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锌铜处理对苹果属植物叶内碳酸酐酶活性的影响



全 文 :果 树 科 学 , 1 2 ( 1 ) : 1 0一 1 4 , 1 9 9 5
Jo u r n a l o f F ur it cS i
e n e e
锌铜处理对苹果属植物叶内
碳酸醉酶活性的影响
董 一文轩 ’ 沈 隽 」 孟、繁静
日七京农亚大学园艺奈 1心。。 9 4 ) 拍练农业大学生物学院 )
摘 要 通过室内外试验 ,观测了锌 、铜处理对苹果属植物吓丙破缺醉醉沈A 酶 )活性的效应
, 和锌处理对计 内锌 、 铜 、 磷 、银铁含量的影响 . 结果表呀 : 在甜条实生省和苹果幼畜水培 中 ,锌欢 5漏云. 、 l 一他理的饮 醉活性最高 ,加人甸苹果幼苗姗提敢液中爵硬乐多液n : tZ 16 0) 明显抑
制 C A 酶活性 ,而硫酸铜溶液 ( 1 6。 倍 )只有微弱的抑制作用 ;在幼苗叶上喷波尔多液对 c A 酶活性有
一定的抑创作用 ,布红星苹果大树上峨旅锌肥对叶内的 C A 酶活性无显著琪嘟梯度锌水培和新梢
速长期对面喷锌的处理都显著或极显着改变和提高了吐内含锌量 气但壮你破 、 铜 、钙含量影响较小、
一 对炉一件育拿与认醉括终的关种波尔害液对 C A 酶活性的.娜厚卑雄行孑讨论 , _关扭词 , : 苹果属 ; 碳酸醉碱毅破质元素
碳酸醉醉呼不 C摊21 1 . 以下一简称 C A 酶 ) 是普遍存在于动植物体内的一种酶 。 国外对它在
植物上的表现与特性进行了许多研究卜 ’ 、 俱国内未见报道 ,雌们 一于 天”鲜和 ` ” 85 年通过室内
外试验 , 对锌铜处理在果树上与 C A 酶活性的关系进行了探讨 , -
1 材料和方法
1
.
1 材料及处理
1
.
1
.
1 梯度锌水培的苹果属幼 苗 1 9 8 5 年 9 月挖出条播的当年生甜茶实生苗 〔材“ l su h峥 e -
he o i
: ( aP m p
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. 〕 , 去除叶片 , 枝条上保 留两个好芽剪截 (约 生1 c0 m ) , 对根系彻底洗涤和
必要修剪后 , 将苗子固定在带盖液培缸中 ;先用去离子水饥饿培养` 周 , 再用不同含锌量营养
液培养 。 每盆盛 9 0 一 I OO 0m 「培养液井 定期更换 。 液培苗株距 36 . oc m ,行距 4 5 . oc m 。 共 10 行
30 盆 。 试验在塑料大棚中进行 , 于 1 9 8 5 年 H 月结束 。 试验处裸 : L 含锌 .0 03 m g · l一 ’营养液 ;
2
. 含锌 。 . s o m , . 卜营养液 , 3 . 含锌 2 . s o m , . : 二 ,营养谕: 各处运随机排列 ,重复 。 次 。 营养液
中其它元素含量为 : N 7 3 . o 、 K 7 8 . 2 、 P 3 1` o 、 M g Z o . 8 、 5 1 6 . 7 、 F e l . 3 1 、 C l o . 5 1 、 N a o . 5 4 、 B o . 1 1 、
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一 , 一营养液的 p H值用 C a ( O H ) , 固体或水溶液调整在 5 . 4 一
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.
8
, 最终钙含量约为 78 . s m g · l 一 ’ 。
从北京市上庄苗圃取 回红星 、 金冠苹果 ( aM lu : P u m il a M il
.
)半成苗后 ,在接芽上 0 . 5一
0
.
sc m 处剪截 , 水培从 1 9 8 5 年 4 月到 7 月 。 培养期间液培缸 1 2/ 体积埋在地里 , 每 1 d0 灌水一
次降低土温 ` 一根系处理方法 、苗木固定和培养方法及营养液配方同前。 试验处理与甜茶实生苗
相同 , 另增加一个含锌 10 . o o m g 一 r ’ 营养液处理 。 每处理重复 3 次 , 每小区 3 株苗 , 共计 36
盆 。
1
.
