全 文 ：中南药学 2012 年 11 月 第 10 卷 第 11 期 Central South Pharmacy. November 2012, Vol. 10 No. 11
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HPLC-ELSD法测定朱砂根中岩白菜素和百两金皂苷A的含量
黄珍珍，蔡佳仲，柯翠敏，朱瑞静，黄玲，胡英杰 *（广州中医药大学热带医学研究所，广州 510405）
摘要：目的 建立 HPLC-ELSD 法同步测定朱砂根活性成分岩白菜素和百两金皂苷 A 的含量。 方法 采用
Phenomenex Luna C18色谱柱（4.6 mm × 250 mm，5 μm），以甲醇 -水为流动相梯度洗脱，流速 1.0 mL • min－ 1，
柱温 30 ℃。ELSD参数：漂移管温度 100 ℃，载气流速 2.5 mL • min － 1。结果 岩白菜素和百两金皂苷 A分
别在 0.42 ～ 8.40 μg和 0.51 ～ 10.20 μg与峰面积呈良好的线性关系，平均回收率分别为 101.2%、101.4%，
RSD分别为 1.6%、2.0%。 结论 建立的含量测定方法操作简便、结果准确、重现性好，可用于朱砂根药材的
质量控制。
关键词：朱砂根；岩白菜素；百两金皂苷 A；HPLC-ELSD
中图分类号：R284.1, O657.7+2 文献标识码：A 文章编号：1672-2981(2012)11-0829-04
doi:10.3969/j.issn.1672.2981.2012.11.010
HPLC-ELSD determination of bergenin and ardisiacrispin A
in Ardisia crenata Sims
HUANG Zhen-zhen, CAI Jia-zhong, KE Cui-min, ZHU Rui-jing, HUANG Ling, HU Ying-jie* (Institute of Tropical Medi-
cine, Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou 510405)
Abstract: Objective To establish an HPLC-ELSD method to determine the contents of bergenin and ardisiacrispin A in Ardi-
sia crenata simultaneously. Methods An HPLC-ELSD method was developed. A Phenomenex Luna C18 column (4.6 mm ×
250 mm,5 μm) was used, and methanol-water was used as mobile phase with gradient elution,at 1.0 mL • min－ 1,The column
temperature was 30 ℃ . For ELSD,the drift tube temperature was 100 ℃ and nitrogen fl ow rate was 2.5 mL • min－ 1. Results
Bergenin and ardisiacrispin A were linear at 0.42 － 8.40 μg and 0.51 － 10.20 μg respectively. The average recovery was
101.2% and 101.4%, with RSD of 1.6% and 2.0%, respectively. Conclusion The method is easy to operate,accurate and
reproducible,which can be used for the quality control of the Ardisia crenata Sims.
Key words: Ardisia crenata Sims; bergenin; ardisiacrispin A; HPLC-ELSD
基金项目：教育部高校博士点基金项目（No. 20104425110014）。
