全 文 ：落 叶 果 树　DECIDUOUS　FRUITS　1998 (4)
苹果属植物对褪绿叶斑病毒(CLSV)的抗性鉴定
肖　艳　黄建昌 成明昊　李育农
(仲恺农业技术学院园艺系　广州　510225) (西南农业大学园艺系)
　　摘　要　该文以变叶海棠为砧木研究了 26个种类的苹果属植物对褪绿叶斑病毒(CLSV)侵染后的反应。试验结果
表明 ,受CLSV 侵染后 , 26个种类的苹果属植物嫁接成活率降低 ,生长量减少 ,嫁接相对成活率的变化与植物的带毒量有极
显著的负相关(r=-0.9361＊＊)。对砧木和接穗粗度影响不大 ,对株高影响明显 ,其变化与其植株的带毒量有显著的正相关
(r=0.8048＊＊)。叶片叶绿素含量降低 ,叶绿素成份 a/ b比值升高。根据上述指标 ,综合分析和评价了苹果属植物对 CLSV
的抗性。
关键词　苹果　砧木　褪绿叶斑病毒　抗性
　　苹果褪绿叶斑病毒(CLSV)为潜隐性病
毒 ,对嫁接成活 、树体生长及果实产量与品质影
响较大[ 1 ,2 ,3] ,但其危害在不同砧木 、接穗种类
及其组合之间存在着差异 。本文试图从我国丰
富的苹果属植物资源中筛选对 CLSV抗性强的
种类 ,为苹果生产和科研工作者选择砧木提供
依据 。
1　材料与方法
1.1　材料
试材取自西南农业大学果树研究室苹果属
植物种质圃(见表 1)。CLSV 毒源材料引自中
国农业科学院郑州果树所 。
1.2　方法
于10月份将 CLSV 毒源 P204材料的 2 个
芽腹接在变叶海棠实生砧上 ,成活后第 2年春
季(2月底)在其上 2 ～ 3cm处切接供试材料 ,各
重复 10 ～ 15株 ,同时在末接 CLSV毒源 P 204的
变叶海棠实生砧上切接供试材料 ,每类 10 ～ 15
株作对照 ,3月中旬调查嫁接相对成活率(病株
成活率/健株成活率);生长停止后调查植株生
长量(砧木和接穗粗度 ,株高),用同种健株与病
株平均数之差表示 CLSV 对不同种类的影响;
病毒提取参照 Lister et al方法[ 6 ,10] ,稀释液在
V Ⅴ-120紫外分光光度计 220 ～ 300nm 波长
范围扫描 ,再测定 260nm 、280nm 及最大吸收
峰波长外的吸光度(Amax),用 A260/A280 定
性检测 CLSV ,Amax 表示组织病毒含量的相对
高低 ,叶绿素的测定采用丙酮乙醇混合液法测
定[ 7] ;苹果属植物对 CLSV 的抗性评定采用模
糊数学中隶属函数的方法[ 8] 。
表 1　试　材　种　类
种　　类 来源
毛山荆子(Malus mansh urica Komorov.) 辽宁熊岳
丽江山荆子(M.rockii Rehd.) 四川昭觉
小金海棠(M.xiaoj inensis Cheng et Jiang.) 四川小金
冬红(M .pumi la va r.niedz wetzkyna Dieck.) 甘肃敦煌
酸苹果(M .pumi la Mill.) 甘肃武威
甜果子(M .pumi la Mill.) 甘肃武威
冬白果(M .pumi la Mill.) 甘肃敦煌
花红(M .asiat ica Nakai.) 四川北碚
矮花红(M .asiatica Nakai.) 四川巴县
沙果(M .p runi folia Borkh.) 陕西临潼
助列涅特(M .pruni folia Borkh. 辽宁熊岳
崂山柰子(M .pruni folia Borkh.) 山东青岛
小红海棠(M .pruni folia Borkh.) 辽宁旅大
楸子(M .p runi folia Makino.) 甘肃武威
莱芜难咽(M .m icromalus Borkh.) 山东青岛
新疆野苹果(M.sieversii Roem.) 新疆沁源
三叶海棠(M .siebold ii Rehd.) 美国
陇东海棠(M .kandaensis Schneid.) 四川小金
变叶海棠(M .toringoides Hughes.) 四川马尔康
花叶海棠(M .t rand itoria S chneid.) 四川阿坝
沧江海棠(M .ombrophi la Hand-Mazz.) 四川盐源
河南海棠(M .honanensis Rehd.) 四川南坪
滇池海棠(M .yunnanensis S chneid.) 四川盐源
沙金海棠(M .sargenti i Rehd.) 美国
西伯利亚海棠(M.robusta Rehd.) 美国
森林苹果(R12740-7A)(M .sy lvestris Mill.) 河南郑州
　本文于 1998-07-07收到
—3—
