全 文 ：收稿日期:2012-07-04; 修订日期:2012-11-13
基金项目:河北省科技支撑计划项目( No． 07276485)
作者简介:藏 威( 1982-) ，男( 汉族) ，河北保定人，现任衡水学院讲师，硕
士学位，主要从事体育教学和科研工作．
* 通讯作者简介:耿红梅( 1968 － ) ，女( 汉族) ，河北景县人，现任衡水学院
教授，博士学位，主要从事药物分析研究工作．
欧亚旋覆花总黄酮增强小鼠抗疲劳抗缺氧能力研究
藏 威，李国金，耿红梅*
(衡水学院，河北 衡水 053000)
摘要:目的 探讨欧亚旋覆花总黄酮的抗疲劳抗缺氧作用。方法 给实验组小鼠以 25mg /kg、50mg /kg、100mg /kg 三个剂
量的欧亚旋覆花总黄酮灌胃，对照组给予等量蒸馏水，连续 21 d后，各组小鼠分别进行爬杆实验、抗疲劳游泳实验和常压
密闭缺氧实验。结果 与对照组相比，三剂量欧亚旋覆花总黄酮均显著地延长了实验小鼠的爬杆时间、游泳耗竭时间和
密闭缺氧存活时间( P ＜ 0． 05) 。结论 一定剂量的欧亚旋覆花总黄酮对小鼠有明显的抗疲劳抗缺氧作用。
关键词:欧亚旋覆花总黄酮; 抗疲劳; 抗缺氧
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 02． 064
中图分类号:R285． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805( 2013) 02-0384-01
欧亚旋覆花是一种传统的中草药，为菊科旋覆花属植物欧亚
旋覆花 Inula britannica L．的干燥头状花序，主要分布于中国、韩
国和日本，该药收载于《中国药典》(2010 版)一部，性味咸、温，入
肺、肾经，具有降气止呕，消痰行水等功效，主治咳嗽消痰、胁下胀
满、大腹水肿、去头目风、泄散风寒［1］。目前，报道的欧亚旋覆花
的化学成分主要是甾醇、倍半萜、香豆素及黄酮类化合物［2 ～ 4］，具
有抗炎、抗肝损伤、抗肿瘤、抗氧化［5］等多种生物活性。黄酮类
化合物是欧亚旋覆花的主要活性成分之一，作者前期工作已发现
欧亚旋覆花总黄酮在体外具有抗氧化作用。为了进一步研究欧
亚旋覆花总黄酮的药理作用，作者采用小鼠运动模型，对其抗疲
劳抗缺氧能力进行研究，以期为欧亚旋覆花在保健食品的开发及
以后在运动员日常膳食的补充方面提供科学依据。
1 材料与仪器
1． 1 药物与试剂 实验药材分别采购于山西、安国等地，经河北
医科大学生药教研室聂风禔教授鉴定为菊科植物欧亚旋覆花。
欧亚旋覆花总黄酮提取物(本实验室自制)。其它试剂均为分析
纯。
1． 2 仪器 广口瓶，塑料水桶，温度计，旋转蒸发仪(德国 Heidol-
ph公司) ，BS210S电子天平(北京赛多利斯天平有限公司)。
1． 3 动物与分组 昆明种小鼠，雌雄混用，体质量 18 ～ 22g，由
河北医科大学试验动物中心提供。提供基础饲料、自由饮水、饮
食，饲养室室温为(23 ± 5)℃，相对湿度为 40% ～ 70%，照明随
同自然变化。动物观察适应 7d后，选取 96 只进行实验，随机分
为 4 组(每组 8 只) ，即对照组(CTG)和黄酮低剂量治疗组
(LFG)、黄酮中剂量治疗组(MFG)、黄酮高剂量治疗组(HFG)。
采用灌胃法，治疗组每天以 15 ml /kg·bw 的容量给小鼠灌胃不
同剂量的欧亚旋覆花总黄酮(25mg /kg、50mg /kg、100mg /kg) ，对
照组给予等量蒸馏水。每天定时灌胃 1 次，连续 21d。
2 方法
2． 1 欧亚旋覆花总黄酮制备［6］ 取欧亚旋覆花适量加 10 倍量
