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云南不同地区岩白菜中岩白菜素含量的比较



全 文 :第 25 卷 第 6 期 云南农业大学学报 Vol. 25 No. 6
2010 年 11 月 Journal of Yunnan Agricultural University Nov. 2010
收稿日期:2009 - 12 - 25 修回日期:2010 - 03 - 12
* 基金项目:云南省社会发展科技计划 (2007C211M) ;云南省科技厅重点产业创新工程项目 (2008IF004)。
作者简介:姜洪君 (1975 -) ,男,山东成武人,在读硕士研究生,主要从事植物资源的评价与利用研究。
E - mail:jianghj1998@ 163. com。
**通讯作者 Corresponding author:郭凤根 (1964 -) ,男,浙江平湖人,博士,教授,主要从事植物资源的评价与
利用研究。E - mail:fenggen64@ yahoo. com. cn 。
云南不同地区岩白菜中岩白菜素含量的比较*
姜洪君,郭凤根**,张丽梅,陈严平,杨生超
(云南农业大学农学与生物技术学院,云南 昆明 605201)
摘要:应用高效液相色谱法 (HPLC)测定了采自云南 8 个地区的 18 个岩白菜居群的岩白菜素含量,结果表
明: (1)同一居群的不同器官间岩白菜素含量差异悬殊,根状茎是提取岩白菜素的理想器官; (2)不同居群
的根状茎中的岩白菜素含量存在极显著差异 (P < 0. 01) ,介于 9. 77% - 3. 15%之间,丽江玉龙水库居群的根
状茎是开发利用岩白菜中岩白菜素的最优种源; (3)不同居群的叶片中的岩白菜素含量也存在极显著的差异
(P < 0. 01) ,在 1. 61% ~ 0. 55%之间。
关键词:岩白菜;岩白菜素;云南
中图分类号:S 567. 23 文献标识码:A 文章编号:1004 - 390X (2010)06 - 0895 - 04
Comparison of Bergenin Contents of Bergenia
purpurascens among Different Regions in Yunnan Province
JIANG Hong-jun,GUO Feng-gen,ZHANG Li-mei,CHEN Yan-ping,YANG Sheng-chao
(College of Agronomy and Biotechnology,Yunnan Agricultural University,Kunming 650201,China)
Abstract:Bergenin contents of 18 populations of Bergenia purpurascens in Yunnan Province were ana-
lyzed by high-performance liquid chromatography (HPLC)and the results showed as follows: (1)
There were most significant differences in bergenin contents among various organs of the same Bergenia
population. Rhizome was the favorite organ for extracting bergenin. (2)Bergenin contents from rhizo-
mes of different Bergenia populations were different at extremely significant level (P < 0. 01)and be-
tween 9. 77% and 3. 15% . The rhizome of Bergenia population distributed in Yulong reservoir of Li-
jiang County was the best resource for bergenin exploitation in B. purpurascens. (3)Bergenin contents
from laminae of different Bergenia populations were also different at most significant level and between
1. 61% and 0. 55% .
Key words:Bergenia purpurascen;bergenin;Yunnan
岩白菜 [Bergenia purpurascens (Hook. f. et
Thoms. )Engl.] 为虎耳草科岩白菜属的多年
生草本植物,分布在云南、四川、陕西、西
藏、新疆等省区的高山阴湿环境中[1]。它是一
