全 文 ：第 6 1卷 第 3期 V o l6 1 N o3
198 5年 9月
南 京 药 学 院 学 报
Ju on ra l
of N n a jing C o l leg eof Ph a rm a eyS eP t198 5
朝鲜与中国产蛇床子中握斯脑和欧芹属
素乙的定量测定
孟正木 金昌根 , 赵宁训
( 中草药化学教研室 )
摘 要 朝鲜 、 中国 ( 南京 、 广州 ) 产蛇床子的 乙醉提取物 , 经柱层纯化 , 薄
层层析 , 双波长扫描 , 测得其中呢斯脑 、 欧芹属素 乙的含量 。 结果表明 : 南京 、 广
州两地产蛇床子中香豆素成分含量均高于朝鲜产品 。 吸斯脑 百分含量 : 南京产品 为
1
。
4 9 士 0 。 0 9 2 , 广州产品为 1。 1 9士 0 。 0 5 5 , 朝鲜产品为 0 。 6 1士 0 。 0 4 5 ( n = 5 ) ; 欧
芹属素 乙 百分含量 : 南京 、 广州 、 朝鲜产品依次为 1 . 0 士 .0 07 3 ( n 二 5 ) 、 o 。 60 士
0
。
0 3 7 ( n = 5 )
、
0
。
5 3士 0 。 0 1 9 ( n = 4 ) 。 同时比较 了朝 鲜 、 南京和 广 州三地 蛇
床子中香豆素的含量 , 其比值 为 1。 01 : 1。 4 0 : 1 。 0 。
关健词 蛇床子 , 香豆素 , 呢斯脑 , 欧芹属素 乙
蛇床子系缴形科植物〔C n id i u m m o n n i e r i ( L ) C u s s o n 〕的果实 , 为常用中药 。 具有抗
真菌 、 驱蛔 虫 、 治疗阴道滴虫的作用 。 本品含有多种香豆 素成分〔 ’ 〕 , 其主要成分为 呢 斯脑
( o
s ht ol
、 欧芹酚一 7一甲醚 ) , 据向仁德等报道这是治疗老慢支的活性成分 〔 ? 〕 。 由于蛇床子质
量标准尚未见报道 , 而朝鲜产蛇床子亦是广用药物 ,其化学成分也未见介绍 。 为此我们将从中
提取所得的握斯脑 、 欧芹属素乙 ( Im p e ar ot ir n ) 作为标准品 , 对朝鲜产与中国 南京 、 广州
产蛇床子的乙醇提取物中所含的两种成分进行了薄层定量测定 。 朝鲜产品购 于 1 9 8 4年 1月 ,
南京产品于 1 9 8 4年 3 月购于南京市药材公司 、 广州产品于 1 9 8 3年 8 月购于广州市药材公司 ,
三地产品经鉴定为同一品种 。
实
一 、 仪器与药品
双波长薄层扫描 仪 ( 日 本 岛 津
C s一 9 1 0 ) , 三地产蛇床子 。
标准品 握 斯 脑 ( I ) : 白 色针
晶 , m p 8 2 ~ s 3 oc , R f = 0 . 7 5 (硅胶薄
层 , 己烷 一醋酸乙醋 3 : 1 展开 ) , 显
紫色萤光 。 元素分析 C ; S H , 6 0 3 , 计
算值 % C 73 . 75 , H 6 . 60 ; 实验值%
验 部 分
0 一 C H Z一 C H
`护
C H 3
C H 压
` t,
( 1 )
1 9 8 5年 1 月 2 1日收稿
* 朝鲜民主主义人 民共和国平壤医科大学药学系
C 7 3
。
6 9
,
H 6
。
6 7
。
U V
、
IR
、 ’
H N M R
、 ’ ” C N M R 、 低分辨质谱与文献 c Z 一 ” 〕数据一致 。 高分
辨质 谱 测 得其 精 确 分 子 量 为 2 4 。 10 7 3 , 组 成 cl 5 H I 6 0 3 , 。 8 。 尚有 碎 片 m / z :
2 16
。
1 1 4 5
,
C l 4 H 1 6 0 2
,
9 7 ; 2 0 2
。
0 9 6 5
,
C l s H 1 4 0 ,
, 昆 7 ; 1 9 8 。 0 6 7 8 , C 1 3 H l o O : , 9 9 。
欧芹属素乙 ( l ) : 淡黄色针晶 , m p 1 0 ~ 1 02 ℃ , fR = 0 . 69 ( 层析条件同上 ) , 显淡黄色萤
光 。 U V 、 IR 、 ’ H N M R 、 ’ 3C N M R 、 低分辨质谱与文献〔 ” , 呼 , 6 〕数据一致 , 高分辨质谱测得其
精确分子量 2 7 0 。 0 8 9 8 , 组成C l 6 H , 4 0 4 , 9 1 0 。
二 、 蛇床子 乙醇提取物的薄层定性
(一 ) 材料前处理 : 将蛇床子于红外灯下干燥后分别置铜冲内粉碎 , 过 1 0 目筛 , 备用 。
(二 ) 香豆素成分的提取 : 取上述粉末各 5 9 , 分别
, .
