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几种千斤拔属饲用植物单宁含量动态分析



全 文 :植物单宁 (Tannins) 又称植物多酚 (Plant
polyphenol), 是一类广泛存在于植物体内起自身保
护作用的多元酚化合物, 是植物和环境相互作用的
产物。 多数牧草和灌木都含有水平不等的单宁, 而
热带和亚热带乔、 灌木中, 单宁含量则相对更高。
富含单宁的植物易导致家畜在采食后出现中毒、 消
化不良等症状, 但采食少量含单宁的植物又可提高
反刍动物的产乳量和产毛率[1]。
豆科(Fabaceae)蝶形花亚科(Faboideae)千斤拔
属(Flemingia Roxburgh ex WT. Aiton)植物富含蛋
白质、 氨基酸以及 Fe、 Cu、 Mn、 Zn、 Se 等微量元
素, 是极具潜力的豆科饲用灌木资源, 在越南、 肯
尼亚等国家, 经常在旱季被用作羊的替补饲草。 已
有研究表明 , 饲料中加入含单宁的大叶千斤拔
[Flemingia. macrophylla (Wildenow)Prain]能提高动
物机体的 N 源留存, 减少羔羊甲烷的日排放量 [2],
但较高单宁水平的大叶千斤拔可降低饲粮中有机物
和粗蛋白的利用率 [3], 也可影响山羊和绵羊的采食
量和消化率[4]。 本研究分别测定了 5种(6份种质)千
斤拔茎、 叶在不同月份的单宁含量, 旨在明确单宁
热带作物学报 2012, 33(3): 512-516
Chinese Journal of Tropical Crops
收稿日期: 2012-01-22 修回日期: 2012-03-01
基金项目: 中央级公益科研院所基本科研业务专项(No. PZS066); 海南省重点科技项目(No. 090103); 农业科技成果转化资金项目(No.
2010GB23260578); 公益性行业(农业)科研专项(No. 200903026-1); 现代农业产业技术体系建设专项(No.CARS-35)(Supported
by the earmarked fund for China Agriculture Research System)。
作者简介: 蔡林宏(1987年—), 女, 湖南人, 硕士。 研究方向: 种质资源研究。 *通信作者: 周汉林, E-mail: zhouhanlin8@163.com; 刘国道,
E-mail: liuguodao2008@163.com。
几种千斤拔属饲用植物单宁含量动态分析
蔡林宏 1,2,3, 周汉林 1,2*, 刘国道 1,2*, 郇恒福 1,2, 李 茂 1,2
1 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所农业部热带作物种质资源利用重点开放实验室 海南儋州 571737
2 中国热带农业科学院热带草业与畜牧研究所, 海南儋州 571737
3 海南大学农学院, 海南儋州 571737
摘 要 测定了 5 种(6份种质)千斤拔属(Flemingia Roxburgh ex WT. Aiton)饲用植物茎、 叶在不同月份(2010年
6月至2011年5月)的单宁含量, 揭示其动态变化趋势。 结果表明: 6 份千斤拔叶片单宁平均含量由低到高依次为
大叶千斤拔Ⅰ(种质源自海南, 1.82%)<腺毛千斤拔(1.93%)<大叶千斤拔Ⅱ(种质源自越南, 2.17%)<海南千斤
拔(2.28%)<球穗千斤拔(2.55%)<宽叶千斤拔(2.70%); 茎中单宁平均含量由低到高顺序为大叶千斤拔Ⅰ(种质
源自海南, 1.05%)<球穗千斤拔(1.08%)<腺毛千斤拔(1.43%)大叶千斤拔Ⅱ(种质源自越南, 1.56%)<宽叶千斤
拔 (1.60%)<海南千斤拔 (1.64%)。 6 份千斤拔叶片的单宁含量均高于相应的茎含量, 并随月份的推移而变化。
这表明千斤拔单宁的含量受种类、 器官及生长时期的影响。
关键词 单宁; 动态变化; 千斤拔
中图分类号 S567.9 文献标识码 A
Tannins Dynamic of 5 Species of Genus Flemingia
CAI Linhong1, 2, 3, ZHOU Hanlin1, 2, LIU Guodao1, 2, HUAN Hengfu1, 2, LI Mao1, 2
1 Tropical Crops Genetic Resources Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences / Key Laboratory of
Tropical Crops Germplasm Resources Utilization, Ministry of Agriculture, Danzhou, Hainan 571737, China
2 Tropical Grassland and Animal Science Institute, Chinese Academy of Tropical
Agricultural Sciences, Danzhou, Hainan 571737, China
3 College of Agronomy, Hainan University, Danzhou, Hainan 571737, China
Abstract Tannins contents of 5 species of genus Flemingia Roxburgh ex WT. Aiton were determined from June
2010 to May 2011. Tannins levels in the leaves of Flemingia were ranked as: F. macrophylla Ⅰ(1.82%), F. lineata
(1.93%), F. macrophylla Ⅱ(2.17%), F. latifolia var. hainanensis(2.28%), F. strobilifera (2.55%), F. latifolia (2.70%).
