全 文 ：第３１卷 第１期
２０１２年　２月
华　中　农　业　大　学　学　报
Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｕａｚｈｏｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ
Ｖｏｌ．３１　Ｎｏ．１
Ｆｅｂ．２０１２，５０～５４
收稿日期：２０１０－１２－１０
基金项目：国家自然科学基金项目（３０５６００５９，３１０６０２０５）、新疆维吾尔自治区自然科学基金项目（２００８２１１７０）
芦韦华，硕士研究生．研究方向：植物细胞工程．Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｗｈ１９８３０８２２＠ｑｑ．ｃｏｍ
通讯作者：王　芳，教授．研究方向：植物细胞工程．Ｅ－ｍａｉｌ：Ｗａｎｇｆａｎｇ１ｈａｏ＠１２６．ｃｏｍ
理化条件对新疆紫草毛状根培养及
紫草素含量的影响
芦韦华　陈永芳　王　芳　代宁波　郝爱花　李翠芳　嘉素尔
新疆农业大学农学院，乌鲁木齐８３００５２
摘要　以发根农杆菌诱导的新疆紫草毛状根为试验材料，采用二阶段培养法，分别考察了 ＮＨ４ＮＯ３、培养
基、转速、温度、蔗糖对毛状根生长的影响及培养方式、酸水解酪蛋白对毛状根生产的影响。结果表明：毛状根在
ＭＳ无铵液体培养基中生长速度较 ＭＳ快了近１倍，第１５天时毛状根的生长量达峰值，增殖８倍；在ＳＨ无铵培
养基、转速为（１２０±５）ｒ／ｍｉｎ、温度为（２５±１）℃时毛状根增殖倍数最大，为９．３４倍。蔗糖质量浓度对毛状根的
生长增殖影响不大；液体培养方式的紫草素及其衍生物含量（１．０５％）远远高于固体培养（０．３３％），是后者的３
倍；添加０．５ｇ／Ｌ的酸水解酪蛋白的其紫草素及衍生物含量为１．２９％，较对照（１．１７％）增加了１０．３％。本研究
为今后利用新疆紫草毛状根规模化生产提供了理论依据。
关键词　新疆紫草；毛状根；紫草素及其衍生物；培养条件
中图分类号　Ｑ　９４３．２　　文献标识码　Ａ　　文章编号　１０００－２４２１（２０１２）０１－００５０－０５
　　新疆紫草（Ａｒｎｅｂｉａ　ｅｕｃｈｒｏｍａ （Ｒｏｙｌｅ）Ｊｏｈｎｓｔ）
是我国传统药用紫草类植物中临床药效最好的一
种，其中的主要成分紫草素及其衍生物广泛用于医
药、食品、化妆品和高级印染等行业［１－２］。新疆紫草
主要分布于新疆，随着人们的大量采集，野生资源已
接近枯竭，采用常规育种方式进行品种改良周期较
长，因此给人工种植带来了较大的困难，到目前为止
人工大面积有效栽培还未成功［３］。多年来利用细胞
培养生产紫草素及其衍生物的研究报道很多［３－６］，毛
状根培养生产植物次生代谢产物将是一种有效途
径，这方面的研究已经取得了可喜的成就［７－１０］，如青
蒿（青蒿素）、雪莲（芸香苷）、红豆杉（３，４－二羟基苯
丙氨酸）、长春花（长春碱）等。毛状根作为营养器官
较细胞培养有其优越性，比如生长速度快且不依赖
激素，次生代谢产物较稳定等。目前未见有关利用
新疆紫草毛状根合成紫草素及其衍生物的报道。本
研究旨在利用发根农杆菌转化获得的新疆紫草毛状
根［１１］，优化其培养条件，使毛状根在液体培养中既
能迅速生长增殖，又能提高紫草素及其衍生物的含
量，从而为新疆紫草毛状根规模化培养提供参考
依据。
１　材料与方法
１．１　试验材料
新疆紫草毛状根 Ａｅｈｒｆ０７株系（发根农杆菌
ＭＳＵ４４０诱导产生）由笔者所在的课题组提供。
１．２　试验方法
由于紫草素及其衍生物的合成呈非偶联型，即
紫草素及其衍生物是在毛状根生长停止后才进行合
成的，因此，新疆紫草毛状根的液体培养采用“二阶
段培养法”：第一阶段以毛状根生物学产量的增殖为
目的，第二阶段以毛状根生产紫草素及其衍生物为
目的。
１）毛状根生长阶段。称取生长一致的毛状根
０．５ｇ，接种于装有５０ｍＬ液体培养基的１００ｍＬ锥
形瓶中，培养液灭菌前调 ｐＨ 值至５．８，在温度
（２５±１）℃、转速（１２０±５）ｒ／ｍｉｎ条件下暗培养，培
养１５ｄ后，取出用滤纸吸干表面水分称取鲜质量，
计算增殖倍数。
增殖倍数＝（ｍ２－ｍ１）／ｍ１
ｍ１ 为接种时毛状根鲜质量，ｍ２ 为培养一定时
间后毛状根鲜质量。将毛状根置于８０℃条件下
DOI:10.13300/j.cnki.hnlkxb.2012.01.016
　第１期 芦韦华 等：理化条件对新疆紫草毛状根培养及紫草素含量的影响 　
１ｈ，再于６０℃下干燥至质量恒定后称取干质量。
