全 文 ：收稿日期:2005-03-25;　修订日期:2005-11-12
作者简介:赵文彬(1967-),女(汉族),甘肃酒泉人 ,现任石河子大学药学
院高级实验师 ,主要从事天然药物成分研究工作.
天山大黄多糖的超声提取及含量测定
赵文彬 , 成玉怀
(石河子大学药学院 , 新疆 石河子　832002)
摘要:目的 从天山大黄中提取多糖 , 并测定其含量。方法 运用超声技术用水提醇沉法提取天山大黄多糖 , 用酚 -硫酸
比色法测定多糖含量。结果 多糖含量 8.756%, 平均回收率为 100.6%, RSD=0.66%(n=5)。结论 首次运用超声技术
从天山大黄中提取出多糖 ,反应速度加快 , 收率提高。
关键词:　超声技术;　天山大黄;　多糖;　提取 ;　含量测定
中图分类号:R284.2　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)02-0223-01
ExtractionandContentDeterminationofPolysaccharidefromRheumwittrochiiL.byUl-
trasonicTechnology
ZHAOWen-bin, CHENGYu-huai
(PharmacyColegeofShiheziUniversity, Shihezi832002, China)
Abstract:ObjectivePolysaccharideswasextractedfromRheumwitrochiiL.byultrasonicmethod, andthecontentwasdeter-
mined.MethodsPolysaccharideswasextractedbyUltrasonicmethod, andthecontentwasdeterminedbyspectrophotometer.Re-
sultsThepolysaccharidescontentofRheumwitrochiiL.is8.756%, recoveryrateis100.6%。 ConclusionItisthefirsttimeto
extractpolysaccharidesfromRheumwitrochiiL.byultrasonicmethod.Ultrasonicextractionwasabettermethodforpolysaccha-
ridesofRheumwitrochiL.
Keywords:Ultrasonictechnology;　RheumwitrochiiL;　Polysaccharide;　Extraction;　Contentdetermination
　　天山大黄(RheumwitrochiL.), 主要生长在天山山脉 , 为新
疆特有大黄品种。维吾尔语译音 “热万”。维吾尔族民间用于治
疗血小板减少症 、闭经 、痢疾 、通淋不利等症 [ 1] 。药理研究表明 ,
天山大黄多糖具有抗病毒 、抗肿瘤 、抗乙肝等作用。 为了给该药
材的进一步研究和合理利用提供基础资料 ,本研究运用超声技术
从天山大黄中提取多糖 [ 2] , 并测定其含量 [ 3] 。 现将结果报道
如下。
1　仪器 、试剂及样品
1.1　仪器 岛津 UV-2401PC紫外可见分光光度计 , DL-360超声
波仪(35kHz,浙江象山县石浦海天电子仪器厂), TG328B分析天
平 , DZKW-C电子恒温水浴(北京光明医疗仪器厂), R-201旋转
蒸发器(上海申胜生物技术有限公司), 索氏提取器 。
1.2　材料与试剂 (+)葡萄糖 (AR)105℃干燥恒重 、苯酚
(AR)、硫酸(AR)均为分析纯。天山大黄:采自天山北坡海拔
2 000米左右的新疆沙湾县林场内 , 经石河子大学生物学院何敬
琨教授鉴定为 RheumwitrochiiL.。秋后采挖 , 洗净 , 切片晾干 ,
破碎后备用。
2　方法与结果
2.1　标准曲线的绘制
2.1.1　标准葡萄糖溶液的配制 精确称取干燥恒重的葡萄糖
25.2 mg, 加适量水溶解 , 转移至 250 ml容量瓶中 ,加水至刻度 ,
摇匀 , 配成浓度为 100.8μg· ml-1标准葡萄糖溶液备用 。
2.1.2　5%苯酚试剂的配制 取苯酚 100 g,加铝片 0.1 g和 NaH-
CO3 0.05 g,蒸馏 , 收集 182℃馏份 , 称取 7.5 g,加水 150 ml溶解 ,
置棕色瓶内放冰箱备用。
2.1.3　标准曲线绘制 精确量取葡萄糖标准溶液 0.0, 0.1, 0.2,
0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7 ml置干燥试管中 ,分别加水使成 1.0 ml,
再分别加入 5%苯酚溶液 1.6 ml, 摇匀 , 然后加浓 H2SO4 7.0 ml,
充分摇匀 , 室温放置 25 min, 同时做一空白 , 在 510 nm处有最大
吸收 , 绘制标准曲线 , 回归方程:A=0.056 54C+5.47 ×10-4 , r=
0.999 8。在 10 ～ 70μg· ml-1的范围内 , 浓度与吸收度有良好的