Tannins levels in the stem of Flemingia were ranked as: F. macrophylla Ⅰ (1.05%), F. strobilifera (1.08%), F.
lineata(1.43%), F. macrophylla Ⅱ(1.56%), F. latifolia(1.60%), F. latifolia var. hainanensis(1.64%). Tannins content
in the leaves was higher than that in the stems, and related to species, organs,growing period and environment.
Key Words Tannins; Dynamics; Flemingia
doi 10.3969/j.issn.1000-2561.2012.03.022
第 3 期 蔡林宏等: 几种千斤拔属饲用植物单宁含量动态分析
1.1.3 试剂 无水碳酸钠、 钨酸钠、 磷钼酸、 磷
酸、 无水乙醇、 单宁酸(C76H52O46)、 无水乙醇, 试
剂均为分析纯, 水为去离子水。
饱和 Na2CO3溶液: 30 g 无水 Na2CO3加热溶解
于 100 mL 水中, 待溶液冷却有晶体析出时用滤纸
过滤。
Folin-Denis 显色剂: 10 g磷钼酸、 50 g 钨酸钠
溶于 375 mL水中, 加入 25 mL 85%磷酸, 加热煮沸
回流 2 h, 冷却后定容至 500 mL, 于棕色瓶中保存。
1.2 方法
1.2.1 样品中单宁的提取 样品采集与预处理:
2010 年 6 月至 2011 年 5 月的每月 18 日, 分别采
集 6份材料的茎、 叶片, 每次采样约 500 g, 105℃
杀青 20 min 后 65 ℃条件下烘干至恒重。 样品全部
粉碎并通过 2.0 mm 筛孔, 用自封袋封装, 室温保
存待用。
单宁的提取: 称取(1.000 0±0.200 0)干燥样品
于 250 mL 锥形瓶中, 加入体积分数为 20%乙醇水
溶液 50 mL, 置于恒温水浴锅中加热浸提, 双层滤
纸过滤后弃去前面少部分滤液, 其余滤液保留待测。
1.2.2 单宁标准溶液的配制 称取 50.00 mg 单宁
于 100 mL烧杯中, 少量水溶解后移入 500 mL容量
瓶中定容, 配制成浓度 ρ 为 0.100 0 mg/mL 的单宁
标准溶液(即配即用)。
1.2.3 溶液中单宁浓度的检测 用移液枪分别吸
取0(空白对照)、 0.5、 1.0、 1.5、 2.0、 2.5、 3.0 和
3.5 mL 单宁标准溶液或 1.0 mL 待测样品提取液于
盛有约 30mL水的 50mL容量瓶中; 分别加入 2.5 mL
Folin-Denis 显色剂 、 5 mL 饱和 Na2CO3 溶液 , 摇
匀、 定容; 显色 30 min 后用 721 型可见分光光度
计测定 760 nm 波长处吸光度值 A760。
1.2.4 单宁浓度标准曲线的绘制 以吸光度值
A760为纵坐标, 系列标准溶液中的单宁浓度 ρ 为横
坐标, 绘得回归方程为 ρtannin(mg/mL)=1.507 3 A760
(相关系数R2=0.999)的标准曲线(图 1)。
1.2.5 样品中单宁含量的计算 单宁含量以干燥
样品中(干基)单宁的质量分数 wtannin表示, 按以下
公式计算。
wtannin/%=ρtannin×50×1 000m×(1-M)×100=1.507 3
A760×50×1 000m×(1-M)×100