作者简介：黄珍珍，女，硕士研究生，主要从事中药学研究，E-mail：zzhuang2010gz@126.com * 通讯作者：胡英杰，男，研究员，博
士生导师，主要从事中药学研究，E-mail：yjhu01@126.com
朱砂根为紫金牛科（Myrsinaceae）植物朱砂根（Ardisia
crenata Sims）的干燥根，具有解毒消肿、活血止痛、祛风
除湿之功效，主产于广西、广东、云南、江西等省，别名铁
凉伞、大罗伞、小罗伞等，可用于治疗咽喉肿痛、风湿痹痛、
跌打损伤 [1]。岩白菜素（bergenin）是朱砂根的主要药用成分，
具有止咳平喘作用 [2-3]，其制剂在临床上用于治疗慢性支气
管炎 [4]。百两金皂苷 A（ardisiacrispin A）是朱砂根的一种主
要三萜皂苷 [5] ，具有抗肿瘤活性，体外对白血病、肝癌、口
腔上皮癌、宫颈癌、卵巢癌、胃癌、乳腺癌细胞具有较强的
细胞毒作用 [6]。因此选择岩白菜素和百两金皂苷 A 2种类型
的药物活性成分作为朱砂根质量控制指标具有科学意义和应
用前景。本文报道利用高效液相色谱 -蒸发光检测（HPLC-
ELSD）技术建立了药材中同时测定 2种成分含量的方法并
对不同产地药材进行检测分析的研究结果。
1 仪器与材料
Dionex高效液相色谱仪（戴安中国有限公司），包
括 P680输液泵，ASI-100自动进样器，TCC-100柱温箱，
Chromeleon色谱工作站； Alltech蒸发光检测器（广州市奥
泰仪器有限公司），BS224S电子分析天平（精密度：万分之一，
赛多利斯科学仪器有限公司）；KQ3200E型超声波清洗器（昆
山市超声仪器公司）；甲醇为色谱纯（Dikma公司）；其他
试剂均为分析纯。朱砂根植物样品（见表 4，其中 7号样品
由云南热带作物职业学院彭丽彬老师采自云南普洱市，其他
样品均购于广东广弘药材有限公司）经西南林学院樊国盛教
授鉴定为紫金牛科植物朱砂根 Ardisia crenata Sims，对照品
岩白菜素和百两金皂苷 A均由蔡佳仲博士从该植物中分离
和鉴定，纯度经 HPLC面积归一化法检测，均＞ 98.5%。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Phenomenex Luna C18 色谱柱（4.6 mm ×250 mm，
5 μm），进样 10 μL，流动相为甲醇（A）-水（B），梯
度 洗 脱（ 0 ～ 8 min，30%～ 55%，70% A；8～ 10 min，
55% ～ 65%，70% A；10 ～ 25 min，65% ～ 70%，70% A；
25～ 30 min，70% A），流速 1 mL • min－ 1，柱温 30 ℃。漂
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表 1 朱砂根回流提取岩白菜素与百两金皂苷 A的含量 (n＝ 2)
Tab 1 Content of bergenin and ardisiacrispin A in Ardisia crenata Sims by refl ux extraction (n＝ 2)
提取溶剂
（extractive solvent）
岩白菜素（bergenin）/% 百两金皂苷 A（ardisiacrispin A）/%
50 min 60 min 70 min 50 min 60 min 70 min
甲醇 1.19±0.27 1.49±0.27 1.40±0.40 1.92±0.10 1.97±0.28 1.96±0.11
10%乙醇 0.96±0.05 1.38±0.27 1.33±0.46 0.68±0.03 1.11±0.13 1.01±0.12
20%乙醇 1.00±0.22 1.42±0.23 1.43±0.33 1.03±0.21 1.14±0.12 1.02±0.21
30%乙醇 1.11±0.12 1.49±0.51 1.40±0.40 1.68±0.42 1.71±0.72 1.57±0.12
40%乙醇 1.77±0.47 1.57±0.44 1.49±0.16 1.77±0.40 1.97±0.14 1.59±0.22
50%乙醇 1.62±0.12 1.69±0.69 1.59±0.45 2.06±0.33 2.12±0.18 2.01±0.41
60%乙醇 1.24±0.22 1.49±0.28 1.24±0.18 1.91±0.16 1.75±0.12 1.51±0.11
