全 文 ：然可见条状结晶，但包合物中已无条状结晶，表明 MA 被包合在
β － CD内。
3 结论
优选出的最佳包合物制备工艺条件为:β 超声功率 300 W，
超声时间 30min，包和率达到 91． 22%。
由于 β － CD具有特殊的环状中空的筒状结构，可将 MA 嵌
入其中，形成包合物，可以增加 MA的溶解性，采用超声方法可有
效制备 MA/β － CD包合物。
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收稿日期:2015-07-22; 修订日期:2015-11-20
基金项目:广西科技攻关计划项目(桂科攻 1355004 － 12) ;
广西壮族自治区卫生厅中医药科技专项(No． GZBZ14 － 08) ;
广西壮药材质量评价与标准研究专项
(No． GXZC2014 － G31577 － YLZB － B3)
作者简介:王 淼(1990-) ，女(汉族) ，黑龙江齐齐哈尔人，广西中医药大
学药学院在读硕士研究生，主要从事中药成分分析与质量控制工作．
* 通讯作者简介:覃洁萍(1963-)，女(汉族)，广西南宁人，广西中医药大学
教授，硕士研究生导师，硕士学位，主要从事中药分析与质量控制研究工作．
产地加工方法对藤茶中双氢杨梅素含量的影响
王 淼，覃洁萍* ，奉艳花，黄志飘，刘鹏飞
(广西中医药大学药学院，广西 南宁 530001)
摘要:目的 通过测定不同产地加工方法处理的藤茶中双氢杨梅素的含量，探讨不同的藤茶产地加工方法对藤茶药材质
量的影响。方法 分别采用低温烘干、高温杀青、微波处理、自然晒干、自然阴干几种不同产地加工方法对藤茶鲜叶进行
加工，并模拟阴雨天将藤茶置于阴暗潮湿环境放置数天;然后采用高效液相色谱法测定不同方法加工处理的藤茶中双氢
杨梅素的含量。结果 高温杀青、微波干燥法、低温烘干法处理的藤茶中双氢杨梅素含量均较高，而自然晾晒的藤茶中双
氢杨梅素含量较低，置于阴暗潮湿环境放置数天的藤茶中双氢杨梅素含量则低至 3%以下。结论 藤茶的产地加工对其
中主要活性成分的含量有很大影响，采摘后立刻杀青烘干、低温干燥或用微波处理可有效提高藤茶中双氢杨梅素的含
量，从而保证藤茶药材的质量。
关键词:藤茶; 产地加工; 双氢杨梅素; 含量对比; 高效液相色谱
DOI标识:doi:10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2016． 03． 037
中图分类号:Ｒ283． 1 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2016)03-0614-03
藤茶为葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄 Ampelopsis grossede-
tata的嫩茎叶经传统炮制加工制成的保健茶，民间常用于治疗咽
喉炎、皮肤炎、风寒感冒、黄疸肝炎等症［1 ～ 3］。藤茶中所含的主要
化学成分为黄酮类化合物，其中最主要的成分为双氢杨梅素［4］。
药理实验证明，藤茶中的双氢杨梅素具有抗氧化［5，6］、抗菌、抗炎
及抗过敏［7 ～ 9］、降糖［10，11］、降脂［12］及保肝［13］等功效，为藤茶的主
要活性成分。在不同地区，藤茶的加工方法略有不同，主要有炒
制、水煮、晒干等方法。不同的加工处理方法，对药材中的有效成
分可能会产生不同的影响。我们前期研究发现，经传统炒制或微
波处理后可大大提高藤茶中主要有效成分双氢杨梅素的含量。
中药材采摘后的加工处理，对药材的质量有着至关重要的作
用。如徐文芬等［14］的研究发现，淫羊藿药材在新鲜采摘后用 140