线性关系。
2.2　多糖的提取及精制 称取天山大黄样粉 100 g, 置 500 ml烧
瓶中 , 用石油醚(60 ～ 90 ℃)水浴回流脱脂 2次 , 2 h/次。残渣挥
干溶剂后 ,置锥形瓶中 ,分别加水至 50, 100, 150 ml,于 35kHz超
声提取 30, 40, 50 min后过滤 , 减压浓缩至 25 ml,加入 0.1%活性
炭 , 脱色 ,过滤 , 滤液加入 95%乙醇使溶液含醇 80%, 静置过夜 ,
过滤 , 残渣用乙醚 、无水乙醇反复洗涤 ,得天山大黄多糖 , 60℃ 烘
干备用 。以 100 ml, 40min的多糖量最多。
2.3　换算因素测定 精确称取 60℃干燥恒重的天山大黄多糖 20
mg,水溶解后定容到 100 ml容量瓶中 , 摇匀 , 做为多糖储备液。
精确量取此液 0.2 ml,加水至 1 ml, 按测定标准曲线同样的方法
测其吸光度值。按公式 f=W/CD计算换算因素 , 得 f=3.73。
式中 , W为多糖重量(μg), C为多糖液中葡萄糖的重量(μg), D
为多糖的稀释倍数。
2.4　样品测定 分别精确称取天山大黄粉末 0.20 g,用 80%乙醇
浸泡过夜 ,与多糖的提取及精制项相同的方法提取 , 定容于 250
ml容量瓶为样品液。精确吸取样品液 1 ml, 按测定标准曲线同
样方法测其吸光度值 , 按公式:多糖含量%=CDf/W ×100计算
含量 , 分别为 8.695%, 8.721%, 8.747%, 8.800%, 8.817%,平均
含量为 8.756%, S=0.000 51, RSD=0.59%(n=5)。
2.5　方法学考察
2.5.1　回收率测定 精确称取天山大黄粉末 0.15 g, 精密加入多
糖 7 mg, 与多糖的提取及精制项相同的方法提取 , 于 250 ml容量
瓶中定容。精确移取 1 ml,按测定标准曲线同样方法测其吸光度
值 , 按样品测定同样的方法进行测定。计算多糖含量 , 分别为
99.90%, 100.0%, 100.5%, 101.1%, 101.4%, 平均回收率为
100.6%, S=0.006 6, RSD=0.66%(n=5)。
2.5.2　精密度 精密吸取供试品溶液 1.0 ml共 5份 ,分别置 10
ml容量瓶中 ,按标准曲线的制定项下相同的方法显色测定(每隔
20 min测 1次 , 连续 5次)。通过标准曲线 ,计算出样品多糖的含
量。分别为 8.705%, 8.732%, 8.740%, 8.793%, 8.819%, 平均
值为 8.758%, S=0.000 47, RSD=0.54%(n=5),精密度良好。
2.5.3　重复性 称取天山大黄样品 5份 ,分别与多糖的提取及精
制项相同的方法提取 , 依法测定 , 其含量结果分别为 8.711%,
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LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH 2006VOL.17NO.2 时珍国医国药 2006年第 17卷第 2期
8.729%, 8.737%, 8.790%, 8.808%, 平均值为 8.755%, S=
0.000 42, RSD=0.48%(n=5)。
2.5.4　稳定性实验 用硫酸-苯酚法测定同一样品液在不同时间
吸收度 , 吸收度值至少在 48 h内不变。
2.6　常规法提取 取天山大黄样粉 5份 , 每份约 0.2 g, 精密称
定 , 置索氏提取器中 ,用石油醚(60 ～ 90℃)水浴回流脱脂 2次 , 2
h/次。残渣挥干溶剂后 , 置锥形瓶中 , 加 85%的乙醇 50 ml, 浸泡
12 h,恒温 80℃水浴加热回流分别提取 4, 6, 8, 10, 12 h。过滤 ,减
压浓缩至 25ml, 加入 0.1%活性炭 , 脱色 ,过滤 , 滤液加入 95%乙
醇使溶液含醇 80%, 静置过夜 ,过滤 ,残渣用乙醚 、无水乙醇反复
洗涤 , 得天山大黄多糖 , 于 250 ml容量瓶中定容。 精确移取 1
ml, 按测定标准曲线同样方法测其吸光度值 , 按样品测定同样的
方法进行测定。 多糖含量分别为 6.875%, 6.913%, 7.142%,
6.957%, 6.731%,平均值为 6.924%。
3　讨论
天山大黄多糖具有多种生物活性 , 能激活免疫细胞 , 提高机
体的免疫功能 , 对正常细胞没有毒副作用 , 在抗肿瘤 、抗病毒等药
物研究中 ,多糖类药物的研制已成为当今世界新药的发展方向之
一。多糖的研究发展很快 ,但研究层次及技术水平都还较低。 超
声技术应用于植物细胞破壁 , 大大地加快了反应速度 , 有效地提
高了收率 [ 3] 。我们首次运用超声技术从天山大黄中提取出多
糖 , 并对其含量进行了测定 , 反应时间大为缩短。超声法所用仪
器简单 ,操作方便 , 且自动化程度高 ,便于大规模工业生产。
参考文献:
[ 1 ] 　LiuYM.TheRecordofHerbalMedicineofWEIWUERNation[ M] .
