全 文 ：杂志，2012，18(12) :18 － 20．
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DOI 10． 3870 /yydb． 2013． 08． 038
小飞蓬中总黄酮的含量测定
岐琳，牛晓峰
(西安交通大学医学院药学系，西安 710061)
摘 要 目的 建立小飞蓬中总黄酮的含量测定方法。方法 采用分光光度法，以芦丁为对照品，以 5%三氯化铝
甲醇溶液为显色剂，在 510 nm波长处对样品中总黄酮进行含量测定。结果 总黄酮在 5 ～ 50 μg·mL －1线性关系良好，
平均加样回收率 98． 11%，RSD = 1． 10% ( n = 6) 。9 月份小飞蓬中总黄酮含量最高( 1． 71% ) ;小飞蓬药材保存 3 年总黄
酮含量变化不大。结论 该方法操作简便、准确，具有很好的重复性和稳定性，适用于小飞蓬中总黄酮的含量测定。
关键词 小飞蓬;总黄酮; 生长期; 保存期
中图分类号 R286; R927． 1 文献标识码 A 文章编号 1004 － 0781( 2013) 08 － 1088 － 02
小飞蓬为菊科植物小飞蓬(Erigeron canadensis
L．)的全草，又称祁州一枝蒿、蛇舌草、竹叶艾、鱼胆
草、苦蒿，具有清热解毒、祛风止痒之功效，用于治疗口
腔炎、中耳炎、结膜炎、风火牙痛、风湿骨痛等［1-2］。有
关该药的研究笔者较少见到［3-4］，为进一步开发小飞
蓬，笔者参照文献［5-6］，对不同生长期和不同保存期
小飞蓬中总黄酮进行含量测定。
1 仪器与试药
1． 1 仪器 UV-260 紫外分光光度计(日本岛津) ，
CP-224S电子天平(德国赛多利斯)。
1． 2 试药 芦丁对照品(中国食品药品检定研究院，批
号:100080-200306) ，所用试剂均为分析纯。不同保存期
测定用样品(批号:20070902)及不同生长期测定用样品
(批 号:20090428，20090521，20090616，20090719，
20090729，20090811，20090823，20090907，20090918，
20091009，20091022，20091031)均采收于西安交通大学
药学系药圃，经西安交通大学李映丽教授鉴定为菊科植
物小飞蓬(Erigeron canadensis L．)的全草。
2 方法与结果
2． 1 对照品溶液的制备 精密称取 105 ℃干燥至恒
收稿日期 2012 － 11 － 23 修回日期 2012 － 12 － 20
作者简介 岐琳(1967 －) ，女，陕西西安人，实验师，学士，
研究方向:天然药物。电话:029 － 82655138，E-mail:qilin @
mail． xjtu． edu． cn。
通讯作者 牛晓峰，副教授。E-mail:niuxf@ mail． xjtu． edu．
cn。
重的芦丁对照品 10． 0 mg，置 100 mL 量瓶，加 60%乙
醇适量，振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得每毫升
含芦丁 0． 1 mg的对照品溶液。
2． 2 供试品溶液的制备 取小飞蓬药材粗粉约
1． 0 g，精密称定，置索氏提取器，加入 60 ～ 90 ℃石油
醚 100 mL，回流提取 8 h，挥干石油醚，加入 60%乙醇
50 mL，加热回流提取二次(1． 5 h，1 h) ，过滤，合并滤
液，回收乙醇，残渣用 60%乙醇溶解并移入 10 mL 量
瓶，用 60%乙醇稀释至刻度，摇匀，精密吸取 1 mL 置
50 mL量瓶，60%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，即得。
2． 3 标准曲线的绘制 精密吸取对照品溶液 0． 5，1，
2，3，4 和 5 mL，分别置 10 mL 量瓶，分别加 60%乙醇
5 mL，精密加入 5%亚硝酸钠溶液 1 mL，摇匀，放置
6 min，精密加入 10%硝酸铝溶液 0． 3 mL，混匀，放置
6 min，精密加入氢氧化钠试液 2 mL，60%乙醇稀释至
刻度，摇匀，放置 10 min。以相应试剂为空白，采用紫
外-可见分光光度法，在 510 nm 波长处测定吸光度。
以芦丁对照品浓度为纵坐标(Y) ，溶液吸光度值为横
坐标(X) ，作标准曲线，回归方程为 Y = 98． 512X + 0．
002 7，r = 0． 999 9，结果表明芦丁对照品浓度在 5 ～
50 μg·mL －1范围内与溶液的吸光度之间呈良好的线
性关系。
2． 4 精密度实验 精密量取 100 μg·mL －1芦丁对照
品溶液 2 mL，按标准曲线绘制方法操作，在 510 nm波
长处连续 6 次测定吸光度值，结果 RSD = 0． 17%(n =