1
.
2 喷施锌肥 的盛果期红星苹果树 1 9 8 4 年在北京市西郊白家瞳果园选择 45 株生长发
本文于 19 9 4一 02 一 01 收到 。
, 现在沈 阳农业大学园艺系工作 (辽宁 1 1 0 1 61 )
l 期 董文轩等 :锌铜处理对苹果属植物叶内碳酸哥酶活性的影响
育一致的 27年生盛果期红星苹果树连续两牟喷锌 .设 9个处理 :1 .萌芽前 1周 ( 3月底 )喷水
( CK
,
) ; 2
. 萌芽前 1周喷水+ 新梢速长期 (5 月 中 ) 喷水 ( C K : ) ; 3 . 新梢速长期喷水+ 采果后 1
周 内 ( 9月中 ) 喷水 ( C K : ) ; 4 . 萌芽前 1周喷 5 % Z n S O二 7 H : O 水溶液 ; 5 . 萌 芽前 1周喷 5 %
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7 H刀水溶液十新梢速长期喷 O · 2 % z乎5 .0 ’ 7 H: O水溶液 ` 6 · 新梢速长期喷 o · 2 %
Z n S O二 7 H ZO 水溶液 ; 7 . 新梢速长期喷 。 . 13 % Z (n N O户 2 水溶液 ; 8 . 采果后 1 周内 喷 。 . 针百
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O 水溶液 。 试验采用单株小区 , 重复 5 次 。
1
.
1
.
3 喻施波 尔多液的红 星苹果幼苗 1 9 8 5 年 4 月选取大小一致的红星苹果半成苗 18 株
定植在校外试验地 , 同年 6 月分成三组 (每组 6 株 ) :第一组 6 月 5 日喷水 ( C K ) ;第二组 6 月 5
日叶喷 1 : 2 : 16 0 倍波尔多液 ;第三组 6 月 5 日和 7 月 5 日分别喷 1 , 2 : 160 倍波尔多液 . 并
在 6 、 月 5 日 、 6 月 20 日和 7 月 2。 日分别取样测定 C A 酶活性 ,用 6 月 5 日喷水树叶的酶提取
液在室内进行 1 60 倍硫酸铜溶液和 1 : 2 : 1 6 0( 硫酸铜 : 石灰 : 水 )倍波尔多液对 C A 酶效应
白钾见测 。 试验各设 7个处理 : 不加任何药液 ( C K ) 、 加硫酸铜或 波 尔多液 0 . 0 5 、 0 . 1 0 、 0 . 2 0 、
0
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.
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。 每处理重复测定 5 次 。
L Z 方法
1
.
2
.
1 C A 阵活性 浏定 ( l) 取样 : 对盛果期红星树在一个方位或全树范 围选择 巧一 20 个生
长正常外围新梢 ,按生长季节早期取上部叶 、 中期取中上部叶 、 后期取中部 叶〔` 〕 . 每梢采 3 片 , 2
片用于矿质元素含量测定 , 1 片用于 C A 酶 活性测定 . 其它试材从整株上均匀取样 , 用冰瓶带
回实验室备用 二 ( 2 )待测液制备 : 采用 E d w a dr s 和 O h ik 法 【5 , `〕 , 试材用 3 . 5 9 . ( 3) 活性测定 : 采
用 W i lb u r 一 A n d e r s o n [ , j和 R i e k l t 等〔. 〕相结合的改进方法 。 用 p H S一 2 型酸度计监测 p H 值变
化 ,记录反应液 p H 值降到 6 . 3 的时间 。 整个测定在冰一水浴中进行 。 (4 )酶活性表示方法 : 酶
活性 ( p H 单位 · g 一 ’ · 105 一 ’ )一 (缓冲液 p H 值一 6
.
3 ) x 总体积 x 10 0/ 活性 s( ) x 试材重 ( g ) 。
1
.
2
.
2 半 护质元素含贡 对采回的叶样 , 经洗涤 、 酶固定 、烘干 、 粉碎后用干灰化法 .[] 制备待测
液 ,再用电感藕合等离子体发射光谱 (I C P )法测定锌 、铜 、磷 、铁 、钙 · 5 种元素的含量 .
2 结某与分析
2
.