①ＮＨ４ＮＯ３ 试验。毛状根接种于 ＭＳ、ＭＳ无
铵（去除ＮＨ４ＮＯ３）液体培养基中，分别培养３、６、９、
１２、１５ｄ。
②转速和培养基组合试验。毛状根接种于 ＭＳ
无铵、Ｂ５ 无铵、ＳＨ 无铵、ＬＳ无铵液体培养基中，摇
床转速分别为（１００±５）、（１２０±５）、（１４０±５）
ｒ／ｍｉｎ。
③温度和培养基组合试验。毛状根接种于 ＭＳ
无铵、Ｂ５ 无铵、ＳＨ 无铵、ＬＳ无铵液体培养基中，培
养温度分别为（２３±１）、（２５±１）、（２７±１）℃。
④ 蔗 糖 试 验。蔗 糖 添 加 量 为 １５、３０、４５、
６０ｇ／Ｌ。
２）毛状根生产阶段。称取３ｇ由ＳＨ无铵液体
培养基中培养１２ｄ的毛状根，接种于装有５０ｍＬ
Ｍ－９液体培养基的１００ｍＬ锥形瓶中，ｐＨ值为５．８，
培养温度（２５±１）℃，转速（１２０±５）ｒ／ｍｉｎ，除特殊
说明外均添加酸水解酪蛋白（ＣＨ）１ｇ／Ｌ。培养３０ｄ
后测定紫草素及其衍生物的含量（包括毛状根和培
养液）。
①培养方式试验。毛状根接种于 Ｍ－９液体培
养基、Ｂ５无铵固体培养基中。
②酸水解酪蛋白试验。毛状根接种于添加
０．２５、０．５０、１．００、２．００ｇ／Ｌ酸水解酪蛋白的 Ｍ－９液
体培养基中。
③毛状根中紫草素及其衍生物的提取及含量测
定。采用中国药典中记载的测定羟基萘醌总色素的
方法测定紫草素及其衍生物的含量。具体方法：取
培养一定时间的毛状根适量，于５０℃烘箱中干燥
３ｈ，粉碎，精密称取０．５００ｇ，置１００ｍＬ容量瓶中，
加无水乙醇稀释至刻度，４ｈ内不断振摇，过滤，精
密吸取滤液５ｍＬ于２５ｍＬ容量瓶中，加无水乙醇
稀释至刻度，摇匀。采用分光光度法测定吸收度
Ａ５１６，按左旋紫草素及其衍生物（Ｃ１６Ｈ１６Ｏ５）的吸收
系数为２４２计算，毛状根紫草素及其衍生物含
量／％＝（Ａ５１６／２４２）×１０。
④培养液中紫草素及其衍生物的萃取及含量测
定。将培养一定时间的毛状根培养液与等体积的石
油醚混合，在分液漏斗中振荡，静置，分液，反复萃取
至无色，合并萃取液，测定萃取液体积，采用分光光
度法测定萃取液Ａ５１６，培养液中紫草素及其衍生物
含量／％＝（Ａ５１６／２４２）×１０×Ｖ×ｎ，其中，Ｖ 为培养
液的体积（ｍＬ）；ｎ为稀释倍数。
紫草素及其衍生物含量＝毛状根紫草素及其衍
生物含量＋培养液紫草素及其衍生物含量。
２　结果与分析
２．１　ＮＨ４ＮＯ３ 对新疆紫草毛状根生长的影响
图１结果显示，毛状根在 ＭＳ无铵液体培养基
中生长速度较 ＭＳ快了近１倍，毛状根生长量随培
养时间的推移而逐渐增加，第１５天时毛状根的生长
量达峰值，增殖８倍，表明铵离子不利于毛状根的生
长，这与许铁峰等［１２］报道的商陆毛状根培养一致。
试验发现接种３～１２ｄ的毛状根的韧性及活力较
强，培养超过１２ｄ的毛状根松软易断，继代后长势
较差。因此，毛状根的液体培养继代周期为１２ｄ，此
期内应及时将毛状根进行继代培养以维持不断生长
的营养需求。
图１　ＮＨ４ＮＯ３ 对毛状根生长的影响
Ｆｉｇ．１　Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ＮＨ４ＮＯ３ｏｎ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｇｒｏｗｔｈ
图２　转速和培养基对毛状根生长的影响
Ｆｉｇ．２　Ｅｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓｈａｋｅｒ　ｒｅｖｏｌｕｔｉｏｎｓ　ｒａｔｅ　ａｎｄ
ｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｄｉａ　ｏｎ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｇｒｏｗｔｈ
２．２　转速和培养基对新疆紫草毛状根生长的影响
摇床转速影响毛状根液体培养过程中氧气的传
递。图２结果显示，在（１４０±５）ｒ／ｍｉｎ下由于摇床
的转速过快，毛状根的剪切力增大，导致接种１ｄ后
多数毛状根断裂，几天后褐化，甚至死亡；在（１００±
５）、（１２０±５）ｒ／ｍｉｎ中均可正常生长，尤其在ＳＨ无
铵培养基中、转速为（１２０±５）ｒ／ｍｉｎ时毛状根增殖
倍数最大，为９．３４倍，较（１００±５）ｒ／ｍｉｎ时（７．４６
倍）增加了１．８８倍。
１５
　　 华 中 农 业 大 学 学 报 第３１卷　
２．３　温度和培养基对新疆紫草毛状根生长的影响