70%乙醇 0.69±0.36 0.88±0.13 0.73±0.14 1.54±0.14 1.53±0.31 1.45±0.21
80%乙醇 0.67±0.15 0.69±0.13 0.68±0.25 1.09±0.15 1.28±0.30 1.00±0.14
90%乙醇 0.35±0.15 0.42±0.11 0.42±0.10 0.88±0.12 1.07±0.41 0.80±0.21
表 2 朱砂根超声提取岩白菜素与百两金皂苷 A的含量 (n＝ 2)
Tab 2 Contents of bergenin and ardisiacrispin A in Ardisia crenata Sims by ultrasonic extraction (n＝ 2)
提取溶剂
（extracton solvent）
岩白菜素（bergenin）/% 百两金皂苷 A（ardisiacrispin A）/%
50 min 60 min 70 min 50 min 60 min 70 min
甲醇 0.95±0.21 1.21±0.23 1.12±0.11 1.90±0.15 1.91±0.22 1.79±0.16
10%乙醇 0.84±0.31 1.28±0.13 1.22±0.13 0.45±0.11 0.62±0.11 0.90±0.14
20%乙醇 1.11±0.03 1.33±0.12 1.30±0.23 0.72±0.11 0.98±0.22 0.96±0.23
30%乙醇 1.21±0.25 1.35±0.30 1.34±0.26 1.21±0.22 1.11±0.31 1.45±0.12
40%乙醇 1.56±0.02 1.40±0.23 1.38±0.12 1.24±0.17 1.50±0.32 1.59±0.12
50%乙醇 1.41±0.51 1.55±0.14 1.41±0.15 1.92±0.24 2.05±0.32 2.01±0.32
60%乙醇 1.00±0.11 1.26±0.21 1.24±0.22 1.42±0.47 1.83±0.32 1.51±0.24
70%乙醇 0.61±0.21 0.66±0.01 0.53±0.11 1.31±0.15 1.81±0.12 1.45±0.01
80%乙醇 0.59±0.23 0.60±0.32 0.50±0.11 1.26±0.13 1.32±0.30 1.00±0.21
90%乙醇 0.33±0.12 0.33±0.20 0.22±0.11 1.02±0.21 1.23±0.22 0.80±0.21
移管温度：100 ℃；气体流速：2.5 mL • min－ 1。此条件下岩
白菜素与百两金皂苷 A分离度较好，并与其他组分达到基线
分离（见图 1），理论塔板数以岩白菜素计算，应≥ 3 000。
2.5 方法学考察
2.5.1 线性关系 取“2.2”项下混合对照品溶液，进样 1、
2、4、8、10、12、14、16、20 μL，测定，以峰面积的常用
对数为纵坐标（Y），对照品量（μg）的常用对数为横坐标
（X）绘制标准曲线，分别得：岩白菜素回归方程：Y ＝ 1.259
X － 0.260 9，r ＝ 0.999 7，在 0.42～ 8.40 μg呈良好的线性
0 5 10 15 20 25
t/min
1 2
0 5 10 15 20 25
t/min
1
2
图 1 岩白菜素和百两金皂苷 HPLC-ELSD
Fig 1 HPLC-ELSD of bergenin and ardisiacrispin A in Ardisia crenata
A.对照品（control solution）；B. 9号药材样品（sample）；1.岩白菜
素（bergenin）；2.百两金皂苷 A （ardisiacrispin A）
B
A
2.2 对照品溶液的制备
精密称定岩白菜素对照品 4.20 mg，百两金皂苷 A对照
品 5.10 mg，加甲醇溶解，定容至 10 mL，摇匀，即得岩白菜
素 0.42 mg • mL－ 1、百两金皂苷 A 0.51 mg • mL－ 1。精密称
定岩白菜素对照品 13.0 mg，百两金皂苷 A对照品 15.0 mg，
加甲醇溶解，定容至 10 mL，摇匀，即得岩白菜素 1.30 mg •
mL－ 1、百两金皂苷 A 1.50 mg • mL－ 1 。