～ 180℃鼓风快速干燥有利于其中淫羊藿苷成分含量的增加。张
云［15］在研究白芍的产地加工时发现，白芍沸水煮去皮后晒至 7
成干，切薄片、干燥的加工方法，与传统方法相比可减少白芍苷在
加工过程中的损失。时维静等［16］对白头翁产地加工的实验研究
证实，新鲜白头翁采收后，经 105℃杀青再用 50℃干燥，白头翁皂
苷含量最高。为进一步探讨藤茶采收后的产地加工方法对藤茶
主要化学成分的影响，本文采用不同产地加工方法对藤茶进行加
工处理，并采用高效液相色谱法分别测定了不同加工处理的藤茶
中双氢杨梅素的含量，研究了藤茶的新鲜程度及产地加工方式对
藤茶中有效成分双氢杨梅素含量的影响，为今后规范藤茶的加工
方法提供科学依据。
1 仪器与材料
本文实验用藤茶分别于 5 ～ 7 月采自广西壮族自治区桂林恭
城、桂林灵川及南宁地区，所有采集的藤茶样品原植物均经广西
中医药大学蔡毅教授鉴定，为葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄
Ampelopis grossedentata(Hand － Mazz)的嫩茎叶。双氢杨梅素对照
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时珍国医国药 2016 年第 27 卷第 3 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2016 VOL． 27 NO． 3
品(广西中医药大学分析化学教研室提供，经 UV、MS、1HNMＲ、
IＲ光谱分析鉴定结构;经 HPLC 进样 20μg 按归一化法检测，双
氢杨梅素含量达 99． 0%，符合含量测定的要求)。甲醇(分析纯，
国药集团化学试剂有限公司) ，乙腈(色谱纯，Fisher 公司) ，磷酸
(分析纯，南宁第二化工厂)。
Agilent － 1100 高效液相色谱仪，G1314A 型 VWD 紫外检测
器，G1313A型自动进样器，G1316A型智能化柱温箱。G1311A型
四元梯度泵，G1322A型脱气机。赛多利斯科学电子天平(北京，
中国) ，DHG － 9240A 型电热恒温鼓风干燥箱(上海，中国)
KQ5200B型超声清洗器(昆山，中国) ，泰斯特高速万能粉碎机
(天津市，中国)。
2 方法与结果
2． 1 药材的产地加工
2． 1． 1 低温烘干法 将新鲜采集的藤茶嫩茎叶摊开，置烘箱中于
60℃下烘至全干。
2． 1． 2 微波处理法 将新鲜采集的藤茶嫩茎叶置于 700MH微波
下辐射 2min，再于 60℃下烘至全干，即得。
2． 1． 3 高温杀青后低温烘干法 将新鲜采集的藤茶嫩茎叶置于
烘箱中，105℃烘 15min杀青，再于 60℃下烘至全干。
2． 1． 4 自然晒干法 将新鲜采集的藤茶嫩茎叶摊开，于阳光下晒
至全干。
2． 1． 5 自然阴干法 将新鲜采集的藤茶嫩茎叶摊开，于阴凉干燥
通风处晾至全干。
2． 1． 6 潮湿不通风环境放置 模拟阴雨潮湿天气，将新鲜采集的
藤茶嫩茎叶置于阴暗潮湿环境放置数天后，再置于烘箱中，60℃
烘至全干。
本实验将 3 个不同产地采集到的藤茶药材分别用以上“2．
1． 1 ～ 2． 1． 6”不同加工方法进行加工处理，得到 1 － 1 ～ 1 － 6、2 －
1 ～ 2 － 3 及 3 － 1 ～ 3 － 4 不同编号的藤茶样品，详见表 2。
2． 2 含量测定方法与结果
2． 2． 1 色谱条件 色谱柱:Agilent ODS 柱(250mm × 4． 6mm，
5μm) ;流动相:乙腈 － 0． 1%磷酸，梯度洗脱，0 － 30min:乙腈 10%
