全 文 ：贵州农业科学 2 0 0 6 , 3 4 ( 2 ) : 1 4一 1 7
G u i z h
o u A g r i e u l t u r a l S
e i e n e e s
阿盛 l窗 [文章编号〕1 0 0 1一 3 6 0 1 ( 2 0 0 6 ) 0 2一 0 0 5 0 一 0 0 1 4 一 0 4
荞麦属植物叶片及其愈伤组织中的总黄酮含量
王爱国 , 陈庆富 ’
(贵州师范大学 生物技术与工程学院 植物遗传育种研究所 , 贵阳 5 0 0 01 )
[摘 要〕 以 荞麦属植物叶片为外植体诱 导愈伤 组织 , 来用 分光光度法测 定荞麦属植 物叶片及其愈伤 组织 中总黄 酮 的含
量 , 筛选出富含总黄酮 的品 系及其愈伤 组 织细 胞 系 , 为遗传改良培育新品种和工厂 化 生产芦丁 打下基础 。〔关键词 〕 荞麦属 ; 总黄酮 ; 叶 片 ; 愈伤 组织
[中图分类号〕 5 5 1 7 ; Q 9 4 5 . 1 7 + 3 〔文献标识码〕 A
T o t a l F la v o n e C o n t e n t s in L e a f a n d it s C a l lu s ( L e a f U s e d a s E x P la n t )
O f B U C k
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W h e s t G e n U S
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一
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a n g 5 5 0 0 0 1
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A b s t r a e t : C a l lu s 15 in d u e e d f r o m l e a f o f aF g
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P 夕r u m M i ll
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f la v o n e s a r e s e l e e t e d a f t e r d e t e r m in in g t o t a l fl a v o n e e o n t e n t s in le a f a n d e a ll u s o f F a g o P夕 r u m M il l b y s p e e t r o m e t e r , w h ie h la y s
a g o o d f o u n d a t io n fo r b r e e d in g n e w v a r ie t i e s a n d p r o d u e in g R u t i n o n la r g -e s e a l e
.
K e y w o r d s : 凡 g o P夕 r u m M il l ; t o t a l f l a v o n e s ; l e a f ; e a l l u s
荞麦属 ( F a g o P y ur m M il . )属于被子植物门种
子植物亚门双子叶植物纲寥目寥科 [ ’一 2」 , 在世界上
分布较广 , 几乎遍及所有种植有粒作物的 国家闭 。
荞麦属植物含有丰富的黄酮类化合物芦丁 ( R ut in ,
也称芸香昔 、 维生素 P 、 紫懈皮昔 ) 。 据赵玉平 、 肖春
玲的研究表明 ,荞麦不同器官所含总黄酮中的芦丁
含量有所差异 ,其中叶片总黄酮中芦丁约占8 6 . 4% ,
比其他器官都 高川 。 芦 丁可以 降低毛细血管通透
性 、 维持血管正常的渗透压 , 有助于保持 、 恢复毛细
血管的正常弹性 ,治疗闭塞性脑血管症 ,临床用于脑
血栓所致 的偏瘫 、 失语以及动脉硬化 等症比 5〕 。 本
研究以荞麦属植物幼叶为外植体诱导愈伤组织 , 采
用分光光度法测定荞麦属植物幼叶及其愈伤组织中
总黄酮的含量 ,筛选出富含总黄酮的品系及其愈伤
组织细胞系 ,为遗传改良培育新品种 和工厂化生产
芦丁打下基础 。
1 材料与方法
1
.
1 供试植株
实验材料的种类 、 名称 、 原产地见表 1 、 表 2 。 所
有实验材料全部由贵州师范大学生物技术与工程学
院植物遗传育种研究所提供 。
1
.
2 仪器与试剂
7 5 5 B 型紫外可见光分光光度计 (上分 ) , F仆 1
冷冻干燥器 ,数显水浴恒温震荡器 , 超净工作台 , 光
照培养箱 。 M S 大量元素 、 微量元素 、 维生素 、 氨基
酸 、 2 , 4一 D 、 6一B A ,均为分析纯 。 芦丁标准品 , 中国药
品生物制品检定所 ; 甲醇 , 95 % 乙醇 ,亚硝酸钠 、 硝酸
铝 、 氢氧化钠均为分析纯 。
1
.