2.3 供试品溶液制备
取朱砂根粉末（过 40目筛）约 0.5 g，精密称定，置
150 mL圆底烧瓶中，精密加入 50%乙醇 100 mL，精密称定，
水浴回流 1 h，放冷，用 50%乙醇补足减失的重量，摇匀，
滤过，取续滤液，用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，即得。
2.4 提取条件的选择
取朱砂根干燥粉末（过 40目筛），精密称定，加 200
倍量的甲醇和不同浓度的乙醇，超声或回流条件下提取 1次。
测定提取液中岩白菜素与百两金皂苷 A的含量，筛选提取
条件（见表 1～ 2）。结果表明，以 200倍量的 50%乙醇溶
液，回流提取 1 h，最适合于岩白菜素与百两金皂苷 A提取。
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关系；百两金皂苷A回归方程：Y＝ 1.712 5X－ 0.257，r＝
0.999 7，在 0.51～ 10.20 μg呈良好的线性关系。
2.5.2 稳定性试验 取 9 号药材，按“2.3”项下方法配制 1
份供试品溶液，分别于 0、2、4、6、8、12 h 进样 10 μL，
岩白菜素和百两金皂苷A峰面积的 RSD分别为1.5% 、1.4%，
表明样品中岩白菜素和百两金皂苷 A在 12 h 内保持稳定。
2.5.3 精密度试验 精密吸取对照品溶液 10 μL，重复进样 6
次，岩白菜素和百两金皂苷A面积的RSD分别为2.4%，1.2%。
2.5.4 重复性试验 取 9 号药材，按“2.3”项下方法配制 5
份供试品溶液。进样测定，测得岩白菜素和百两金皂苷A平
均含量为 1.98%和 2.07%，RSD分别为 2.0%和 1.0%，结果
表明本方法重复性良好。
2.5.5 加样回收试验 取 9号药材，精密称取 9份，各 0.25 g，
分别置 50 mL容量瓶中，用移液管精密加入岩白菜素对照品
溶液（1.30 mg·mL－ 1 ） 2.00 、3.60 、5.20 mL；百两金皂苷
A对照品溶液（1.50 mg·mL－ 1 ）2.00 、3.60、5.20 mL，每个
浓度 3份；照“2.4” 方法配制供试品液，进样 10 μL，计算
加样回收率（见表 3），岩白菜素和百两金皂苷 A平均回收
率分别为 101.2%、101.4%；RSD分别为 1.6%、2.0%。
表 3 加样回收试验
Tab 3 Recovery test
成分
（component）
称样量
（weight）/g
样品含量
（content）/mg
加入量
（added quantity）/mg
测得量
（detected quantity）/mg
回收率
（recovery）/%
平均回收率
（average recovery） /%
RSD
/%
岩白菜素 0.253 5.009 2.60 7.643 103.1
0.249 4.930 2.60 7.577 101.8
0.254 5.029 2.60 8.509 99.2
0.251 4.970 4.68 9.607 100.8
0.252 4.990 4.68 9.801 102.8 101.2 1.6
0.255 5.049 4.68 9.724 99.9
0.250 4.950 6.76 11.805 101.4
0.257 5.089 6.76 11.768 98.8
0.251 4.970 6.76 11.946 103.2
百两金皂苷 A 0.254 5.258 3.00 8.354 103.2
0.253 5.237 3.00 8.300 102.1
0.251 5.196 3.00 8.121 97.5
0.249 5.154 5.40 10.754 103.7
0.248 5.134 5.40 10.491 99.2 101.4 2.0
0.252 5.216 5.40 10.778 103.0
0.250 5.175 7.80 12.928 99.4
0.249 5.154 7.80 13.032 101.0
0.258 5.341 7.80 13.227 101.1
表 4 朱砂根样品中岩白菜素和百两金皂苷 A的含量
Tab 4 Contents of bergenin and ardisiacrispin A in Ardisia crenata Sims
No.
