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6种浙产铁线莲属植物的薄层色谱和紫外光谱组法鉴别



全 文 :第 31 卷 第 3 期
2 0 1 3 年 3 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 31 No. 3
Mar. 2 0 1 3





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6 种浙产铁线莲属植物的薄层色谱和紫外光谱组法鉴别
骆红飞,高晓洁,金艳
(浙江中医药大学附属第二医院,浙江 杭州 310005)
摘 要:目的:为威灵仙类药材的开发和利用提供鉴别依据。方法:采用薄层色谱法和紫外光谱组法对浙产
6 种铁线莲属植物进行分析鉴别。结果:扬子铁线莲、毛蕊铁线莲、柱果铁线莲的薄层色谱有其特征斑点;6 种铁
线莲属植物的紫外谱线组图谱存在差异。结论:方法简便、可靠,可用于鉴别该 6 种铁线莲属植物。
关键词:铁线莲属;薄层色谱;紫外光谱组法;鉴别
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1673 - 7717(2013)03 - 0655 - 03
Identification of Six Plants of Clematis L. in Zhejiang Province by
TLC and Ultraviolet Spectral Line Method
LUO Hongfei,GAO Xiaojie,JIN Yan
(Second Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University,Hangzhou 310005,Zhejiang,China)
Abstract:Objective:To provide a basis for the identification for developing and utilizing Medicinal Materias of Weil-
ingxian. Method:The chemical constituents of six plants of Clematis L. in Zhejiang province were analysed by TLC and
Ultraviolet line method. Result:Clematis ganpiniana,Clematis lasiandra Maxim. and Clematis uncinata had their unique
spots in the TLC;the UV spectrum of six plants of Clematis L. were different. Conclusion:The method was smiple and sta-
ble,and can be used to identify these six plants of Clematis L.
Key words:Clematis L.;TLC;ultraviolet spectral line method;identification
收稿日期:2012 - 10 - 19
作者简介:骆红飞(1970 -) ,女,浙江人,副主任药师,硕士,研究方
向:临床中药学。
通讯作者:高晓洁(1985 -) ,女,浙江人,中药师,硕士,研究方向:
药用植物学。E-mail:gaoxiaojie83@ 163. com。
中药威灵仙,为我国中医临床和民间常用的祛风止痛
类药物,正品威灵仙来源于毛茛科铁线莲属植物威灵仙
Clematis chinensis Osbeck、棉团铁线莲 Clematis hexapetala
Pall.、东北铁线莲 Clematis manshurica Rupr. [1]。随着对中
药资源的开发利用,铁线莲属植物中可作为中药威灵仙使
用的品种较多,仅据《浙江药用植物志》记载就有 7 个品
种[2]。本文收集了浙江常见的 6 种铁线莲属植物,采用薄
层色谱和紫外光谱法对其进行比较,获得较好的鉴别效果,
拟解决铁线莲属植物在性状、显微结构接近而难以鉴别的
不足,并为扩大威灵仙类药材资源提供依据。
1 仪器与材料
1. 1 仪器与试剂
GF - 254 高效薄层层析板;UV -2550 型紫外分光光度
计(波长范围:200 ~ 500 nm;狭缝:2 nm;扫描速度:中速) ;
ZF– I型三用紫外分析仪。盐酸、乙酸乙酯、甲醇、硫酸、
蒸馏水、无水乙醇、氯仿、石油醚(60 ~ 90 ℃) ,蒸馏水为重
蒸水,其余为分析纯试剂。
1. 2 材料
6种铁线莲属植物采自天目山和桐庐凤川西庄,经浙江中
医药大学张水利教授鉴定,为威灵仙Clematis chinensis Osbeck、
