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11种湖南产菝葜属植物和肖菝葜中落新妇苷的含量比较



全 文 :●实验研究●
11 种湖南产菝葜属植物和肖菝葜中落新妇苷的含量比较
湖南中医药大学( 410208) 易艳,刘阳,彭一波,谢 谊①,王实强①②
关键词 落新妇苷;分析;菝葜属;肖菝葜; 对比研究
百合科菝葜属( Smilax) 植物在我国有 60 多种,主要分
布于长江以南的广大地区,资源丰富[1]。《中国药典》( 2010
年版一部) 仅收载土茯苓( 光叶菝葜) Smilax glabra Roxb.和
菝葜 Smilax china L.两个品种供药用[2],文献已对不同产地
土茯苓中的落新妇苷含量进行了比较[3]。由于同属植物的
形态相近,其根茎作为药用从外形上更难辨认,常常有其它
品种混入代替土茯苓、菝葜作为药用。为了考察菝葜属不
同品种成分含量差异,本研究采用高效液相色谱法对湖南
产 11 种菝葜属植物 19 个样品和一个肖菝葜样品中的落新
妇苷进行了定量分析。
1 实验材料
1. 1 仪器 岛津 LC - 10ATvp 高效液相色谱仪: 日本岛津
公司; N2000 双通道色谱工作站: 浙江大学智能信息工程研
究所; KQ2200B型超声波清洗器: 昆山市超声仪器有限公
司; AE240 型分析天平: METTLER公司。
1. 2 试药 甲醇为色谱纯; 水为双重蒸馏水; 其他试剂均
为分析纯;落新妇苷对照品: 由四川省维克奇生物科技有限
公司提供,HPLC测定含量大于 98% ; 12 个菝葜属样品由课
题组成员亲自采集,经湖南省中医药研究院中药研究所生
药室鉴定,取其根茎作为测定样品;菝葜 1 号样品、肖菝葜由
湖南湘泉制药提供;菝葜 2 号样品、土茯苓为商品药材。
2 方法与结果[2 - 5]
2. 1 色谱条件 色谱柱为依利特 Hypersil BDS C18 ( 5μm ,
4. 6mm × 200mm) ; 流动相: 甲醇 - 0. 3%冰醋酸溶液 ( 28 ∶
72) ;检测波长: 291nm; 流速: 1ml /min; 柱温: 40℃ ; 进样量:
10μl;理论塔板数按落新妇苷计不低于 5000。结果见图 1。
图 1 对照品( A) 及菝葜 1 号样品( B) 色谱图
1.落新妇苷
2. 2 对照品溶液的制备 取落新妇苷对照品适量,精密称
定,加 60%甲醇制成每 1ml含 0. 3mg的贮备液;精密吸取该
溶液 5ml于 25ml量瓶中,加 60%甲醇稀释成 60μg /ml 的对
照品溶液。
2. 3 供试品溶液的制备 取本品粉末( 过二号筛) 约 0. 8g,
精密称定,置锥形瓶中,精密加入 60%甲醇 50ml,称定重量,
超声提取 30min,放冷置室温,再称定重量,用 60%甲醇补足
差重,摇匀,滤过,取续滤液即得。
2. 4 线性关系的考察 取落新妇苷对照品适量,精密称
定,加 60%甲醇制成每 1ml含 0. 36mg的贮备液; 分别精密
吸取该溶液 0. 5、1. 0、1. 5、2. 0、2. 5、3. 0ml于 10ml量瓶中,
加 60%甲醇稀释至刻度,摇匀,备用。分别吸取上述不同
浓度对照品溶液各 10μl,按上述色谱条件进行分析。以对
照品进样量为横坐标,色谱峰面积为纵坐标,计算回归方
程。结果表明落新妇苷进样量在 0. 18 ~ 1. 08μg 范围内,
呈良好的线性关系,回归方程为 Y = 966085. 8X - 26513. 6
( r = 0. 9999) 。
2. 5 精密度试验 精密吸取菝葜 1 号药材供试品溶液,连
续进样 6 次,每次 10μl,测定色谱峰面积,以峰面积积分值
计算,RSD = 0. 22%。结果表明本法精密度良好。
2. 6 稳定性试验 精密吸取同一份菝葜 1 号药材供试品溶
液,分别在 0、2、4、6、8、10h 进样,每次 10μl,测定色谱峰面
积,以峰面积积分值计算,RSD = 0. 34%。结果表明供试品
溶液在 10h内基本稳定。
·011·
第 27 卷第 2 期
2011 年 3 月
湖南中医杂志
HUNAN JOURNAL OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol. 27 No. 2
Mar 2011


湖南省中医药研究院中药研究所( 410013)
通讯作者,( 0731) 88927773
2. 7 重复性试验 精密称取同一份菝葜 1 号药材粉末 6
份,每份 0. 8g,按“2. 3”项下方法制备供试品溶液,各精密吸
取 10μl进样,在上述色谱条件下分析,测定平均含量为
0. 49%,RSD = 1. 93%。结果表明本法重复性良好。
2. 8 回收率试验 精密称取已知落新妇苷含量的菝葜 1 号
