全 文 ：北京医学院学报1 97 6年第l 期
杨 树 花 抑 菌 有 效 部 分 的 研 究
药学系7 2 届工农兵学员毕业 实践杨树花研制组
杨树花为杨柳科植物 (加拿大杨o P Pu ls u
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、 毛白杨 p.to me t nos a Cr r a )
或同属其它多种植物的干燥雄花序 , 又名杨构
花 , 全国各地均有种植 , 资源极为丰富。
唐慎微 : 《 重修政和经史证类备用本草 》和
李时珍 : 《 本草纲 目》均记载 白杨树皮煎汤能止
孕痢 , 但未见杨树花人药 。 1 9 7 1年 3 月出版的
J< 匕京市中药手册 >( ` ’开始收载杨树花作为治疗
痢疾的药 物 , 以 后 在 《 中药材手册拾遗>( 2 ,和
北京市中草药制剂选编>( ” ’ 中也均有记载 。
今年春 , 北京第四制药厂将杨树花制成片
齐J, 称为 “ 痢消灵 ” , 送交北京医学院第一附属
医院等 12 个医疗单位进行临床观察 。在 6 01 例
急性菌痢病人的试治中 , 治愈率为 7 7% , 好转
者为 n % , 无效为 12 % , 总有效率为 8 % ` 4 ’ 。
加以其资源广泛 , 价格低廉 , 深受广大工农兵
患者欢迎 。 为了更好地提高杨树花的疗效 , 本
着毛主席关于 “ 中国医药学是一个伟大的宝库 ,
应当努力发掘 , 加以提高” 的教导 , 我们 7 2 届
工农兵学员在毕业实践中 , 承担了北京第四制
药厂提出的杨树花抑菌有效部分的研究工作 ,
其 目的是为 “ 痢消灵 ” 制订质量控制标准 , 以保
证用药的有效 , 并为进一步改进 “ 痢消灵 ” 的剂
型 , 提供必要的资料 。
杨树花治疗急性菌痢的作用机制可能是多
方面的 , 但根据临床观察 ` “ ’ , 在以杨树花治愈的
菌痢病例中 , 平均 5 . 71 天大便细菌转阴 , 因此
不能排除抑菌作用的存在 。 目前在对于杨树花
治疗菌痢的药理作用还有待深人探讨的同时 ,
暂以体外抑菌作用为指标 , 寻找杨树花的有效
成分 , 并与 “ 痢消灵 ” 对照比较 , 在临床有效的
基础上暂定其质量的参考规格 , 以便生产中控
制药品质量 , 看来是可行的 。 因为 “ 痢消灵 ” 是杨
树花的浸膏片 ,包含杨树花中全部主要成分 , 只
要抑菌有效成分存在 , 可能尚未查明的其他有
效成分也不会丧失 。
一 、 杨树花抑菌有效部分的筛选 :
我们首先按照一般方法 `“ ’ , 对杨树花成分
进行了系统分析和预试验 。 按照植物成分的亲
脂性分为甲 、 乙 、 丙 、 丁和戊五个部分 , 结合
体外的抗菌试验 (表 1 ) , 能够初步看出 :
甲部分 : 主要成分为树脂 , 并呈衡 、 菇和
香豆精类成分的反应 , 无抑菌作用 。
表 1 杨树花各部分提取物的抑菌作用 *
菌种 金黄色葡
萄 球 菌 大肠杆菌 付氏杆菌
、
\ 粼提取 物 \ + 十 一 +
一 十 ~ 一
一ù+一一一+ù一十一+
纸片法 , 药液浓度为每 m ] 含杨树花 1 . 2 9 ; 普通琼
脂培基 , 一 : 无抑菌作用 , 十 : 有抑菌作用 , 十 一 : 抑菌作用
不明显 。
乙部分 : 不含脂肪油 、 衡菇 , 也无抑菌作
用 。
丙部分 : 主要成分为黄酮类衍生物 , 可能
还含有酚类 、 酚酸类 、 香豆精类 、 试类 , 有明
显的抑菌作用 。
丁部分 : 不含生物碱 , 也无抑菌作用 。
戊部分 : 含有少量靴质 、 氨基酸 、 糖 , 并
呈黄酮 、 酚 、 内醋和留菇等反应 , 但抑菌作用
不明显 。
为了进一步证明丙部分的抑菌作用 , 我们
测定了它对八种细菌的抑菌圈 , 见表 2o
根据表 2 的结果 , 酒精对照液虽然也表现
出抑菌作用 , 但作用的强度远不及丙部分 , 因
表2 丙 部 分 的 抑 菌 作 用 *
火女 `一犷 _里 样\ 省 数 大肠杆菌 金黄色葡萄 球 菌 绿脓杆菌 枯草杆菌 }宋内氏杆菌 !付氏杆菌 志 贺 氏杆 菌 I志 贺 氏杆 菌 亚
丙 部 分