3 实验方法
1
.
3
.
1 愈伤组织诱 导 于荞麦初花期 , 剪取 同一
环境条件下的荞麦植株上完全展开 的幼叶 , 流水清
洗后沥干 。 在超净工作台上进行如下操作 : 用 75 %
酒精浸泡 30 5 , 0 . 1%升汞 (含少量吐温 8 0) 溶液中浸
泡 15 m in , 无 菌 水 冲洗 5 次 ; 将 幼 茎及 叶柄 切成
0
.
5 。 m长的切段 , 幼叶切成 0 . 5 c m “ 的方块 作外植
体 ,分别接种于 M S + 2 ` o m g / L Z , 4一 D + 1 . s m g / L
6
一
B A的愈伤组织诱导培养基上进行愈伤组织诱导 。
M S 为基本培养基 ,附加 3%蔗糖 、 5 0 m g / L 水解乳
蛋白 、 0 . 85 %琼脂 , p H 5 . 8 。 材料均在温度为 ( 25 士
2) C的光照培养箱内培养 。 愈伤组织诱导阶段不需
要光照 ,增殖阶段光照强度 3 。。 o L u x 。
1
.
3
.
2 线性关 系考察 参 照张宏志等圈 , 精密称
取经冷冻真空干燥后 的芦丁标准品 97 . 6 m g , 定容
于 10 0 m I J 容量瓶 中 , 得到芦丁标准品溶液 。 分别
吸取 0 . 0 、 1 . 0 、 2 . 0 、 3 . 0 、 4 . 0 、 5 . o m L 芦丁标准品溶
液于 2 5 m L 容量瓶中 , 加 5% N a N O Z溶液 1 . o m L ,
混匀 ,放置 6 m i n ; 加 10 % A I ( N O 3 ) 3溶液 1 . o m I J ,
混匀 ,放置 6 m i n ; 加 l m o l / L N a O H 溶液 I O m L ,再
加去离子水至刻度 ,摇匀 , 放置 1 5 m i n , 于 SO O n m 处
测吸光度 ( A ) 。 用最小二乘 法作线性 回归 , 得 芦丁
吸光度 ( A ) 与浓度 (W ) 的关 系曲线 的回归方程 , 并
求得其相关系数 , R 以考察线性关系 。
1
.
3
.
3 样品制备 荞麦初花期完全展开的幼叶及
[收稿 日期 ] 20 0 5一 2 1一 10 ; 2 0 0 6一 0 3一 0 2 修 回
[基金项目〕 国家 自然科学基金 ( 3 0 2 7 0 8 5 2 , 3 0 4 7 1 1 16 )〔作者简介〕 王爱国 ( 19 7 0一 ) , 男 ,硕士研究生 ,从事资源植物组织培养及药用成分含量分析 。
* 为通讯作者 。 贵阳市宝 山北路 1 16 号 ,贵州师范大学生物技术与工程学院植物遗传育种研究所 。 E 一m ial : qe f l 9 6 6 @ 1 63 . co m 。
第 2期 王爱国 等 荞麦属植物叶片及其愈伤组织中的总黄酮含量 1 5
其 03 d龄的愈伤组织 ,流水清洗后沥干 , 真空冷冻干
燥 (一 50 ℃ , 2 4 h ) ,研磨后过 4 0 目筛 。 取 10 0 m g 干
粉于 10 m L 容量 瓶 中 , 加入 60 m L 70 % 的酒 精 ,
6 0℃水浴并振荡 s h ,过滤 ,用 70 % 的酒精定容 。
1
.
3
.
