全 文 ：［收稿日期］ 20110920(704)
［通讯作者］ * 李宜平，副教授，从事中药资源及开发利用研
究，Tel:0431-86172201， E-mail:czdliyiping @
163． com
HPLC测定肝毒净丸中白藜芦醇苷、
岩白菜素的含量
于丽雅，刘海艳，李宜平 *
(长春中医药大学药学院，长春 130117)
［摘要］ 目的:建立以高效液相色谱法测定肝毒净丸中白藜芦醇苷、岩白菜素含量的方法。方法:C18柱(4. 6 mm ×
150 mm，5 μm) ，流动相分别为乙腈-水(20∶ 80)、甲醇-水(20∶ 80) ，检测波长分别为 303，275 nm，流速 1. 0 mL·min － 1。结果:白
藜芦醇苷在 0. 121 2 ～ 0. 323 2 μg(r = 0. 999 9)线性关系良好，平均加样回收率 97. 99%，RSD 0. 69%;岩白菜素在 0. 148 5 ～ 0. 396
μg (r = 0. 999 9)线性关系良好，平均加样回收率 98. 65%，RSD 0. 92%。结论:方法操作简便、准确、重复性好，为肝毒净丸的
质量控制提供了依据。
［关键词］ 肝毒净丸;白藜芦醇苷;岩白菜素;含量测定;高效液相色谱法
［中图分类号］ R284. 1 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2012)22-0149-03
Determination of Polydatin and Bergenin in Gandujing Pill by HPLC
YU Li-ya，LIU Hai-yan，LI Yi-ping*
(School of Phamaceutical Sciences，Changchun University of Chinese Medicine，Changchun 130117，China)
［Abstract］ Objective: to build a high performance liquid chromatography on determination of the
polydatin and bergenin in Gandujing Pill． Method:C18 column (4. 6 mm × 150 mm，5 μm) ，mobile phase of
acetonitrile-water (20∶ 80) ，methanol-water (20∶ 80) ，wavelength detection at 303，275 nm，flow rate 1. 0 mL·
min － 1 ． Result:Polydatin showed a good linear relationship in the range of 0. 121 2-0. 323 2 μg (r = 0. 999 9) ;the
average recovery was 97. 99% with RSD of 0. 69% ． Bergenin showed a good linear relationship in the range of
0. 148 5-0. 396 μg (r = 0. 999 9) ;the average recovery was 98. 65% with RSD of 0. 92% ． Conclusion:The
method with good repeatability is simple and accurate，which provides a basis for quality control of the Gandujing
Pill．
［Key words］ Gandujing Pill;polydatin;bergenin;determination of the content;HPLC
肝毒净丸是在肝毒净颗粒基础上更改剂型制成
的水丸，在提取工艺、质量标准方面均有较大的提
高。肝毒净丸是由虎杖、紫金牛(矮地茶)、垂盆草、
半枝莲、地耳草、厚朴、败酱草、紫草、贯众、片姜黄
10 味中药组成的中药复方制剂，具有清热解毒、利
湿化瘀的功效，主要用于慢性乙型病毒性肝炎的治
疗。为有效控制该制剂的质量，对方中主要药材虎
杖中的白藜芦醇苷［1］和矮地茶中的岩白菜素［2］，采
用高效液相色谱法进行了定量分析研究。
1 仪器与试药
LC-10ATvp 型高效液相色谱仪(日本岛津，包
括:LC-10ATvp 泵、CTO-10Avp 柱温箱、SPD-10Avp
紫外检测器) ;AUY220 型电子分析天平(日本岛津