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} 瞥 】 “ 4 1 “ 0 1 “ 9 } “ , 1 2 0 } ” } + { ” 2
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95 % 酒 精
〔对照 ) 口口= 口…
{
“ 】’ ” · “ ! 4 · 。 1 一 1 }
第①、 ②次试验为纸片法 , ③ 、 ④ 、 ⑤三次试验均为海绵球法 , 海绵球的直径为 7 m m , 高 sm m 。 试样丙部分的浓度为
每 m l 含杨树花 1 . 2 9 , 每个海绵球加药液为 0 . 25 m l (本文中其他处报告的抑菌试验 , 除纸片法外 , 均同此 ) 。
表中的数据为抑菌圈的直径 , 以 m m 为单位 。
表 3 杨树花丙部分中三种主要成分的 R ; 值和颜色反应万号卜沁…拼添,一片一诊除爵一兰二生一…二上竺-…二上兰…-竺上生巨耳生…竺 ~毕、 。 月八 { } 亮黄 { 要 } , 。 ! 黄绿 ! 亮黄 绿 1 决 . ` 1 1 、 } * 、犷叹 ? v · 任 口 1 1 ; l七 五处 . 1 夕魂 1 J L 夕飞 】 1 ;华 ; 乏 U` l 诬戍 艺左宝 匀下 1 1 夕 减 l , 匕 多叹— {一}— 卜一十早兰 {— {一黄 ’ 。 .29 1 1 黄 } 黄 { 黄 } 黄绿 { 黄绿 . ) 浅墨 绿 { . } 浅黄 } 黄此丙部分的抑菌作用是可以肯定的 。二 、 杨树花中抑菌有效成分的分离与性质用 4 0% 醋酸为溶剂的纸层离法 , 从杨树花
的丙部分中 , 能分离出 R F 值不同的五个色点 ,
以其在紫外光下所出现的颜色和 R 二 值的次序 ,
分别称为黄 ,二 黄 , 、 黄: 和 蓝 , 、 蓝 : ,其 中 黄 : 。
和蓝 , 含量较少 , 致颜色较 浅 , 且有时分不出
来 , 只有黄 : 、 黄 2及蓝2是主要成分 , 它们的 R ,
值及其纸上颜色反应见表 o3
以上三种主要成分在纤 维 粉 薄层层离法
中 , 用 4 0%醋酸为溶剂 , 测得的 R 二 值分别为
0
.
8 3
、 。 . 5 及 O . 3 5( 与纸层离法 测 得 的 R , 值
0
.
7 2
、
0
.
4 9 及 0 . 2 9相当 ) 。 应 用 此条件进行
制备薄层层离法 , 分离出黄 1、 黄2和蓝2三种主
要成分 , 再按前述海绵球法测定其抑菌作用 ,
结果如表 4 。
表 4 的结果说明三种主要成分都具有抑菌
作用 , 但抑菌强度都比表 2 丙部分的作用弱 。
因为在表 4 结果中所应用的三种主要成分的供
试样浓度较丙部分约低 3 倍以上 。 这是抑菌作
用较弱的可能原因之一 , 另外各成分间产生协
同作用也是可能的 。
由纤维粉制备薄层层离法分离出的三种主
要成分以及蓝 , , 还测得了它们的紫 外 吸 收光
谱如下 :
此{淤H n m
黄 : 2 4 1、 2 5 1、 2 7 5 、 3 6 2
黄 : 2 4 0 . 5 、 2 5 1 、 3 12 、 3 4 3
蓝 : 2 4 2 、 2 5 1、 3 13、
蓝 : 2 4 1、 2 5 0 、 2 5 3 、 33 4
表4 丙部分中三种主要成分的抑菌作用
菌 种 金黄色葡萄样 品一\ 抑菌面一 }大 肠 杆 菌 }球 菌 }绿 脓 杆 菌{ 枯 草 杆 菌 )宋内氏杆菌 …付 氏 杆 菌一一一一今一里孚一十一一一一一 , 一州一一弓— 一一一— 一州一一一 - -} 甲 1 ’ o } “ } ” · 5 } 一 】 ” 1 ’ o1 曾 } ’ 4 } 9 } ’ 6 } ’ o } ” { ”黄 , } 曹 } ’ 0 } ’ 5 } “ } 8 } + 1 +卜万黔, 卜一上一一卜一二 -一 }— }— {一止生一 {—一一一州~共牛井止上丰二竺斗- 共} 巴 } ’ 0 } + 一 } 一 { ’ 。 { ’ o} 曾 } + 1 8 } ` 2 } ” { ’ 4 】 ’ 3黄 ? } 甲 l ` 0 1 ` 3 } 二 I ’ 9 1 十 I “ 3一井剑茸华立仁过选丰立巨过
