全 文 ：园 艺 学 报 19 9 4, 2 1 ( 4 ) : 4 0 1一 40 3
A e t a H口 r t ie u h u r a e S in ic a
白菜 x 白芥属间远缘杂种黑斑病抗性研究 *
巩振辉 何玉科 ” 王 鸣
(西北农业大学园艺系 , 陕西杨陵 7 12 10 0)
关键词 白菜 ; 白芥 ; 属间杂交 ; 白菜黑斑病 ; 抗病性鉴定
S t u d i e s o n t h e R e s i s t a n c e o f I n t e r g e n e r i e H y b r id s o f C h i n e s e C a b b a g e
X W h i t e M u s t a r d t o A lt e r n a r i a L e a f S Po t
G o n g Z h e n h u i
,
H e Y u k e
, a n d W a n g M i n g
( oN
r rh w e s t e r n A岁 ic u ir u r a l nU iv e sr i r夕 , 介n g l in g hS a a n x i 7 12 10 0 )
K e y w o dr s C h i n e s e e a b b a g e ; W h i te m u s t a r d ; I n t e r g e n e r ie c r o s s ; A l te r n a r i a l e a f s P o t ; I n d e n ti if
e a t io n o f d i s e a s e
1 目的与材料方法
大白菜黑斑病 〔A l t er n ar ia b ar s ic ae ( B er k . ) S ac c . 〕 在我国部分地区某些年份的危
害程度已超过病毒病 、 霜霉病和软腐病三大病害 , 成为大白菜生产中的重要病害。 开展大
白菜抗黑斑病育种已成为大白菜生产 与科研中一项紧迫任务 。 白芥 ( S in a isP a lb a L . ) 对
十字花科多种病虫害 有极高的抗性 ( F r o l y a k i n , 19 9 1; G o li n o w s k i , 19 9 1; G r i s h e c h -
k i n a
,
19 8 8 ; M u
e h l c h e n
,
1 9 9 0 ; S a li s b u r g
,
19 8 7 )
, 已受到 欧美一些学 者的高度重视 。
将白芥的抗病基因导人大白菜 目前尚未见报道 , 本试验以对白菜黑斑病免疫的白芥品种为
抗源 , 试图通过白菜与 白芥属间杂种子房和胚珠培养的方法 , 将白芥的抗病基因导入 白菜
与白芥属间双单倍体 , 并就杂种对白菜黑斑病的抗性进行鉴定分析。
供试白芥品种 J l 。 引自荷兰 。 供试白菜品种 5 份 , 分别为 N W , 、 N W Z、 N W 3 、 N W 4
和 8 0一 7 , 其中前 4 份 由西北农业大学芸墓属蔬菜课题组提供 , 8 0一 7 为杂种一代 , 由西北
农业大学蔬菜站提供。
L l 杂种子房培养 以供试 5个白菜品种为母本 , 白芥品种 lJ 。为父本 , 于开花前 2 天去
雄套袋 , 开花当天授粉 。 切取授粉后第 6 天的子房 , 测量子房长度后 , 用 70 %酒精浸泡 1
分钟 , 再用 0 . 1% 升汞消毒 10 分钟 , 然后用无菌水冲洗 3 次 , 接种在 W hi et 培养基上 ,
其中附加改良的 W hi t e 维生素 、 I A A 1 . s m g / k g 、 蔗糖 509 / k g 、 白菜花器提取液 (每
10 0 m L 水加白菜当天开放花器 50 个 , 开水煮沸 5 分钟后过滤 ) 50 m L / L 、 琼脂 .0 8% 。
收稿 H期 : 19 9 4一 0 1一 10 ; 修回 日期 : 1 9 94 一 0 6一 0 6。
* 国家白然科学基金资助项目。 * * 现在 卜海植生所工作。
园 艺 学 报 1 2卷
接种后置于 2士 2℃ , 光照强度 1 5O l0 x , 每天光照 14 小时的培养室 中培养 36 天后 , 调查
统计培养子房数 、 成熟角平均长度 、 获得的种子数 、 杂种种子在 M S 无激素培养基中的
发芽数和杂种种子发芽率。
L Z 杂种胚珠培养 为提高杂种胚珠成苗率 , 选在上述 W ih et 培养基及附加成分中培养
两周的子房 , 在超净工作台上剥出胚珠 , 接种在 M S 培养基上 , 其中附加白菜花器提取
液 50 0m L / L 、 N A A O. l m g / k g 和 K T O . l m g / k g 。 培养条件及调查统计项 目同子房培
养 。
L 3 染 色体标 本的制 作 与观察 取根尖或幼叶 , 采用铁钒一苏木精染色法 (周春生等 ,
198 3 )
, 在 o ly m p u s 显微镜下检查染色体。
1 .4 杂种苗的扩繁培养 以 M S + 3m g / k g B A + .0 5一 l m g / k g IA A 培养基诱导茎段 、 叶
片 、 叶柄 、 下胚轴生芽 ; M S + 3m g / k g K T 培养基诱导根段生芽 , 幼苗切下转移到无激
素 M S 培养基诱导生根 (何玉科等 , 19 92) 。
L S 离体培 养叶人工接种黑斑病 鉴定 病原由陕西省蔬菜研究所提供 。 病原菌经回接在
白菜上恢复致病力后 , 经 分离纯化 , 在 P D A 培养基上保存繁殖 , 接种浓度为 10 “ / m L
个抱子 。 每个株系取经繁殖培养的叶片 8 片 (直径 2 . 5一 c3 m ) , 重复 3 次 , 共 24 片叶 ,
用灭菌牙签蘸取约 1 5拜 L 抱子悬浮液在叶片主脉一侧刺孔接种 , 接种后将接种叶插人不含
激素的 M S 培养基 , 避光保湿 48 小时后置培养室 内 2 士 2℃下 , 光照强度 1 5 0 l0 x , 每天
14 小时光照 , 第 5 天统计病情指数 。
2 结果与分析
.2 1 白菜 x 白芥杂种子房培养 试验结果表明 , 供试的 5 个白菜 x 白芥杂交组合 , 在离
体子房培养条件下 , 成熟子房发育的长度大致相 同 , 且各个组合均获得了杂种种子和杂种
苗 。 每个接种子房 , 获得的种子数为 1 . 8一 .2 4 粒 , 平均 2 .0 4 粒 ; 获得的杂种苗 1 . 5一 2 . 15
株 , 平均 1 . 7 4 株 。 .