2ó!卜.
!
.
l
weO-0
0000000000000
置索氏提取器中 , 用 95 %乙醇连续回流提取 , 至乙醇回
流液中不显香豆素反应为止 ( 约 6 小时 ) , 回收溶剂至
小体积 , 残留液定量转移到 1 0 m l 量瓶中 , 并以乙醇稀
释至刻度 , 摇匀 , 供层析用 。
(三 ) 薄层板的制备 : 取硅胶 G (青岛海洋化工厂产
1 0 ~ 4 0件 ) 8 9 , 加 0 . 8% C M C 一 N a 水溶液 ( 上清液 部分 )
2 5 m l
, 调匀 , 用涂布器 铺成 1 8 x 1 5 x o 。 0 5 ( m m ) 的
方板 , 空气中风干 , 1 10 ℃活化 1小时 ,置干燥器内 , 备用 。
( 四 ) 点样 、 展开和显色 : 上述乙醇提取液 分 别点
样 2时 , 上行展开 , 溶剂为正己烷 一乙酸乙醋 ( 3 : 1 ) ,
展开后干燥 , 置紫外光灯下观察荧光 , 握斯脑呈紫色 ,
欧芹属素乙为淡黄色 。 层析谱见图 l 。
三 、 蛇床子 中嘱斯脑和欧芹属素乙的定量
(一 ) 样品液的柱层纯化 : 为避免测 定 中的干扰因
素 , 样品液需经纯化 。
人 B C D
图 1 蛇床子 乙醇提取物薄层层析
图谱
A 朝鲜产品 , B 广州产品 ,
C 南京产品 , D 标准品
( 1
. 强斯脑 2 。 欧芹属素 乙 )
1
. 回收率试验 : 取硅胶 ( 上海市五 四农场化学试剂厂产 , 1 0 0 一 2 0 目 ) 按干法 装 柱 ,
先以环己烷 一醋酸乙醋 ( 3 : 1 ) 冲洗 , 除去其所含有机杂质 。 将精密称取的呢斯脑和欧芹属
素乙标准品溶于上述少量洗脱剂中上柱 , 继以该溶剂洗脱 , 用巳恒重的锥形瓶接收 , 至无香
豆素反应停止收集 , 挥去溶剂 , 干燥恒重 , 测得三次平均回收率在 95 %以上 。 见表 1 。
表 1 暖斯脑 、 欧芹属素乙回收率的阅定
呢 斯 脑 欧 芹 属 素 乙
柱层前
重量 ( m g)
柱层后
重量 ( m g)
回收率
( % )
柱层前
重量 ( m g )
柱层后
重量 ( m g)
测定次数
3
。
2 6
2
。
8 7
4
。
0 5
3
。
1 4
2
。
7 4
3
。
8 9
9 6
。
3 2
9 5
。
4 7
9 6
。
0 4
2
。
1 6
3
。
1 4
5
。
2 0
2
。
0 1
3
。
2 8
4
。
9 8
1上自今OJ
平均 9 5 。 9 4
回收率
( % )
9 3
。
0 5
9 6
。
1 8
9 5
。
7 6
9 5
。
0 1
2
。 柱层纯化 : 按上法装柱 , 精密吸取前述定性用的蛇床子乙醇提取液 10 m l上柱 , 以环
己烷 一醋酸乙醋 (: 1 3)洗脱至无香豆素反应 , 停止收集 , 蒸发溶剂至小体积 , 将其定量移
入 10 m l量瓶中 , 以乙醇稀释至刻度 , 供薄层定量用 。
(二 ) 标准曲线的制备 : 精密称 取 握斯脑
2
。