　　图３结果显示，在同为（１２０±５）ｒ／ｍｉｎ的摇床
中培养，在（２７±１）℃条件下，由于温度较高，毛状
根变为褐色，很快死亡，而在（２３±１）℃、（２５±１）℃
下均可正常生长。（２５±１）℃是毛状根生长培养的
最适温度，尤其在ＳＨ 培养基中毛状根的增殖倍数
最大，较（２３±１）℃时增加了２．８４倍。方差分析结
果表明，４种不同液体培养基中培养的毛状根在
（２５±１）℃条件下的增殖倍数均较（２３±１）℃有显
著提高，表明温度是影响毛状根生长的重要因子。
图３　温度和培养基对毛状根生长的影响
Ｆｉｇ．３　Ｅｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｄｉｆｅｒｅｎｔ
ｍｅｄｉａ　ｏｎ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｇｒｏｗｔｈ
２．４　蔗糖对新疆紫草毛状根生长的影响
蔗糖是离体培养物生长不可缺少的碳源和能
源。图４结果显示，随着培养液中蔗糖质量浓度的
增加，毛状根的生长增殖变化不大。表明低质量浓
度蔗糖完全可以满足毛状根生长需求，而高浓度质
量蔗糖也没有抑制毛状根生长。因此，从经济角度
考虑，在ＳＨ无铵培养基中只需添加１５ｇ／Ｌ蔗糖，
既不影响毛状根产量，又可节约成本。
图４　蔗糖对毛状根生长的影响
Ｆｉｇ．４　Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ｓｕｃｒｏｓｅ　ｏｎ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｇｒｏｗｔｈ
２．５　培养方式对紫草素及其衍生物合成的影响
毛状根在液体培养基中的生长量明显多于固体
培养方式，且毛状根的颜色明显较固体培养方式的
红。图５结果显示，毛状根在液体培养基中的紫草
素及其衍生物含量达到１．０５％，远远高于固体培养
基中的含量（０．３３％），是后者的３倍。方差分析结
果表明二者之间差异显著，表明液体培养方式对毛
状根的生长与紫草素及其衍生物合成具有明显促进
作用。此外，毛状根中的紫草素及其衍生物有外泌
至培养液中现象，培养液颜色由淡红至深红程度不
等，为总含量的７．６０％。
１：固体培养Ｓｏｌｉｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ；
２：液体培养Ｌｉｑｕｉｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｄｉｕｍ．
图５　培养方式对紫草素及其衍生物合成的影响
Ｆｉｇ．５　Ｅｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｏｎ　ｓｈｉｋｏｎｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
２．６　酸水解酪蛋白对紫草素及其衍生物合成的影
响
　　图６结果显示，添加０．５ｇ／Ｌ的酸水解酪蛋白
效果最好，紫草素及其衍生物含量为１．２９％，较对
照（１．１７％）增加了１０．３％。随酸水解酪蛋白含量
的继续增加，紫草素及其衍生物含量呈下降趋势。
添加量为２．０ｇ／Ｌ时紫草素及其衍生物含量明显降
低（０．６８％）。说明添加０．５ｇ／Ｌ的酸水解酪蛋白可
以提高紫草素及其衍生物含量，过量则产生抑制作
用，但方差分析结果表明，与对照的差异不显著。
图６　酸水解酪蛋白对
紫草素及其衍生物合成的影响
Ｆｉｇ．６　Ｅｆｅｃｔ　ｏｆ　ＣＨ　ｏｎ　ｓｈｉｋｏｎｉｎ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ
３　讨　论
许多研究认为氮源影响培养物的生长量及生长
环境如培养基中的ｐＨ值。商陆的毛状根培养不同
氮源对其生长有显著影响，酸水解酪蛋白最好，其次
为ＮＨ４ＮＯ３ 和酵母浸膏，蛋白胨效果最差［１２］。四
倍体菘蓝毛状根生长需要１．０ｇ／Ｌ水解酪蛋白或水
解乳蛋白作为氮源，毛状根分枝多、产量高［１３］。雷
公藤不定根生长进入对数期以前，氮元素开始大量
消耗，进入对数生长期后，培养基中的氮源９０％被
消耗，表明氮是毛状根生长的必要条件［１４］。长春花
毛状根培养用水解乳蛋白作为氮源较 ＮＨ４ＮＯ３ 的
２５
　第１期 芦韦华 等：理化条件对新疆紫草毛状根培养及紫草素含量的影响 　
每瓶增长量提高了５０％以上［１５］，说明在毛状根的培
