全 文 ：食用菌学报 2009.16(2):41～ 44
收稿日期:2009-03-24原稿;2009-05-31 修改稿
基金项目:云南省应用基础研究“覆土微生物对暗褐网柄牛肝菌子实体形成的作用研究”(编号:2008CD193)的部分
研究内容
作者简介:何明霞(1968-), 女 , 2004年毕业于华南热带农业大学 ,农艺师 , 主要从事食用菌栽培及外生菌根研究。
＊本文通讯作者
文章编号:1005-9873(2009)02-0041-04
暗褐网柄牛肝菌菌丝的生物学特性研究
何明霞 , 张春霞 , 纪开萍＊ , 曹　旸 , 刘　静 , 王文兵
(云南省热带作物科学研究所 ,云南景洪 666100)
摘　要:首次对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的生物学特性进行研究 , 结果表明:在实验范围内 , 菌丝生长的最
适温度为 30 ℃, 最适 pH 值为 4 , 菌丝生长不需要光照 , 最佳碳源为葡萄糖 , 最佳氮源为酵母膏 , 最佳无机盐
为 KH2PO4+MgSO4·7H2O。
关键词:暗褐网柄牛肝菌;菌丝;生物学特性
　　暗褐网柄牛肝菌(Phlebopus portentosus)又
名巨型牛肝菌 ,属于牛肝菌属黄肉牛肝菌组[ 1 , 2] 。
其子实体富含蛋白质和钾 、钙 、镁 、铁 、锌等多种
人体所需要的矿质元素 ,营养丰富[ 3] 。要实现暗
褐网柄牛肝菌的人工驯化 ,就要分离得到纯培养
菌株 ,对其生物学特性进行研究。本文研究了温
度 、pH 值 、光照 、营养条件对暗褐网柄牛肝菌菌
丝生长的影响 ,从中选出菌丝生长的最适条件和
培养基配方 ,为暗褐网柄牛肝菌的开发利用提供
参考依据 。
1　材料与方法
1.1 材料
1.1.1 供试菌株
　　暗褐网柄牛肝菌菌株 ,由云南西双版纳热带
花卉园的野生子实体分离得到 ,其人工培养的子
实体凭证标本保存在中国科学院昆明植物研究
所真菌标本室 ,编号为:HKAS49706 。
1.1.2 基础培养基
　　去皮马铃薯 200 g ,葡萄糖 20 g ,酵母膏 1 g ,
MgSO4·7H 2O 1.5 g , KH 2PO 41 g , 琼脂 20 g ,
H 2O 1 L , pH 自然 。
1.2 方法
1.2.1 温度对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　将直径 0.65 cm 的菌丝块接入基础培养基
平板(φ=9 cm ,下同)中央 ,分别于 5 ℃、10 ℃、
15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃、35 ℃、40 ℃条件下倒
置暗培养 ,pH 自然 ,每个处理 5次重复。接种后
第 20天以十字交叉法测量菌落直径 ,同时观察
菌丝长势 、颜色等特征。
1.2.2 pH 对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　用 0.1 mol/L的 HCI 或 NaOH 溶液调节基
础培养基的 pH 为 2 、3 、4 、5 、6 、7 、8 ,制成平板 ,接
入直径 0.65 cm 的菌丝块 ,置于(30±1)℃恒温
暗培养 ,重复设置和其它方法同 1.2.1。
1.2.3 光照对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　采用平板培养法 ,设连续光照(1 500 Lx)、12 h
光(1 500 Lx)暗交替 、黑暗 3种条件 ,(30±1)℃恒
温培养 , 重复设置和其它方法同1.2.1。
1.2.4 碳源对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　分别以等量的麦芽糖 、乳糖 、蔗糖 、果糖 、甘
露醇 、可溶性淀粉代替基础培养基中的葡萄糖 ,
重复设置和其它培养条件同 1.2.2。
1.2.5 氮源对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　分别以等量的酒石酸铵 、硫酸铵 、氯化铵 、硝
酸钾 、蛋白胨 、尿素代替基础培养基中的酵母膏 ,
重复设置和其它培养条件同 1.2.2。
1.2.6 无机盐对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　分别以 1 g ZnSO4·7H2O 、MgSO4·7H2O 、
MnSO4 、CaSO4 、FeSO4·7H 2O 、KH2PO4 、NaNO3
代替基础培养基中 KH 2PO4 +MgSO4·7H 2O ,重
复设置和其它培养条件同 1.2.2。
食　用　菌　学　报 第 16 卷
实验数据用 DPS分析软件进行 LSD 差异显
著性检验[ 4] 。
2　结果与分析
2.1 不同温度对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　由图 1可知 ,温度对暗褐网柄牛肝菌菌丝生
长具有明显的影响 。温度在 30 ℃时菌丝生长较
快 ,浓密褐色 ,长势最佳;温度在 35 ℃时 ,菌丝生
长速度急剧下降;温度达到 40 ℃时 ,菌丝不生
长;温度低于 15 ℃时 ,菌丝生长缓慢且长势弱;
温度低于 10 ℃时 ,菌丝不生长。因此 ,暗褐网柄
牛肝菌菌丝生长的最适温度为 30 ℃。
图 1　不同温度对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
Fig.1 Effect of temperature on mycelium growth of
Phlebopus portentosus
2.2 不同 pH对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
图 2　不同 pH对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
Fig.2　Effect of pH on mycelium growth of
Phlebopus portentosus
　　不同 pH 条件下菌落直径见图 2 ,菌丝在 pH
为 2 ～ 6间均可生长 , pH 为 4时菌丝生长量最大
且长势最佳;pH 低于 3 或高于 5时菌丝生长缓
慢且长势较弱;当 pH 为 7 ～ 8时 ,菌丝不生长;暗
褐网柄牛肝菌菌丝在偏酸条件下生长较好 。
2.3 不同光照对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　不同光照条件下菌落直径见图 3 ,暗褐网柄
牛肝菌菌丝在黑暗条件下 ,菌落直径最大 ,菌丝
浓密褐色 ,长势最佳;在光照和光暗交替条件下 ,
菌落直径无差异。
1.黑暗;2.光暗交替;3.光照
小写英文字母表示P<0.05的差异显著性
1.C on tin uous darkness;2.12-hour con secutive lights/ dark