4 总黄酮测定 取样品 1 m L 于 25 m L 容量
瓶中 ,加 5% N a N O Z溶液 1 . o m L , 混匀 , 放置 6 m i n ;
加 10 % A I ( N O 3 ) 。溶液 1 . o m L , 混 匀 , 放置 6 m i n ;
加 l m ol I/ J N a 0 H 溶 液 10 m L , 再加去离子水至刻
度 ,摇匀 ,放置 1 5 m i n , 于 SO 0 n m 处测 吸光度 ( A ) 。
试剂空 白作参比 。 根据 回归方程及测得 的吸光度
( A i) 计算样品 中总黄酮的浓度 ( W i) 。 用 W i 乘 以
2 5 0 0
,再除以 10 0 0 0 0 , 再 乘以 1 0 0% 即得 叶片及 其
愈伤组织干粉中总黄酮含量 (干重 ) 。
2 结果与分析
2
.
1 芦丁吸光度 ( A )与浓度 (W )的关 系 曲线的回
归方程
芦丁吸光度 ( A )与浓度 (W ) 的关系曲线的 回归
方程 : A ~ 0 . 0 1 5W一 0 . 0 1 5 , 其相关系数 R = 0 . 9 9 8 。
说明 ,浓度在 3 . 9一 19 . 5林g / m L 线性关系很好 。
2
.
2 荞麦属植物不同品种叶片总黄酮含量 (干重 )
从表 1 、 2 中可以看出 : 大粒组中 ,大野荞叶片及
其愈伤组织中的总黄酮含量最多 ;小粒组中 , 以硬枝
万年荞叶片及其愈伤组织 中总黄酮的含量最多 。 在
的含量最多 。
2
.
2
.
1 荞麦叶片总黄酮含量的种 内差异分析 对
荞麦属 1 个种 (包括 7 个 大粒组和 4 个小粒组 )叶
片的总黄酮含量平均值 ( % ) 、 变化范围和变异系数
进行分析 ,结果 (表 3 ) 表明 , F . 。 s : u l e n t u m 、 F . 。 s : u -
l e n t u m v a r
.
h o m o z r o P i e u , n
、
F
.
m e g a s P a r t a n i u m 3
个种的变异 系数较大 , 都在 20 %以上 。 F . g ar ic il -
p es 和 F · u or P h川 lu m Z 个种 的变 异 系数较 小 , 在
2% 以下 。
2
.
2
.
2 荞麦叶片总黄酮含量的种 间差异分析 对
荞麦属 n 个种叶片总黄酮含量进行方差分析 、 多重
比较 ( D u n ca n 法 )及聚类分析 ,结果 (表 4 和图示 )表
明 , n 个种叶片总黄酮含量 的种间差异达到极显著
水平 ( F 一 1 52 . 68 ’ ) , 可以 明显分为三类 : 第一类 为
F
.
ur
口 P h刃 lu m , 叶片总黄酮的平均含量最高 , 达 到
2 9
.
13 3 % ; 第 二类 包括 F , P i l u s 、 F . n : e g a s P a r t a n i -
u m 和 F . c y m os u m , 3 个种之间差异不显著 ; 其余 7
个种可归为第三类 。 第三类又可分成 A 、 B 、 C 三个
组 :尸 . ` uo g 。 , ge o se 和 F . t“ at ir cu m 种间差 异不大 ,
归为 A 类 ; F . g r a c i l i p e : 和 F . e s e u l e n t u m 种间差异
不大 ,归为 B 类 ; F . 。 a l l i a n t h u m 、 F . 。 s c u l e n t u m va r .
h o m ot r() iP cu m
、
F
.
il en ar
。 种 间 差 异 不 大 , 归 为 c
类 。 荞麦属 n 个种叶片总黄酮含量 的聚类分析见
图示 。
所有种中 ,硬枝万年荞叶片及其愈伤组织中总黄酮
表 l 荞麦属植物野生居群叶片的总黄酮含 , (石月 )
T a b le 1 W i ld b u e k w h e a t s p e e i e s u s e d i n t h e t e s t a n d t h e i r t o t a l f l a v o n e e o n t e n t s ( J u n e ) %
序号
N u m b e r
种 名
Sp e e i e s n a m e
F
.