上式中, m是样品质量(g); M是样品水分含量。
1.3 数据统计与分析
实验数据运用 SAS9.0 和 Excel 进行统计分析,
各组数据以平均值(X)±标准差(SD)表示。
pH 有机质/(g/kg) 全氮/(g/kg) 全磷/(g/kg) 全钾/(g/kg) 碱解氮/(mg/kg) 速效磷/(mg/kg) 速效钾/(mg/kg)
4.90 7.57 0.60 0.24 5.02 83.02 5.15 45.25
表 1 供试土壤的基本理化性状
含量的动态变化趋势和不同器官之间单宁含量的差
异, 为海南黑山羊的安全采食及合理利用千斤拔属
植物资源提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试材料及其生境概况 供试材料为 3年生
的腺毛千斤拔[Flemingia. lineata(Linnaeus)Roxburgh
ex WT. Aiton]、 大叶千斤拔[F. macrophylla(Wildenow)
Prain]Ⅰ(种质源自海南)和Ⅱ(种质源自越南)、 宽
叶千斤拔(F. latifolia Bentham)、 海南千斤拔(F. latifolia
var. hainanensis YT. Wei et SK. Lee)、 球穗千斤
拔[F. strobilifera(Linnaeus)R. Brown]等 5 种千斤拔
属植物(6份种质)的嫩茎、 叶片。
试验采样地点位于中国热带农业科学院热带作
物品种资源研究所试验基地。 地处北纬 19° 30′,
东经 109° 30′, 海拔 149 m, 属热带季风气候类
型, 夏秋高温多雨, 冬春干旱低温, 年均温 23.98℃。
雨季 5~10 月份, 旱季 11 月至次年 4 月, 年均降
水 2 135.9 mm。 试验期间该试验地不施肥。
1.1.2 供试土壤 供试土壤为海南省儋州市中国
热带农业科学院热带作物品种资源研究所基地, 取
0~20 cm 表层土壤, 风干、 过 1 cm 筛、 混匀。 供
试土壤的基本理化性质见表 1。

0.6
0.5
0.4
0.3
0.2
0.1
0
0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25 0.3 0.35 0.4




单宁含量/(mg/mL)
图 1 单宁标准曲线
513- -
第 33 卷热 带 作 物 学 报
2.2 千斤拔单宁含量动态变化趋势
2.2.1 千斤拔叶片单宁含量动态变化趋势 大叶千
斤拔Ⅰ和腺毛千斤拔叶片的单宁含量低于 2%, 峰
值均出现在 7月, 大叶千斤拔Ⅰ叶片的单宁含量变
化趋势为单峰型, 最大值为 2.44%; 腺毛千斤拔叶
片单宁含量的变化趋势比较平缓, 最大值为 2.2%,
在 1 月和 2 月单宁含量较少 , 分别为 1.69% 、
1.70%(图 2)。
4 份叶片单宁含量高于 2%的千斤拔中, 大叶
种质
各个月份叶片中的单宁含量/%
平均值
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
宽叶千斤拔 2.76 2.64 2.51 2.75 2.91 2.68 2.00 2.69 2.97 2.63 2.48 2.64 (2.70±0.14)A
海南千斤拔 2.17 2.29 2.39 2.22 2.46 2.13 2.02 2.30 2.24 2.24 2.36 2.56 (2.28±0.15)B
腺毛千斤拔 1.69 1.70 2.00 2.03 1.86 2.18 2.22 1.99 1.90 1.82 1.78 1.98 (1.93±0.17)C