养中，不同植物对氮源反应不同，因而需求也不尽相
同，有些植物可以通过ＮＨ４ＮＯ３ 替换成有机氮的方
法提高产量。黄芪毛状根的生长量在 ＭＳ 无
ＮＨ４ＮＯ３ 培养基中增加２０％以上［１６］。本研究与前
人研 究 结 果 相 似，添 加 酸 水 解 酪 蛋 白、去 除
ＮＨ４ＮＯ３ 对毛状根生长有利，但新疆紫草毛状根的
生长是否完全不需要ＮＨ４＋或如果需要则与ＮＯ３－
之间的比例应为如何，相关研究正在进行中。
在液体培养基中植物组织对剪切力较为敏感。
摇瓶培养过程中转速升高，瓶内的传质效果好，溶氧
相对提高，但转速过高，剪切力变大，容易引起培养
物的损伤及次生代谢产物合成量的降低。不同植物
毛状根培养时，最适转速因植物种类而异。水母雪
莲毛状根培养中，转速在１００ｒ／ｍｉｎ时，剪切力对水
母雪莲毛状根影响小，具有好的传质和氧传递，毛状
根生长量及总黄酮合成量均达到最大［１７］。青蒿毛
状根培养中，转速在１３０～１５０ｒ／ｍｉｎ时剪切力对其
影响小，同时具有好的传质和氧传递［１８］。本试验新
疆紫草毛状根液体培养中，转速在（１２０±５）ｒ／ｍｉｎ
时，剪切力对新疆紫草毛状根影响小，具有好的传质
和氧传递，毛状根增殖最快。
３０、５０ｇ／Ｌ的蔗糖对三裂叶野葛毛状根的生长
有促进作用，１０ｇ／Ｌ时毛状根生长缓慢，毛状根细
小且侧根较少［１９］；当蔗糖质量浓度为９０ｇ／Ｌ时，毛
状根生长很慢，侧根少而短粗，脆而易断。人参毛状
根培养４周的生物量结果为蔗糖含量３０ｇ／Ｌ的处
理优于１５ｇ／Ｌ的处理［２０］。在一定范围内提高蔗糖
质量浓度能促进青蒿毛状根的生长，当蔗糖质量浓
度达到８０ｇ／Ｌ时，毛状根的形态发生明显的改变，
生长受到严重抑制［２１］。本研究中毛状根在蔗糖质
量浓度为１５～６０ｇ／Ｌ范围内增殖倍数差异不大，这
与前人研究结果不太一致。主要原因可能是毛状根
培养周期相对较短，低质量浓度蔗糖（１５ｇ／Ｌ）完全
可以满足其生长需求，而６０ｇ／Ｌ的蔗糖质量浓度对
新疆紫草毛状根没有抑制作用，这一点与前人研究
结果一致。
植物的细胞培养中添加活性炭可吸附酚类物
质，防止褐化，避免对植物产生毒害作用，影响其生
长［２２］。本研究分别在ＳＨ毛状根生长培养基和Ｍ－９
紫草素及其衍生物生产培养基中添加１ｇ／Ｌ的活性
炭，结果表明在ＳＨ 中毛状根生物学产量的增殖倍
数平均为７．０５倍，产量并无提高，反而有所下降。
在 Ｍ－９中添加活性炭后毛状根紫草素及其衍生物
含量也未增加。此外。笔者还进行了Ｌ－苯丙氨酸、
琼脂糖、油菜素内酯等的试验，与对照相比，毛状根
的生长、紫草素及其衍生物含量均较低，表明这些物
质对毛状根的生长及生产有抑制作用，这与紫草细
胞培养［２３－２４］的研究结果不一致，主要原因可能是植
物种类及培养体系不同所致。
本研究结果表明，采用ＳＨ无铵液体培养基、转
速为（１２０±５）ｒ／ｍｉｎ、温度为（２５±１）℃时毛状根
增殖倍数最大，紫草素及其衍生物含量较固体培养
增加了３倍。此结果为今后利用新疆紫草毛状根规
模化培养生产紫草素及其衍生物奠定了技术基础。
参 考 文 献
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ｔｏ　ｅｎｈａｎｃｅ　Ｌ－ＤＯＰＡ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｓｔｉｚｏｌｏｂｉｕｍ　ｈａｓｓｊｏｏ　ｈａｉｒｙ
ｒｏｏｔ　ｃｕｌｔｕｒｅｓ　ｂｙ　ｕｓｉｎｇ　ａ　ｍｅｓｈ　ｈｉｎｄｒａｎｃｅ　ｍｉｓｔ　ｔｒｉｃｋｌｉｎｇ　ｂｉｏｒｅａｃ－
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　　 华 中 农 业 大 学 学 报 第３１卷　
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［２１］ＹＵ　Ｓ　Ｘ，ＫＷＯＫ　Ｋ　Ｈ，ＤＯＲＡＮ　Ｐ　Ｍ．Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｓｕｃｒｏｓｅ，ｅｘｏｇｅ－
ｎｏｕｓ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｏｔｈｅｒ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｏｎ
ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｓｔｅｒｏｉｄａｌ　ａｌｋａｌｏｉｄ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙ　Ｓｏｌａｎｕｍ　ａｖｉｃｕｌａｒｅ
ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ［Ｊ］．Ｅｎｚｙｍｅ　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌ，１９９６，１８：２３８－２４３．
［２２］崔堂兵，郭勇，张长远．植物组织培养中褐变现象的产生机理及
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成的研究［Ｊ］．南京大学学报：自然科学版，２０００，３６（２）：２３３－
２３４．
Ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｐｈｙｓｉｃａｌ　ａｎｄ　ｃｈｅｍｉｃａｌ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ
ｏｎ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｏｆ　Ａｒｎｅｂｉａｅｕｃｈｒｏｍａ（Ｒｏｙｌｅ）Ｊｏｈｎｓｔ　ｈａｉｒｙ
ｒｏｏｔｓ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｓｈｉｋｏｎｉｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ
ＬＵ　Ｗｅｉ－ｈｕａ　ＣＨＥＮ　Ｙｏｎｇ－ｆａｎｇ　ＷＡＮＧ　Ｆａｎｇ
ＤＡＩ　Ｎｉｎｇ－ｂｏ　ＨＡＯ　ＡＩ－ｈｕａ　ＬＩ　Ｃｕｉ－ｆａｎｇ　ＪＩＡ　Ｓｕ－ｅｒ
Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ａｇｒｏｎｏｍｙ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｕｒｕｍｑｉ　８３００５２，Ｃｈｉｎａ
Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｕｓｉｎｇ　ｔｈｅ　Ａｒｎｅｂｉａ　ｅｕｃｈｒｏｍａ （Ｒｏｙｌｅ）Ｊｏｈｎｓｔ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｒｈｉ－
ｚｏｇｅｎｅｓ　ａｓ　ａ　ｔｅｓｔｉｎｇ　ｍａｔｅｒｉａｌ，ｔｈｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｓｙｓｔｅｍ　ｗｉｔｈ　ｔｗｏ－ｓｔａｇｅ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ａｒｎｅｂｉａ　ｅｕｃｈｒｏｍａ
（Ｒｏｙｌｅ）Ｊｏｈｎｓｔ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｗａｓ　ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｆｉｒｓｔ　ｔｉｍｅ．Ｆａｃｔｏｒｓ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｉｎｇ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｇｒｏｗｔｈ　ｓｕｃｈ
ａｓ　ＮＨ４ＮＯ３，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｍｅｄｉａ，ｓｐｅｅｄ，ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ，ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｓｕｃｒｏｓｅ　ａｎｄ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｏｎ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｐｒｏｄｕ－