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表 3 所指明的颜色反应 , 初步推 测黄 ;可 能为
黄酮醇衍生物 , 而黄2 、 蓝 1及蓝 2均可能是黄酮
的衍生物 , 除蓝 , ,未明外 , 它们都是抑菌的有
效成分 。
三 、 “ 痢消灵 ” 片的质盆控制标准 :
为了更好地保证 “ 痢消灵 ” 片的疗效 , 我们
探索了它的质量控制标准 , 具体如下 :
取 “ 痢 消 灵 ” 片 (基片 ) 10 片 , 粉碎后加
水 2 0 m l溶解 (必要时可于水浴 上 加 热 ) , 用
醋酸乙醋 自其中提取三次 , 每次用量 10 m l,合
讲提取液蒸千后溶渣于 95 %乙醇 10 nI l中 , 供
下列试验用 。
1
. 试管反应 :
( 1 ) 取乙醇溶液 l m l 加水 2 m l混合 , 如有
混浊现象 , 滴加 10 % N a 0 H 试液数滴 , 振摇后
混液应澄清并显黄色 。
( 2) 盐酸镁粉反应 : 取乙醇溶液约 l m l 加
镁粉少许 , 于冷却情况 下 , 滴加浓盐酸 3~ 5
滴 , 埃泡沸反应完毕后 , 混液应呈明显的红色
或紫红色 (必要时可在水浴中加热 ) 。
2
. 滤纸片法 : 将乙醇溶液 1~ 3 滴 (毛细
管 ) 滴在白色滤纸片上 (1 滴千 后 , 再滴另 1
滴 ) , 干后 , 原点应呈黄色 , 然 后将滤纸片置
氨气流中片刻 , 黄色应加深 。 离开氨蒸气数分
钟后 , 加深的黄色应又消退 。 进一步在原点上
喷 1% A IC 13 乙醇溶液 , 原点应 呈 持久 性的亮
黄色 , 置紫外灯下观察 , 应呈黄色或黄绿色萤
光 。
3
. 层离法 :
( 1) 纸层离 : 将乙醇溶液滴加在层离用滤
纸的起点处 , 按上行法 , 以 40 % 醋酸为溶剂 ,
进行层离 , 应得到 R ; 值为 0 . 29 、 0 . 49 、 0 . 72
三个集中的色点 , 显色的结果应与表 3 一致 。
(2 )薄层层离 :薄层 :纤维粉 (湿法铺板 ),
溶剂为 4 0% 醋酸 , 层离后应得 R 二 0 . 3 5 、 0 . 5 5 、
0
.
83 三个集中的色点 , 显色结 果 应 与表 3 一
致 。
其他各项应符合片剂的规定 。
四 、 “ 痢消灵 ”片的抑菌作用 :
应用由 “ 痢消灵 ” 片提取 出的乙醇溶液 (相
当于杨树花的丙部分 , 见上述质量控制标准项
下 ) 按海绵球法进行抑菌试验 , 得结果如表 5 。
表 S “ 痢 消 灵 ” 的 抑 菌 作 用
磊一粼、…一 …黔补…卜… …宋内氏杆·卜…
: ;: 烈川月牛…月川军
_
、
} 曾 } 8 } 9 } 十 一 { 一 { 未 长 “ { ` 长 “” 5% 乙 醇 1 曾 { + … ’ 0 1 一 { ’ 0 1 + 1 _ g`对照 , 卜一叫 {兰- 一 {— }一三兰~一 {~一二卫一一一 }一一二一一卜一二一一卜一竺一一I 平 均 ! ” ! ` o · 3 ! “ } ’ o } + 1 ” · 5 .以上结果与表 2 的结果基 本 相 似 , 说明“ 痢消灵 ” 片剂包含杨树花丙部分中所含的主要
成分和抑菌的有效成分 , 也就是说用体外抑菌
的有效成分作为 “ 痢消灵 ” 片的质量控制暂时标
堆是可行的 。
本文报告的工作是在北京第四制药厂开 门办学中
完成的 。
承北京第四制药厂领导和工人师傅 们的指导和帮
助 , 特此致谢 。
参 考 文 献
1
. 北京市药检所 : 北京中草药手册 , 1 9 7 0
2
. 北京市药材公司 , 北京市药检所 : 中药材手册拾遗 (北京
地区 ) , 19 7 3 ,
3
. 北京市卫生局 : 北京市中草药制剂选编 。
4
. 北京市杨树花协作组 : 杨树花制剂一痢消灵片的研究 , 内
部资料 , 2 0 7 5 。
5
. 北京第二传染病医院 : 杨树花治疗急性细菌性痢疾20 例小
结 , 内部资料 , 1 9 7.5
6
. 北京医学院药学系 : 中草药化学讲义 , 1 9 7.2