全 文 :收稿日期:2005-07-14; 修订日期:2006-03-20
作者简介:李 芳(1965-),女(汉族),新疆石河子人, 现任新疆石河子市
人民医院药剂科主管药师 ,主要从事中药成分的研究工作.
新疆紫草多糖的超声提取及含量测定
李 芳 1 , 储继红2 , 赵文彬 3
(1.新疆石河子市人民医院 832000; 2.新疆 石河子市社会保障局 832000;
3.石河子大学药学院 , 新疆 石河子 832002)
摘要:目的 从新疆紫草中提取多糖 , 并测定其含量。方法 运用超声技术用水提醇沉法提取紫草多糖 , 用酚-硫酸比色法
测定多糖含量。结果 多糖含量 2.267%,平均回收率为 100.8%, RSD=0.48%(n=6)。结论 运用超声技术从紫草中提
取出多糖 , 反应速度加快 ,收率提高。
关键词:超声技术; 紫草; 多糖; 提取 ; 含量测定
中图分类号:R284.2 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2006)07-1216-01
UltrasonicExtractionandContentDeterminationofPolysaccharideofArnebiaeuchroma
(Royle)Johnst
LIFang1 , CHUJi-hong2 , ZHAOWen-bin3
(1.DepartmentofPharmacologyofShiheziPeoplesHospital, XinjiangShihezi832000, China;2.SocialEnsur-
anceBureauofShiheziCity, XinjiangShihezi832000, China;3.PharmacyColegeofShiheziUniversity, Xin-
jiangShihezi832002, China)
Abstract:ObjectivePolysaccharideswasextractedfromArnebiaeuchroma(Royle)JohnstbyUltrasonicmethod, andthecontent
wasdetermined.MethodsPolysaccharideswasextractedbyUltrasonicmethod, andthecontentwasdeterminedbyspectrophotom-
eter.ResultsThepolysaccharidescontentofArnebiaeuchroma(Royle)Johnstis2.267%, recoveryrateis100.8%.Conclu-
sionExtractpolysaccharidesbyUltrasonicmethod, UltrasonictechnologyisagoodmethodforpolysaccharidesofRheumwittrochi
L.
Keywords:Ultrasonictechnology; Arnebiaeuchroma(Royle)Johnst; Polysaccharide; Extraction; Contentdetermina-
tion
新疆软紫草(Arnebiaeuchroma(Royle)Johnst), 主要生长在天
山山脉 , 为新疆特有紫草品种 [ 1] 。药理研究表明 , 紫草多糖具有
抗病毒 、提高机体免疫力 、抗乙肝等作用。为了给该药材的进一
步研究和合理利用提供基础资料 ,我们运用超声技术从紫草中提
取多糖 [ 2] , 并测定其含量 [ 3] 。现将结果报道如下。
1 仪器与材料
1.1 仪器 岛津 UV-2401PC紫外可见分光光度计 , DL-360超声
波仪(35kHz,浙江象山县石浦海天电子仪器厂), TG328B分析天
平 , DZKW-C电子恒温水浴(北京光明医疗仪器厂), R-201旋转
蒸发器(上海申胜生物技术有限公司), 索氏提取器 。
1.2 材料与试剂 (+)葡萄糖(AR)105℃干燥恒重 、苯酚
(AR)、硫酸(AR)均为分析纯。
新疆软紫草:采自天山北坡海拔 2 600 m左右的新疆乌鲁木
齐县南郊林场内 , 经石河子大学生物学院何敬琨教授鉴定为
Arnebiaeuchroma(Royle)Johnst。秋后采挖 ,洗净 , 晾干 ,破碎后备
用。
2 方法与结果
2.1 标准曲线的绘制
2.1.1 标准葡萄糖溶液的配制 精确称取干燥恒重的葡萄糖
25.2 mg, 加适量水溶解 , 转移至 250 ml容量瓶中 ,加水至刻度 ,
摇匀 , 配成浓度为 100.8 μg· ml-1标准葡萄糖溶液备用 。
2.1.2 5%苯酚试剂的配制 取苯酚 100 g,加铝片 0.1 g和 NaH-
CO3 0.05 g,蒸馏 , 收集 182℃馏份 , 称取 7.5 g,加水 150 ml溶解 ,
置棕色瓶内放冰箱备用。
2.1.3 标准曲线绘制 精确量取葡萄糖标准溶液 0.0, 0.1, 0.2, 0.