药材粉末 6 份,每份 0. 4g,分别精密加入 7ml0. 3mg /ml 的落
新妇苷对照品贮备液,按“2. 3”项下方法制备供试品溶液,
各精密吸取 10μl进样,在上述色谱条件下分析测定,计算回
收率。落新妇苷的平均回收率为 98. 83%,RSD = 1. 97%
( n = 6) 。结果见表 1。
2. 9 样品含量测定 分别精密称取采集样品和商品药材
粉末,每份 0. 8g,按“2. 3”项下方法制备供试品溶液,精密吸
取对照品溶液和供试品溶液各 10μl,注入液相色谱仪,依照
上述色谱条件测定色谱峰面积,计算含量,结果见表 2。
表 1 回收率实验结果( n = 6)
样品中的量
( mg)
加入对照品
量( mg)
测得量
( mg)
回收率
1. 9605 2. 1 4. 0733 100. 61
1. 9639 2. 1 4. 0541 99. 53
1. 9919 2. 1 4. 1148 101. 09
1. 9448 2. 1 4. 0144 98. 55
1. 9316 2. 1 3. 9669 96. 92
1. 9286 2. 1 3. 9506 96. 28
注:平均回收率 98. 83%,RSD14. 97%
表 2 不同品种不同来源样品中落新妇苷的含量测定结果
样品编号 品 种 来 源 含量( % )
1 菝葜 Smilax china L. 湖南湘西湘泉制药 0. 5168
2 菝葜 Smilax china L. 湖南四怡堂大药房 0. 0278
3 菝葜 Smilax china L. A 0. 1297
4 菝葜 Smilax china L. A 0. 0716
5 缘脉菝葜 Smilax nervomarginata Hay. A 0. 0189
6 圆锥菝葜 Smilax bracteata Presl A 0. 0026
7 暗色菝葜 Smilax lanceifolia Roxb. var. opaca A. DC. A 0. 0101
8 尖叶菝葜 Smilax arisanensis Hay. A 0. 0029
9 白背牛尾菜 Smilax nipponica Miq. A 0. 0083
10 西南菝葜 Smilax bockii Warb. A 0. 0104
11 西南菝葜 Smilax bockii Warb. A 0. 0045
12 小叶菝葜 Smilax microphylla C. H. Wright A -
13 黑果菝葜 Smilax glaucochina Warb. A 0. 0053
14 粗糙菝葜 Smilax lebrunii Levl. A 0. 0026
15 土茯苓 Smilax glabra Roxb. 湖南高新大药房 0. 5851
16 土茯苓 Smilax glabra Roxb. 湖南万众药品超市 0. 6441
17 土茯苓 Smilax glabra Roxb. 湖南古汉 0. 2577
18 土茯苓 Smilax glabra Roxb. 湖南老百姓大药房 0. 6510
19 土茯苓 Smilax glabra Roxb. 湖南芝林药业 0. 4844
20 肖菝葜 Heterosmilax japonica Kunth 湖南湘西湘泉制药 -
注:来源 A系湖南省湘西自治州吉首市永顺县小溪乡
3 讨 论
从表 2 中可以看出不同品种样品中落新妇苷含量差异
显著,只有菝葜和土茯苓中落新妇苷含量高于 0. 1%,而小
叶菝葜和肖菝葜中未能检出; 不同来源的菝葜和土茯苓中
落新妇苷含量差异也较大,尤其是菝葜差异更为显著。药
理学研究表明,落新妇苷具有较强的利尿和镇痛作用,本文
用 HPLC法测定多个菝葜属植物的落新妇苷含量,为湖南菝
葜属植物的开发利用提供了一定依据。
参考文献
[1] 王光忠,李秋怡,干国平,等. 17 种国产菝葜属植物中白藜芦
醇含量比较[J].时珍国医国药,2007,18( 7) : 1679 - 1680.
[2] 国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部[S].北京: 中国医药科技出
版社,2010,17,290.
[3] 张笑颜,詹丽茵,曾祥腾.高效液相色谱法测定不同产地土茯苓药
材中落新妇苷的含量[J].药品鉴定,2010,7( 10) :90 -91.
[4] 陈幸,李彬,黎万寿,等. HPLC 法测定土茯苓中落新妇苷的含
量[J].药物分析杂志,2004,24( 4) : 437 - 439.
[5] 李磊,张宏桂,乔延江. HPLC法测定土茯苓药材中落新妇苷和
白藜芦醇的含量[J].药物分析杂志,2007,27( 5) : 654 - 656.
( 收稿日期: 2011 - 02 - 20)
·111·第 2 期 易艳,刘阳,彭一波,等: 11 种湖南产菝葜属植物和肖菝葜中落新妇苷的含量比较