6) ，表明仪器精密度良好。
·8801· Herald of Medicine Vol. 32 No. 8 August 2013
2． 5 稳定性实验 取同一供试品溶液，分别在 0，15，
30，60，90 和 120 min，510 nm波长处测定吸光度值，结
果 RSD = 0． 33%(n = 6)。表明供试品溶液在制备后
120 min内稳定性良好。
2． 6 重复性实验 取同一批样品粉末 1． 0 g，共 6 份，
按样品测定方法平行测定，计算总黄酮含量，结果
RSD =0． 85%，表明方法重复性良好。
2． 7 加样回收率实验 取已知含量样品(总黄酮含
量 1． 56%)粉末 0． 5 g，共 6 份，精密称定，分别精密加
入浓度 1． 51 mg·mL －1芦丁对照品溶液 5 mL，挥干溶
剂，按供试品溶液制备方法制备样品，以相应试剂为空
白，照紫外-可见分光光度法，在 510 nm波长处测定吸
光度值，由标准曲线读出浓度，计算总黄酮含量，结果
见表 1，平均加样回收率 98． 11%，RSD =1． 10%。
表 1 芦丁加样回收率实验结果
取样量 /
g
原有量 加入量 测得量
mg
回收率 /
%
0． 502 9 7． 845 2 7． 55 15． 336 2 99． 22
0． 508 0 7． 924 8 7． 55 15． 294 9 97． 62
0． 507 7 7． 920 1 7． 55 15． 403 1 99． 11
0． 501 5 7． 832 4 7． 55 15． 235 8 98． 06
0． 504 7 7． 873 3 7． 55 15． 299 9 98． 37
0． 505 2 7． 881 1 7． 55 15． 150 9 96． 29
2． 8 样品测定 取不同采收时间及不同保存时间小
飞蓬药材粗粉约 1． 0 g，精密称定，按“2． 2”项制备不
同供试品溶液，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光
光度法，在 510 nm波长处测定吸光度值，由标准曲线
读出浓度，计算总黄酮含量，结果见表 2，3。
3 讨论
由紫外吸收图谱可知，样品溶液和对照品溶液在
510 nm 波长处有最大吸收，故选择 510 nm 为测定波
长。
小飞蓬药材中总黄酮含量随着生长期的延长不断
增高，在倒苗前含量最高，小飞蓬最佳采收期应为 9 ～
10 月份。小飞蓬药材随着保存时间的加长，总黄酮含
量有所降低，贮存 4 年期的药材总黄酮损失近 40%，
所以最佳保存期应为 1 ～ 3 年。
表 2 小飞蓬不同生长期总黄酮含量测定结果 %
样品批号 采收日期 总黄酮含量 RSD
20090428 2009 年 4 月 28 日 0． 35 1． 19
20090521 2009 年 5 月 21 日 0． 47 1． 26
20090616 2009 年 6 月 16 日 0． 59 1． 07
20090719 2009 年 7 月 19 日 0． 75 0． 89
20090729 2009 年 7 月 29 日 1． 01 1． 01
20090811 2009 年 8 月 11 日 1． 36 0． 77
20090823 2009 年 8 月 23 日 1． 47 0． 92
20090907 2009 年 9 月 7 日 1． 56 1． 08
20090918 2009 年 9 月 18 日 1． 71 0． 81
20091009 2009 年 10 月 9 日 1． 65 0． 94
20091022 2009 年 10 月 22 日 1． 52 1． 05
20091031 2009 年 10 月 31 日 1． 30 1． 12
表 3 小飞蓬不同保存期总黄酮含量测定结果 %
测定日期 保存时间 /年 总黄酮含量 RSD
2008 年 3 月 11 日 0． 5 1． 51 0． 83
2008 年 9 月 7 日 1． 0 1． 47 0． 75
2009 年 3 月 5 日 1． 5 1． 42 1． 19
2009 年 9 月 10 日 2． 0 1． 38 0． 90
2010 年 3 月 17 日 2． 5 1． 30 0． 85
2010 年 9 月 12 日 3． 0 1． 28 0． 66
2011 年 3 月 8 日 3． 5 1． 12 0． 97
2011 年 9 月 6 日 4． 0 0． 92 1． 05
2012 年 3 月 6 日 4． 5 0． 85 0． 72
2012 年 9 月 3 日 5． 0 0． 71 0． 88
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