8 8 m g和欧芹属素乙 2 。 6 0 m g , 置于 5 m l量 黝 .30251识值分瓶中 , 加醋酸乙醋至刻度 , 精确吸取 2 、 4 、
6
、 8 、 10
、
12 和 14 闪点样 , 经 正己烷 一醋酸
乙醋 ( 3 : 1 ) 展开 , 紫外灯光下定 位 后 , 用
双波长薄层扫描仪扫描 。 呢斯脑的紫外波长为
3 1 5 n m
, 在点样量为 1~ 9陀时 , 实验测得面积
与浓度成正比 , 欧芹属素乙紫外波长为 3 04n m
时 , 同样成正比 ( 见图 2 ) 。
(三 ) 样品的定量 : 于同一板上点 标 准品
液 (称取握斯 脑 2 。 28 m g 、 欧芹属素 乙 2 . 60 m g
置于 5 m l量瓶中 ,加醋酸乙醋至刻度 )及经柱层
纯化后的样品液各 2时 , 薄层板 、 展开溶剂 、
6 7 8 9
点样童拟目
图 2 嘱斯脑 (一 ) 、 欧芹属素乙 .( 二
的标准曲线
显色条件与薄层定性相同 。 经上行两次重复展
开 , 在薄层扫描仪上测得面积积分值 , 根据标准品与样品中相应的香豆素成分面积积分值计
算朝鲜 、 南京 、 广州蛇床子中握斯脑 、 欧芹属素乙的含量 。 结果见表 2 。
表 2 蛇床子中欧芹属素乙及嘱斯脑的含皿
异数变系标准品量
(协g )
测定次数及含量%
2 3
平均
值
标准差
( S X ) ( C V % )
产地
八Uù1甘。Jón八卜UūO…,止n甘nùù办OUù”lO以一匕勺…ó0nU八曰ù南京广州朝鲜
南京
广州
朝鲜
1
。
0 4
1
。
0 4
l
。
0 4
1
。
1 1 0
。
9 7
0
。
5 4 0
。
6 3
0
。
5 4 0
。
5 4
0
。
9 5
0
。
6 1
0
。
5 2
l
。
0 6
0
。
6 3
0
。
0 7 3
0
。
0 3 7
0
。
0 1 9
7
。
3
6
。
2
3
一
6
欧芹属素乙
0
。
9 1
0
。
9 1
0
。
9 1
1
。
5 9 1
。
4 7 1
。
3 9 1
。
4 3 1
。
5 9
1
。
1 0 1
。
1 9 1
。
2 5 1
。
1 9 1
。
2 1
0
。
6 3 0
。
6 3 0
。
6 5 0
。
5 选 0 。 5 8
1
。
4导
l
。
1 9
0
。
6 1
0
。
0 9 2
0
。
0 5 5
0
。
0 4 5
6
。
1 8
4
。
6 2
7
。
3 8
呢脑斯
表 3 蛇床子中总香豆素含盘的比较
均值平产地 侧定次数及含量%
1 2 3 黔、撇
七~ - 一.目
坛盆公 J
七五娜 l
南京
广州
朝鲜
。
8 9 5
。
9 1 5
。
8 2 5
。
一
0 3 4
。
0 1 4
。
3 7 4
。
。
5 4 4
。
5 6 3
。
9 1 3
。
7 2 5
。
8 4 0
1 8 0
2 4 0
。
0 9 1
。
4 6
。
1 8 4
。
4 6
。
3 6 8
。
5 8 南京 广州 甄 蜕:
J任三
.
.
