全 文 ：娜“ 准闷菊 姗 年复刊号
褐环粘盖牛肝菌的菌丝营养特性研究
应 国华l )叶荣华l )吕明亮l )朱 琼l )李伶俐l )吴学谦 2 )
(l )丽水市林业科学研究所 , 浙江 丽水 323() X() ; 2) 浙江省林业科学研究院 , 浙江 杭州 31 X() 23 )
摘 要 以 Me 配方为基础 , 通过蔗糖 、 果糖 、 甘油 、 麦芽糖 、 葡萄糖不同碳源 ; 蛋白陈 、 豆陈 、 酵母青 、
牛肉青 、 抓化按 、 谷氨酸 、 硝酸钠 、 磷酸二氢按等不同氮源 ; 蔡乙酸 、 稀土生长激素 , 对菌丝的生长试验 ,
表明揭环粘盖牛肝菌菌丝生长的最适碳源是葡萄糖 、 `麦芽糖 、 果糖 ; 最适氮源是钱态氮 , 而有机氮中 , 牛
肉青利用较好 , 酵母膏次之 ; 蔡乙酸 、 稀土对菌丝生长无促进作用 。
关健词 褐环粘盖牛肝菌 ; 菌丝 ; 营养特性
褐环粘盖牛肝菌是一种较典型的与松树共生的菌根菌 , 其菌丝不能在一般的 P DA 培养基中生长或生
长极差 。 通过菌丝 1 物学特性研究 , 探求褐环粘盖牛肝菌菌丝体适宜的碳 、 氮营养源 , 培养基配方 , 为菌
根苗合成 , 人工促繁提供依据 。
, 材料与方法
1
.
1 菌种 褐环粘盖牛肝菌 , 丽水市林科所食用菌科研中心分离保存 。
1
.
2 试验材料 有机试剂为生化试剂 , 无机试剂为分析纯 , 购自上海生化试剂有限公司 , 稀土购自山西 。
M e 配方 : 系自行研制的褐环粘盖牛肝菌专用母种配方 。
1
.
3 试验方法 ①碳源 。 基础培养基 : 以 M e 减葡萄糖为对照 ( cK ) , 分别添加等量的蔗糖 、 果糖 、 甘
油 、 麦芽糖 、 葡萄糖 , 制成固体斜面培养基 , 接种菌龄相同的褐环粘盖牛肝菌菌种 , 每一配方处理重复 3
次 , 置于 25 ℃的生化培养箱中培养 , 定期观测 , 划线标记菌丝生长速度 , 记录菌丝恢复和生长状况 。 ②
氮源 。 基础培养基 : eM 配方 , 以 M e 减磷酸二氢钱为对照 ( CK ) , 分别添加等量的蛋白陈 、 豆脉 、 酵母
膏 、 牛肉膏 、 氯化按 、 谷氨酸 、 硝酸钠 、 磷酸二氢按 , 制成固体斜面培养基 , 接人菌龄相同的褐环粘盖牛
肝菌菌种 , 每一配方处理重复 3 次 , 置于 25 ℃的生化培养箱中培养 , 定期观测 , 划线标记菌丝生长速度 ,
记录菌丝恢复和生长状况 。③生长激素 。基础配方 : M e 固体配方 + 红塘 5 留1姗 mL + 蛋白陈 2 以1溯 .mI +马铃薯 10 岁1 0以〕 mL 。 试验用生长激素 : 蔡乙酸 , 稀土 。 培养基的蔡乙酸浓度梯度和处理编号分别为 :
( )A 0
.
1 n l l J L
,
( B) O
.
s n d J L
,
( c) Z m IJ L
,
( )D 4
n d J ;L 培养基的稀土浓度梯度和处理编号分别为 : ( E ) 30
n江J L , ( F ) 加 m l J L , ( e ) 5 m U L , ( H ) 1 1l l l J L , ( I ) 0 . 5 1l l l J L , 对照编号为 J 。 高压灭菌后制成斜面培养
基 , 接人褐环粘盖牛肝菌 , 每一处理重复 5 次 , 置于 25 ℃培养箱中培养 。
2 结果与分析
2
.
1 破源 从碳源试验结果来看 : 添加碳源的培养基菌丝生长速度都比对照 C K 要快 , 菌丝长势也都比
对照好 , 说明培养基中的碳源是褐环粘盖牛肝菌菌丝生长的重要因素 。 葡萄糖 、 麦芽糖 、 果糖是褐环粘盖
牛肝菌适宜的碳源 , 菌丝洁白 , 气生菌丝生长旺盛 , 生长速度较快 , 菌丝与培养基结合紧密 。 以蔗糖为碳
源的培养基上 , 菌丝的蔓延虽然很快 , 但接种块恢复缓慢 , 菌丝细弱 、 稀少 , 菌丝量少 , 说明菌丝对蔗糖
有一定的利用能力 , 还不是很适应 , 对培养基的亲合力不强 。 以甘油为碳源的培养基 , 菌丝生长细弱 , 菌
丝与培养基的亲合力不强 , 菌丝生命力不旺 (表 1 ) 。
2
.
