全 文 ：第19卷 第11期
Vol.19 No.11
2013年 11月
November.2013Guiding Journal of Traditional Chinese Medicine and Pharmacy
新疆雪莲总黄酮对多种癌细胞增殖抑制的研究*
吕 芳1，张晓梅1，李江伟2（通讯作者）
（1.江苏省苏北人民医院生殖医学中心，江苏 扬州 225001；
2.新疆大学生命科学与技术学院，新疆生物资源基因工程重点实验室，新疆 乌鲁木齐 830046）
[摘要] 目的：研究雪莲总黄酮对Hela、KYSE150、LS180细胞增殖的抑制效果。方法：采用CCK-8检测雪莲总黄酮对Hela、
KYSE150、LS180细胞增殖能力的影响，293T细胞为正常细胞对照，观察雪莲总黄酮处理6 d后Hela细胞数量形态的变化。结果：
雪莲总黄酮0.1 mg/mL和0.2 mg/mL处理3种癌细胞，与对照组比较，24 h和48 h后能够不同程度抑制细胞增殖。结论：雪莲总黄
酮能够抑制多种癌细胞增殖，具有剂量和时间依赖性。
[关键词] 雪莲总黄酮；抗肿瘤；CCK-8
[中图分类号] R285.5 [文献标识码] A [文章编号] 1672-951X（2013）11-0076-02
Affects of Sauflsurea Involucrata Flavones on Cancer Cell Proliferation
LV Fang1, ZHANG Xiao-mei1, LI Jiang-wei2 (Corresponding Author)
（1.Reproductive Medicine Center, Northern Jiangsu Peoples Hospital, Yangzhou Jiangsu 225001, China;
2.National Key Laboratory Basis of Xinjiang Biology Resources and Genetic Engineering，College of Life Science and
Technology，Urumqi Xinjiang 830046,China）
[Abstract] Objective: To study the affects of Sauflsurea involucrata flavonoids on Hela, KYSE150 and LS180 cell lines
proliferation. Methods: The affects of Sauflsurea involucrata flavonoids on cells proliferation of Hela, KYSE150 and LS180 cell
was determined by a CCK-8 assay, and 293T cells were control group. The number and form of Hela was observed in 6
days. Results: Comparing with the control group, CCK-8 assay showed thatthe growth of cancer cell lines was significantly
decreased, after being stimulated by flavones at 0.1 mg/mL and 0.2 mg/mL for 24 and 48 h. Conclusion: Sauflsurea involucrata
flavonoids can inhibit cancer cell proliferation in a dose-and time-dependent.
[Key words] Sauflsurea involucrata flavones; Antitumor activity; CCK-8
近年来研究发现植物药理活性成分能够在表观遗传学
调节发挥抗癌作用，茶多酚、苹果多酚、黄酮类化合物等植物
活性成分都能抑制癌细胞增殖，具有抗肿瘤作用[1]。这些药理
活性成分有益于多种慢性疾病治疗，尤其是黄酮和类黄酮化
合物[2-3]。本文研究新疆雪莲总黄酮对多种癌细胞：宫颈癌（Hela）、
食管癌（KYSE150）、结肠癌（LS180）细胞增殖能力的影响，为
新疆雪莲总黄酮抗癌提供研究基础。
1 材料与方法
1.1 实验材料和细胞系 雪莲总黄酮注射液购自新疆制药
厂，CCK-8购自Dojindo公司，DMEM干粉购自GIBCO公司产
品，胎牛血清购自山东银香伟业生物工程公司，其他试剂均
为国产分析纯。Hela，LS180，293T细胞为实验室冻存保存；
KYSE150细胞系由北京协和医科院肿瘤医院王明荣教授惠
赠，KYSE150细胞用10%胎牛血清DMEM培养，其它细胞均为
90% RPMI1640加10%胎牛血清培养，37 ℃ 5% CO2的培养箱
培养。
1.2 CCK-8检测 将对数生长期的肿瘤细胞用胰蛋白酶消
化后计数，96孔板每孔接种2000-5000个细胞，细胞中分别添
加不同浓度雪莲溶注射液作为实验组，293T细胞作为正常
细胞对照，常规培养细胞空白对照组。CCK-8于处理后24 h、
48 h测定，每孔加入1%CCK-8，37℃ 5% CO2继续培养1 h，酶联
免疫仪OD450波长下检测各孔吸光度值。
1.3 雪莲总黄酮对癌细胞形态的影响 雪莲总黄酮0.05mg/mL，
0.1 mg/mL，0.2 mg/mL作用Hela细胞6 d后，观察细胞形态变化