水，回流提取 3 次，每次 1h，合并提取液浓缩;然后用 AB － 8 大孔
吸附树脂柱富集，提取物上样浓度为 0． 2 g /ml，用 70%乙醇进行
洗脱，冷冻干燥，得欧亚旋覆花总黄酮，使用时用蒸馏水配成所需
各浓度。
2． 2 爬杆试验［7］ 灌胃给药 21d时，于末次给药后 1h，将经训练
筛选过的小鼠分别放在长 110mm、直径 7mm 的垂直悬挂的光滑
玻璃棒上端，使其肌肉处于静力紧张状态，记录小鼠从爬杆开始，
直至肌肉疲劳，无力抱住玻璃棒而落到地上的时间，反复 3 次，第
3 次跌落后终止实验，累计 3 次的时间作为爬杆时间(s)。
2． 3 负重游泳实验［8］ 灌胃给药 21d，末次灌胃 1 h后，每只小鼠
尾部系一为其体重 10%的重物，将各组小鼠分别放入水深为
20cm，水温保持在 23℃左右的水桶中(桶的直径为 32cm，每桶放
4 只) ，立即计时，并注意观察。当小鼠头部沉入水中 10s 不能浮
出水面者即为体力耗竭，记录小鼠自进入水中到此时的时间为小
鼠游泳耗竭时间。以该时间为指标，比较各组小鼠的游泳运动能
力。
2． 4 耐常压缺氧实验［8］ 连续灌胃 21d，于末次灌胃 1h后，将各
组小鼠分别放入盛有 5 g钠石灰的 250 ml的带塞广口瓶内(每瓶
只放 1 只小鼠) ，用凡士林涂抹瓶塞以密闭瓶口，立即计时，直至
小鼠呼吸停止。以小鼠在密闭广口瓶内存活时间为指标，比较各
组小鼠耐缺氧存活时间。
2． 5 统计分析 所有实验数据用 SPSS 11． 0 统计软件进行数据
处理分析，计量资料以 珋x ± s表示，各组间比较用 t检验，以 P ＜ 0．
05 为差别有统计学意义。
3 结果
3． 1 欧亚旋覆花总黄酮对小鼠爬杆实验的影响 由表 1 可以看
出，与对照组比较，不同剂量的欧亚旋覆花总黄酮均能显著延长
小鼠爬杆时间，中、高剂量效果较佳。这表明欧亚旋覆花总黄酮
能够提高小鼠的运动耐力，具有降低力竭性疲劳的作用。
表 1 欧亚旋覆花总黄酮对爬杆实验的影响(珋x ± s) s
组别 爬杆时间
CTG 40． 08 ± 24． 11
LFG 55． 52 ± 20． 82
MFG 71． 52 ± 22． 36*
HFG 79． 65 ± 21． 28*
与对照组比较，* P ＜ 0． 05;n = 8
3． 2 欧亚旋覆花总黄酮对小鼠游泳耗竭时间的影响 由表 2 可
以看出，与对照组比较，低、中、高剂量组可以显著提高小鼠负重
游泳能力，延长小鼠的负重游泳时间，说明一定剂量的欧亚旋覆
花总黄酮对小鼠具有显著的抗疲劳作用。
表 2 欧亚旋覆花总黄酮对小鼠游泳耗竭时间的影响(珋x ± s)min
组别 游泳耗竭时间
CTG 24． 89 ± 2． 71
LFG 33． 46 ± 2． 45*
MFG 36． 56 ± 3． 22*
HFG 38． 88 ± 5． 64*
与对照组比较，* P ＜ 0． 05;n = 8
3． 3 欧亚旋覆花总黄酮对小鼠密闭缺氧存活时间的影响 由表
3 可以看出，与对照组相比较，低、中、高剂量组可以显著提高小
·483·
时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 2 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL． 24 NO． 2
鼠耐缺氧能力，说明一定剂量的欧亚旋覆花总黄酮对小鼠具有
显著的抗缺氧作用。
表 3 欧亚旋覆花总黄酮对小鼠密闭缺氧存活时间的影响(珋x ± s)
min
组别 存活时间
CTG 14． 89 ± 1． 85
LFG 20． 46 ± 9． 54*