2 氮源 根据菌丝在各培养基上的萌发 、 生长情况分析 : 褐环粘盖牛肝菌菌丝对钱态氮利用较好 , 在
磷酸二氢钱 、 氯化钱培养基中菌丝生长不仅较快 , 且菌丝 白 、 发菌有力 、 生长旺盛 、 培养基颜色改变小 ,
基金项目 : 浙江省科技厅科研项目 “牛肝菌仿生栽培技术研究 ” (编号 : 么1 )33C 加16)
应国华等 : 褐环粘盖牛肝菌的菌丝营养特性研究 · 2 3·
说明菌丝色素分泌少 , 对培养基适应较好 。 在有机氮中 , 牛肉膏的利用较好 , 发菌速度快 , 菌丝长势好 ;
酵母膏次之 ; 豆脉 、 蛋白脉对菌丝生长无作用 , 与对照没有显著区别 。 (表 2)
表 1 不同碳源对揭环粘盖牛肝菌菌丝 生长的影响
碳源 恢复情况 培养基变色情况 菌丝形态 菌丝长速 / nI
·
d
一 ’
葡萄搪 十 十 十 灰褐 前端整齐洁白 , 萌发有力 , 气生菌丝旺盛 1 . 43
蔗糖 + 微黄 前端极稀蔬 , 菌丝贴生 , 细绒毛 , 稀 1 5
果糖 + + 黄 前端较齐洁白 , 萌发有力 , 气生菌丝旺盛 1 . 30
甘油 十 浅灰 细绒毛状 1 . 36
麦芽糖 十 十 十 灰黄 前端整齐洁白较稀疏 , 气生菌丝旺盛 1 . 25
CK + 微变灰 蜘蛛网式 , 极稀 0 . 81
表 2
氮源 恢复情况
不同氮源时揭环粘盖牛肝菌菌丝生长的影响
菌丝长势 菌丝形态 菌丝长速 / nI
·
d
一 ’ 差异显著性
朴nDe卜臼285497龙205伪127的0onù磷酸二氢按
蛋白陈
豆脉
酵母膏
牛肉青
硝酸钠
抓化钱
谷氨酸
CK
+ + +
培养基变色
浅灰
黄褐
黑褐扩散
深黑褐
黄褐
黑褐扩散
灰黄
+ 十 十 十
十 十 十
+ 十 十
黑褐
前端整齐洁白 , 萌发有力 , 气生菌丝旺盛
前端较整齐 、 细绒毛状
接种块周围菌丝较旺 , 前端贴生稀
前端较整齐 、 细绒毛状
前端整齐 , 萌发有力
前端块状生长成团
前端整齐 , 色白 , 后期发菌有力
培养基 未凝固
前端较整齐 、 稀蔬 0 . 叱7
2
.
3 生长激素 4 月 18 日接种 , 分别在 4 月 2 5 日 、 4 月 2 8 日 、 5 月 2 日 、 5 月 6 日划线测量记录褐环粘
盖牛肝菌菌丝生长长度 , 结果见表 3 。
表 3 生长激素时揭环粘盖牛肝菌菌丝生长的影响
1 2 3 4 5 平均
重 复 . 数
1 2 3 4 5
_
处理编号
4153769200432810403987210354821n
ù
0U
0
.
39
0
.刃
为395276410040328肠950ABCDEHF1..`
培养基稀土浓度为 20 I n IJ L 处理 ( )F 的生长速度明显低于培养基蔡乙酸浓度为 4 I l l U L 处理 ( )D 、 稀
土浓度为 0 . S l l lU L 处理 ( )I 和对照 ( )J , 经方差分析结果表明 , 处理 F 与处理 D 间存在显著差异 , 其他
各处理间无显著差异 。 而试验设置的所有蔡乙酸和稀土处理均与对照 J无显著性差异 , 说明该试验所用的
生长激素对褐环粘盖牛肝菌菌丝生长无明显促进作用 。
3 总结
褐环粘盖牛肝菌菌丝生长的最适碳源是葡萄糖 , 麦芽糖 , 果糖 。
褐环粘盖牛肝菌菌丝生长的最适氮源是按态氮 , 而有机氮中 , 牛肉膏利用较好 , 酵母膏次之 。
蔡乙酸 、 稀土对褐环粘盖牛肝菌菌丝生长无促进作用 。
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