全 文 ：·!· #$%&’(’)*%+ ,-’*./. 0$12 3./.%$4- 5 ,+’*’4%+ 6-%$7%4)+)289 ::; <%*1%$89 =)+> : ?)> @
收稿日期：::A B @@ B @:
作者简介：李明 C @;AD B E，男，硕士研究生，研究方向：中药新药开发与研究，F7%’+：+’7’*2D:G@;H @ID> 4)7。通讯作者：苏子仁，男，研究
员，主要从事新药开发研究，F7%’+：/1J’$.*H 2J-(47> .&1> 4*。
相差不大，其原因可能是清脂六通丸制剂直接是由生
药粉末直接制丸而成。所以本研究选择回流 I: 7’*
作为本次样品的提取方式。
参考文献：
K @ L沈晓旭，鲁卫星，毛静远，等 > 清脂六通丸治疗高脂血症 C气滞血
瘀痰浊内阻证 E临床研究 K < L > 中国中医药信息杂志，::!，@
CG E：@I B @A>
K L高敬伟，郭泽明 > 高效液相色谱法测定大黄中的大黄素、大黄酚
的含量 K < L > 数理医药学杂志，::I，@; C E：@IA B @I;>
K D L国家药典委员会 > 中华人民共和国药典 ::! 年版一部 K M L > 北京，
化学工业出版社，::!： @N B @A>
C编辑：邹元平 E
O6P,法测定五指毛桃中补骨脂素和芹菜素的含量
李 明 @，陈志维 @，黎玉翠 @，陈振权 ，陈楚镇 ，苏子仁 @ C广州中医药大学，广州 !@:::I；> 河源市金源绿
色生命有限公司，广东河源 !@N::: E
摘要：目的 建立五指毛桃中补骨脂素和芹菜素的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法对五指毛桃药材
中补骨脂素和芹菜素进行含量测定。色谱柱：QR, ,@A 柱 C !: 77 S G> I: 77，! !7E；流动相：甲醇 B :> T
磷酸，梯度洗脱；流速：@> : 7P·7’* B @；柱温：D: U；检测波长：补骨脂素 G! *7，芹菜素 DDA *7；进样
量：@: !P。结果 补骨脂素在 :> :AD I V @> :G! : !2范围内线性关系良好， ! W :> ;;; ;，平均回收率 @::> GD T，
3M0 T W :> G! T C W ; E；芹菜素在 :> :I! I V :> A: : !2 范围内线性关系良好， ! W :> ;;; ;，平均回收率
@::> G@ T，3M0T W :> DG T C W ;E。结论 所建立的方法简便、快捷，重现性好，可用于该药材的质量评价。
关键词：五指毛桃；补骨脂素；芹菜素；高效液相色谱法
中图分类号：3AG> @ 文献标识码：X 文章编号：@::D B ;NAD C::; E:@ B ::! B :D
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A8B)$.,：3%&’d e’4’ O’$(%.；6/)$%+.*；Xc’2.*’*；O6P,
五指毛桃 C3%&’d e’4’ O’$(%. E，别名五爪龙、土五
加皮、土北芪等，源于桑科粗叶榕 #$%&’ ($!)* =%-+>
的根，为广东省道地中药材。《中华人民共和国药
典》记载，五爪龙味辛、甘，性平，有健脾补肺、利
·!·中药新药与临床药理 !#年 $月第 ! 卷第 $ 期
流动相
甲醇
#$ %&磷酸
# ’ (()*+
!!
,!