m e否 a s Pa r t a , ; u 们 (大粒 )
代 号
C o d e n a m e
倍 性
P lo i d y
原产地
( ) r i g in
株数
N u m b e r o [ p }a n t
平均 含量
A v e r a罗 e o n t e n t
变化范围
F
.
e 、 ( u l e , t u 阴 v a r . h () 。 o , r o P i c u阴 (大粒 )
F
.
p , l “ s (大粒 )
F
. : y功。 、 u 阴 (大粒 )
F
.
g r a c i l i p e s (小粒 )
F
.
u r o P力夕z zu , (小粒 )
F
.
l f o e a er (小粒 )
F
.
o a l l位 n t h u n : ( ) h n i s hi (小粒 )
F
.
z u o g o n g e 。 、 e (大粒 )
M E I
M E Z
M E 3
M E4
M E S
M E 6
M E 7
M E S
M E g
M E 1 0
M E l l
M E 1 2
M E 1 3
M E 1 4
M E 1 5
M E 1 6
M E 1 7
M E 1 8
H ( ) l
H ( ) 2
P l l
P IZ
P I 3
P 14
C Y I
G R I
U R I
1 1 1
C A I
Z U I
贵州 G u i z h o u
贵州 G u i z h o u
贵州 G u i z h o u
贵州 G u i z h o u
贵州 (子u i o h o u
贵州 G u i: h o u
贵州 G u i: h o u
贵州 G u i z h o u
贵州 G u iz h o u
贵州 G u i z h o u
四川 S l e h u a n
四川 S i eh u a n
贵州 G u i z h o it
云南 Y u n n a n
贵州 G u iz h o u
云南 Y u n n a n
贵州 G o i: h o u
贵州 (奋u l z h o u
云南 Y u n n a n
云南 Y u n n a n
贵州 G u i z h o u
西藏 T i b e t
西藏 T , b e t
西藏 T i卜e t
云南 Y u n n a n
云南 Y u n n a n
云南 Y u n n a n
云南 Y u n n a n
云南 Y u n n a n
西藏 T i b e t
1 1
11
.
7 7
1 3
.
0 9
1 3
.
0 4
1 5
.
4 2
1 2
.
9 0
13
,
0 1
1 9
.
6 7
1 8
.
7 2
1 5
.
5 7
1 5
.
3 6
1 4
.
1 9
1 6
.
6 5
1 2
.
8 1
2 0
.
7 5
8
, 压9
1 6
.
9 7
1 8 3 6
] 6
.
8 0
2
.
2 1
3
.
2 6
1 4
.
9 8
1 5
,
7 8
1 6
.
5 8
1 5 5 6
1 2
.
9 3
5
.
4 7
2 9 1 3
2
.
2 1
2
.
7 4
8
.
1 6
A l t ear t i
o n s e o P e
1 1
.
3 5 ~ 1 2
.
1 8
1 2
.
6 7 ~ 1 3 5 1
1 2
.
3 4~ 1 3
.
7 2
1 4
.
9 3 ~ 1 6
.
2 7
] 3
.
2 1一 1 2 . 5 9
1 2
.
5 3 ~ 1 3
.
4 8
1 9
.
5 2~ 1 9
.
8 2
1 8
.
2 5一 1 9 . 0 6
1 5
.
6 5~ 1 5
.
4 8
1 5
,
3 2一 1 5 . 4 0
1 3
.
9 0 一 1 4 . 4 7
1 5
.
9 6 ~ 1 7
.
1 2
1 2
,
3 5 一 1 3 2 7
2 0
.
5 6 ~ 2 0
.
9 4
7
.
9 5 ~ 8
.
8 3
1 6
.
5 9 ~ 1 7
.
2 8
1 7
.
8 6 一 1 8 . 9 2
1 6 3 9 ~ 1 7
.
2 1
2
.
1 0一 2 . 3 3
3
.
1 7 ~ 3 3 3
1 4
.
6 2~ 1 5
.
3 2
1 4
.
7 9 ~ 1 6
.
6 8
1 5
.
4 8~ 1 7
.