种重要的药用植物,岩白菜素 (bergenin)和
熊果苷 (arbutin)为其主要药用成分[2], 《中
华人民共和国药典》收其为镇咳祛痰药,用于
慢性支气管炎等病的治疗,目前已制成片剂用
于临床[3],其特点是对咳嗽中枢有选择性抑制
作用,不良反应小,且连续使用不产生耐药
性。前人对岩白菜中岩白菜素的测定方法及含
量有较多报道[4 - 9],但涉及云南省不同产区岩
DOI:10.16211/j.issn.1004-390x(n).2010.06.016
白菜中岩白菜素含量比较的报道较少[10]。笔
者采用高效液相色谱法分析测定了云南产 18
个岩白菜居群的岩白菜素含量,旨在筛选出岩
白菜素含量高的优质种源,为引种栽培这一濒
危药材提供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 材料
从云南省内 8 个产地采集到的 18 个岩白菜居
群,详见表 1。
表 1 岩白菜居群的信息及其岩白菜素含量
Tab. 1 Population information and bergenin contents of B. purpurascens
居群
population
产地
location
北纬
north latitude
东经
east
longitude
海拔
altitude
根状茎中
岩白菜素 /%
bergenin in rhizome
叶片中
岩白菜素 /%
bergenin in lamina
LJ 丽江玉龙水库Yulong Reservoir,Lijiang 26°5957″ 100°1058″ 3 333 9. 77 aA 1. 04 gG
X - 1 香格里拉小中甸Xiaozhongdian,Shangelila 27°3743″ 99°4115″ 3 572 9. 42 bB 1. 42 cC
MC - 1 鹤庆马厂Machang,Heqin 26°2652″ 100°0122″ 3 382 8. 47 cC 1. 34 dD
X - 2 香格里拉小中甸Xiaozhongdian,Shangelila 27°3708″ 99°4210″ 3 434 8. 35 cC 1. 49 bB
MC - 2 鹤庆马厂Machang,Heqin 26°2650″ 100°0119″ 3 370 7. 44 dD 1. 19 eE
CS 大理苍山Cangshan,Dali 25°4028″ 100°0335″ 3 532 6. 02 eE 1. 53 bB
YS - 1 药山岔口岩Chakouyan,Yaoshan 27°1254″ 103°0609″ 3 315 5. 12 fF 1. 35 dD
YS - 2 药山小平岩Xiaopingyan,Yaoshan 27°1300″ 103°0614″ 3 151 5. 02 fF 0. 70 jJ
JZS - 1 轿子山大黑箐Daheiqin,Jiaozishan 26°0506″ 102°5057″ 3 809 5. 01 fF 0. 92 hH
JZS - 2 轿子山花溪Huaxi,Jiaozishan 26°0457″ 102°5046″ 3 790 4. 58 gG 1. 11 fFG
YS - 3 药山水坪子岩Shuipingziyan,Yaoshan 27°1232″ 103°0451″ 3 757 4. 43 hGH 0. 81 iI
JZS - 3 轿子山营地Yingdi,Jiaozishan 26°0503″ 102°5045″ 3 723 4. 25 iHI 1. 06 gG
DQ - 1 德钦碧罗雪山Biluoxueshan,Deqin 28°0147″ 98°5132″ 3 702 4. 15 iI 0. 55 kK
JZS - 4 轿子山精怪塘Jingguaitang,Jiaozishan 26°0500 102°5108″ 3 985 4. 13 iI 1. 14efEF
LJS 兰坪老君山Laojunshan,Lanping 26°3841″ 99°3751″ 3 430 3. 91 jJ 1. 61 aA
DQ - 3 德钦碧罗雪山Biluoxueshan,Deqin 28°0153″ 98°5123″ 3 839 3. 18 kK 0. 82 iI
DQ - 2 德钦碧罗雪山Biluoxueshan,Deqin 28°0150″ 98°5129″ 3 754 3. 18 kK 0. 69 jJ
JZS - 5 轿子山花溪Huaxi,Jiaozishan 26°0510″ 102°5055″ 3 803 3. 15 kK 1. 40 cCD
注:右侧两栏中的大、小写字母分别表示 1%和 5%水平上的差异。
Note:The capital and small letters in the same column represented differences at 1% and 5% level,respectively.