(( ’ (%)*+
!!(-#
,!(,#
(% ’ (.)*+
-#
,#
对照品溶液
五指毛桃样品溶液
空白溶剂
对照品溶液
五指毛桃样品溶液
空白溶剂
湿舒筋的功效 / ( 0。五指毛桃益气而不作火，补气而不
提气，扶正而不碍邪，兼能祛痰平喘、化湿行气、
舒筋活络，更加适合岭南多湿的气候特点，民间认
为功用和北芪相当，固有“南芪”之称 / % 0。《中华人
民共和国药典》和《广东省中药材标准》对五指毛
桃的质量控制仅限于性状鉴别和 123 鉴别。本文建
立了五指毛桃中补骨脂素和芹菜素的高效液相色谱
含量测定方法，以期快速、全面、有效地评价五指
毛桃的内在质量。
! 仪器与试药
456789 :;<<51 高效液相色谱仪 =配有 >4? @
(## 检测器、;A4(B#; 检测器、:1C!.! 柱温箱、
>-.# C>23 泵、?:5 @ (## 自动进样器 D；3EFG)HIHG+
色谱工作站；JK%##48型医用数控超声仪 = ##L，
昆山市超声仪有限公司 D。
五指毛桃药材由河源市金源绿色生命有限公司提
供，经广州中医药大学第一附属医院曾惠芳主任中药
师鉴定为桑科粗叶榕 !#$% &’() AMEI$ 的根。补骨脂
素 =供含量测定用，批号：((#BN @ %###N D，购自中
国药品生物制品检定所。芹菜素由广州中医药大学新
药开发研究中心分离制得，纯度为 NN$ % &。甲醇为
色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
! 方法与结果
# ! 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：O<3 3(.
柱 =%!# )) P ,$ -# ))，! !)D；流动相：甲醇 @ #$ % &
磷酸，梯度洗脱，洗脱曲线见表 (；流速：($ # )2·
)*+ @(；柱温：# Q；检测波长：补骨脂素 %,! +)，芹
菜素 . +)；进样量：(# !2。理论塔板数按补骨脂
素、芹菜素峰计算均不低于 % ###。
表 流动相梯度洗脱曲线 =& D
# 对照品溶液的制备 精密称取补骨脂素对照品
,$ (. )R，置 (# )2 容量瓶中，加甲醇至刻度，摇
匀，作为补骨脂素对照品贮备液；精密称取芹菜素对
照品 $ %. )R，置 (# )2容量瓶中，加甲醇至刻度，
摇匀，作为芹菜素对照品贮备液；分别精密吸取上
述补骨脂素对照品贮备液和芹菜素对照品贮备液各
( )2，置 (# )2容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，即得
每毫升含补骨脂素 #$ #,( . )R、芹菜素 #$ #% . )R
的对照品混合溶液。
# $ 供试品溶液的制备 取五指毛桃药材细粉约
%$ # R，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入乙醇
(## )2，密塞，称定重量，超声处理 # )*+，放
冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇匀，
滤过，精密量取续滤液 !# )2，蒸干，残渣加甲醇
溶解，转移至 ! )2 量瓶中，加甲醇至刻度，摇
匀，即得。
# % 专属性考察试验 精密吸取空白溶剂、补骨脂
素与芹菜素对照品混合溶液、五指毛桃供试品溶液
各 (# !2，进样测定，结果空白溶剂在补骨脂素、芹
菜素对照品相同保留时间位置上均未见干扰，结果
见图 (、图 %。
图 五指毛桃 C>23图谱 = %,!+)D
图 ! 五指毛桃 C>23图谱 = .+)D
# & 线性关系考察 精密吸取对照品混合溶液 %，
,，-，.，(#，(!，%#，%! !2 进行色谱测定，按上
述色谱条件测定峰面积，并以峰面积积分值 = * D对进
样量 = + D进行线性回归。结果见表 %。
表 ! 线性关系考察结果
# ’ 精密度试验 精密吸取上述对照品混合溶液 (#
!2，重复进样 - 次，测得补骨脂素平均峰面积积分
值为 N$ ,，S:4 T #$ ,B &，芹菜素平均峰面积积分
( U )*+
( U )*+
补骨脂素
芹菜素
线性范围 U !R
#$ #. - ’ ($ #,! #
#$ #-! - ’ #$ .%# #
回归方程
* T N,$ !(% +
* T -$ !B( +
’
#$ NNN N
#$ NNN N
·!· #$%&’(’)*%+ ,-’*./. 0$12 3./.%$4- 5 ,+’*’4%+ 6-%$7%4)+)289 :;;< =%*1%$89 >)+? :; @)? A
成 分
补骨脂素
芹菜素
取样量 B 2
A? ;A: !
A? ;::
A? ;CD !
A? ;C: !
A? ;;!
A? ;C< E
A? ;ED
A? ;
A? ;A: !