球穗千斤拔 2.04 2.84 2.41 2.46 2.94 2.26 2.41 2.69 2.57 2.81 2.66 2.54 (2.55±0.26)A
大叶千斤拔Ⅰ 1.61 1.69 2.08 1.86 2.13 1.78 2.44 1.54 1.61 1.70 1.71 1.63 (1.82±0.27)C
大叶千斤拔Ⅱ 2.09 2.45 2.32 2.31 2.58 1.86 1.91 1.89 1.98 1.78 2.32 2.54 (2.17±0.28)B
表 2 千斤拔叶片不同月份单宁含量
说明: 无相同字母表示差异极显著(p<0.01)。 下同
种质
各个月份茎中的单宁含量/%
平均值
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
宽叶千斤拔 1.71 1.72 1.93 2.06 1.62 1.63 1.31 1.47 1.04 1.39 1.62 1.63 (1.60±0.27)AB
海南千斤拔 1.77 1.96 1.89 1.80 1.65 1.39 1.44 1.48 1.46 1.98 1.43 1.46 (1.64±0.23)A
腺毛千斤拔 1.35 1.08 1.36 1.68 1.48 1.50 1.46 1.55 1.62 1.73 1.16 1.18 (1.43±0.21)B
球穗千斤拔 1.16 1.08 1.07 1.00 0.89 1.06 1.10 1.44 1.13 0.91 1.30 0.84 (1.08±0.17)C
大叶千斤拔Ⅰ 0.75 0.76 1.05 1.07 1.34 1.11 1.39 1.08 0.83 1.18 0.98 1.06 (1.05±0.20)C
大叶千斤拔Ⅱ 1.42 1.61 1.64 1.83 2.11 1.26 1.39 1.51 1.27 1.39 1.71 1.64 (1.56±0.25)AB
表 3 千斤拔茎在不同月份单宁含量
种质
各器官中单宁平均含量/%
叶 茎
宽叶千斤拔 (2.70±0.14)A (1.60±0.27)B
海南千斤拔 (2.28±0.15)A (1.64±0.23)B
腺毛千斤拔 (1.93±0.17)A (1.43±0.21)B
球穗千斤拔 (2.55±0.26)A (1.08±0.17)B
大叶千斤拔Ⅰ (1.82±0.27)A (1.05±0.20)B
大叶千斤拔Ⅱ (2.17±0.28)A (1.56±0.25)B
说明: 同行间不同字母表示差异极显著 (p<0.01)。
表 4 千斤拔茎、 叶平均单宁含量差异性分析
2 结果与分析
2.1 千斤拔单宁含量
分析结果表明, 5 种千斤拔(6份种质) 叶片、
茎中均含有不同水平的单宁, 其含量随月份的推移
而变化(表 2、 3), 但同一植物叶片的单宁含量显
著高于茎(表 4)。
6 份叶片中, 单宁含量最高为 9 月份的宽叶千
斤拔 (2.97% ) , 最低为 8 月份的大叶千斤拔Ⅰ
(1.54%)。 不同千斤拔叶片的单宁平均含量差异较
大, 单宁含量最高为宽叶千斤拔(2.70%), 最低的
为大叶千斤拔(1.82%), 其余依次为球穗千斤拔、
海南千斤拔、 越南大叶千斤拔和腺毛千斤拔。 依据
千斤拔叶片单宁含量的均值, 将其分成 2组进行动
态分析: 单宁含量低于 2%的包括大叶千斤拔Ⅰ、
腺毛千斤拔, 分别为 1.82%、 1.93%, 极显著低于
其它 4 种材料(p<0.01); 单宁含量高于 2%的包括
大叶千斤拔Ⅱ、 海南千斤拔、 球穗千斤拔和宽叶千
斤拔, 分别为 2.17%, 2.28%、 2.55%和 2.70%。