5 9
1 4 7 2~ 1 6
.
3 9
1 2
.
2 0 ~ 1 3
.
7 3
5
.
3 7~ 5
.
5 7
2 8
,
6 3 ~ 2 9 7 0
2
.
3 0一 2 . 4 7
2
.
6 3 ~ 2
.
9 0
7
.
6 3 ~ 8
.
5 3
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234567891023456789跄
1 6贵 州 农 业 科 学 20 0 6, 3 4 卷
表 2 荞麦属栽培种植株叶片的总黄酮含 t 《` 月 )
T a b l e Z
序 号
N u nr b e r
种 名
P e c 二e s n a m e
C u l t i v a r s u s e d in
代 号
C () d e n a m e
t h e t e s t a n d r h e i r t o r a l fla v o n e e o n t e n t s ( J
u n e )
倍 性
P lo i d y
原产地
( ) r i g i n
株数
N u m b e r o f P l a n 土
平均含量
A v e r a g e e o n t e n t
%
变化范 围
A l t e r a t i o n s e o P e
F
. ￡、 e u l 。 , t u 从 (大粒 )
F
.
z ` , l “ r i o u n , (大粒 )
E S ]
ES Z
E S 3
E S 4
E S S
E S6
E S7
E S S
E S g
E S 10
E S l l
E S 12
T A I
T A Z
T A 3
T A 4
T A S
T A 6
T A 7
T A S
T A g
T A IO
1
、
A l l
T A 1 2
T A 1 3
T A 1 4
贵州 G u i: h o u
贵州 G u i z h o u
贵州 G u i: h o u
贵州 (奋u i z h o u
贵州 G u 、: h o u
贵州 G u i z h o u
贵州 〔 ; u i z h o u
贵州 (奋u i: h o u
四 川 S i e h u a n
湖南 H L: n a n
德国 (二e r m a n y
P r a g u e
贵州 (奋t l i z h o u
贵州 G u i z h o u
之「西 J i a lz g x i
贵州 G u i z阮 u
贵州 G u iz h o u
贵州 G u i: h o u
贵州 G u i z h o u
贵州 (二u i: h o u
贵州 G u i: h o u
贵州 (二u i z h o u
贵州 G u i z h o u
贵州 G u i z h o u
湖南 H u n a n
山西 Sh a n x i
6
.
6 0
3
。
6 1
5
.
5 3
5
.
3 2
3
.
7 8
3
.
6 2
`
;:
6
。
0 6
3
.
9 3
5
.
8 6
6
.
3 8
7
.
1 9
7
.
2 5
7 3 0
7
.
10
7 1 2
7
.
1 7
7
.
2 4
6
.
3 0
7
.
1 9
7 2 6
7
.
2 3
.
::
6
.
6 3
6
.
5 0 ~ 6
.
7 0
3 53一 3 . 7 2
4
.
8 6 ~ 6
,
3 0
5
.
1 3一 5 . 6 6
3
.
G l ~ 4
.
0 7
3
.
2 5~ 3
.
9 2
3
.
4 9 ~ 3
.
6 3
2
.
9 5 ~ 3
.
4 5
5
.
9 6 ~ 6
.
2 1
3 8 1~ 4 1 2
5
.
6 4 ~ 6
.
1 3
6
.
27 ~ 6
.
4 8
6
.
9 8 ~ 7
.
3 9
6 8 8 ~ 7
,
5 6
7
.
2 7 ~ 7
.
3 2
6
.
7 5~ 7
.
3 3
6
.
9 9一 7 . 3 6
6
.
8 7~ 7
.
3 9
6
.
8 5~ 7
.
5 1
6
.
0 7 ~ 6
.
5 9
7 1 2 ~ 7 2 3
6
.
9 9 ~ 7
.
5 2
6
.
8 7 一 7 . 2 0
6
.
9 5 ~ 7
.
5 6
6
,
0 5一 6 3 4
6
.
3 7 ~ 7
.