ｃｉｎｇ　ｓｕｃｈ　ａｓ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　ｃｕｌｔｕｒｅ，ｃａｓｅｉｎ　ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ　ｗｅｒｅ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｈｉｃｈ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　ＭＳ（ｎｏ　ＮＨ４＋）ｌｉｑｕｉｄ　ｍｅｄｉｕｍ，ｔｈｅ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ
ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｗａｓ　ｄｏｕｂｌｅｄ　ｔｈａｔ　ｏｆ　ＭＳ　ｓｏｌｉｄ　ｍｅｄｉｕｍ，ａｎｄ　ｉｔ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｂｙ　８ｔｉｍｅｓ　ｃｕｌｔｉｖａｔｅｄ　ｅｖ－
ｅｒｙ　１５ｄ．Ｕｎｄｅｒ　ｔｈｅ　ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ　ｗｈｉｃｈ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｉｎｏｃｕｌａｔｅｄ　ｗｉｔｈ　５０ｍＬ　ＳＨ（ｎｏ　ＮＨ４＋）ｌｉｑｕｉｄ　ｍｅｄｉｕｍ，ａｔ
（２５±１）℃，（１２０±５）ｒ／ｍｉｎ，ｔｈｅ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｂｙ　９．３４
ｔｉｍｅｓ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｓｕｃｒｏｓｅ　ｗａｓ　ｎｏｔ　ｃｒｉｔｉｃａｌ　ｆｏｒ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ
ｓｈｉｋｏｎｉｎ　ｆｒｏｍ　ｓｏｌｉｄ　ｃｕｌｔｕｒｅ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｓｔａｇｅ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｐｒｏｍｏｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ａｂｏｕｔ　０．３３％ｔｏ　１．０５％．
Ａｄｄｉｎｇ　０．５ｇ／Ｌ　ｃａｓｅｉｎ　ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅ　ｉｎｔｏ　ｔｈｅ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ，ｔｈｅ　ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｏｆ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ　ｐｒｏｌｉｆｅｒａ－
ｔｉｏｎ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｐｒｏｍｏｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ａｂｏｕｔ　１．１７％ｔｏ　１．２９％，ｐｒｏｖｉｄｉｎｇ　ａ　ｔｈｅｏｒｅｔｉｃａｌ　ｂａｓｉｓ　ｆｏｒ　ｃｕｌｔｉｖａｔｉｎｇ　ｌａｒｇｅ－
ｓｃａｌｅ　ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ　ｂｙ　ａｐｐｌｙｉｎｇ　Ａｒｎｅｂｉａ　ｅｕｃｈｒｏｍａ（Ｒｏｙｌｅ）Ｊｏｈｎｓｔ　ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ　Ａｒｎｅｂｉａ　ｅｕｃｈｒｏｍａ （Ｒｏｙｌｅ）Ｊｏｈｎｓｔ；ｈａｉｒｙ　ｒｏｏｔｓ；ｓｈｉｋｏｎｉｎ　ａｎｄ　ｉｔｓ　ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ；ｃｕｌｔｕｒｅ
ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ
（责任编辑：杨锦莲）
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