DOI :10.13855/j.cnki.lygs.1998.04.002
2　结果与分析
2.1　CLSV侵染对嫁接成活和生长的影响
26个种类的苹果属植物经 CLSV 侵染后 ,
12种嫁接成活率降低(表 2)。CLSV对砧木粗
度和接穗粗度影响甚小 ,但对树高影响明显 ,有
19 个 种 类 树 高 降 低 , 其 中 森 林 苹 果
(R12740-7A)、冬白果树高较健株低 30cm 以上 ,
而楸子 、沙果 、陇东海棠 、甜果子等种类嫁接成
活和株高都未受 CLSV 的影响 ,表明其抗性较
强。
表 2　CLSV 侵染后病毒提取液吸光度 、　嫁接相对成活率及生长量的变化
种　　类
病毒提取液
吸光度(Amax)■D/ 273nm.g
嫁接相对
成活率(%)
株高均
差值(cm)
森林苹果
(R12740-7A) 1.620A 41.67＊＊ 32.70＊＊
丽江山荆子 1.550A 55.00＊＊ 26.70＊＊
毛山荆子 1.530A 43.00＊＊ 28.00＊＊
冬白果 1.481A 55.71＊＊ 30.20＊＊
三叶海棠 0.950B 70.05＊＊ 25.55＊＊
小红海棠 0.824C 73.33＊＊ 20.75＊＊
矮花红 0.780C 74.45＊＊ 23.60＊＊
变叶海棠 0.745C 80.00＊ 19.00＊＊
沙金海棠 0.730C 84.28＊ 14.40＊
西伯利亚海棠 0.700D 81.43＊ 20.80＊＊
冬红 0.695D 85.82＊ 19.86＊
小金海棠 0.690D 100.00 16.50＊
滇池海棠 0.650D 76.57＊ 17.60＊
花红 0.642D 92.86 9.20＊
沧江海棠 0.642D 90.62 10.25＊
莱芜难咽 0.630D 90.00 12.45＊
河南海棠 0.620D 94.78 9.50＊
崂山柰子 0.613D 92.59 17.33＊
助列涅特 0.610D 93.50 22.09＊＊
沙果 0.590D 94.08 3.25
新疆野苹果 0.580D 95.71 6.00
酸苹果 0.480E 96.57 7.79
花叶海棠 0.454F 96.51 5.70
陇东海棠 0.452F 97.60 4.87
楸子 0.450F 97.71 4.60
甜果子 0.430F 97.71 8.40
　注:方差分析采用α=0.01的显著水平;“ ＊＊”表示健株与
病株相比达到差异极显著水平;“ ＊”表示健株与病株相
比达到差异显著水平
2.2　CLSV 侵染后对组织带毒量影响
病毒粒体由核酸和蛋白质组成 ,其核酸和
蛋白质在260nm 和 280nm 左右 ,有强烈的紫外
吸收 ,由于病毒的 260nm 和280nm吸收的比值
(A260/A280)因种类而异 ,故可用 A260/A280
进行定性鉴定[ 9] , 本试验所测材料提取液的
A260/A280都接近 1.85 ,与有关报道[ 10]基本
一致 ,表明提取液正是 CLSV 制剂 。病毒提取
液的吸光度(紫外区最大吸收值处),可以表示
植株带毒量的大小 ,可在其他条件一致的情况
下作为植物抗性的一个很有价值的指标[ 9] 。
表 3　CLSV 侵染后叶绿素的变化
种　类
病株
叶总
(mg/g)
叶 a/
叶 b
健株
叶总
(mg/ g)
叶 a/
叶 b
相对
值%
(病/健)
酸苹果 2.09 1.48 2.10 1.46 99.52
楸子 2.08 1.85 2.11 1.75 98.57
甜果子 1.75 1.70 1.79 1.58 97.76
陇东海棠 2.11 1.84 2.18 1.68 96.79
花叶海棠 2.18 1.50 2.26 1.32 96.46
沙果 2.18 1.68 2.31 1.37 94.37
新疆野苹果 2.13 1.80 2.28 1.49 93.42
助列涅特 1.59 1.64 1.76 1.55 90.34
崂山柰子 2.20 1.53 2.44 1.42 90.16
河南海棠 1.86 1.72 2.09 1.68 89.00
莱芜难咽 2.44 1.65 2.74 1.32 89.05
沧江海棠 1.61 1.35 1.82 1.21 88.46
花红 2.23 1.71 2.53 1.34 88.14
滇池海棠 1.57 1.37 1.80 1.25 87.22
小金海棠 1.77 1.65 2.03 1.57 87.19
西伯利亚海棠 1.86 1.61 2.15 1.43 86.51
冬红 1.80 1.52 2.09 1.46 86.12
沙金海棠 1.58 1.50 1.85 1.42 85.86