0 1
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月只Qón,10`J乌厂刁汽éù了O口口砂1夕内JJ任56八乃,J口qj,曰,Jó渡左健月J斗J络.斗4今月qs已5u5Las
表 3 荞麦植株叶片平均 总黄酮含 t 及其变异系数
T a b le 3 A v e r a g e t o t
a
l f la v o n e e o n t e n t s o f t e s t e d b u e k w he a t s p e e i e s a n d t h
e
i r e o e f f i e i e n t o f v a r i a b i l i t y
种 名
S P e e ie s
株数
N u m b e r o f p l a n t
平均值 ( % )
A v e r a g e
变化范围 ( % )
A Il e r a t io n s e o P e
标 准偏差 ( 、 )
S t a n d a rd d
e v i a t i o n
变异系数
C o e f f ie i e n t o f
v a r i a b il i t y
大粒组 Bi g g r a i n g r o u p
F
.
e s 〔 u l e ” t u 阴
F
.
t a r a r 之c u m
F
. 心“ 书 l e n r u m 撇 r . 人o m () 之r o P i c u 阴
F
. z u o g o n g e n ` ￡
F
. 从 e ` a s Pa r t a n i u 阴
F
.
P i l u s
F
. 〔 y 阴。 `“ 脚
小粒组 S m a l l g r a i n g ro u p
F
.
g ra
f i l i P己`
F
.
e a l l i a ” t h u ,n
F
.
1汇,正亡a r e
F “ r o P六夕 l l u 州
4
.
7 88
7
.
0 26
2
.
7 3 5
8
.
1 6 3
14
.
9 62
1 5
.
7 8 5
1 2
.
9 3 3
2
.
9 5~ 6
.
7 0
3
.
0 5一 7 . 5 6
2
,
10 一 3 . 3 3
7
.
6 3~ 8 5 3
7
.
9 5~ 2 0
.
9 4
l心. 6 2~ 1 7 . 5 9
12
.
2 0 ~ 13
、
7 3
1
.
26
0
.
4 3
0
.
5 8
0
.
4 7
3
.
1 2
0
.
8 7
0
。
6 3
2 6
.
36
6
.
16
2 1
.
28
5
.
7 9
2 0 8 7
5
.
50
4
.
8 4
广nl内OC八,ú只j往,j月ó59翻
5 4 7 0
2
.
7 4 3
2
.
3 9 0
2 9
.
13 3
5
.
37~ 5
.
5 7
2
.
6 3 ~ 2
.
9 0
2
.
3 0一 2 . 魂7
28
.
6 3~ 2 9 7 0
0
.
1 0
0
.
1 4
0 0 9
0
.
5 4
1
.
8 3
5
.
1 1
3
.
57
1
.
8 5
丝AN E
X I 一
丸凡为沁志xl0
xl
l一o , Z a - . 0 7 a o 幻 , , , 2 1 。 , 4M i l n i m u m D 18 t a n e e B e t w e e n C i u s te sr注 : X l 为 F . u r o P人夕 l zu m ; X : 为 F . P泛z u , ; X 3 为 F . 二 e g a s P a rt a n滋u m ; X ; 为 F . e夕 m o s u m ; X 。 为 F . z u o g o n g e o s e ; X ` 为 F . t a t a r i c u m . ; X 7 为F · g ar c i l i户e s ; X : 为 F · e s c “ l e n t u m ; X , 为 F · c a l l i a n th “ m ; x :。为 F · e s c u l e n t u m va r · h o m o t or p i c u , , x , , 为 F · 11” e仔r e图示 荞麦月 1 个种叶片总黄峨含 t 的 . 类分析F ig . C lu s t e r a n a ly s i s o f t o t a l fla v o n e e o n t e n t s i n l e a v e s o f 1 1 b u e k w h e a t s p e e i e s
第 2期 王爱国 等 荞麦属植物叶片及其愈伤组织中的总黄酮含量
表 4
Ta b l
e4
1个荞麦种叶片 中总黄酮含蚤之间的多重 比较 表 5
Dn ua en
’ 5m ult i pl e eom pa r is ona m n oa s v ea r get ota l
f la vn o e eont ents of el v e enb u e kwha ets pe e i
e、
荞麦属植物不 同品种叶片及其愈伤组 织中的
总黄酮含最 (干重 )
Ta b l es
I )a n n u e平均值 ( % )
(子 r u oPn i g
荞 麦种
B u e kwha ets P e e is eAa r v e ge
2 9
.