和数量，使用0.04%台盼蓝计数，染色的为死细胞，拒染的为
活细胞。
1.4 统计学方法 测试数据采用office excel统计学处理，进
行组间方差齐性检验。满足方差齐性采用t检验，不满足方齐
性采用秩和检验。
2 实验结果
2.1 雪莲总黄酮对多种癌细胞增殖具有抑制作用 CCK-8
结果显示，0.1 mg/mL和0.2 mg/mL雪莲总黄酮处理宫颈癌Hela
*基金项目：科技省部共建新疆生物资源基因工程重点实验
室开放基金（XJDX0201-2010-04）
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DOI:10.13862/j.cnki.cn43-1446/r.2013.11.052
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November.2013
细胞、食管癌KYSE510细胞及结肠癌LS180细胞24 h后，细胞
增殖能力均显著低于空白对照组（P<0.05），其中KYSE510在
24h后0.2mg/mL处理组极显著低于空白对照组。48 h后0.1mg/mL
和0.2 mg/mL雪莲总黄酮处理各组癌细胞增殖能力也极显著
低于空白对照组（P<0.01），表明雪莲总黄酮对3种癌细胞增殖
能力的影响具有浓度和时间依赖性。其中，雪莲总黄酮处理
Hela细胞系，LS180结肠癌细胞系24 h后，0.2 mg/mL为半数致
死剂量，48 h后0.1 mg/mL达到半数致死剂量；而KYSE150细胞
处理24 h时即达到半数致死剂量，IC50为0.07 mg/mL，较其它癌
细胞更为敏感。0.05 mg/mL雪莲总黄酮对癌细胞增殖能力无
明显抑制。293T细胞不同处理组在24 h和48h与空白对照组比
较，增殖能力差异无统计学意义（P>0.05）。（见表1）
表1 不同浓度雪莲总黄酮处理后各组细胞增殖率 （x+s）
组别 浓度 时间 宫颈癌Hela 食管癌KYSE510 结肠癌LS180 293T
（mg/mL） （h） 细胞 细胞 细胞 细胞
实验组 0.05 24
48
0.1 24
48
0.2 24
48
对照组 -- 24
-- 48
注：与空白对照组比较，aP＜0.05，bP＜0.01。
2.2 雪莲总黄酮作用Hela细胞6 d后细胞形态和数量变化 不
同浓度雪莲总黄酮作用Hela细胞6 d后，台盼蓝拒染法结果显
示，随着雪莲总黄酮作用浓度增大，处理时间延长，其对癌细
胞增殖抑制作用逐渐增强。统计学分析雪莲总黄酮处理了6 d
的Hela细胞数量显示，雪莲黄酮处理组0.05 mg/mL[（12.5±1.8）
×104]，0.1 mg/mL[（4.2±0.7）×104]，0.2mg/ml[（1.2±0.1）×104]处理
6 d后细胞数量少于对照组[（25.4±2.1）×104]，差异有统计学意
义（P﹤0.01）。并且随着处理时间增加雪莲总黄酮对癌细胞增
殖抑制能力持续增加。（见图1）
图1 不同浓度雪莲总黄酮作用Hela细胞6 d后
雪莲总黄酮处理Hela细胞6 d后，细胞增殖受到抑制，形
态学显示雪莲总黄浓度越高活细胞数量越少，癌细胞增殖速
率越慢。（见图2）
3 讨 论
肿瘤是多因素，多阶段形成引起的细胞增殖过度或凋亡
减弱，当前对肿瘤的非手术治疗深受放化疗毒副作用的困
扰，因此研究无创伤性，无毒副作用的天然植物抗肿瘤药物
成为当今国际医药研究的重点方向。植物药理活性成分通过
调节表观遗传作用治疗癌症的机制是优先在肿瘤细胞中抑
制细胞增殖和诱发细胞程序性死亡，进而调节细胞周期进程
与细胞凋亡来调节基因表达[4]。这些活性成分能特异性作用
于癌细胞发挥抗肿瘤作用，对正常细胞增殖无抑制作用。本
研究中，我们发现雪莲总黄酮能够抑制多种癌细胞增殖，抑
制效果具有时间和剂量的依赖性。不同癌细胞抑制作用有差
异，食管癌细胞KYSE150对雪莲总黄酮更为敏感，其抑制癌
细胞增殖的机制需要进一步研究。对雪莲总黄酮抗癌机理的
研究，有利于阐述中药活性药理成分治疗癌症的机制和新抗
肿瘤药的研制和开发。
参考文献
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[4] 吕芳,苏幼红,张富春,李江伟.植物药理活性成分对表观遗
传调节的研究概况[J].中草药,2008,21(2):121-124
（收稿日期：2013-10-15 编辑：朱民）
图2 雪莲总黄酮作用Hela细胞6 d
1.27±0.040
1.339±0.204
0.836±0.045a
0.620±0.119a
0.703±0.019a
0.289±0.051b
1.233±0.023
1.482±0.085
1.421±0.064
1.851±0.207
0.657±0.111a
0.544±0.058b
0.694±0.013b
0.125±0.044b
1.443±0.137
2.296±0.296
1.375±0.276
1.331±0.098
1.157±0.107a
0.994±0.051a
0.983±0.033a
0.432±0.075b
1.323±0.027
1.385±0.047
0.323±0.116
0.093±0.051
0.283±0.091
0.329±0.077
0.277±0.085
0.393±0.068
0.341±0.092
0.453±0.079
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