公司) ，HU-3120F 型双频超声机(重庆中谱科技有
限公司)。白藜芦醇苷(批号 1535-200102)、岩白菜
素(批号 1532-200202)均购自中国药品生物制品检
定所;肝毒净丸(批号 031101，031105，031110，均由
吉林省博维药业有限公司生产) ;乙腈为色谱纯，水
为双蒸水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2. 1 色谱条件与系统适应性试验 用十八烷基硅
·941·
第 18 卷第 22 期
2012 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 22
Nov．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.22.022
烷键合硅胶为填充柱，C18柱(4. 6 mm × 150 mm，
5 μm) ，白藜芦醇苷以乙腈-水(20∶ 80)作为流动相，
检测波长 303 nm，柱温 30 ℃，流速 1. 0 mL·min － 1，
进样量 10 μL，理论塔板数按白藜芦醇苷峰计算不
低于 2000［3-4］;岩白菜素以甲醇-水(20 ∶ 80)作为流
动相，检测波长 275 nm，柱温 25 ℃，进样量 10 μL，
流速 1. 0 mL·min － 1，理论塔板数按岩白菜素峰计算
不低于 2000［2，5-6］。
2. 2 溶液的制备
2. 2. 1 对照品溶液的制备 精密称取白藜芦醇苷
对照品、岩白菜素对照品适量，分别加甲醇溶解制成
每 1 mL 含 0. 020 2 mg 的白藜芦醇苷对照品溶液、
每 1 mL 含 0. 024 75 mg 的岩白菜素对照品溶液，
即得。
2. 2. 2 供试品溶液的制备 取本品适量，研碎，取
约 0. 2 g，精密称定，置 50 mL 量瓶中，加甲醇适量，
超声处理(250 W，25 kHz)30 min，取出，放冷，用甲
醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，过 0. 45 μm
微孔滤膜，即得。
2. 2. 3 阴性对照试验 按处方比例分别称取除虎
杖及矮地茶以外的其余药味按制备工艺制成缺虎杖
和缺矮地茶的阴性样品，按 2. 2. 2 项下方法操作，分
别制备虎杖的阴性对照溶液和矮地茶的阴性对照溶
液，按照相应的色谱条件进行高效液相色谱试验，所
得阴性对照色谱图中，在与肝毒净丸色谱图中白藜
芦醇苷及岩白菜素峰的出峰位置上未出现吸收峰，
表明处方中其他药材对白藜芦醇苷及岩白菜素的含
量测定无影响，见图 1。
A，D．对照品;B，E．样品;C．缺虎杖阴性样品;F．缺矮地茶阴性样品;1．白藜芦醇苷;2．岩白菜素
图 1 肝毒净丸 HPLC
2. 3 方法学考察
2. 3. 1 线性关系考察 分别精密量取白藜芦醇苷
对照品溶液或岩白菜素对照品溶液 6，8，10，12，14，
16 μL，按已拟定的色谱条件测定，以峰面积积分值
Y 为纵坐标，以白藜芦醇苷或岩白菜素的进样量
(μg)为横坐标绘制标准曲线，进行线性回归。白藜
芦醇苷的线性回归方程 Y = 677. 74X － 56. 227(r =
0. 999 9) ，表明白藜芦醇苷在 0. 121 2 ～ 0. 323 2 μg
呈良好的线性关系。岩白菜素的线性回归方程Y =
271. 73X － 0. 017 2(r = 0. 999 9) ，表明岩白菜素在
0. 148 5 ～ 0. 396 μg 呈良好的线性关系。
2. 3. 2 精密度试验 分别精密吸取白藜芦醇苷对
照品溶液 10 μL 和岩白菜素对照品溶液 10 μL，注
入高效液相色谱仪，重复进样 6 次，计算白藜芦醇苷
峰面积的 RSD 0. 56%，岩白菜素峰面积的 RSD
1. 87%，表明仪器的精密度良好。
2. 3. 3 稳定性试验 取同一供试品溶液，分别在
0，2，4，6，8 h 进样 10 μL，结果白藜芦醇苷峰面积的
RSD 0. 86%，岩白菜素峰面积的 RSD 0. 73%，表明
供试品溶液在 8 h 内稳定。
2. 3. 4 重复性试验 精密称取同一批供试品 6 份，
分别按 2. 2. 2 项下方法制备，按 2. 1 项下色谱条件测
定，测得样品中白藜芦醇苷的含量为 42. 12 mg /9 g，
RSD 0. 58%，岩白菜素的含量为 25. 36 mg /9 g，RSD
0. 62%，表明该方法的重复性良好。
2. 3. 5 加样回收率试验 分别取已知含量的肝毒