]3 3
1 5 5 7 8
1 4
.
6 92
]2 93 3
8
.
1 36
7
.
0 2 6
5
.
0 7 4
4
.
7 8 8
2
.
3 7 4
2
.
3 5 7
2
.
3 90
植株数星
Pla nra r n o“ nt
Cn ot ents( DW )oft ota l
f o凡 goPyr um
名 中文名
f la v on e int h ela efa nda el ls u
原产地
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F
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F
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F
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F
.
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F
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F
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F
. 亡s c u l e z了z u ” , v a r . h o伊n o t r o P滋c u 阴
F I f了才已“ r e
N a m e C h i n e s e ( ) r i g i n
总黄酮含量 〔% )
T o ta l f la v o n e e o n t e n t s
叶片 愈伤组织
I e a f C a l l u s
大粒组 B i g g r o i n g r o u p
F e ` e u Ze 7于t u m
F
.
t a t a r艺c u ,”
F
. 尸 s 〔 u l e ” t “ m , a r
.
h o扭 o t r() P i e u 阴
只 z u叮 o n 澄 F , ,百e
F
. 阴 已g a ` P u r z a 左 i “ m
F
.
P艺l u s
F c少切。 ` u 阴
小粒组 S m a l l g r a i n g r o u p
F
,
g ra
r il i P 尸`
F
、 c a l l i a ,z r h “ 阴
只 l i n 尸“ 理
F
.
u r o Ph夕 11“ 阴
甜荞
苦荞
佐贡野 荞
大野荞
毛野荞
金养麦
贵州遵义
江西九江
云南
西藏
云南
西藏
云南
6
.
6 0
7
.
3 0
2
.
2 1
8
.
16
9
.
4 5
1 2
.
2 3
6
.
3 7
1 2
.
1 0
2 5 7 9
1 6
.
8 9
1 5
.
9 2
ùōé
注 : 。 ~ 。 . 0 5 ;字母相同表 示差 异不大 。
2
.
3 荞麦属植物不同品种叶片及其愈伤组织总黄
酮含量 (干重 )
为了较客观地反映荞麦属植物不同品种叶片及
其愈伤组织 中总黄酮含量 , 每种植物随机选取 3 株 ,
每株测 3 6 次 , 求得平均 值作为衡量该种植 物的指
标 。
从表 5 可以看 出 ,所有愈伤组织的总黄酮含量
细柄野荞麦
线叶野荞麦
硬枝万年荞
云 南
四川
云南
云南
5
.
4 7
2
.
7 4
2
.
3 9
2 9
.
1 3
8
.
0 3
5 3 5
4 9 0
3 0 82
均 比其叶片中的总黄酮含量多 , 幅度大小不一 。 通
过对荞麦属植物不同品种叶片与其愈伤组织中总黄
酮含量 ( % ) 的相关性分析表明 , 二者的相关关系显
著 (表 6 ) 。
表 6 荞麦属植物不同品种叶片与其愈伤组织 中总黄酮含通的相关性
T a b l e 6 T h e r
e
l a t i v e a n a ly s i s o n e o n t e n t s o f t o t a l f la v o n e i n t h e le a f a n d e a llu s o f F a g
o
P夕r u m
叶片 L ea f
愈伤组织 C川 lus
相关系数 R e l a : iv e
羔 黑 黑 器
%
29
.
1 3
3 0
.