698 云南农业大学学报 第 25 卷
1. 2 方法
1. 2. 1 对照品溶液的制备
准确称量 5 mg 岩白菜素对照品,放入 100
mL的容量瓶中,用 60%的甲醇溶液定容后摇匀,
即得到 1 mL含有 50 μg的对照品的溶液,相当于
50 mg /L。以此溶液为母液,配制浓度为 0,5,
10,25,50 mg /L 的对照品浓度系列,然后将已
经摇匀的上述系列溶液过 0. 45 μm 的微孔滤膜,
取适量准备上机测定。
1. 2. 2 样品待测液的制备
准确称取已烘干磨细的岩白菜叶片及根状茎
样品 0. 1 g,放入 25 mL 量瓶中,加入 60%的甲
醇溶液 25 mL,放入超声波仪中超声提取 50 min,
冷却、摇匀后过 0. 45 μm 的滤膜后稀释 10 倍备
用。每份样品重复 2 次。
1. 2. 3 仪器及测试条件
采用高效液相色谱法,色谱柱为 SB - C18 柱
(250 mm ×4. 6 mm,填充物粒径 5μm),色谱仪为安
捷伦 1100 HPLC仪;甲醇∶水 =20∶80 的溶液为流动
相[9],流速为1 mL/min;检测波长为275 nm[11],柱
温为 30℃,进样量为 20 μL。试验用水均为过 0. 45
μm孔径滤膜的二次去离子水[12],试验用甲醇为色
谱纯甲醇,流动相使用前超声 50 min。
1. 2. 4 数据分析
以岩白菜素标样的岩白菜素峰面积值为纵坐
标 Y,标样浓度为横坐标 X,求取回归方程,再
根据各待测样品的岩白菜素峰面积值计算各样品
的岩白菜素含量。用 SPSS 13. 0 软件对测定结果
进行了方差分析,并进行了 Duncan 氏多重
比较[13]。
2 结果与分析
进行了岩白菜素标样的峰面积值对浓度的线
性回归,在 5 ~ 50 mg /L 的范围内线性关系良好,
回归方程为 y = 30. 633 6 x - 20. 606 2, r2 =
0. 999 7。岩白菜素对照品和岩白菜样品的 HPLC
色谱分离图见图 1。
2. 1 同一居群的不同部位中岩白菜素的含量比较
以轿子山花溪旁的岩白菜居群为材料,分析
了根状茎、根、叶片、叶柄等 4 个部位的岩白菜
素含量,发现同一居群的不同部位中岩白菜素含
量差异很大:根状茎中含量最高,达 4. 58%;其
次是根,为 2. 88%;叶柄中含 1. 69%;叶片中含
量最低,仅为 1. 11%。从表 1 列出的 18 个居群
的测定结果来看,根状茎中含量均高于叶片中含
量,根状茎中含量是叶片中含量的 2. 76 ~
9. 82 倍。
2. 2 不同居群的根状茎中岩白菜素含量的比较
18 个岩白菜居群的根状茎中岩白菜素含量的
测定结果及方差分析结果见表 1。丽江玉龙水库
居群的根状茎中岩白菜素含量最高,达 9. 77%,
极显著高于其它所有居群 (P < 0. 01)。香格里拉
小中甸居群 1 的根状茎中岩白菜素含量为
9. 42%,极显著高于除丽江玉龙水库居群外的其
它居群 (P < 0. 01)。鹤庆马厂 1 和香格里拉小中
甸 2 居群间含量没有达到显著差异,但它们极显
著地高于除前述 2 居群外的其它居群 (P <
0. 01)。鹤庆马厂 2 居群的含量极显著地高于大理
苍山居群的含量 (P < 0. 01)。药山岔口岩、药山
小平岩、轿子山大黑箐等 3 个居群间含量未达到
显著差异。轿子山花溪旁居群的含量显著地高于
药山水坪子岩居群的含量 (P < 0. 05) ,但未达极
显著水平。轿子山营地下、德钦碧罗雪山居群 1、
轿子山精怪塘 3 居群间岩白菜素含量无显著差异,
它们极显著地高于兰坪老君山居群 (P < 0. 01)。
德钦碧罗雪山 2、德钦碧罗雪山 3 和轿子山花溪
等 3 个居群的含量均在 3. 2%以下,三者间未达
显著差异。不同居群的根状茎中岩白菜素的含量
差异最多达 3. 10 倍。
798第 6 期 姜洪君,等:云南不同地区岩白菜中岩白菜素含量的比较
2. 3 不同居群的叶片中岩白菜素含量的比较
18 个岩白菜居群的叶片中的岩白菜素含量的
测定结果及方差分析结果见表 1。叶片中岩白菜
素含量最高的是兰坪老君山居群,为 1. 61%,极
显著地高于其它所有居群 (P < 0. 01)。其次是大
理苍山和香格里拉小中甸 2 居群,两者之间差异
不大,但极显著地高于除兰坪老君山外的其它居
群 (P < 0. 01)。香格里拉小中甸 1 和轿子山花溪
居群间含量无显著差异,但极显著的高于除了前
述 3 居群外的其它居群 (P < 0. 01)。药山岔口岩