→30%，0． 1%磷酸 90%→70%;流速 1ml·min － 1;检测波长
292nm;进样量 5μl。在此色谱条件下，双氢杨梅素对照品及典型
的藤茶样品 HPLC色谱图见图 1。
2． 2． 2 对照品溶液的制备 精密称取双氢杨梅素对照品于容量
瓶中，用甲醇充分溶解定容，配制成浓度为 1． 03mg·ml －1对照品
储备液。
I．双氢杨梅素
图 1 双氢杨梅素对照品(a)、60℃烘干藤茶(b)、
自然晒干藤茶(c)、阴暗潮湿环境放置的藤茶
(d)样品 HPLC色谱图
2． 2． 3 供试品溶液的制备 精密称取藤茶粉末 30mg于 100ml具
塞锥形瓶中，精密加入 50ml甲醇，称重，超声提取 40min。放冷至
室温后，用甲醇补足缺失的重量，摇匀，滤过。取续滤液，于
13000r·min －1离心 10min。将上层溶液移至进样瓶中，即得供试
品溶液。
2． 2． 4 方法学考察
2． 2． 4． 1 线性关系的考察 分别取浓度为 1． 03mg·ml －1的对照
品储备液 1，4，8，10，15ml，于 5 个 50ml 量瓶中，加甲醇稀释并定
容，配制成浓度为 0． 0206 ，0． 0824，0． 1648，0． 206，0． 309 mg·
ml －1的系列标准品溶液，然后按“2． 2． 1”项下的色谱条件，各进
样 5μl，测量双氢杨梅素的峰面积。以峰面积为纵坐标，进样量
(μg)为横坐标，制作标准曲线，得回归方程为 A = 2511． 22m +
33． 40，r = 0． 9998(n = 5)。说明双氢杨梅素在 0． 103 ～ 1． 545μg
范围内其进样量与峰面积呈良好线性关系。
2． 2． 4． 2 精密度实验 取浓度为 1． 03mg·ml －1的双氢杨梅素对
照品储备液稀释 10 倍后，按“2． 2． 1”项下的色谱条件连续进样 6
次，测定双氢杨梅素峰面积，并计算其峰面积的 ＲSD值为 0． 3%。
结果表明仪器精密度较好。
2． 2． 4． 3 重复性实验 精密称取编号为 1 － 5 的藤茶药材粉末
30mg，共 6 份，按“2． 2． 3”项下的方法制备供试品溶液，按“2． 2．
1”项下的色谱条件进样分析，测定双氢杨梅素的色谱峰面积，并
计算药材中双氢杨梅素的含量。结果其平均含量为 17． 2 %，
ＲSD值为 2． 3%。表明方法重复性较好。
2． 2． 4． 4 稳定性实验 精密称取编号为 1 － 5 的藤茶药材粉末
30mg，按“2． 2． 3”项下的方法制备供试品，并于 0，2，4，8，12，24h
按“2． 2． 1”项下的色谱条件进样分析，测定双氢杨梅素的峰面
积，计算得到其峰面积的 ＲSD 值为 1． 5%。表明供试品溶液在
24h内稳定性较好。
2． 2． 4． 5 加样回收率 精密称取编号为 1 － 5 的藤茶药材粉末，
共 9 份，置于具塞锥形瓶中，分别按高中低 3 个不同量加入双氢
杨梅素对照品溶液。即第 1 － 3 份各加入浓度为 0． 603mg·ml －1
的双氢杨梅素对照品溶液 4ml、第 4 － 6 份各加入 5ml、第 7 － 9 份
各加入 6ml。按“2． 2． 3”项下的方法制备供试品。按“2． 2． 1”项
下的色谱条件进样分析，测定双氢杨梅素峰面积并计算其总含
量。根据国际纯粹和应用化学联合会(IΜPAC)所推荐的回收率
计算公式［17］，计算双氢杨梅素的加样回收率，结果见表 1。实验
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2016 VOL． 27 NO． 3 时珍国医国药 2016 年第 27 卷第 3 期
结果表明本方法准确性较好。
表 1 藤茶中双氢杨梅素加样回收率的测定结果