净丸(批号 031101)约 0. 1 g 及 0. 2 g，各取 6 份，精
密称定。前 6 份精密加入白藜芦醇苷对照品溶液
(0. 527 2 g·L － 1)1 mL，后 6 份精密加入岩白菜素对
照品溶液(0. 315 8 g·L － 1)1 mL，按 2. 2. 2 项下方法
制备供试品溶液，按照 2. 1 项下色谱条件测定，计算
回收率。结果表明本品准确度较好(表 1 ～ 2)。
·051·
第 18 卷第 22 期
2012 年 11 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 22
Nov．，2012
表 1 肝毒净丸中白藜芦醇苷加样回收率试验
No．
样品含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
1 0. 457 8 0. 527 2 0. 978 8 98. 82
2 0. 472 2 0. 527 2 0. 994 3 99. 03
3 0. 493 3 0. 527 2 1. 007 5 97. 53
97. 99 0. 69
4 0. 489 5 0. 527 2 1. 008 2 98. 39
5 0. 480 7 0. 527 2 0. 990 6 96. 72
6 0. 492 7 0. 527 2 1. 006 3 97. 42
表 2 肝毒净丸中岩白菜素加样回收率试验
No．
样品含量
/mg
加入量
/mg
测得量
/mg
回收率
/%
平均值
/%
RSD
/%
1 0. 270 2 0. 315 8 0. 579 2 97. 85
2 0. 298 4 0. 315 8 0. 609 1 98. 39
3 0. 279 2 0. 315 8 0. 588 9 98. 07
98. 65 0. 92
4 0. 286 0 0. 315 8 0. 600 8 99. 68
5 0. 295 5 0. 315 8 0. 608 2 99. 02
6 0. 283 9 0. 315 8 0. 596 2 98. 89
2. 3. 6 样品含量测定 按 2. 2. 2 项下供试品溶液
的制备方法，平行测定 3 批次肝毒净丸中白藜芦醇
苷、岩白菜素的含量。结果白藜芦醇苷含量分别为
41. 51，42. 16，42. 52 mg /9 g，岩白菜素含量分别为
27. 22，26. 49，27. 36 mg /9 g。
3 讨论
3. 1 流动相的选择 参照肝毒净颗粒原标准含量
测定项，进行流动相摸索，采用乙腈-水(25 ∶ 75) ，结
果白藜芦醇苷峰保留时间较短，与其他色谱峰未能
达到基线分离，而以乙腈-水(20∶ 80) ，白藜芦醇苷峰
能与其他色谱峰达到基线分离，确定为以乙腈-水
(20∶ 80)作为测定白藜芦醇苷含量的流动相。对岩
白菜素进行流动相摸索，采用以甲醇-水(20∶ 80) ，岩
白菜素峰能与其他色谱峰达到基线分离，确定以甲
醇-水(20∶ 80)作为测定岩白菜素含量的流动相。
3. 2 提取溶剂的选择 分别采用甲醇、50%甲醇对
供试品中白藜芦醇苷和岩白菜素进行超声提取，结
果表明以甲醇作为提取溶剂时测得的含量较高，因
此选用甲醇为提取溶剂。
3. 3 提取时间的选择 对不同提取时间进行了比
较，结果超声处理 30，40 min 测得的含量接近，且已
经能够提取完全，因此选择超声处理 30 min。
［参考文献］
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［J］．中草药，2003，34(6) :496．
［2］ 中国药典 ．一部［S］． 2010:338．
［3］ 杨红美，陈波，曾建国，等 ． HPLC 同时测定虎杖及其提
取物中 4 种有效成分的含量［J］． 中国中药杂志，
2006，31(3) :202．
［4］ 郑虎占，董泽宏，佘靖 ． 中药现代研究与应用 ． 第 3 卷
［M］．北京:学苑出版社，1998:2800．
［5］ 郑虎占，董泽宏，佘靖 ． 中药现代研究与应用 ． 第 5 卷
［M］．北京:学苑出版社，1998:4551．
［6］ 潘扬，王天山，马国祥，等 ． RP-HPLC 法测定肝毒净颗
粒中岩白菜素的含量［J］． 中药新药与临床药理，
1998，9(3) :172．
［责任编辑 顾雪竹
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
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