period s(1 500 lx);3.Cont inuou s light(1 500 lx)
Dif ferent let ters represen t signif icant dif f erence at P 0.05 level
图 3　不同光照对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
Fig.3　Effect of light on mycelium growth of
Phlebopus portentosus
2.4 不同碳源对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　不同碳源条件下菌落直径见图 4 ,以乳糖 、葡
萄糖为碳源的培养基上的菌丝生长量优于其它 ,
而麦芽糖 、果糖 、蔗糖 、可溶性淀粉 、甘露醇为碳
源的培养基上菌丝生长量差异不显著。虽然乳
糖培养基上菌丝生长较快 ,但菌丝稀疏 、纤弱 ,颜
色发黄。因此 ,综合菌丝生长速度和菌丝长势 ,
葡萄糖为暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的最适碳源 。
　　　　对照.葡萄糖;1.麦芽糖;2.乳糖;3.蔗糖;4.果糖;5.甘露醇;6.可溶性淀粉　小写英文字母表示 P <0.05的差异显著性
Cont rol.glucose;1.m al tose;2.l actos e;3.sucrose;4.f ructose;5.manni tol;6.solu ble s tarch
Dif ferent let ters repres ent signif icant dif f erence at P 0.05 level
图 4　不同碳源对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
Fig.4　Ef fect of carbon source on mycelium growth of Phlebopus portentosus
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第 2 期 何明霞 , 等:暗褐网柄牛肝菌菌丝的生物学特性研究
2.5 不同氮源对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　不同氮源条件下菌落直径见图 5 ,暗褐网柄
牛肝菌菌丝在以酵母膏为氮源的培养基上菌丝
生长量最大 ,长势最好 , 培养 20 d 菌落直径为
6.69 cm ,其次为酒石酸铵和硫酸铵 。尿素培养
基上的菌丝在第 20 天尚未生长 ,说明尿素对暗
褐网柄牛肝菌菌丝生长有抑制作用。
2.6 不同无机盐对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的影响
　　不同无机盐条件下菌落直径见图 6 ,菌丝在
CK培养基(KH2 PO 4+MgSO 4·7H 2O)上生长速
度最快 ,长势最好 。硫酸锌不宜作为暗褐网柄牛
肝菌菌丝培养的无机盐 。
2.7 暗褐网柄牛肝菌菌丝形态观察
　　在筛选出的最适条件下 ,暗褐网柄牛肝菌菌
块接种到基础培养基上 2 d后开始萌发 , 10 d后
直径为 1.7 cm ,菌落褐色 、浓密 。在光学显微镜
下观察菌丝无色透明 ,多分支 ,直径约 3μm ,锁状
联合明显(图 7)。
图 7　暗褐网柄牛肝菌菌丝锁状联合(400×)
Fig.7　Clamp connections in Phlebopus portentosus
mycelia(400×)
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食　用　菌　学　报 第 16 卷
3　小结
　　本文首次对暗褐网柄牛肝菌菌丝生长的生
物学特性进行报道 。实验范围内 ,暗褐网柄牛肝
菌菌丝生长的适合碳源和氮源分别是葡萄糖和
酵母膏 ,无机盐是 KH2 PO 4 +MgSO4·7H2O;菌
丝生长的最适温度为 30 ℃,温度低于 10 ℃或高
于 40 ℃时 ,菌丝都不萌发;菌丝在偏酸条件下生
长较好 ,最适 pH 值为 4;光暗交替和持续光照的
条件下菌丝生长受到影响 ,黑暗条件下菌丝生长
最好;此研究结果可为暗褐网柄牛肝菌子实体的
人工培养提供参考 。
参考文献
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社 , 2006:1-215.
[ 2] 臧　穆.我国东喜马拉雅及其邻区牛肝菌目的研究
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Nutritive v alue o f popular wild edible mushrooms
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[ 4] 唐启义 , 冯明光.DPS 数据处理系统[ M] .北京:科学
出版社 , 2007.
[本文编辑] 　王瑞霞
Optimization of Selected Physical and Nutritional Parameters
Affecting the Growth of Phlebopus portentosus Mycelium
HE Mingxia , ZHANG Chunxia , JI Kaiping＊ , CAO Yang , LIU Jing , WANG Wenbing
(Yunnan Tropical Crops Resear ch Institute , Jinghong , Yunnan 666100 , China)
Abstract:The eff ects of sele cted physic al and nutr it ional par amete rs on the growth of Phlebopus portentosus
mycelium were studied.Mycelial growth was optimal at 30 ℃ in a medium(adjusted to pH 4.0)containing
KH2PO4 , MgSO4·7H2O , and with glucose and yeast extr act as the carbon and nitr ogen sources , r espectively.
Mycelial growth does not r equir e light.
Key words:Phlebopus portentosus ;myce lium;physical and nutr itional par ame ters
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