和鹤庆马厂 1 居群间含量没有显著差异,但它们
极显著地高于鹤庆马厂 2 和轿子山精怪塘居群
(P < 0. 01)。轿子山精怪塘居群和轿子山花溪旁
居群间差异不显著,轿子山营地下居群与丽江玉
龙水库居群间也无显著差异,但四者均极显著地
高于轿子山大黑箐居群 (P < 0. 01)。德钦碧罗雪
山 3 居群与药山水坪子岩居群间差异不显著,但
它们极显著地高于药山小平岩和德钦碧罗雪山的
另两个居群 (P < 0. 01)。德钦碧罗雪山 1 居群的
岩白菜素含量最低,仅为 0. 55%,极显著地低于
其他所有居群 (P < 0. 01)。不同居群的叶片中岩
白菜素的含量差异最多达 2. 93 倍。
3 讨论与结论
关于岩白菜中岩白菜素的提取和含量测定已
有较多报道:云南省大理州制药厂的科技人员用
工业乙醇作溶剂加热回流岩白菜根茎粉末提取岩
白菜素,含量为 3. 35%[14];陈文斗等[15]研究了
用不同溶剂和不同方法提取岩白菜素的效果,发
现以甲醇浸泡药材、以超声波助溶提取效果最好,
用 HPLC法测得苍山产岩白菜根茎中的岩白菜素
含量为 6. 66%;纪兰菊也证明了 HPLC 法是测定
岩白菜素的可靠方法,西藏产岩白菜根状茎中岩
白菜素的含量在 4. 85% ~ 6. 20%之间[8]。笔者
在借鉴前人研究成果的基础上,以甲醇作溶剂,
超声波助溶提取 50 min,再用 HPLC 法测定了云
南省内 18 个岩白菜居群的岩白菜素含量,发现苍
山产岩白菜居群的根状茎含 6. 02%的岩白菜素,
这一结果与陈文斗等[15]的结果相近,说明本研究
所用的分析方法是可行的。
本研究的测定结果表明,同一居群的不同部
位间岩白菜素含量存在显著差异,以根状茎中含
量最高,叶片中含量最低,根和叶柄中含量居中,
根状茎是提取岩白菜素的理想器官。无论是根状
茎还是叶片,不同居群间在岩白菜素含量上的差
异均达极显著水平,丽江玉龙水库居群和香格里
拉小中甸居群 1 的根状茎中的岩白菜素含量均在
9%以上,是开发利用岩白菜素资源的最佳种源。
致谢:本文的实验室分析部分在中国科学院南京土壤研
究所进行,得到了吴龙华研究员的指导和韩存亮、钟明
等老师的帮助,在此表示衷心的感谢!
[参考文献]
[1] 潘锦堂. 中国植物志 [M]. 北京:科学出版
社,1992.
[2]江苏新医学院. 中药大辞典 [M]. 上海:上海科学
技术出版社,1996.
[3]中华人民共和国卫生部. 中华人民共和国药典 (一
部) [M]. 北京:人民卫生出版社,1990.
[4]赵建国,罗瑞芳. 岩白菜素的提取新工艺 [J]. 中国
医药工业杂志,1991,22 (8) :346 - 347.
[5]夏从龙,刘光明,马晓匡. 岩白菜素的研究进展
[J]. 时珍国医国药,2006,17 (3) :432 - 433.
[6]王刚,麻兵继. 岩白菜素的研究概况 [J]. 安徽中医
学院学报,2002,21 (6) :59 - 62.
[7]段志敏,刘国清. 用高效反相液相色谱法测定岩白菜
素 [J]. 云南大学学报:自然科学版,1991,13
(3) :277 - 279.
[8]纪兰菊. 西藏产两种岩白菜中岩白菜素的 HPLC测定
[J]. 西北植物学报,2005,25 (2) :397 - 399.
[9]张甜,郝南明,董学畅,等. 微柱高效液相色谱法测
定岩白菜素含量的研究 [J]. 云南民族大学学报:
自然科学版,2005,14 (2) :128 - 130.
[10]吕丽芬,袁理春,杨丽云,等. 岩白菜和岩陀中岩白
菜素含量比较 [J]. 中药材,2008,31 (4):488 -489.
[11]唐光明,柯立坚. 高效液相色谱法测定复方垂盆草
颗粒剂中岩白菜素含量 [J]. 广西中医学院学报,
2008,11 (1) :49 - 51.
[12]杨怀镜,姚宏春,张金望. HPLC 法测定岩白菜素
和复方岩白菜素片的含量 [J]. 中国药事,2003,
17 (3) :71 - 72.
[13]张力. SPSS 13. 0 在生物统计中的应用 [M]. 厦门:
厦门大学出版社,2006.
[14]云南大理州制药厂. 岩白菜中岩白菜素的分离与药
理试验 [J]. 中草药通讯,1975 (6) :12 - 13.
[15]陈文斗,聂明华. 落新妇和岩菖蒲中岩白菜素的高
效液相色谱测定法 [J]. 药学学报,1988,23
(7) :606 - 609.
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