全 文 ：HPLC测定小儿止咳颗粒中岩白菜素的含量
杨能英 , 　夏新华
(湖南中医学院药剂教研室 ,湖南 长沙 410004)
收稿日期:2002-09-11
作者简介:杨能英(1976～ ),女 ,湖南益阳人 ,研究生 , 研究方向:中药新药的制备工艺与质量标准研究..电话:0731-5686164 , E-mail:xi-
aoyanger2000@yahoo.com.cn
关键词:小儿止咳颗粒;岩白菜素;HPLC
中图分类号:R927.2　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2003)07-0591-02
　　小儿止咳颗粒主要由矮地茶 、麻黄 、苦杏仁等中药制备
而成 ,临床用于小儿外感咳嗽的治疗 ,疗效显著。方中矮地
茶为君药 , 具有镇咳去痰之功效 ,所含主要有效成分为岩白
菜素[ 1] 。因此 ,本文选择以岩白菜素为指标成分 , 采用高效
液相色谱法进行测定。
1　仪器与试药
1.1　仪器　Water 高效液相色谱仪;Waters 2487 型双波长
紫外检测器 , Polaris 5u C18-A 色谱柱(250mm ×4.6mm),
Breeze工作站 , C-R3A 数据处理器 , MA110 型电子分析天
平 ,超声波提取器 , UV-265 日本岛津自动记录分光光度计。
1.2　试药　岩白菜素对照品(批号:1532-200001)由中国药
品生物制品检定所提供;HPLC 检测为单一成分 , 按归一化
法计算其纯度为 98.64%;小儿止咳颗粒由湖南某厂提供;
甲醇为色谱纯 ,水为重蒸馏水 , 其余均为分析纯。
2　方法与结果
2.1　检测波长的选择　取岩白菜素对照品适量 , 加甲醇制
成对照品溶液 ,置紫外分光光度计记录其它紫外吸收光谱 ,
结果显示 , 岩白菜素在 275nm 波长处有最大吸收 , 故选择
275nm 作为测定波长。
2.2　对照品溶液的制备　精密称取岩白菜素对照品12.1
mg ,置 25m L量瓶中 , 加甲醇溶解 ,并稀释至刻度 , 摇匀;精密
量取 10mL , 置 100mL 量瓶中 , 加甲醇至刻度 , 摇匀 , 即得
(0.0484mg·m L-1)。
2.3　供试品溶液的制备 　取本品适量 , 研细 , 取细粉约
0.75g ,精密称定 , 置磨口锥形瓶中 , 加入乙醚 50m L , 回流
60min , 静置 ,倾出乙醚液;残渣挥干乙醚 ,然后精密加入甲醇
50m L ,称定重量 , 超声处理(200W , 40kHz)30min , 放冷 , 再称
定重量 ,用甲醇补足减失的重量 , 滤过 ,取其续滤液作为供试
品溶液。
2.4　阴性对照液的制备　按处方比例称取除去矮地茶的其
它药材适量 ,依照小儿止咳颗粒的制备工艺和供试品溶液的
制备方法制备阴性对照液。
2.5 　色谱条件　色谱柱:Polaris 5u C18-A 柱(250mm ×
4.6mm)。流动相:甲-水(22∶78)。检测波长:275nm。流速:
1.2mL·min-1 。柱温:室温。灵敏度:2AUFS , 理论板数以岩
白菜素计不低于 3000。
A
B
C
岩白菜素的的 HPLC图谱
A.对照品　B.样品　C.阴性对照品
2.6　干扰试验　照上述色谱条件 ,量取供试品溶液 、对照品
溶液 、阴性对照液各 5μL ,分别注入色谱仪。供试品色谱中 ,
在与对照品色谱图相应的位置上有一相同的色谱峰 ,而阴性
对照液未见干扰(阴性对照品色谱图在 5 ～ 8min 之间无色谱
峰 , 可认为样品中保留时间 6.051min 处的色谱峰即为对照
品色谱峰)。
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2003 年 7 月
第 25 卷　第 7 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
July , 2003
Vol.25　No.7
2.7　线性关系考察　精密吸取浓度为 0.0484mg·mL-1的
岩白菜素对照品溶液 2 , 4 , 6 , 8 , 10μL 进样 , 测定其峰面积积
分值 ,以浓度为横坐标 , 峰面积积分值为纵坐标 ,绘制标准曲
线 ,其回归方程为:A =1.68 ×103C -2.67 ×104 , r =
0.9995。可见 , 岩白菜素在 96.8 ～ 484.0ng 范围内具有良好
的线性关系(以下含量测定结果均按回归方程计算)。
2.8　提取时间的考察　实验考察了样品超声提取 30min ,
45min , 60min对岩白菜素含量测定的影响 , 结果表明:样品
在超声提取 30min 时 ,含量已基本提取完全 , 因此方法中采
用超声提取 30min。见表 1。
表 1　 不同提取时间岩白菜素的含量