具体情况如表 2所示。
茎中单宁含量最高为 4 月份的宽叶千斤拔
(2.06%), 最低的为 1月份的大叶千斤拔(0.75%);
不同千斤拔的茎单宁含量差异显著, 单宁平均含量
最高的为海南千斤拔(1.64%), 最低为大叶千斤拔
(1.05%), 其余依次为宽叶千斤拔、 越南大叶千斤
拔、 腺毛千斤拔和球穗千斤拔。 依据千斤拔茎中单
宁含量的均值, 将其分成 2组进行动态分析: 单宁
含量低于 1.5%的包括大叶千斤拔、 球穗千斤拔和
腺毛千斤拔, 分别为 1.05%、 1.08%、 1.43%; 单
宁含量高于 1.5%的包括越南大叶千斤拔、 海南千
斤拔和宽叶千斤拔 , 分别为 1.56% 、 1.60% 、
1.64%。 具体情况如表3所示。
514- -
第 3 期 蔡林宏等: 几种千斤拔属饲用植物单宁含量动态分析
千斤拔Ⅱ和海南千斤拔叶片的单宁含量极显著低于
球穗千斤拔和宽叶千斤拔(p<0.01)(图 2)。 其中,
大叶千斤拔Ⅱ在 5 月和 12 月出现峰值, 分别为
2.58%、 2.54%, 而 6 月和 10 月单宁含量均低于
2%; 海南千斤拔、 球穗千斤拔和宽叶千斤拔的叶
片各月单宁含量均高于 2.0%, 始终在一个较高的
水平上波动, 均随月份呈波浪型变化趋势, 但宽叶
千斤拔的变化趋势较为平缓。 海南千斤拔在 12 月
出现峰值, 为 2.52%; 拔球穗千斤拔在 2、 5 和 10
月出现峰值, 分别为 2.84%、 2.94%和 2.81%; 宽
叶千斤拔的峰值出现在 5月和 8月, 分别为 2.91%、
2.97%, 但在 7月份单宁含量最低, 为 2.00%。
2.2.2 千斤拔茎中单宁含量动态变化趋势 单宁
含量低于 1.5%的 3 份千斤拔的茎, 其单宁均随月
份呈不规则的波浪形变化, 且变化幅度较大(图 3)。
大叶千斤拔在 5 月和 7 月出现峰值 , 分别为
1.34%、 1.39%, 最小值出现在 1 月和 2 月, 分别
为 0.75%、 0.76%; 球穗千斤拔在 8 月出现峰值,
为 1.44%, 最小值出现在 5 月和 10 月 , 分别为
0.89%、 0.91%; 腺毛千斤拔单宁各月单宁含量均
大于 1%, 且随月份呈先增后减的趋势, 峰值出现
在 10月, 为 1.73%, 最小值出现在 2月, 为 1.08%。
若以生育期推测, 大叶千斤拔和腺毛千斤拔的最小
值均出现在花期。
3
2.7
2.4
2.1
1.8
1.5
1.2
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12




/%
月份
宽叶千斤拔 海南千斤拔 腺毛千斤拔
球穗千斤拔 大叶千斤拔Ⅰ 大叶千斤拔Ⅱ
图 2 千斤拔叶片单宁含量动态变化

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12




/%
月份
宽叶千斤拔 海南千斤拔 腺毛千斤拔
球穗千斤拔 大叶千斤拔Ⅰ 大叶千斤拔Ⅱ
图 3 千斤拔茎单宁含量动态变化
2.3
1.8
1.3
0.8
0.3
515- -
第 33 卷热 带 作 物 学 报
单宁含量高于 1.5%的 3 份千斤拔茎, 其单宁
的变化趋势较为一致, 均随月份呈现较大的波动
(图 3)。 其中, 宽叶千斤拔和大叶千斤拔Ⅱ随月份
呈先增后减再增的变化趋势。 大叶千斤拔Ⅱ的峰值
出现在 5 月, 为 2.11%, 6 月和 9 月单宁含量较
低, 分别为 1.26%、 1.27%; 宽叶千斤拔的峰值则
出现在 4 月, 为 2.06%, 9 月出现最小值 1.04%;