8 2
47一0330一260一45
0
,
9 8 9 ”
3 讨论
张宏志等川对 内蒙古赤峰市栽培荞麦按生育期
对各营养器官的芦丁含量进行定量分析发现 ,在荞
麦盛花期花中芦丁含量最高 , 达到 1 3 . 68 % ,始花期
叶片中芦丁含量最高 , 为 7 . 95 % 。 张琪等川 的研究
表明 ,苦荞麦粉中的总黄酮含量为 2 . 9 % 。 项 昭保
等川 的研究表明 , 荞麦干叶中黄酮含量达到 6 16 % 。
唐宇 、 赵钢叫 的研究表明 , 花的黄酮含量最高 , 达到
7
.
4% ; 叶片中的黄酮含量次之 , 达到 5 . 3% ; 茎中的
黄酮含量最低 ,达到 1 . 0% 。
以上研究大多集 中在栽培种 (甜荞和苦荞 ) ,广
大珍贵野生荞麦资源被忽视 , 而且针对荞麦属所有
种的研究至今未见报道 。 本研究采集 了四川 、 云南 、
西藏 、 贵州等地野生荞麦 , 首次对荞麦属 n 种植物
的叶片进行了总黄酮含量的测定 , 并且诱导出叶片
愈伤组织 ,筛选出硬枝万年荞和大野荞 2 个 富含总
黄酮的野生种及其愈伤组织 ,为遗传改 良培育新品
种和工厂化生产芦丁打下了基础 。
致 谢 : 贵州 师范 大 学生物技 术与工程 学院 张
以忠 、 任翠娟 、 卢文芸 、 唐金 刚 、 盛茂银 、 王甜 、 李建
辉 、 潘守举 、 郭玉珍 、 孙辉 、 杨政富等 同学对本研究给
予 了帮助 , 乙 引教授为本研究提供 了部分器材 的 支
持 ,在此一并表示衷心的感谢 !
〔参
仁1 〕
考 文 献〕
陈庆富 . 五个中国荞麦 ( aF go p y ur m )种的核型 分析「J〕 . 广西
植物 , 2 0 0 1 , 2 1 ( 2 ) : 1 0 7一 11 0 .
林汝法 . 中国荞麦〔M ] . 北京 : 中国农业出版社 , 1 9 9 .4
杨克里 . 我 国荞 麦种质资源研究现状与展 望〔J〕. 中国种 业 ,
1 9 9 5 ( 3 )
:
1 1
一 13
.
赵玉平 , 肖春玲 . 苦荞麦不同器官总黄酮含量测定及分析 [ J〕 .
食品科学 , 2 0 0 4 , 2 5 ( 10 ) : 2 6 4一 2 6 6 .
张宏志 , 管 正学 , 田晓娅 . 分光 光度法测 定荞麦中芦 丁含量
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张 琪 , 刘慧灵 ,朱 瑞 ,等 . 苦荞麦中总黄酮和芦丁的含量测
定方法的研究 [ J〕. 食品科学 , 2 0 0 3 , 2 4 ( 7 ) : 1 1 3一1 16 ·
项昭保 , 任绍光 ,石轶松 ,等 . 吸光光度法测定荞麦秸 中总黄酮
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唐 宇 ,赵 刚 . 荞麦中黄酮含量的研究压J」. 四川农业 大学学
报 , 2 0 0 1 , 1 9 ( 4 ) : 3 5 2一3 5 4 .
(责任编择 : 高红卫 )
马J一esll es件`尸aùb厂LL厂IL
几J口叮沙门ǎrL广es
2 0 0 6 年是 “ 十五 ” 结束和 “ 十一五 ” 开局 的承上启 下之年 , 为 了贯彻党 中央 、 国务 院提出的建设社会 主义新农村 的重要
思想 , 切 实将农业科研 工作中有创新性 、科学性 、 实用 性的研究成果及时 、 准确 地反映 出来 , 为建设社会主义新农村提供 强
有力的技术支撑 ;鉴于近段时间 以 来 , 《贵州农业科学》收到的论文数量 较丰 , 按正期 出版很难 满足广 大作者的要求 。 为
此 , 本刊 决 定于 2 0 0 6 年 7 月 出版 1 期增刊 。 增刊质量和编排形式与正刊 完全相 同 。 欢迎广大作者 、读者踊跃投稿 、 订刊 。
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