提取时间(min) 30 45 60
含量(mg·g -1) 3.57 3.55 3.62
2.9　精密度试验　精密吸取同一对照品溶液 5μL , 重复进
样 5 次 ,测定其峰面积积分值 , 结果 RSD =1.34%(n=5)。
2.10　稳定性试验　分别精密吸取同一样品供试溶液 5μL ,
于 0 , 1 , 2 , 4 , 8 , 24h 进样 , 测定其岩白菜素峰面积积分值。结
果表明 ,供试品溶液在 24h 内峰面积积分值基本稳定 , RSD
=1.39%(n=5)。
2.11　重复性试验　取同一批号样品(20010720)约 0.75g ,
共 5 份 ,按上述条件 , 测定其岩白菜素含量。结果平均含量
为 3.58mg·g-1 , RSD 为 0.51%(n=5)。
2.12　加样回收率试验　精密称取已知含量的样品(批号:
20010720 , 含量为 3.58mg·g-1)约 0.37g , 分别精密加入岩白
菜素对照品溶液(0.52mg·g-1)1.0 , 2.0 , 3.0mL , 于水浴上挥
干溶剂 ,然后按上述方法制备供试品溶液 , 并测定含量 , 计算
回收率 , 结果平均回收率为 98.58%, RSD 为1.10%。 见表
2。
2.13　样品测定　按拟定的含量测定方法 ,测定 3 批样品中
岩白菜素的含量 , 结果见表 3。
表 2　 回收率试验结果
编号 取样量(g)
样品含量
(mg)
加入量
(mg)
测得量
(mg)
回收率
(%)
平均值
(%)
RSD
(%)
1 0.3466 1.2408 1.04 2.2719 99.14
2 0.3572 1.2788 1.04 2.3197 100.09
3 0.3526 1.2623 0.52 1.7775 99.08
4 0.3572 1.2788 0.52 1.7832 97.00 98.58 1.10
5 0.3508 1.2559 1.56 2.7889 98.27
6 0.3554 1.2723 1.56 2.7995 97.90
表 3　 3 批样品含量测定结果
批号 010720 010728 010802
含量(mg·袋-1)17.95 17.80 17.88 17.70 17.00 16.70
3　讨论
3.1　根据参考文献 ,岩白菜素易溶于甲醇 , 在水或乙醇中微
溶[ 2] ,故选择甲醇作为本品的溶剂。
3.2　本品是一个复方制剂 ,由矮地茶等 12 味中药组成 , 其
甲醇提取液所含成分复杂 , 颜色较深 ,实验表明 , 用甲醇提取
液直接进样 , 图谱峰形较难看 ,基线不平稳 , 且对 HPLC 柱污
染严重。因此 , 对样品进行净化处理十分必要。我们对 D101
型大孔吸附树脂柱 、聚酰胺柱以及用乙醚脱脂 3 种净化处理
方法进行了比较 , 结果表明 ,样品经乙醚脱脂处理后 ,供试液
颜色明显变浅 , 杂质的影响最小 , 且回收率高 , 重复性好 , 方
法简便 , 可以很好地控制本品的质量。
参考文献:
[ 1] 　张艺 ,赖先荣 ,孟宪丽 ,等.紫金牛属药用植物中岩白菜素的高
效液相色谱法测定及资源利用[ J] .中国中药杂志 , 1996 , 21
(8):458.
[ 2] 　中华人民共和国药典(一部)[ S] .北京:化学工业出版社 ,
2000:169.
落花叶安神剂对中枢神经系统作用的初步研究
郭红学 , 　李　展 , 　王　戈
(河南省南阳市药品检验所 ,河南 南阳 473000)
收稿日期:2002-01-19
作者简介:郭红学(1974～ ),男 ,河南南阳人 ,大学 ,研究方向:中药药理.电话:0377-3133050.
关键词:落花叶安神剂;镇静;催眠;抗惊厥
中图分类号:R285.5　　　　　文献标识码:B　　　　　文章编号:1001-1528(2003)07-0592-01
　　落花叶安神剂是纯中药落花叶提炼制成的水煎剂。本
文进行了落花叶安神剂镇静 、催眠 、抗惊厥作用的初步研究。
1　实验材料
1.1　药品
落花叶安神剂:黄山制药厂 , 批号:990928;戊巴比妥钠:
辽宁制药厂 , 批号:961022;安定片:济南第三制药厂 , 批号:
960801;硝酸士的宁注射液:上海天丰制药厂 , 批号:961211。
1.2　动物　健康小白鼠 , 体重 18g ～ 22g , 有河南省南阳卫
校动物实验中心提供。
1.3　器材　动物活动箱(上海医疗器三厂)。
2　方法及结果
2.1　小白鼠 50 只(♀♂各半), 随机分为 5 组 , 即生理盐水
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2003 年 7 月
第 25 卷　第 7 期
中 成 药
Chinese T raditional Patent Medicine
July , 2003
Vol.25　No.7