产地
(origin)
岩白菜素含量
（bergenin) /%
百两金皂苷 A含量
（ardisiacrispin A) /％
1 广东从化 1.25±0.24 2.17± 0.05
2 广东韶关 2.06±0.03 2.74±0.69
3 云南昆明 1.39±0.22 2.98±0.12
4 云南文山 1.72±0.12 1.03±0.41
5 云南黄坪 1.77±0.47 1.60±0.33
6 广西贺州 1.62±0.12 2.06±0.23
7 云南普洱 1.74±0.22 2.35±0.11
8 福建莆田 1.69±0.36 2.55±0.18
9 福建沙县 1.97±0.15 2.08±0.20
10 广西玉林 2.05±0.15 2.77±0.27
11 广西南宁 1.26±0.42 2.56±0.41
12 广西百色 1.76±0.11 2.96±0.35
13 广西桂林 1.91±0.24 2.14±0.22
2.5.6 含量测定 取不同产地的朱砂根药材，按“2.3”项
下方法配制供试品溶液，分别进样 10 μL，测定（n＝ 2），
结果见表 4。
3 讨论
3.1 提取条件选择
已有对朱砂根中岩白菜素含量的测定方法报道 [2-3]，
也有对百两金皂苷 A含量测定方法的报道 [7]，但欠缺对朱
砂根中 2种不同药效成分同时进行定量分析的研究报道。
百两金皂苷 A结构中无共轭体系，几乎没有紫外吸收，
而蒸发光散射检测器是质量型通用检测器，可利用 HPLC-
ELSD方法实现对 2种药物活性成分的同步测定。供试品
溶液的制备，优选出的提取条件是：以 200倍量的 50%
乙醇溶液，回流提取 1 h，适于岩白菜素与百两金皂苷 A
提取。
3.2 色谱柱的选择
在同一色谱条件比较 Thermo BDS HYPERSIL C18色谱
柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）和 Phenomenex Luna C18色谱
柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）的分离效果，以 Phenomenex
Luna C18色谱柱对岩白菜素和百两金皂苷A的分离度为佳。
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3.3 流动相的选择
分别采用乙腈 -水，甲醇 -水作为流动相进行色谱分离，
试验结果以甲醇 -水梯度洗脱分离效果为佳。
3.4 小结
有的样品中（如广东韶关）百两金皂苷 A与岩白菜素
的含量均较高，但多数样品中 2种成分含量及其变化的一致
性与产地关系不明显。
参考文献
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using an LC-UV/ELSD method and confi rmation by LC-ESI-TOF
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（收稿日期： 2012-07-26； 修回日期： 2012-08-30）
肉桂树龄与其灰分含量变化的关系研究
李玲，杨炯珍，姜平川 *（广西源安堂药业有限公司，南宁 530022）
摘要：目的 对肉桂树龄与其灰分含量变化的关系进行研究。 方法 对广西肉桂地理标志保护范围内的 16个地
区、市、县的不同树龄的肉桂进行灰分测定。结果 当肉桂树龄＜ 10年，其总灰分含量符合药典规定；而当肉
桂树龄≥ 15年时，其灰分含量大多数不符合药典规定。 结论 建议对中国药典 2010版一部中对于肉桂检查项
下的总灰分部分的相关规定进行修改。
关键词：肉桂；地理标志；树龄；总灰分
中图分类号：R931.6 文献标识码：A 文章编号：1672-2981(2012)11-0832-03
doi:10.3969/j.issn.1672.2981.2012.11.011
Different tree ages and change of ash content in Cinnamomi Cortex
LI Ling, YANG Jiong-zhen, JIANG Ping-chuan* (Guangxi Yuanantang Pharmaceutical Co. Ltd, Nanning 530022)
Abstract: Objective To describe the relation between different tree ages and quality of Cinnamomi Cortex. Methods The
ash of cinnamon of different ages in 16 Guangxi geographic mark protection was determined. Results When the age of cin-
namon was less than 10 years, the ash content was in line with the Pharmacopoeia; when the tree age of cinnamon more than
15 years, the ash content of most did not meet the Pharmacopoeia. Conclusion We suggest that Chinese Pharmacopoeia for
the total ash part of cinnamon should be modifi ed.
Key words: Cinnamomi Cortex; geographic mark; tree age; ash
作者简介：李玲，女，硕士研究生，主要从事中药质量分析研究，Tel：18978842542，E-mail：linglingszj@163.com * 通讯作者：姜平川，
女，副研究员，主要从事中药新药开发与质量控制技术研究，Tel：13807712995，E-mail：yat268@163.com
肉桂（Cinnamomi Cortex）是樟科植物肉桂（Cinnamo-
mum cassia Presl）的干燥树皮，具有补火助阳、引火归源、
散寒止痛，活血通经的功效，是我国常用中药，也是国外
常用的食品添加剂和香料，在国际市场的需求量非常大。
明代李时珍所著的《本草纲目》中，肉桂被列为补品中的
上品，载其“开腠理，致津液，通其气、补肾火、消沉寒”。
《神农本草经》誉之“主百病，养精神，和颜色，利关节，
补中益气，久服通神，轻身不老”。我国是肉桂的生产大国，