.2 2 白菜 X 白芥杂种胚珠培养 将培养 2 周的子房从培养基取出 , 剥出胚珠 , 进行胚珠
培养 。 结果表明 , 接种每个子房可获杂种苗 .2 08 一 2 . 4 2 株 , 平均 2 . 23 株 。 显然 , 对 白菜
x 白芥杂种进行子房和胚珠结合培养会明显提高杂种苗的获得率 。 不同组合提高的幅度有
差异 。 N W : x lj 。组合提高的幅度最大 , 杂种苗的获得率是单进行子房培养的 1 . 4 倍 ;
N w
; X IJ
。组合提高的幅度最小为 1 . 12 倍 。 5 个组合平均为 1 . 28 倍。 由此可见 , 对于远缘
杂种的培养 , 适时将子房培养转入胚珠培养是提高杂种苗产量的一种可行方法 。
.2 3 杂种染 色体观察 杂种苗根尖或幼叶体细胞染色体分析发现 , 在不 同组合中均有 3
种 ( 10 、 20 和 2 条 ) 染色体的植株 。 显然 , 具有 2 条染色体的植株为白菜与 白芥的双
单倍体 , 证明确为真杂种 ; 具有 10 条或 20 条染色体的植株形态特征和母本接近。 如果以
这些植株作为假杂种 , 则不 同组合 中平均真杂种占 87 . 31 % , 其 中 N W : X J 10 的真杂种比
例最高 , 为 92 . 86 % ; 80 一 7 X J l。 的真杂种比例最低 , 为 80 .7 7% 。
.2 4 杂种 幼 苗 离体培养叶人工接种黑斑病抗性鉴 定 白菜离体叶黑斑病抗性鉴定在我国
已有报道 (齐秀菊 1993 ; 刘焕然 19 9 0) , 认为离体叶黑斑病人工接种鉴定可用于大白菜黑
斑病抗性鉴定 。 本试验在上述研究的基础上 , 对白菜 火 白芥的属间杂种苗单株进行黑斑病
抗性 鉴定 。 结果表明 (表 ) , 供试 白菜品种 N w l 、 N w 3 为 感病品种 ; N w Z、 N w ; 和
4期 巩振辉等 :白菜 x白芥属间远缘杂种黑斑病抗性研究
0 8一 7为高感 ;白芥品种 Jl。 对黑斑病免疫 。 白菜 x白芥的 5个组合杂种的群体抗性 , 有 2
个表现为耐病 , 3 个表现为抗病。 尽管如此 , 我们仍在不 同组合里获得了一批高抗或抗病
株系 , 还在 N w l x J 10 、 N W 3 x lj 。 和 80 一 7 x lj 。 属间杂交组合里获得了免疫株系 。 进一步
开展对这些材料的选育研究 , 对创造高抗甚至免疫白菜黑斑病的种质材料有重要作用 。
表 白菜 x 白芥杂种苗离体培养叶人工接种黑斑病的抗性表现
T a le6 T h
e er s i st a n e e ot A let r n a ir a le a f s op t
o f lt
e h y b ir ds k wt
e e n B r a s s ic a e a从谬 s t r is x S in a 尸 5 a lb a b y a irt 反 i a l加 o c u -
l a it o n 劝ht d e t a e卜ed C u l加 t e le va e s
组合或品种
C r o s s c o m b i
n a t i o n s
o f CU l t iV a f S
接种株系数
群体抗病性表现
D i se a s e r e s i s t a cn
e o f P o P u la t i o n
N o
.
o f li l e s i n 0 Cu la et d 病情指数
D i阴 a s e In d e X
扰病性类型 .
T y p e s o r d i s e a s e er
s is t a n c e
.
N W
一 10 6 8名 S
N W
Z 10 9 1
.
1 H S
N W
3 10 7 5
.
5 5
N W
4 10 8 8
.
9 H S
8 0一 7 10 8 6
.
7 H S
J一0 10 0 0 1
N W
, x J l o 10 3 0
.
0 R
N W
Z X J l o 10 4 6
.
7 T
N W
3 X J一0 10 2 7
.
8 R
N W
4 X J一0 10 2 4 . 4 R
8 0一 7 x J一0 10 3 4 . 4 T
,
l
,
H R
,
R
,
T
,
S
,
H S 分别代表免疫 、 高抗 、 抗病 、 耐病 、 感病和高感 。
*
I
,
H R
,
R
,
T
,
S
,
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, s u s e e P t i b ili ty a n d h ig h
s u s e e p t i b ili ty er
s p e e t iv e ly
.
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