扬子铁线莲 C. ganpiniana(Levl. et Vant.)Tamura、粗齿铁线
莲 C. argentilucida(Levl. et Vant.)W. T. Wang、毛蕊铁线莲
C. lasiandra Maxim.、柱果铁线莲C. uncinata Champ.和山木通
C. finetiana Levl. et Vant.,分别阴干后取根茎粉碎。
2 方法与结果
2. 1 薄层色谱鉴别
分别精密称取样品粉末各 2 g 于 150 mL 圆底烧瓶内,
加入 40 mL蒸馏水,沸水浴回流提取 1 h,趁热抽滤,滤液定
容至 40 mL,加盐酸,使盐酸浓度为 10%,沸水浴回流水解
1 h。水解液用乙酸乙酯萃取(16 mL × 3 次) ,挥干乙酸乙
酯,残渣以甲醇溶解,定容至 5 mL,得供试品溶液。吸取供
试品在层析板上点样 10 μL,以 V(氯仿)∶ V(乙酸乙酯)=
2 ∶ 1 为展开剂,展至 7. 3 cm,取出,晾干,喷以 V(硫酸)∶ V
(甲醇)= 1 ∶ 2 溶液,置 105 ℃烘箱中烘至显色清晰。在可
见光和紫外灯 365 nm下分别进行观察,结果见图 1。
可见光下,威灵仙与其它 5 种植物的 4 个主斑点均一
一对应;365 nm荧光下,威灵仙、扬子铁线莲、粗齿铁线莲、
柱果铁线莲 Rf = 0. 64 的斑点和威灵仙、粗齿铁线莲、柱果
铁线莲 Rf = 0. 51 的斑点均显示蓝色荧光;扬子铁线莲、毛
蕊铁线莲在展开过程中就有一明显的黄色斑点随展开剂展
开,显色后颜色不变,并在 365 nm 下显示明显的黄绿色荧
光斑点,该斑点为扬子铁线莲、毛蕊铁线莲的特征斑点;柱
果铁线莲 Rf = 0. 85 的紫红色斑点也是其特征斑点。
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DOI:10.13193/j.archtcm.2013.03.209.luohf.072
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1.威灵仙 2.扬子铁线莲 3. 粗齿铁线莲 4. 毛蕊铁
线莲 5.柱果铁线莲 6.山木通
图 1 6 种铁线莲属植物齐墩果酸 TLC鉴别色谱图
2. 2 紫外光谱组法鉴别
取样品粗粉各 1 g,置 25 mL容量瓶中,分别加石油醚、
氯仿、无水乙醇、蒸馏水 20 mL,室温浸泡 2 h,振摇,滤过,滤
液用相应溶剂适当稀释后,置 1 cm石英比色皿中,以相应溶
剂做空白对照,在紫外分光光度计上扫描。结果见图 2 ~5。
石油醚提取液的 UV图谱:6 种铁线莲属植物 λmax 吸
收峰波长在(225. 00 ± 0. 50)nm,且在(265. 00 ± 5. 00)nm
均有吸收峰;毛蕊铁线莲在 262. 00、266. 50 nm 处有特征
峰。氯仿提取液的 UV 图谱:威灵仙、扬子铁线莲、粗齿铁
线莲、柱果铁线莲 λmax 吸收峰波长在(237. 00 ± 1. 00)
nm,毛蕊铁线莲 λmax为 273. 50 nm,山木通 λmax为270. 50
nm。无水乙醇提取液的 UV 图谱:威灵仙和扬子铁线莲与
其它四种的差别较大,威灵仙 λmax为 228. 00 nm处的吸收
峰明显高于其它几种植物,在 218. 50、278. 00 nm 有吸收
峰;扬子铁线莲的峰形与威灵仙基本一致;而其它四种植物
在 240 nm至 270 nm有多个吸收峰。水提取液的 UV图谱:
各植物之间差异不大,除威灵仙在 325. 00 nm 处有较强的
1.威灵仙 2.扬子铁线莲 3.粗齿铁线莲 4.毛蕊铁线莲 5.柱果
铁线莲 6.山木通
图 2 石油醚浸液的紫外光谱图
1.威灵仙 2.扬子铁线莲 3.粗齿铁线莲 4. 毛蕊铁线莲
5.柱果铁线莲 6.山木通
图 3 氯仿浸液的紫外光谱图
1.威灵仙 2.扬子铁线莲 3.粗齿铁线莲 4. 毛蕊铁线莲
5.柱果铁线莲 6.山木通
图 4 无水乙醇浸液的紫外光谱图
吸收峰,其它 5 种植物的 λmax 在 270 ~ 285 nm 之间,且峰
形均较平坦呈肩峰。
3 讨 论
(1)薄层色谱分析后发现 6 种铁线莲属植物主斑点的
Rf值和颜色均较接近,表明其含有部分相同的化学成分;扬
子铁线莲、毛蕊铁线莲、柱果铁线莲有其特征斑点,可作为
鉴别依据。
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1.威灵仙 2.扬子铁线莲 3.粗齿铁线莲 4.毛蕊铁线莲
5.柱果铁线莲 6.山木通
图 5 水浸液的紫外光谱图
收稿日期:2012 - 10 - 22
作者简介:王泓(1990 -) ,男,浙江杭州人,研究方向:药学。
通讯作者:何昱(1974 -) ,女,浙江人,副教授,硕士研究生导师,研
究方向:药物质量控制。E-mail:heyu0923@ hotmail. com。
