 10 天后即可生
根获得完整再生植株并移栽成活 。 通过这一实验程 序已可使组织培养这一方法成功地作为圆叶娃
JL膝快速繁殖的一种手段 。
通过组织培养对一些有经济价值的植物进行快速繁殖的研究 , 以往已 有 不 少 报道 〔 ”
, , ” ` , , 〕。 其中有些植物的组织培养工作达到在生产上应用的程度 。 从而使这一方法有可能
成为加速繁殖及培养优良单株无性系的一种新的有效的手段 ,
圆叶娃儿藤为广西地区常用的一种野生中草药 , 在临床上有良好的镇痛作用, 长期以来
由于采集过度和人工繁殖缓慢等间题 , 一以致造成药源贫乏 , 为临床和科研 用 药 带 来很大困
难 , 为此 , 我们进行圆叶娃儿藤组织培养的研究 , 获得大量完整的再生植株和移栽成活 。 为
圆叶娃儿藤的快速繁殖提供新的途径 。
材 料 与 方 法
圆叶娃儿藤 ( T y l o p h o r a t r i e h o p h了l l a T s鑫a n g ) 为萝摩科多年生草本植物 。 种子经
0
。
1 %升汞消毒后 , 用无菌水清洗三次 , 再接种于 1 12 M S 基本培养基上 , 待种子发芽 , 幼
苗出现了 3 一 在 对真叶时 ,分别切取大小为 0 。 5 。 m 的上胚轴及子叶接种子 H 〔 “ 〕附加不同
浓度 6一 B A l 一 5 毫克 /升 的基本培养基上培养 , 及在 H 或 M S 培养基附加不伺激素
的培养基上继代培养和生根 , 培养材料培养于 25 士 1 ℃的培养室中 , 每日用日光灯照光 8 小
对 , 光强度为 1 5 0 0勒克斯。
试 验 结 果
一 、 不定芽的诱导和植株再生
圆叶娃儿藤无菌苗的不同外植体 , 在不同培养基上培养10 天后 , 除体积稍有增大外 , 在
形态上均未见明显变化。 接种后约两周 , 上胚轴在靠近子叶基部开始发生丛生的苗芽 , 继之
. 参加本项工作 的有吴其芳、 罗伟英、 李月格等同志。 本项研究工作得到桂纽林先生热偏帮助 , 该致绷密 。
广 西 植 物 春卷
靠 圣只一卜 一端的土胚轴表面直接出现大量黄色颗粒状突起 , 以后突起亦增大变绿而成为丛生的
芽状 , 随着黄色突起的增生和绿芽的扩大 , 外植体增殖为大小约为 1 . 5 x 1 . 北斑 的芽块 ,
并从子叶叶趟部位的芽丛中首先伸出明显的幼苗 ( 图 1 卜 稍后 , 其他芽点亦伸长成为明显
的小苗 ( 图 2 ) 。 经一月后统计 , 其结果如表 1 所示 。
表 1 不同浓度 6一 B A对圆叶娃儿藤上胚轴诱导不定芽诱导影响
组 别 : (戛爵矛 每块外植体上的苗数 苗 的 生 长 情 况
一 }一
H 十 B A I
H 十 B A Z
H 十 BA S
诱导频率
(% )
6 C
_
7
8 4 0
8 一 17
6 一 2 0
1 1一 韶
茎粗壮 , 节何长 , 叶 大
茎粗软 , 节间撰、 玲 大
茎细弱 , 贾阿盘1 叶小
I百二l
从表 1 可以看出 , 在不同浓度的 B A对不定芽的发生均有较好的作甩 , 而具随着浓堆的
增高效果也越好 。 但从苗的生长状况看 , 在组 I 、 1 中苗生长较为健壮 , 而组鱼中的苗
丛生而瘦弱 , 似有轻度的抑制影响 , 特别从继代培养中 也 发 现 , 只有第 n 组 H 十丑人 含毫
克 /升组合的材料生长最好 , 用芽团切割成小块进行继代培养 , 以每月继代一次计戴 其增
殖力约为原外植体的 10 倍 , 且在继代10 次以后 , 其再生力仍未见减弱 。
一瓢器黑黯“ · B` 峰克 /加最卿· ”卿颇 ,对于下胚轴或子叶的材料 , 在各培养基上一直未见分化。
二 、 苗的生根与移栽 -
为了使芽块上小苗不断正常生长 , 当其中有些伸长 3 c 。 左右及 3 对叶片时 , 可从其基
部切下并转入含不同生长素的M S培养基上生根 , 其绪果列于表 2 。
表 2 不同浓度生长素对翻叶娃儿膝生根钓影喻
培养基 ( 奄支 /升 ) 接种材料数( 条 ) 生棍的材料株盆 谁生根绷率 ( % ) 平均每株上的生撼签港
M g 千N A AO . 5
M S十丁夏人O 二 5
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在 l / ZM S 十 药 A A o . 25 毫克 Z升的培养基上 , 生根效果最为理想 , 当接种后约一周 ,
茎的基部开始膨大并出现少量节结 , 约 10 天左右就可以从茎基部或节结上伸也白色的札
如果将此等生根植株转移至不含激 素的减半 M S 培养基上「 卿可 使根系 更为爆睡上秘发达
( 图 3 从 且在移栽时更易成活 。 _ 几 -
根系生长良好的小植株经去掉棉塞锻炼 ” 一 导 天后 , 移于碎塘泥和细沙各半爵蕉葬中
( 图 4 ) 或直接栽于苗圃 ( 图 5 ) 。 目前已有 6 批组织苗移入土中。 移栽时间最长的已娜 1月之久 。 并且今春又发出了新枝 。
1 期 邓锡青等 : 圆叶娃儿藤离体组织培养的快速繁殖研究
图 1 一 2由上胚轴表面及子叶叶腋处产
生的丛生芽和小苗
图 3小苗在 1 / 2 M S+ M A A 0. 2 5毫
克 /升培养基上生根又转入 M S
培养基
为移栽在花盆中 n个月后的圆叶
娃儿藤
为移栽在土中一月后的圆叶娃儿藤
4 5图
讨 论
关于药用植物圆叶娃儿藤的离体上胚轴的组织培养研究 , 以往还未见有报道 。 该属植物