,一八QOdqU
一二曰月寸J任
J口、声r l口厅5,,占`生1二毛王林一O以JQU、声、产.一…一不氛盆ǎU0
图 3 蛇床子中总香豆素 ( C ) 、 嘱斯
脑 ( O ) 、 欧芹属素乙 ( I ) 的比较
( 四 )三地蛇床子 中总香豆素的比较 : 按上述薄层定量法 , 以握斯脑作外标 ,
二次同溶剂系统单向展开后 , 紫外扫描所有荧光斑点 , 得总香豆素面积分值总和 ,
斯脑的面积积分值相比 , 得各地蛇床子中总香豆素含量的比值 。 结果见表 3 , 图 3
样 品液经
此值与叹
小 结
1
. 同品种不同产地蛇床子 , 薄层定性显示基本相同的香豆素组成成分 , 南京 、 广州产
品呈 9个香豆素的色斑 , 朝鲜产品比广州 、 南京产品多一个荧光斑点 。
2
. 比较总香豆素的含量 , 朝鲜产品低于南京产品 、 而与广州产品的相近 , 其比例 值为
1
.
40 : 1
.
0 1 : 1
.
0
。 握斯脑的含量以南京产品最高 , 平均值为 1。 49 % , 其次为广州产品 1 . 19 % ,
朝鲜产品最低 ( 0 。 61 % ) 。 欧芹属素乙的含量南京蛇床子为 1 。 0 % , 广州为 0 。 60 % , 朝 鲜 为
O
。
5 3%
, 广州与朝鲜产品相近 。
3
。 本文采用单向多次展开 ( n ) 2 , 点样 2 叭 ) , 双波长薄层扫描 , 紫外检出、 色斑集
中 、 重现性好 。
致 谢 理化测试中心王 丽 华同志代作薄层扫描 。
参 考 文 献
〔 1 〕 秦清之 , 小泽贡 , 马场 李承江 : 药学杂志 1 9 7 2 9 2 ( 10 ) : 12 8 9
[ 2 」向仁德 , 傅晓红 : 中草药 1 9 8 4 15 ( 9 ) : 3 9 5
〔 3 〕 孙汉董 , 丁靖凯 , 林中文 , 易元芬 , 傅坚 : 药学学报 1 9 8 2 1:7 8 35
〔 4 3 H e l l e r 5 R a n d M i l n e G W A : E P A / N IH M a s s S p e e t r a l d a t a b a s e
S u P P l e m e n t 1 1 9 8 0 : 4 6 2 2
〔 5 〕 S t e c k W : C a n J C h e m 1 9 7 2 5 0 : 4 4 3
〔 6 〕 L e e K H a n d S o i n e T O : J Fh a r nr s e i 1 9 6 9 5 8 ( 6 ) : 6 8 1
14
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Ab s t r a e t
F r o m t h e f r u i t o f C n i d i u m m o n i e r i ( L
。
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i n K o r e a , N a n j i n g a n d G u a n g z h o u
, o s t h o l a n d i m p e r a t o r i n 、 V e f e
e o l l e e t e d
i s o l a t e d
a n d i d e n t i f i e d
。
A m e t h o d f o r d e t e r m i n a t i o n o f o s t h o l a n d i m P e r a t o r i n
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。
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t h e e x t r a e t s o f f r u i t b y d u a l w a v e l e n g t il T L C S C a n n e r 从 r a s
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t il a n t h o s e o f K o r e a n s a m P l e
。
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S il e e h u
-
f o l l o w s :
P l a e e
N a n j i n g
G u a n g z h o u
K o r e a
o s t h o l
1
。
4 9士 0 。 0 9 2% ( n = 5 )
1
。
1 9土 0 。 0 5 5% ( n = 5 )
0
。
6 1 士 0 。 0 4 5% ( n = 5 )
i m P e r a t o r i n
1
。
0 0士 0 。 0 7 3 % ( n = 5 )
0
。
6 0士 0 。 0 37 % ( n = 5 )
0
。
5 3 士 0 。 0 1 9% ( n = 4 )
K e y w o r d s S h e e h u a n g z i
,
C o u m a r i n
, O s t h o l
, Im p e r a t o 厂亘皿
1
。
D e p a r t m e n t o f P h 丁t o e h e m i s t r 了
2
。
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P了o n g y a n g U n i v e r s i t y , D p R K