3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7ml置干燥试管中 ,分别加水使成 1.0ml, 再分
别加入 5%苯酚溶液 1.6ml,摇匀 , 然后加浓 H2SO4 7.0ml, 充分摇
匀 , 室温放置 25min, 同时做一空白 , 在 510 nm处有最大吸收 , 绘
制标准曲线 ,回归方程:A=0.069 1C+0.003, r=0.999 0, 在 10 ~
70 μg/ml的范围内 , 浓度与吸收度有良好的线性关系。
2.2 多糖的提取及精制 称取紫草样粉 100 g, 置 2 000 ml烧杯
中 , 分别加水至 500, 1 000, 1 500ml,于 35kHz超声提取 30, 40, 50
min后过滤 , 减压浓缩至 100 ml, 加入 0.1%活性炭 ,脱色 , 过滤 ,
滤液加入 95%乙醇使溶液含醇 80%, 静置过夜 , 过滤 ,残渣用乙
醚 、无水乙醇反复洗涤 , 得紫草多糖 , 60℃ 烘干备用。以 1 000
ml, 40 min的多糖量最多。
2.3 换算因素测定 精确称取 60℃干燥恒重的紫草多糖 20 mg,
水溶解后定容到 100 ml容量瓶中 , 摇匀 , 做为多糖储备液。精确
量取此液 0.2 ml,加水至 1 ml, 按测定标准曲线同样的方法测其
吸光度值。按公式 f=W/CD计算换算因素 ,得 f=3.47。式中 ,
W为多糖重量(μg), C为多糖液中葡萄糖的重量(μg), D为多糖
的稀释倍数。
2.4 样品测定 分别精确称取紫草粉末 20g,用 80%乙醇浸泡过
夜 , 与多糖的提取及精制项相同的方法提取 , 定容于 250 ml容量
瓶为样品液。精确吸取样品液 1 ml,按测定标准曲线同样方法测
其吸光度值 , 按公式:多糖含量%=CDf/W ×100计算含量 ,分别
为 2.248%, 2.256%, 2.263%, 2.279%, 2.287%, 平均含量为
2.267%, S=0.000 16, RSD=0.71%(n=5)。
2.5 方法学考察
2.5.1 回收率测定 精确称取紫草粉末 1.5 g, 精密加入多糖 7
mg,与多糖的提取及精制项相同的方法提取 ,于 250 ml容量瓶中
定容。精确移取 1 ml,按测定标准曲线同样方法测其吸光度值 ,
按样品测定同样的方法进行测定。 平均回收率为 100.8%, S=
0.004 8, RSD=0.48%(n=6)。
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2006VOL.17NO.7
2.5.2 重复性 称取紫草样品 5份 ,分别与多糖的提取及精制项
相同的方法提取 , 依法测定 , 其含量结果分别 2.253%, 2.258%,
2.267%, 2.283%, 2.289%, 平均含量为 2.268%, S=0.000 14,
RSD=0.62%。
2.5.3 稳定性实验 用硫酸-苯酚法测定同一样品液在不同时
间吸收度 , 吸收度值至少在 48 h内不变。
2.6 常规法提取 取紫草样粉 5份 ,每份约 0.2 g, 常规法提取 ,
按样品测定同样的方法进行测定。分别为 1.943%, 1.985%,
2.301%, 1.974%, 1.951%, 多糖平均含量为 1.977%。
3 讨论
紫草多糖具有多种生物活性 [ 4] , 能激活免疫细胞 ,提高机体
的免疫功能 , 对正常细胞没有毒副作用 , 在抗肿瘤 、抗病毒等药物
研究中 , 多糖类药物的研制已成为当今世界新药的发展方向之
一。多糖的研究发展很快 ,但研究层次及技术水平都还较低。 超
声技术应用于植物细胞破壁 , 大大地加快了反应速度 , 有效地提
高了收率 [ 3] 。我们首次运用超声技术从紫草中提取出多糖 , 并
对其含量进行了测定 , 反应时间大为缩短。超声法所用仪器简
单 , 操作方便 ,且自动化程度高 ,便于大规模工业生产。
参考文献:
[ 1 ] 《新疆中草药 》编委会.新疆中草药 [ M] .新疆:新疆人民出版社 ,
1976:123.
[ 2 ] 郑汉臣 ,蔡少青.药用植物学与生药学 ,第 1版 [ M] .北京:人民卫
生出版社 , 2004:375.
[ 3 ] 赵 兵 ,王玉春 ,欧阳藩 , 等.超声波在植物提取中的应用 [ J] .中
草药 , 1999, 30(9):附 1.
[ 4 ] 赵 利.紫草的药理研究进展 [ J].武警医学 , 1997, 8(2):115.
收稿日期:2005-10-21; 修订日期:2006-02-17
作者简介:汪 泳(1965-),女(汉族),湖北武汉人 ,现任黄石理工学院医
学院药学系高级实验师 ,主要从事《药理学 》实验教学及理论教学工作.
