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［20］ Rosenberg GA，Cunningham LA，Wallace J，et al． Immu-
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(收稿日期 2012－11－15)
分光光度法测定 5 种紫珠属中药总黄酮的含量
王红刚，潘利明
(广东药学院，广东 广州 51006)
摘要:目的:测定并比较枇杷叶紫珠、杜虹花、尖尾枫、大叶紫珠、裸花紫珠中总黄酮的含量。方法:以无水芦
丁为对照品，采用分光光度法测定 5 种紫珠属中药提取物中总黄酮的含量。结果:五种供试品溶液测定方法的稳定
性、重复性均较好，平均回收率及 RSD 均符合要求，其总黄酮含量分别为 3. 49%、3. 98%、6. 86%、5. 40%、
13. 26%。结论:五种紫珠属中药总黄酮含量从高到低依次为:裸花紫珠、尖尾枫、大叶紫珠、杜虹花、枇杷叶紫珠。
关键词:分光光度法;总黄酮;紫珠
中图分类号:R 284 文献标识码:A 文章编号:1000－3649 (2013)03－0057－02
马鞭草科紫珠属 (Callicarpa L．)世界上共有
190 余种，我国有 46 种，主要分布于长江以南各省，
其中药用有 30 种，24 种具有止血作用［1］。该属植物
具有散瘀止血、消肿镇痛的功效，临床上主要用于
各种出血症。中药紫珠始载于 《本草拾遗》，别名止
血草，根或全株入药，能通经和血，治月经不调、
虚劳、白带、产后血气痛、风寒感冒。中药紫珠的
植物来源较为复杂，《中国植物志》记载紫珠来源于
紫珠属植物紫珠 Callicarpa bodinieri Levl．，在 《中药
大辞典》、《中华本草》等专著中，有关紫珠的来源
还提到杜虹花 C． formosana Rolfe． ［C． pedunculata-
Lam． et Bakh．］、白棠子树 C． dichotoma (Lour)K．
Koch． 等［2］。在岭南地区较常用的为大叶紫珠 (Clli-
carpabodinieri Levl．)、 杜 虹 花 (C． formasana
Rolfe．)、尖尾枫、枇杷叶紫珠、裸花紫珠等。近年
来，发现该属植物具有镇痛、抗炎、抗氧化、抗肿
瘤等多种活性。紫珠属药材成分较复杂，含鞣质、
黄酮类化合物、酚类物质、糖类物质等多种化合
物［2］。研究发现，紫珠药材中鞣质、酚类物质、糖类
物质均很难进行定量分析，并且黄酮类化物质在很
多紫珠属中药中都是一类主要的药效成分［2］，故将黄
酮类化合物作为指标成分，通过测定其总黄酮的含
量来控制裸花紫珠药材的质量。实验参照其他文献
总黄酮的测定方法［3，4］，采用分光光度法对醇提物总
黄酮含量的测定进行了研究。
1 仪器与试药
岛津 UV － 2450 紫外分光光度计;大叶紫珠
(Callicarpabodinieri Levl．)、杜虹花 (C． formasana
Rolfe．)、尖尾枫采自广东药学院药圃，枇杷叶紫珠、
裸花紫珠药材采自广州中医药大学药圃，经广东药
学院刘基柱副教授鉴定为马鞭草科植物大叶紫珠、
杜虹花、枇杷叶紫珠、尖尾枫、裸花紫珠，此五种
样品均采自 2012 年 6 月 5 日;芦丁对照品 (中国药
品生物制品检定所) ;其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 溶液的制备 精密称取干燥至恒重的芦丁对照
品 30. 2mg，置 100ml 量瓶中，加入 95%乙醇 20ml，
置温水中加热使溶解，放冷，加 95%乙醇稀释至刻
度，摇匀，即得对照品溶液 (含无水芦丁 0. 302mg·
ml－1)。
2. 2 供试品溶液的制备 精密称取干燥至恒重的枇
杷叶紫珠、杜虹花、尖尾枫、大叶紫珠、裸花紫珠
粉末各 3g，加 95% 乙醇 50ml，80℃超声波提取 2
次，每次 1h，滤过，合并滤液，减压回收乙醇至至
约 20ml，加硅胶 H 10g，拌匀后于 105℃烘干，放
冷，转移至具塞三角瓶中，加乙醇 100ml，精密称
重，超声处理 30min，擦干三角瓶，放冷后称重，用
乙醇补足减失重量，摇匀，过滤，精密量取续滤液
20ml，置 100ml量瓶中，加 95%乙醇至刻度，摇匀，
即得供试品溶液。
2. 3 测定波长的确定 取对照品溶液和供试品溶液
各 5ml 分别置 25ml 量瓶中，定容，摇匀后分别于
200 ～ 600nm 范围扫描，两种溶液在 510nm 处均无吸
收峰，见图 1。另取对照品和供试品溶液各 5ml，分
别置 25ml 量瓶中，加 5%亚硝酸钠溶液 1ml，摇匀，
放置 6min，加 10% 硝酸铝溶液 1ml，摇匀，放置
6min，加氢氧化钠液 10ml，再加水至刻度，摇匀，
放置 15min后分别于 200 ～ 600nm 扫描。结果发现，
两种溶液在 510nm处均有较大吸收峰，见图 2。
2. 4 标准曲线的绘制 精密取对照品溶液 1、2、3、
4、5、6ml，分别置 25ml量瓶中，各加水至 6ml，加