海南千斤拔的峰值出现在 2 月和 10 月, 分别为
1.96%、 1.98%, 分别为花期和营养期。
3 讨论
单宁含量受植物遗传特性的影响。 Jackson 等 [5]
测定了热带树木、 灌木和豆科牧草叶片的单宁含量,
发现金合欢属(Acaci Miller)、 落花生属 (Arachis
Linnaeus)和决明属(Cassia Linnaeus)等部分植物单
宁含量不足 55 g/kg 干物质, 而银合欢属(Leucaena
Bentham)和朱樱花属 (Calliandra Bentham)等部分
植物单宁含量高达 60~90 g/kg干物质, 表明了单宁
含量随植物的不同而差异较大。 李茂等 [6]的研究表
明: 对叶榕(Ficus hispida Linnaeus f.)、 大叶千斤
拔、 白饭树[Flueggea virosa(Roxburgh ex Willdenow)
Voigt]等 15种热带乔灌木中均含有水平不等的单宁,
其中, 单宁含量最低的为对叶榕(0.39%), 最高的
为白饭树(2.80%)。 Gudej[7]等对蔷薇科(Rosaceae A.
L. Jussieu)悬钩子属(Rubus Linnaeus)黑莓的 3 个
野生种和 3 个栽培品种, 树莓的 2 个野生种和 13
个栽培品种单宁含量分别进行了测定, 发现树莓和
黑莓单宁含量存在差异; 不同品种的树莓单宁含量
差异较大, 变化范围在 2.62%~6.87%。 本研究中,
千斤拔叶片、 茎中的单宁含量均随种质的不同而存
在差异, 6 份叶片中, 从单宁含量最低的大叶千斤
拔Ⅰ到单宁含量最高的宽叶千斤拔, 其单宁平均含
量为 2.24%; 6 份茎中, 从单宁含量最低的大叶千
斤拔Ⅰ到单宁含量最高的海南千斤拔, 其单宁平均
含量为 1.39%。
植物的不同器官和不同生长发育阶段其单宁含
量也不一样。 王文杰等 [8]对兴安落叶松不同器官单
宁含量进行测定, 表明单宁含量由高到低依次为树
皮>根>针叶>树枝>茎木质部。 黄毅斌等 [9]测定了 5
种热带豆科牧草叶片和茎秆的单宁含量, 表明叶片
的单宁含量均高于茎秆, 其中, 叶片的总单宁平均
含量和缩合单宁含量分别为茎秆含量的 2.24~3.96
倍和 1.82~2.63 倍。 陈燕琴等 [10]在对山蚂蝗营养价
值随生育期变化动态的研究中表明, 单宁随生育期
的推移表现出逐渐下降的趋势, 其中, 卵叶山蚂蝗
与异叶山蚂蝗单宁含量在花期时最高, 其余 4种山
蚂蝗的最高值均出现在营养期。 郭彦军等[11]发现 5
种高山灌木的单宁含量随着季节的推移而下降, 而
珠芽蓼(Polygonum viviparum Linnaeus)和三穗苔草
(Carex tristachya Thunberg)呈先上升后下降的趋势。
本试验中, 不同植物叶片与叶片、 茎与茎之间单宁
含量存在较大差异, 同种植物叶片的单宁含量均显
著高于茎。 其中, 叶片中单宁的变化范围为 1.82%
~2.70%, 茎中单宁的变化范围为 1.05%~1.64%。
此外, 千斤拔叶片和茎均随着生长月份呈较为不规
则的波浪型趋势变化。
因此, 在利用千斤拔作为替补饲草或蛋白补充
料的时候, 可充分考虑茎、 叶比, 并注意其添加量,
以控制单宁含量。 此外, 也可选择在单宁含量较低
的月份对其进行利用, 以免给动物带来不良影响。
参考文献
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责任编辑: 叶庆亮
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