中 , 仅见印度 R a o 等 〔 . , “ 〕曾对印度娃儿藤作过一些形态发生的观察 。 从我们的实验结果看
来 , 由圆叶娃儿藤上胚轴诱导不定芽发生的方式与山植胚培养及苹果下胚轴培养 〔 3 , “ 产生
不定芽丛的方式十分相似 , 由于这种培养方式具有较大的增殖不定芽潜力 , 看来只要生根和
移栽这两个程序相应解决 , 就很有希望付诸实际应用 。
从圆叶娃儿藤上胚轴离体培养所得实验数据看来 , 由上胚轴诱导苗产生至生根移栽 , 前
后约经一个半月时间 , 加上每个外植体产生的芽数众多 , 这些条件都为快速繁殖提供了重要
前提 , 若是以这种速率计算 。 在理论上一个外植体一年就可产生上万株苗 , 这表明这一实验
程序可为建立圆叶娃儿藤的实验基地提供大量种苗 , 也有希望使这一方法作为快速繁殖手段
成为可能 。
2 2 广 西 植 物 4 卷
参 考 文 献
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m息n t a l A s p e e t : o f P l a n t C e l l , T i s s u e a n d o r g a n e u l t u r e . ” J . R e s n e r t a n d Y .
P
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B a j a j
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P l a n t a r u m
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c 认 1 t u r e s o f T y l o p h o r a i n d i e a . P h y s io l . P l a n t , 2 7 : 2 7 1一 27 6 .
ST UD IE S ON RAP ID P RO P AG AT ! ON O F T Y LO P HOR A
T R !C HO P HY LL A T S IAN G T HRO UG H T IS SU E C UL T U RE
D e n g X i
一 q i n g L i a n g X u e
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( G u a n g x i M e d i
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Ab s t r a c t
T y l o p h o
r a t r i e h o p h y l l a T s i a n g w e r e e u l t u r e d i n v i t r o
, e l u s t e r e d b u d s
a n d s h o o t s w e r e o b t a i n e d o n H b a s i e m e d i u m s u p p l e xn e n t e d w i t h 6
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2 m g / 1
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T h e s t e m o f s h o o t s w a s c u t o f f w h e n i t r e a e h e d 3 一 4 。 m i n
h e i g h t a n d h a d Z一 3 p a i r s o f l e a v e s , t h e n t h e e x e i s e d s t e m w a s t r a n s -
f e r r e d o n t o rn e d i u m w i t h l / 2 M S + N A A 0
.
25 m g / 1 f o r r o o t i n g
.
P l a n t l e t s
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e e n s u七e e s s f u l l y t r a n s f e r r e d i n t o p o t s o r 5 0 11 .
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5 p o s s i b l e t h a t t h e t e e h n iq u e o b t a i n e d w h o l e p l a n t l e t b y t i s s u e
e u l t u r e p r o v i d e s a n e f f e e t i v e m e t h o d f o r t h e r a p id p r o p a g a t i o n o f T y l o p
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