1 锌处理对 C A 酶活性的影响
祥度锌水培使得叶片内的 C A 酶活性发生明显变化 (衣 1 ) · 甜茶中含锌 .0 5卿 g · ; l一 ’ 营养
液处理的叶内 C A 酶活性显著高于含锌 0 . 03 m g · !一 ’处理 ,但与 2 . s m g · l一之处理差异不显著 ;
含锌 。 、 邺犯 g · 1一 `和 .2 . 50 m g ,l 一 `处理间无显著差异 . 苹果试材中含锌 。 . 03 m g , l一手处理中树
叶 内的 C A 酶活性显著高于含锌 2 . S Om g · l一 ’和 10 . 0 m g · l一 `处理 , 但与含锌 0 . 5 0m g · l一 ’ 处
理的酶活性无明显差异 , 含锌 .0 50 、 2 , 5 0 、 l o . 0 m g · l一 ’ 三个处理中叶片内的酶活性之间无显
著差异 。 综合两种试材的测定结果看出含锌 。 . 50 m只 · l一 ’处理的 C A 酶活性最高 . 进行喷锌处
理的盛果期红星苹果大树叶内 C A 酶 活性在各处理同期测定数据之间无显著差异 (表 2 ) , 表
明喷锌对大树叶内的 C A 酶活性没有产生显著影响 . 进一步 比较各时期的平均 C A 酶活性发
现 , 1 9 85 年 5 月 1 2 日和 7 月 18 日的平均酶活性差异木显著 ,但都极显著高于两年中 6 月中旬测万的平均活性 (两年 6 月中旬之向差异木显著 ) ,说明 c A 酶活桂在不同时期表现不同 。
果一 树 科 学 1 2卷
表 , 梯度锌水培试林肚内的 r A酶活性 p H单位 · g 一 ’ · `。% 一 ’
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2 铜处理对 C A 酶活性的形响
叶喷波尔多液对苹果幼苗叶内的 c A 酶活性有一定影响滚 3 》
, 对照叶内的 c A 酶活性 明显高于喷施贾尔多液处座若抓才万·茄
` ’ 在喷后当天的测定结果’自怎管处座间差异不显
,但对照的c A 酶活佳仍有较高的趋势 ; 7 月 : 。 日浏定的 c人酶活性各处理间无明显差异且著中
农 3 苹果幼苗叶内的 c A 醉活性 ’ 一 p H ·单位 · g 一 ’ · l 。伽一 ,
侧定 日期
(月 一日 ) 咬一次水
( C K )
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达到最大值 , 表明喷施波尔多液对此时苹果
幼苗叶内的 C A 酶活性不再有影响 。 进一步
比较 3 次测定结果的平均值 ,发现喷水对照
的酶活性高于叶喷波尔多液处理 , 但差异不
显著 . 通过用苹果幼苗叶片酶提取液的精细
试验发现 : 随着波尔多液加入量上升 , 酶活性
迅速下降 ;而随着硫酸铜溶液加入量的增 多 ,
酶活性先下降 , 到达 0 . 10 ml 处理 后又 开始
上升 (附图 ) 。 表 明波尔多液对 C A 酶活性有
明显的抑制作用 , 但硫酸铜溶液的抑制作用
较小 , 甚至能增加酶活性 。
丁 1 2 、 _一产
砂 户 沪 ` 肠一户 夕碑岭 . 甸处理
波尔多液处理8月性
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2
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3 叶片内锌 、钥 、琪 、铁 、钙的含里分析 附困 含桐试荆对 c A醉活性的形响
对锌处理试材在测定 c A 酶活性的同时 ,还测了几种矿质元素的含量 (表 4 、 5 ) . 从表 4 结
果看出梯度锌水培引起了叶内锌 、 铁和磷含量的变化 .甜茶叶内的锌含量随首养液中含锌量增
加极显著提高 , 但铁含量极显著降低 ,而含锌 2 . s o m g · l一 ’处理叶片含磷量显著高于其它两个处理 ;苹果试材叶内锌含量也随营养液中含锌墓增加而显著或极显著提高 . 两种试材叶内的
锐钙含量 , 处理间差异不显著 · 对于喷砰大树 , 从三次测定结果 (表 5 )看出 : 生长前期各元素
含量处理间无显著差异 .到 了月中旬 , 凡新梢速长期喷锌处理的叶片含锌量都极显著高于对照
1 期 蓝文轩等: 锌铜处理对草果属植物叶内碳酸醉醉活性的影响 1 3