5%亚硝酸钠溶液 1ml，摇匀，放置 6min，加 10%硝
酸铝溶液 1ml，摇匀，放置 6min，加氢氧化钠试液
10ml，加水至刻度，摇匀，放置 15min;以相应的溶
液为空白对照。照分光光度法 (《中国药典》2000
年版一部附录 V B) ，在 510nm 测定吸光度，绘制浓
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2013 年第 31 卷第 03 期
Vol． 31，No． 03，2013
四 川 中 医
Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine
图 1 对照品和供试品溶液未显色扫描图
图 2 对照品、供试品溶液扫描图
度 － 吸光度标准曲线，求得回归方程为:A =
9. 5364C—0. 0233 (r = 0. 9998)。结果表明，芦丁对
照品溶液浓度在 12. 08 ～ 72. 48μg·ml－1 范围内，吸
光度与浓度有良好的线性关系。
2. 5 测定方法 精密吸取供试品溶液 4ml (其中裸
花紫珠供试品溶液吸取 2ml) ，置 25ml量瓶中，加水
至刻度，摇匀，作为空白对照。另精密量吸取供试
品溶液 4ml (其中裸花紫珠供试品溶液吸取 2ml) ，
置 25ml棕色量瓶中，各加水至 6ml，加 5%亚硝酸钠
溶液 1ml，摇匀，放置 6min，加 10% 硝酸铝溶液
1ml，摇匀，放置 6min，加氢氧化钠试液 10ml，加水
至刻度，摇匀，放置 15min;以相应的溶液为空白，
在 510nm处立即测定吸光度，根据标准曲线方程计
算总黄酮含量。
2. 6 精密度试验 精密称取干燥至恒重的枇杷叶紫
珠叶粉末，照“2. 2”项下方法制备枇杷叶紫珠供试
品溶液，精密量取 4ml，照 “2. 5”项方法连续测定
吸光度 5 次以测得吸光度计算，结果 RSD= 0. 12% 。
表明仪器的精密度良好。
2. 7 稳定性试验 精密称取干燥至恒重的枇杷叶紫
珠、杜虹花、尖尾枫、大叶紫珠、裸花紫珠粉末，
照“2. 2”项下方法制备供试品溶液，精密量取 4ml，
照“2. 5”项下测定方法分别于 10、12、14、16、
18、20min进行定量测定，结果五种供试品溶液 RSD
分别为 0. 42%、0. 33%、0. 78%、0. 55%、0. 62%。
表明供试品溶液在 10 ～ 20min内稳定。
2. 8 重复性试验 精密称取经过干燥至恒重的枇杷
叶紫珠、杜虹花、尖尾枫、大叶紫珠、裸花紫珠粉
末各 5 份，照 “2. 2”项下方法各制备供试品溶液，
照“2. 5”项下方法测定吸光度，结果 RSD 分别为
0. 41%、0. 98%、1. 21%、1. 03%、1. 76%。结果表
明:方法重复性良好。
2. 9 回收率试验 精密称取干燥至恒重的枇杷叶紫
珠、杜虹花、尖尾枫、大叶紫珠、裸花紫珠粉末各 6
份，精密称重，各分别精密加入芦丁对照品溶液适
量，照 “2. 2”项下方法各制备供试品溶液，按
“2. 5”项下方法测定。结果:五种供试品溶液的平
均回收率为:98. 5%、98. 9%、99. 4%、97. 9%、
100. 2%。RSD 分别为 0. 47%、0. 96%、1. 43%、
1. 51%、1. 64%。结果表明:方法回收率良好。
2. 10 样品的含量测定 精密称取干燥至恒重的枇
杷叶紫珠、杜虹花、尖尾枫、大叶紫珠、裸花紫珠
粉末各 5 份，按 “2. 2”项下方法制备供试品溶液，
照“2. 5”中方法测定，各样品总黄酮含量见表 1。
表 1 5 种紫珠属中药中总黄酮的含量
序号 药材 总黄酮含量 (%) RSD (%)
1 枇杷叶紫珠 3. 49 0. 41
2 杜虹花 3. 98 0. 98
3 尖尾枫 6. 86 1. 21
4 大叶紫珠 5. 4 1. 03
5 裸花紫珠 13. 26 1. 76
3 讨 论
预实验中比较了回流提取与超声提取，结果表
明超声提取的总黄酮效率要高于回流提取。此外，
我们还考察了乙醇浓度、超声时间、提取次数 3 个
因素，结果显示在 95%乙醇溶剂中超声提取 2 次每
次 0. 5h即可基本上将总黄酮提取完全，故本实验供
试液的制备即采用此方法。另外，在超声提取完全
后将溶液浓缩，然后用硅胶吸附后重新提取总黄酮，
此方法可以减少叶绿素的干扰，同时总黄酮也基本
上不会丢失。
黄酮作为紫珠属中药重要的组分，也是紫珠属
中药的活性成分。通过实验结果发现，该五种紫珠
属中药均含有黄酮类化合物，其中总黄酮含量从高
到低依次为:裸花紫珠、尖尾枫、大叶紫珠、杜虹
花、枇杷叶紫珠。现在紫珠属中药用药比较混乱，
往往把这几种紫珠属中药都作为紫珠入药，彼此相
互混淆，通过本论文的研究，为我们科学评价和开
发紫珠属中药资源提供了依据。
参考文献
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四 川 中 医
Journal of Sichuan of Traditional Chinese Medicine
2013 年第 31 卷第 03 期
Vol． 31，No． 03，2013