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鸢尾科植物对Epstein-Barr病毒早期抗原表达的诱导作用



全 文 :癌变·畸变·突变  1999年第 11卷第 3期               Carcinogenesis Teratogenesis and Mutagenesis Vol 11 No 3 1999
鸢尾科植物对 Epstein-Barr病毒早期抗原表达的诱导作用
钟建明1 黄长春2
1 苍梧县鼻咽癌防治所 广西 543100 2 广西药用植物园 南宁 530000
  曾毅报告 ,大戟科和瑞香科的一些植物和中草药
含有诱导 Raji细胞 Epstein-Barr(EB)病毒早期抗原
(EA)的物质(1)。我们的实验也证明在广西鼻咽癌高
发区苍梧县分布着许多能促 EB病毒的植物(2),在进
一步的研究中 ,发现鸢尾科的一些植物也有同样的作
用 ,现报告如下 。
材料与方法
1 材料 鸢尾科植物由广西药用植物园钅监定和提
供 ,采集晒干后切碎 ,用 100ml乙醚浸 3d ,蒸发乙醚
后每 10mg 提取物用 1ml乙醇溶解 。
2 方法 用带有 EB病毒的 Raji细胞培养于含10%
的小牛血清和 4mmol正丁酸钠的 RPM I1640培养液
中 ,加不同浓度的鸢尾提取液 ,同时做巴豆油阳性对
照和不加鸢尾提取液的阴性对照 ,在 37℃培养 72h ,
制成细胞涂片 ,用免疫酶法(3)检测 , 每次实验计数
500个细胞 ,算出早期抗原(EA)阳性细胞率 ,并用台
酚兰染色观察细胞的活性 。
结 果
检查鸢尾科 5个属的 13种植物 ,其中鸢尾属的
9种植物都有诱导 EA 作用 。细胞阳性率在 3.2%-
6%的有黄花鸢尾 、小花鸢尾和东方鸢尾 ,它们和不加
样品的阴性对照相比 ,差异有显著性(P <0.05)。阳
性率在 9.6%~ 14.8%的有硬叶鸢尾 、拟鸢尾 、鸢尾
种 、鸢尾 、蝴蝶花 、马蔺和射干属的射干均有较强的诱
导作用 ,与上面 3种植物相比 EA阳性率差异有高度
显著性)(P <0.01),但没有巴豆油强(附表)。其它 3
个属的植物EA阳性率在 0.4%以下 ,没有诱导作用 ,
它们是红葱属的红葱 ,唐昌蒲属的唐昌蒲 ,番红花属
的番红花。同时做对照试验 , EA 细胞的阳性率 ,培
养液中有正丁酸钠未加鸢尾提取液为 0.4%,加巴豆
油为 19.6%。
附表 鸢尾科植物诱导 EA阳性率
植   物 提 取 液
10μg/ml 2μg/ml
鸢尾属 黄花鸢尾 3.2 1.2
小花鸢尾 3.6 1.4
东方鸢尾 6.2 1.8
硬叶鸢尾 9.6 6.4
拟 鸢 尾 10.8 7.2
鸢 尾 种 11.6 8.1
鸢  尾 16.2 6.1
蝴 蝶 花 3.2 14.2
马  蔺 14.8 6.8
射干属 射  干 13.6 9.2
阳性对照 巴  豆 19.6 17.2
阴性对照 0.4
讨 论
蝴蝶花的提取液在 10μg/ml时 EA 阳性率为 3.
2%,比 2μg/ml的 14.2%低 ,这是因为该药在 10μg/
ml的浓度加到实验细胞上 , 3d后涂片观察该管细胞
活性仅为 30%,对细胞有毒性而影响 EA 抗原的表
达 ,而其它各样本的涂片细胞活性均在 90%以上。
鸢尾科 Iridaceae为单子叶植物 ,其中鸢尾属 Iris
Linn和射干属 Belameande Adans植物有较强诱导
Raji细胞 EB病毒 EA的作用 ,和巴豆油作用相似 ,已
知的促癌物 12 氧十四烷酰大戟二萜醇 13 乙酸脂
(TPA)是从巴豆油提取的 ,它能诱导 EB病毒对淋巴
细胞的转化 、并能促进由肿瘤病毒或化学致癌物质引
起的肿瘤生长 。在人鼻咽组织移植裸鼠中 , EB病毒
与 TPA和丁酸钠协同作用已成功诱发人鼻咽恶性淋
巴瘤和未分化癌(4), 鸢尾科这些阳性植物是否同
TPA一样也有促癌作用需继续研究 。鸢尾在广西的
南宁 、柳州 、玉林 、桂林 、苍梧县等地分布较广 ,常栽种
作为花卉观赏 ,药用根茎味甘辛性平和有消积通便止
血的功效 。射干味苦性寒 ,有清热解毒消炎止咳作
用 ,为常用的中药 。已有的实验结果提示:我们同时
应注意它们的副作用。 (下转第 146页)
RU486有明显的特异性 。
在活体研究中 ,通过将诱导系统共转染到小鼠成
纤维细胞 , 再移植到小鼠肌肉中 , 24 小时后给以
RU486诱导剂量 ,检测目的基因的表达 ,发现有明显
增高 ,超过背景的 10 倍 ,而且所需的诱导剂量低 ,对
正常的小鼠的内分泌系统不会产生明显的影响。
RU486可以进入大脑 ,利于中枢神经系统的诱导表
达。此系统所需的启动子和结合域都是经过改造的 ,
所以仍存在不能消除诱导背景的问题 , RU486是一
种受体拮抗剂 ,在某些正常的生理阶段是不能应用
的 ,怎样改变其对生理功能的影响而不产生副作用也
尚待解决 。
5 总结
过去的几年里 ,报道了很多关于诱导表达系统的
研究 ,以上四种是比较成熟的 ,可能有一定的应用前
景。另外的一些尝试如重金属离子反应性启动子 、热
休克蛋白反应性启动子及其它激素反应性启动子的
研究等 ,或是无诱导活性 ,或是造成内源基因的多种
效应 ,所以仍处于未定论的阶段 。总之 ,可诱导的基
因表达系统的研究虽己有了一些进展 ,但仍存在问
题 ,可我们相信随着研究的深入 ,会逐步成熟并走向
应用 。
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(上接封二)
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(1998-06-20收稿;1998-12-02修回)
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