序号
取样量
/mg
原有量
/mg
加入量
/mg
测得值
/mg
回收率
/%
各水平平均
回收率 /%
总回收
率 /%
ＲSD /%
1 15． 0 2． 58 2． 41 5． 00 100． 3 101． 9
2 15． 3 2． 63 2． 41 5． 10 102． 3
3 15． 2 2． 61 2． 41 5． 10 103． 1
4 15． 7 2． 70 3． 02 5． 80 102． 8 102． 8 102． 8 2． 5
5 15． 8 2． 72 3． 02 5． 85 103． 9
6 15． 0 2． 58 3． 02 5． 65 101． 8
7 15． 2 2． 61 3． 62 6． 35 103． 3 103． 5
8 15． 9 2． 73 3． 62 6． 50 104． 1
9 15． 5 2． 67 3． 62 6． 40 103． 2
n =9
2． 2． 4． 6 含量测定 精密称取不同产地加工的藤茶样品粉末
30mg，按“2． 2． 3”项下方法制备供试品溶液，按“2． 2． 1”项下色谱
条件进样分析，测定双氢杨梅素的峰面积并计算其含量，每份样
品平行测定 2 次，取平均值。结果见表 2。
表 2 不同产地加工藤茶样品中双氢杨梅素的含量测定结果
编号 产地和采收时间 加工方法 含量 /%
1 －1 2． 1 35． 39
1 － 2 2． 2 39． 32
1 － 3 桂林恭城 2． 3 37． 22
1 － 4 (2015 － 06 － 21) 2． 4 18． 30
1 － 5 2． 5 17． 16
1 － 6 2． 6 2． 42
2 － 1 2． 1 21． 15
2 － 2
桂林灵川
(2015 － 05 － 16)
2． 5 14． 43
2 － 3 2． 6 0． 59
3 － 1 2． 1 26． 04
3 － 2
南宁
(2015 － 07 － 15)
2． 2 26． 80
3 － 3 2． 3 26． 00
3 － 4 2． 5 15． 59
3 讨论
本实验以 3 个不同产地藤茶为研究对象，采用高效液相色谱
法测定了不同加工处理的藤茶样品中双氢杨梅素的含量。实验
结果显示，高温杀青、低温烘干及微波处理法的藤茶，其双氢杨梅
素的含量均明显高于自然晾晒的藤茶。实验中还分别采用自然
阴干法和自然晒干法对桂林恭城产的藤茶进行处理，结果显示两
种处理方法所得藤茶中双氢杨梅素含量相差不大，但双氢杨梅素
含量大约只有微波处理藤茶含量的 50%;而放置于阴暗潮湿环
境的藤茶，双氢杨梅素的含量则低至 3%以下。
以上实验结果表明，不同产地加工方法对藤茶的质量及藤茶
中有效成分的含量有很大影响。本实验结果进一步说明传统民
间藤茶多炮制使用是有科学道理的。藤茶采摘后立即杀青、烘
干，或采用微波处理的方法进行加工处理，可有效提高藤茶中双
氢杨梅素的含量，从而保证藤茶药材的质量;而中药材产地加工
常采用的自然晾晒法则不适用于作为藤茶的产地加工方法，否则
会使藤茶药材中有效成分双氢杨梅素的含量大大降低。
为了进一步探讨在阴雨潮湿天气若未能及时对藤茶进行杀
青、干燥加工处理对藤茶有效成分造成的影响，本实验模拟阴雨
潮湿天气，将新鲜采集的藤茶嫩茎叶置于阴暗潮湿环境放置数天
后，再烘干处理;然后用高效液相色谱法测定了这些藤茶样品中
双氢杨梅素的含量。实验结果显示，置于阴暗潮湿环境放置数天
的藤茶中双氢杨梅素含量低至 3%以下。由此可见，藤茶采摘后
必须立即进行杀青、烘干、或微波处理，特别是在阴雨潮湿天气。
否则放置时间越长，有效成分损失越多。
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