MFG 23． 53 ± 8． 26*
HFG 28． 89 ± 2． 67*
与对照组比较，* P ＜ 0． 05;n = 8
4 讨论
由爬杆试验和负重力竭游泳实验可知，欧亚旋覆花总黄酮能
够提高小鼠的运动耐力，具有降低力竭性疲劳的作用。欧亚旋覆
花含有丰富的黄酮类化合物，它们在清除因运动而产生的自由基
过程中起着重要的作用［9］，可通过降低运动后的自由基浓度，减
轻自由基的损伤程度，从而减缓运动疲劳的产生，这可能是欧亚
旋覆花总黄酮抗疲劳作用的机制之一。
缺氧是引起机体疲劳的原因之一。缺氧是一种紧张性刺激，
可引起机体产生各种应激性反应。严重缺氧会引起组织器官的
代谢障碍和功能紊乱，甚至发生组织坏死和机体死亡。生命活动
的重要器官如脑和心脏缺氧是小鼠常压缺氧死亡的主要原因。
本实验研究发现欧亚旋覆花总黄酮能在常压缺氧情况下，延长小
鼠的存活时间，其作用机制有待于进一步研究。
本研究证实，欧亚旋覆花总黄酮能够提高小鼠耐缺氧、抗疲
劳的能力，说明欧亚旋覆花能够增强机体的运动能力和应激能
力，将为进一步开发应用欧亚旋覆花提供良好的依据。
参考文献:
［1］ 国家药典委员会．中国药典，一部［S］．北京:中国医药科技出版社，
2010:305．
［2］ 耿红梅，张嫡群，王云志，等． 欧亚旋覆花中总黄酮的含量测定
［J］．中草药，2006，37(3) :450．
［3］ Shao Y，Bai N，Zhou B． Kaurane glycosides from Inula Britannica
［J］． Phytochemistry，1996，42(3) :783．
［4］ Park EJ，Kim Y，and Kim J． Acylated flavonol glycosides from the
flower of Inula Britannica［J］． J Nat Prod，2000，63 (1) :34．
［5］ Kim SR，Park MJ． Flavonoids of Inula Britannica protect cultured cor-
tical cells from necrotic cell death induced by glutamate［J］． FreeRadi-
cal Biology ＆ Medicine，2002，32(7) :596．
［6］ 耿红梅，张嫡群，王云志，等． 欧亚旋覆花总黄酮提取与富集工艺
研究［J］．天然产物研究与开发，2006，18(4) :643．
［7］ 周桃英，李国庆，崔东坡． 竹叶黄酮抗疲劳作用的实验研究［J］．中
国食品添加剂，2010，18(4) :156．
［8］ 王 莉，魏智清． 宁夏枸杞叶水煎剂增强小鼠抗疲劳抗缺氧能力
研究［J］．时珍国医国药，2012，23(3) :583．
［9］ 吴晶晶，黄培桦，朱良，等． 马尾松花粉总黄酮对小鼠抗疲劳作用
的研究［J］． 现代食品科技，2010，26(8) :815．
收稿日期:2012-06-21; 修订日期:2012-11-13
基金项目:广东省深圳市重点实验室提升项目［No． CXB201005240008A，
the European Research Council Advanced Investigator Grant
( No． 233232) ］
作者简介:吴海强( 1977-) ，男( 汉族) ，河北石家庄人，现任深圳大学副教
授，博士学位，主要从事天然药物化学相关研究工作．
蛇床子等中药抑制 Aβ42 多肽聚集活性研究
吴海强1，张 嫽1，蒙诺亚1，张 昉1，贺震旦2，A． Tunnacliffe3，郑易之1