辣椒酒预防炎症产生的作用研究
汪 泳 , 肖安菊 , 李 倩
(黄石理工学院医学院 ,湖北 黄石 435000)
摘要:目的 研究辣椒酒预防炎症产生的作用 。方法 分别实验观察了辣椒酒对二甲苯 、巴豆油致小鼠耳廓肿胀的预防
作用。结果 提前使用辣椒酒涂搽小鼠的耳廓 4 d, 后用致炎药物小鼠耳廓发生肿胀的程度不明显。结论 辣椒酒具有预
防炎症产生的作用。
关键词:辣椒酒 ; 预防炎症产生
中图分类号:R285.5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2006)07-1217-01
辣椒酒系用茄科植物辣椒 CapsicumfrutescensL.[ C.annuum
L.]的果实剪碎加 45度白酒浸泡而成的一种外用涂搽剂(经验
方)。辣椒治疗已出现水肿性红斑冻疮的作用已有很多报
道 [ 1, 2] 。我们也曾通过实验 , 证实了辣椒有效成分———辣椒素具
有抗炎作用 [ 3] , 但有人在冬季用辣椒酒在易生冻疮处涂搽 , 可以
防止冻疮复发 ,如果连续涂搽 2 ~ 3个冬季 , 可终生不复发 , 这说
明辣椒不仅有抗炎作用 , 亦应该有预防炎症产生的作用。本研究
拟通过药理实验证明其有预防炎症产生的作用。
1 材料
1.1 动物 小鼠由本校动物室提供。
1.2 药物 辣椒酒和巴豆油由本校天然药化实验室制备。
2 方法和结果
2.1 急性耳廓肿胀实验
2.1.1 预防二甲苯致小鼠耳廓肿胀 对照组小鼠(雌雄均有 20g
左右)正常喂养 4d后 , 左侧耳廓滴二甲苯 0.03 ml致炎 , 右侧耳
廓不滴致炎剂为正常对照。实验组(雌雄均有 20g左右),连续 3
d每天在左侧耳廓涂搽辣椒酒 10~ 15 min, 右侧耳廓不涂搽 , 第 4
天左侧耳廓涂搽辣椒酒 , 30 min后 , 滴二甲苯 0.03 ml致炎 , 1 h
后处死动物 , 每鼠剪去左右两耳 , 用 5 mm直径打孔器分别在同
一位置打下圆耳片 , 分析天平称重。每鼠左耳片重量减去右耳片
重量即为肿胀程度 , 将对照组与给药组的肿胀度进行统计学处
理。结果见表 1。
2.1.2 预防巴豆油致小鼠耳廓肿胀 实验组小鼠左侧耳廓上滴
2%巴豆油 0.05 ml致炎 ,其余同上。结果见表 2。
表 1 辣椒酒预防二甲苯致小鼠耳肿胀( x±s)
组别 鼠耳肿胀重量 m/mg 抑制率(% )
辣椒酒 0.92±0.25 27.56
对照 1.27±0.48
与对照组比较 , P<0.05;n=10
表 2 辣椒酒预防巴豆油致小鼠耳肿胀( x±s)
组别 鼠耳肿胀重量 m/mg 抑制率(% )
辣椒酒 0.84±0.32 29.41
对照 1.19±0.43
与对照组比较 , P<0.05;n=10
3 小结
3.1 实验结果表明 , 辣椒酒对二甲苯和巴豆油致小鼠耳肿胀均
有明显的预防作用(P<0.01), 抑制率分别为 27.56%, 29.41%。
3.2 辣椒酒有较好防冻 、治冻疮作用 ,与其预防炎症产生 、抗炎
作用有密切关系。当然 ,从中医理论的角度来讲冻疮是由于冬季
寒冷刺激 ,引起局部血管痉挛 、缺氧 、淤血致慢性局部性组织浸
润。而辣椒和白酒均辛 、热 , 具有散寒 、活血化淤的作用 , 局部涂
搽有助于皮肤抵抗寒凝淤血 ,对防冻 、治冻疮有较好的作用。
参考文献:
[ 1 ] 谢万宗.全国中草药汇编 , 下册 [ M] .北京:人民卫生出版社 ,
1996:653.
[ 2 ] 江苏新医学院.中药大辞典 , 下册 [ M] .上海:上海人民出版 ,
1977:2570.
[ 3 ] 肖安菊 ,乐泳荣 ,陈 璨 ,等辣椒素霜抗炎作用研究 [ J] .时珍国医
国药 , 2000, 11(3):封 3.
[ 4 ] 徐叔云.药理实验方法 , 第 1版 [ M] .北京:人民卫生出版社 ,
1982:524.
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