变叶海棠 1.86 1.43 2.18 1.36 85.32
矮花红 1.78 1.55 2.09 1.44 85.17
小红海棠 2.03 1.53 2.40 1.40 84.58
三叶海棠 2.27 1.42 2.69 1.25 84.39
冬白果 1.56 1.32 1.86 1.20 83.87
毛荆子 1.75 1.59 2.11 1.48 82.94
丽江山荆子 1.93 1.54 2.34 1.40 82.48
森林苹果
(R12740-7A) 2.43 1.58 2.99 1.29 81.27
　注:叶总为叶绿素总量;叶 a 为叶绿素 a;叶 b为叶绿素 b;相
对值%为病株叶绿素与健株叶绿素含量之比
本试验测出不同材料的提取液在最大吸收峰
—4—
273nm 处的吸光度有所不同 ,对结果进行方差
分析表明:森林苹果 、丽江山荆子 、毛山荆子 、冬
白果的吸光度显著高于其他种类 , 说明对
CLSV 抗性弱 ,而陇东海棠 、楸子 、甜果子的吸
光度则显著低于其他各种材料 ,说明对 CLSV
抗性较强 ,其他介于两者之间 。以此为指标 , 26
个种类的苹果属植物对CLSV 抗性强弱顺序见
表 2。植株的带毒量与嫁接相对成活率的变化
有显著的负相关(r=-0.9361＊＊),带毒量高 ,
嫁接成活低 ,反之嫁接成活高 ,而与株高均差呈
显著正相关(r=0.8084＊＊)。
2.3　CLSV侵染后植株叶绿素含量的变化
由表 3可见 ,本试验所测的 26个种类的苹
果属植物病株叶片的叶绿素含量显著地较健株
叶片低 ,叶绿素 a/b比值则较健株叶片略高 ,表
明CLSV 侵染后会引起叶绿素含量降低及叶绿
素成分的变化 ,但不同种类的反应不一 。叶绿
素含 量 减 少 最 为 显 著 的 是 森 林 苹 果
(R12740-7A),丽江山荆子 、毛山荆子等 ,表明这
些种类受CLSV 影响大 ,对CLSV 敏感;而酸苹
果 、楸子等变化较小 ,对 CLSV 抗性较强 ,其他
介于两者之间(表 3)。
2.4　苹果属植物对 CLSV 抗性的综合评定
本文用病毒提取液吸光度 、树高平均数差 、
叶绿素相对含量 、嫁接相对成活率 4项指标的
隶属函数均值大小来对苹果属植物 26个种类
的抗性进行了综合评定 ,以隶属函数均值的大
小排列不同种类对 CLSV 抗性强弱 ,综合结果
表明:楸子 、酸苹果 、陇东海棠 、甜果子 、花叶海
棠 ,隶属函数均值达 0.90以上 ,对 CLSV 抗性
最强;而新疆野苹果 、崂山柰子 、河南海棠 、沙果
抗病性较强;莱芜难咽 、沧江海棠 、花红 、助列湟
特 、小金海棠 、沙金海棠 、滇池海棠 、冬红抗病隶
属函数均值在 0.55 ～ 0.7之间 ,抗性中等;变叶
海棠 、三叶海棠 、西伯利亚海棠 、矮花红 、小红海
棠抗病隶属函数均值在0.55 ～ 0.3之间 ,抗性
较弱;森林苹果(R12740-7A)、冬白果 、毛山荆子 、
丽江山荆子等隶属函数均值在 0.2 以下 , 对
CLSV 表现敏感 。
3　讨论
CLSV 侵染后能导致苹果植物嫁接异常 ,
成活率降低 ,生长量减少 ,但不同种类之间存在
较大差异 。这种现象国内外都有过报道[ 3 , 11] ,
现已证明这种由CLSV 侵染引起的嫁接不亲和
现象 , 大多情况下是由于砧木不耐病所引起
的[ 5] 。本试验所用丽江山荆子 、三叶海棠等行
无融合生殖 , CLSV 对其嫁接影响明显 , 而楸
子 、酸苹果等对 CLSV 抗性强 , 基本上不受
CLSV影响 ,表明苹果属植物受 CLSV 侵染后
嫁接成活率很大程度上决定于砧木 ,因此选择
抗 CLSV的砧木种类对苹果生产显得特别重
要 ,但 CLSV 引起嫁接不亲和现象还应从解剖
学上作进一步研究。
在丰富的苹果属植物资源中 ,不同种类对
CLSV的侵染反应不一。森林苹果(R12740-7A)
是国际通用的 CLSV 的指示植物[ 1] 。本试验
用抗病性隶属函数均值所得的结果大多与上述
一致 ,所测的 26个种类的苹果属植物中 ,森林
苹果(R12740-7A)最敏感 ,有无融合生殖型的种
类如丽江山荆子 、三叶海棠 、变叶海棠等对
CLSV较敏感 ,但小金海棠却与此不符 ,具有中
等抗性 ,故认为无融合生殖类型对 CLSV 的抗
性有多样性的表现 ,这方面有待进一步研究;楸
子 、酸苹果 、陇东海棠等对CLSV 则抗性强 。表
明本试验所用这几项指标综合鉴定苹果属植物
对 CLSV 抗性是比较准确可靠的方法。
参考文献
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