(2)研究石油醚、氯仿、无水乙醇、蒸馏水 4 溶剂浸提
后测得的紫外谱线组图谱后发现,4 溶剂的紫外谱线组图
谱峰形除了无水乙醇提取液外,其余的水浸液、氯仿浸液和
石油醚浸液均十分接近,表明 6 种铁线莲属植物的主要成
分是类似的。同一提取液也存在明显区别的特征峰,可获
得较好的鉴别效果。
紫外光谱组法依据四种不同极性溶剂所溶解的物质不
同,其提取液的紫外吸收光谱的吸收峰位也不同,它们构成
6 种铁线莲属植物的特征性紫外谱线组图谱。同一提取液
不同种植物间既存在一些共有的吸收峰,也存在明显区别
的特征峰。因此,采用多溶剂紫外谱线组法,可以检测出不
同极性溶剂提取液的紫外吸收,通过综合比较六种铁线莲
属植物的图谱差异可获得较好的鉴别效果。本文所用薄层
层析法制样简便、灵敏度高。两者的结合应用,充实了传统
的鉴别方法。从资源开发的角度上来看,其余五种植物与
威灵仙含有相似的化学成分,应结合定量研究加以判断,本
文为威灵仙药材开发利用的后续研究作了铺垫。
参考文献
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典:1 部[S].北京:中国
医药科技出版社,2010:234.
[2] 浙江药用植物志编写组.浙江药用植物志.上册[M]. 杭州:
浙江科学技术出版社,1980:317.
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地瓜儿苗地上部分和地下部分中熊果酸
和齐墩果酸的含量测定
王泓,何昱
(浙江中医药大学,浙江 杭州 310053)
摘 要:目的:在薄层色谱定性的基础上,采用高效液相色谱法同时测定地瓜儿苗地上部分与地下部分中熊
果酸和齐墩果酸两种有效成分的含量,为扩大泽兰药源提供参考。方法:硅胶薄层色谱定性,高效液相色谱法定
量测定,色谱柱为 Agilent Eclipse XDB - C18(4. 6 mm × 150 mm,5 μm) ;流动相为甲醇 -磷酸二氢钠水溶液(7. 8 g
磷酸二氢钠用水溶解并定容至 1000 mL)88 ∶ 12;流速 0. 8 mL /min;柱温 20 ℃;检测波长:210 nm。结果:地瓜儿苗
地上部分与地下部分均含有熊果酸和齐墩果酸,但地下部分的含量较低,约为地上部分的 1 /6。结论:地瓜儿苗
可作为泽兰的原植物入药,但地下部分是否适合作为入药部位还需结合其它成分的研究,尚有待探讨。
关键词:地瓜儿苗;齐墩果酸;熊果酸;含量测定;HPLC;TLC
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1673 - 7717(2013)03 - 0657 - 03
Determination of Ursolic acid and Oleanolic acid in the Aerial Part and
Underground Part of Lycopus lucidus Turcz
WANG Hong,HE Yu
(Zhejiang Chinese Medical University,Hangzhou 310053,Zhejiang,China)
Abstract:Objective:To simultaneously determinate the two active ingredients:ursolic acid and oleanolic acid in aerial
and underground parts of Lycopus lucidus Turcz. after qualified by TLC,which provides a reference for medicinal source
expansion of lycopi herba. Methods:The qualitative analysis was achieved by silica gel TLC,and the quantitative chromato-
graphic separation was achieved by using HPLC system consisting of an Agilent Eclipse XDB - C18 column(4. 6 mm × 150
mm,5 μm) ,with the mobile phase consisting of methanol and sodium dihydrogen phosphate solution(7. 8 g sodium di-
hydrogen phosphate was dissolved in water and then diluted to 1000 mL)88 ∶ 12. The flow rate was 0. 8 mL /min,and the
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