Urumuqi:XinjiangScienceandTechnology sPublishingHouse,
1999:31.
[ 2 ] 　EditorCommiteeofChineseHerbalMedicineofXinjiang.TheChinese
HerbalMedicineofXinjiang[ M].Urumuqi:XinjiangPeople sPubish-
ingHouse, 1976.
[ 3 ] 　ZhaoB, WangYC, OuYF, etal.Ultrasonictechniqueappliedinex-
tractionofplant[ J] .ChinTraditHerbDrug, 1999, 3(9):S-i-ii.
收稿日期:2005-04-07;　修订日期:2005-11-26
作者简介:黄锁义(1964-),男(汉族),广西南宁人 ,现任右江民族医学院
副教授 ,学士学位 ,主要从事主要从事医用化学的教学和中草药有效成分
提取 、微量元素及有机合成的研究工作.
洋葱总黄酮的提取及鉴别
黄锁义1 , 覃成箭 2 , 姚小敏 2 , 梁　宇2
(1.右江民族医学院化学教研室 ,广西 百色　533000;　　　　　
2.右江民族医学院临床医学本科 2003-10班 ,广西 百色　533000)
摘要:目的 为充分利用洋葱植物资源 , 避免资源的浪费 ,探讨洋葱总黄酮的提取及鉴别方法。方法 采用纯物理的工艺
流程过程和紫外线分光光度法从洋葱中提取黄酮类物质 ,对所提取的黄酮类物质进行验证。结果 测得样品中总黄酮的
含量 C=4.84%。回收率为 99.4%, 其纯度和产率均较高。结论 该方法采用全物理过程 , 无任何化学变化及污染 ,是提
取洋葱黄酮类物质的有效途径。
关键词:洋葱;　总黄酮;　提取;　鉴别
中图分类号:R284.2;R282.5　　文献标识码:A　　文章编号:1008-0805(2006)02-0224-02
ExtractionandDistinguishingoftheTotalFlavonefromOnion
HUANGSuo-yi1 , QINCheng-jian2 , YAOXiao-min2 , LIANGYu2
(1.DepartmentofChemistry, YoujiangMedicalColegeforNationalities, Baise, Guangxi533000, China;2.
UndergraduateofClinicalMedicine, Grade2003 , Class10, YoujiangMedicalColegeforNationalities, Baise,
Guangxi533000, China)
Abstract:ObjectiveInordertomakeuseoftheresourcesofonion, avoidwasting, approachtheextractionoftotalflavoneof
onion.MethodsUsingpurelyphysicalprocessflowandspectrophotometrytoextractandchecktheflavoneofonion.ResultsBy
thismethodgettingthecontentsofthetotalflavoneofonionis4.84% andtherateofrecoveryis99.4% withhighoutpatandpu-
rity.ConclusionThismethodisapurephysicalprocess, andhasnotanychemicalchangeandpollution.Itisanidealwaytoex-
tracttheflavoneofonion.
Keywords:Onion;　Totalflavone;　Extraction;　Distinguish
　　洋葱 ,又称葱头 , 属百合科葱属草本植物 , 食用可生可熟 ,可
荤可素 , 欧美国家誉其为 “菜中皇后”。 祖国医学认为 , 洋葱性
平 , 味甘 、辛;其功能:健胃 、消食 、平肝 、润肠 、利尿 、发汗。临床上
表明常吃洋葱对身体有很多益处:促进钠盐排泄 , 有降血压 、降血
脂 、抗动脉硬化 ,预防血栓 , 减少心梗和脑血栓概率;降低血糖含
量 , 治疗糖尿病;缓解哮喘 , 抑制胃癌 、食道癌 、结肠癌 、乳腺癌;预
防骨质疏松;预防老年斑等。另外 , 洋葱含抗菌 、抗炎物质 , 吃洋
葱可防治肠炎痢疾 ,降低胆固醇 , 防治冠心病 、脑梗塞 、心肌梗塞 、
动脉硬化 、脑卒中 、高血压 、头痛 、肩周炎 、便秘 、更年期综合征及
肥胖等 [ 1] 。
现代医学研究发现 ,洋葱含挥发油 、硫化物 、类黄酮 、甾体皂
苷类和前列腺素类等化学成分 , 有多种药用价值 [ 2] ,为了充分利
用 , 笔者对洋葱中黄酮类成分进行提取与鉴别。现将过程介绍
如下。
1　材料与方法
1.1　材料 ①市售新鲜的洋葱。 ②试剂:95%乙醇;甲醇 CP;三
氯化铝 CP;盐酸 CP;氨水 CP;正丁醇 CP;冰乙酸 CP;乙醇乙酯
CP;芦丁对照品(中国生物制品检定所)。 ③仪器设备:UV-
755B紫外线分光光度计(上海分析仪器总厂);DZF-150小型真
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时珍国医国药 2006年第 17卷第 2期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2006VOL.17NO.2