和其它处理 , 但钥 、铁 、磷 、钙的含量处理间无显著差异 ; 6 月中旬叶样中 , 部分处理的叶片含锌
量和含磷量有显著差异 ,而铜 、铁 、钙含量所有处理间差异不明显 。
农 4 禅库锌水培幼苗叶内的某些矿质元素含 t
锌处理 . . … 鱼 . _ 茶 一 _ _ _ _ _ _ _ _ _
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3 讨 论
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,
1 越波够难抑制 .cA 酶活性的机制波尔多液是由硫酸铜 、石灰和水按比例配合而成的石本试验结果表明这种药液对 C A 酶活
性有很强的抑制而碑好之二的硫酸铜水溶液只有一定的抑制作用 ,最高为 2 6% (附图 ) ,由此推测波尔多液呈碱性是抑制 c A 酶活性的根本原因 . 由于试验结果以 p H值降到 6 . 3 时
的时间表示 ,施用或加入波尔多液等于增大了 p H 值 , 会延长碑作用时间 ,表现为酶活性数值
下降 。 此外 ,这种碱性环境不仅保证或可能加强了呈酸性的硫酸铜溶液中铜离子 ( C u : +) 的抑
制作用 。 正是由于溶液的酸碱性和铜离子的双重作用 , 才出现了附图显示的结果 。 波尔多液抑
制作用的减弱和消失也与这两个因素有关 .
果 树 科 、学1 2卷
3
.
2叶内锌含 l与 C A 酶活性的关系
通过计算 C A 酶活性与叶片锌含量之间的相关发现 :. n) 梯度锌水培试材 , 两者不呈直线
相关 , 而表现某种曲线关系 ;由于本试验处理较少 , 无法合理地计算出回归方程 ,今后应在含锌
0
.
03 一 5 . o m g一 l 一 ,之间进一步试验 . ( 2) 喷锌大树吞生长前期访且中荀元因测出的锌含量代
表了叶内活性锌水平 ,而且未达 中奉含量从而与 C A 醉秒的直华相类熬娜 .0 爪 “ )’is 显著水平 。 6 月中旬 , 由于喷施波尔多液的抑制作用掩盖了叶
低且无明显差异 。 据调查 , 白家幢果园每年在 5 月中下旬喷
锌含量的作用 , 造成酶活性很
写 : 24 0 波尔多液预留早期落
叶病 ,至 7 月中旬 ,锌含量差异极
酶活性与叶片含锌量仍不植关、 纬

),以酶活焦隽不再即尔多液抑制 (表 “ ’ , 但 C A旨变化 。可能的原因是 :第二 ,喷施锌肥尽管改变了叶片含
锌量 , 但外用锌不易移动 , 对整个大树锌水平影响不大 , 从而未影响 C A 酶活性 , `第二 ,叶片增
加的含锌量可分成三部分— 体内活性锌 、 体内无活性锌和体外无活性锌 . 由于没有或很少增加了体内活性锌 ,而 C A 酶活性又只有与这部分锌有妙叹:也使、以 酶活性无差异 ·参 考 文 献
I E阮 r 一 A k i v a A 一 n d R肠 v on . C a r ob n i e a n h y d r a , e a e t ;石 t y a o a n i n d i e a tor of 二 i n e d e 6 e i e耐 , 石n c i t r o . t r e e s . J H o rt cS i , 1 9 6 9 ,
4 4 : 3 5 9一 3 6 2
2 J
a e o肠 0 0 B S , F OP n g a n d R L H e a t h . aC r bo o i e 。 。 卜州 r a , 。 o f s p i~ ` : P l a n t P卜y s i o l
,
1 9 7 5
,
5 5
: 4 6 8一 4 7 4
3 5面 1 . aC r bo . 让 a n h y d r a s e a e t i v i t y a “ a n i n d i e a t o r o f 名 i n c de 6 c i e n e r 加 一沐ca n Iea v es . P l a n t a n d 50 11 , 19 8 3 , 7 4 : 2 8 7一 2 8 9
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S dE 贾 a dr s G E a n d A K M o卜 a m de
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