(1．深圳大学生命科学学院，广东 深圳 518060; 2．深圳大学医学院，广东 深圳 518060;
3． Department of Chemical Engineering and Biotechnology，University of Cambridge，Cambridge CB2 3RA，UK．)
摘要:目的 研究几种中药抑制 Aβ42 多肽聚集沉淀的活性。方法 分别制备蛇床子等十二味中药的石油醚、乙酸乙酯和
甲醇提取物，用 ThT荧光光谱法和 E． coli模型对各提取物进行 Aβ42 聚集抑制活性研究。结果 苦参、蛇床子和陈皮乙酸
乙酯提取物能够大大降低作用体系 ThT荧光强度，同时在 E． coli模型中可以显著促进 E． coli细胞生长( 超过阳性对照样
品 EGCG) 。此外，川楝子石油醚提取物也具有较强活性。结论 川楝子、苦参、蛇床子、陈皮等含有抑制 Aβ42 聚集沉淀
的活性成分，可作为抗 AD中药进行深入系统研究。
关键词:阿尔茨海默病; 中药提取物; Aβ42; ThT荧光光谱法; E． coli模型
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 02． 065
中图分类号:R285． 5 文献标识码:B 文章编号:1008-0805( 2013) 02-0385-03
随着社会老龄化的发展，老年性痴呆的发病率持续快速增
加。阿尔茨海默病(Alzheimer＇s disease，AD)是最主要的痴呆疾
病之一［1］，其症状包括记忆力、思维能力、判断能力等的不可逆
退化，严重危害老年人身心健康，给患者家庭和社会带来了巨大
的精神和经济负担，已成为一项世界性健康问题［2］。AD 相关病
理机制较为复杂，目前尚不十分明确，临床上也没有针对病因的
特效治疗药物［3］。不断筛选研究新靶点、新机制的抗 AD药物具
有重要意义。
Amyloid － β(Aβ)聚集形成老年斑和磷酸化 Tau 蛋白的纤维
缠结是 AD基本病理特征［4］。大量研究表明，Aβ 的生成和聚集
在 AD病程中具有重要的促进作用，特别是可溶性 Aβ42 寡聚体
可以通过多种途径导致神经突触损伤和神经细胞的死亡，相对于
不溶性 Aβ纤维沉淀而言，Aβ42 寡聚体具有更强的神经毒性［5］。
以可溶性 Aβ42 寡聚体为作用靶点的抗 AD药物研究是未来的主
导方向之一。结合我国传统中草药在综合性重大疾病防治方面
的独特优势，从中药中筛选研究发现活性显著的可溶性 Aβ42 寡
聚体抑制组分，对 AD防治及中药研究都具有积极的推动作用。
本课题组采用 ThT(Thioflavine T)荧光光谱法［6］和 E． coli细胞筛
选模型［7 ～ 9］作为可溶性 Aβ42 寡聚体抑制组分的研究方法，对多
种中药提取物进行了抑制 Aβ42 多肽聚集活性研究，本文中将报
道蛇床子、苦参等中药的研究结果。
1 器材
1． 1 中药材 本研究所用中药购于由北京同仁堂有限公司(表
1) ，经由深圳大学医学院贺震旦博士鉴定。
1． 2 仪器与试剂 超净工作台(SW － CJ － 2D，苏州净化设备有
限公司)、恒温恒湿培养箱(BPS － 100CL，上海一恒科学仪器有限
公司)、恒温摇床(FLY － 100B，北京乐普纳机电技术开发公司)、
旋转蒸发仪(RV 05 basci 1 － B，德国 IKA 公司)、荧光酶标仪
·583·
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2013 VOL． 24 NO． 2 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 2 期