全 文 ：第 33 卷　第 4期
2004 年　7月
卫　生　研　究
JOURNAL OF HYGIENE RESEARCH
Vol.33　No.4
Jul.　2004　455
文章编号:1000-8020(2004)04-0455-01 ·方法与技术·
贯众影响衰老模型小鼠不同组织酶活性研究
潘伟槐　祝尧荣　朱丽萍　余桂珠　亚芬
绍兴文理学院生物科学系 ,绍兴　312000
　　贯众(Polystichum falcatum Diels)能清热解毒 , 补阳壮肾 ,
强腰膝 ,治疗阳痿 、遗精 、遗尿等功效。已有实验证明 , 贯众能
抗乙肝病毒 、流感病毒 、艾滋病毒等 , 对子宫平滑肌有明显的
收缩作用 ,还能抑制体内的白血病细胞[ 1] 。贯众可提高果蝇
的平均寿命[ 2] , 能有效提高果蝇体内 SOD 的活性 , 降低 MDA
的含量[ 3] 。本研究进一步探索饲喂贯众水提剂一个月后 , 衰
老模型小鼠不同组织有关酶活性的变化。
1　材料和方法
1.1　贯众水提剂的制备
贯众从中药店购买 ,称取 800g ,室温下用蒸馏水浸泡 3h ,
文火煮沸 1h , 用 6层纱布过滤 , 制成 40%(400g L)的水提剂浓
度 ,置于 4℃冰箱保存。用时稀释成 20%、10%、5%的浓度。
1.2　小白鼠衰老模型的建立饲养
浙江省动物实验中心提供的 ICR鼠 , 45 日龄。将小白鼠
随机分成 5组 , 每组 24只 , 雌雄各半 ,每天供给足够的生长饲
料的同时均用腹腔注射D-半乳糖 70mg (kg·d)致衰小白鼠 ,其
中四组同时分别用 40%、20%、10%、5%贯众水提剂饲养 , 一
组以清水饲养作为对照组。 30 天后挖眼球采血 , 取大脑 、肝
脏 、心脏。
1.3　样品的制备和酶活性的测定
样品的制备和测定均严格按照南京建成生物工程研究所
提供的方法进行。 SOD 的测定用改良的连苯三酚自氧化法 ,
MDA的测定用硫代巴比妥酸(TBA)法 , 蛋白质的测定采用考
马斯亮蓝染色法[ 4 , 5] 。
1.4　统计处理
进行 independent-samples T test。
2　结果与分析
以不同浓度贯众水提剂饲养 30天后 , 衰老模型小鼠大脑
组织 SOD酶活性 、MDA的含量 、NOS 酶活性的变化 , 以及心肌
细胞膜上 Na+-K+-ATP和 Ca2+-Mg2+-ATP 酶和肝组织GSH-Px
的变化见附表。 可以看出 , 贯众处理组较对照组 , SOD、NOS
酶活性有明显提高。MDA含量明显降低 , 且大部分达极显著
水平 , 尤其以 10%和 20%贯众水提剂效果最显著。其中 , SOD
活性和 MDA含量基本上呈负相关趋势。
作者简介:潘伟槐 ,男 ,硕士 ,副教授
附表　衰老模型小鼠大脑组织 SOD、MDA、NOS水平 ,心肌细胞膜 Na+-K+-ATPase、 Ca2+-Mg2+- ATPase和肝组织 GSH-Px变化( x±s)
组别 SOD(U mg prot)
MDA
(pmol mg prot)
NOS
(U mg prot)
Na +-K+-ATPase
(μmol h·mg prot)
Ca2+-Mg2+-ATPase
(μmmol h·mg prot)
GSH-Px
(U mg prot)
对照组 32.09±9.37 145.83±23.68 3.31±0.88 17.00±2.81 13.97±2.52 71.29±11.52
5%贯众 42.79±7.50(1) 114.76±16.86(2) 4.34±0.83(1) 19.58±1.26(1) 16.67±0.97(1) 82.52±13.67
10%贯众 47.12±5.58(2) 111.70±16.36(2) 6.37±1.08(2) 20.76±1.94(1) 16.80±0.93(1) 85.52±10.39(1)
20%贯众 56.34±4.61(2) 89.73±18.37(2) 4.56±0.96(1) 18.76±0.54 15.38±1.10 78.49±13.06
40%贯众 53.42±8.05(2) 96.35±27.62(2) 5.19±1.00(2) 19.54±1.64(1) 17.19±1.02(1) 87.66±11.80(2)
　　注:(1)P<0.05(2)P<0.01
　　贯众处理组较对照组 , Na+-K+-ATPase 和 Ca2+-Mg2+-
ATPase活性有显著增加 , 说明贯众对防止心肌细胞膜过氧化
破坏有作用。肝组织中的GSH-Px活力有增加。
3　讨论
用 D-半乳糖建立衰老模型 , 通过检测 SOD、NOS 、ATP、
GSH-Px 酶及MDA 这些与细胞老化过程有关的生化指标评价
贯众的抗衰老作用。SOD活性的增强 , 有助于消除自由基及
活性氧对细胞和细胞膜的损伤 , 降低脂质过氧化的终产物
MDA量。GSH-Px也是一种抗氧化酶类 , 保护细胞膜系统 , 免
遭过氧化的损伤。NOS 活力的增加导致 NO 量上升 , NO 可通
过激活可溶性鸟苷酸环化酶 ,升高细胞内环磷酸鸟苷的水平 ,
对心血管的硬化有一定的防治作用。 ATP 酶(Na+-K+-ATPase
和 Ca2+-Mg2+-ATPase)是存在于质膜上的酶 ,自由基和脂质过
氧化易使该酶的活性下降 ,而降低脂质过氧化程度 , 可以保护
磷脂从而保护了ATP 酶[ 6] 。本研究证明贯众能提高 ATP 酶 、
SOD酶等的活性 ,而降低 MDA 含量 , 从而增强了细胞膜的流
动性延缓细胞老化。
4　参考文献
1　蒋亚生 ,杨宁.贯众的药理研究进展.药学实践杂志 , 2000 , 18(1):
17-18
2　张建龙 ,袁朝晖.贯众和狗脊对野生型及三隐性果蝇寿命的影
响.中国老年学杂志 , 2000 ,20:3-5
3　潘伟槐 ,俞长亮 ,陈雪静 , 等.贯众水提物对果蝇体内 SOD 活性
及MDA含量的影响研究.中国老年学杂志 , 2002 , 22(6):509-510
4　刘声远 ,刁爱坡.铜离子对连苯三酚自氧化法测定 SOD活性的影
响及消除.沈阳理工大学学报 , 1996 ,27(2):180-182
5　李建武 ,萧能庚 ,余瑞元 ,等.生物化学实验原理和方法.北京:北
京大学出版社 , 1994 , 174-176 , 318-323
6　王秋桂 ,何丽娅 ,陈业文 ,等.绞股蓝总皂甙对严重烫伤大鼠胃 、
肠 、肝组织中 SOD、GSH-PX、ATPase 、MDA含量的影响.咸宁医学
学院学报 ,2000 , 14(1):17-18 (2003-12-08收稿)