A? ;::
A? ;CD !
A? ;C: !
A? ;;!
A? ;C< E
A? ;ED
A? ;
样品含量 B 72
;? AFE :
;? AF< <
;? AE:
;? AEA F
;? AFF ;
;? AEC ;
;? A;? A<: !
;? A<; !
;? ; D
;? ;! ;
;? ;! D
;? ;!
;? ; :
;? ;! E
;? ;F E
;? ;E A
;? ;F D
加入量 B 72
;? A; E
;? A; E
;? A; E
;? AFD ;
;? AFD ;
;? AFD ;
;? :AA :
;? :AA :
;? :AA :
;? ;C! :
;? ;C! :
;? ;C! :
;? ; ;
;? ; ;
;? ; ;
;? ;!: E
;? ;!: E
;? ;!: E
测得量 B 72
;? CAE !
;? C:A ;
;? C:C <
;? C!E :
;? C! F
;? C!< E
;? ; C
;? ;! !
;? ;A <
;? ;E; ;
;? ;E;
;? ;EA A
;? ;E< F
;? ;EE C
;? ;E< <
;? A;; F
;? A;; E
;? A;; E
回收率 B G
<A;;? :A
A;;? !;
A;;? :E
A;;?
A;;? <;
A;;? E!
A;;? ;<
A;;? !F
A;;? !F
A;;? E!
A;;? DE
A;;? :C
A;;? :C
A;;? A<
<A;;? FD
平均回收率 B G
A;;? C
A;;? C
3H0 B G
;? C
;? C
表 ! 样品含量测定结果 I ! #， $ J C K
序号
A
:
C
补骨脂素 B 72·2 L A
;? AF! M ;? ;;C ;
;? AFE M ;? ;;E ;
;? AEA M ;? ;;D ;
芹菜素 B 72·2 L A
;? ; M ;? ;;; !
;? ;E M ;? ;;; E
;? ;! M ;? ;;; :
值为 :;? E，3H0 J ;? !E G。3H0 值均 N : G，结果
表明仪器精密度良好。
! # 稳定性试验 取上述供试品溶液 A; !O，按上述
色谱条件分别于 ;，:，，D，A:，: - 各测定 A
次，测得样品中补骨脂素平均峰面积积分值为
CC? D，3H0 J ;? E! G；芹菜素平均峰面积积分值为
!? F，3H0 J A? ;: G。3H0 值均 N : G，试验结果表
明供试品溶液在 : -内稳定。
! $ 重复性试验 按拟定的含量测定方法，对同一
批五指毛桃药材平行制备 D 份供试品溶液，测得补
骨脂素平均含量为 ;? AFD 72·2 L A，3H0 J A? : G；芹
菜素平均含量为 ;? ; 72·2 L A，3H0 J A? E: G。3H0
值均 N : G，试验结果表明该方法重复性良好。
! % 加样回收率试验 精密称取已知含量的同一批五
指毛桃药材 A? ; 2，分别精密加入一定量的补骨脂
素、芹菜素对照品，按供试品溶液制备项下操作，平
行操作 < 份，按上述色谱条件测定含量，计算回收
率，结果见表 C。
表 加样回收率试验结果 I $ J < K
! &’ 样品测定 按照供试品溶液制备项下操作，对
C批五指毛桃药材进行含量测定。测定结果见表 。
( 讨论
五指毛桃是广东省河源市道地药材之一，在华南
地区有着广泛的应用。按照国家“十五”攻关项目
“五指毛桃中药材规范化种植研究基地建设”的要
求，已经在河源市建立了五指毛桃 PQ6种植基地，
五指毛桃规范化、规模化生产形势已经初步形成。以
名老中医邓铁涛教授为代表的岭南医家，习用五指毛
桃治疗慢阻肺等多种疾病。但在药材市场上充斥着多
种外观上易与五指毛桃混淆的榕属植物。现有国家及
地方标准从性状和 #O, 鉴别方面对五指毛桃质量进
行评价，无法满足五指毛桃规模化、规范化种植和大
规模临床应用的需要。因此，五指毛桃药效物质的
含量测定是鉴别五指毛桃真伪，评价五指毛桃质量
的重要手段之一。
在前期药理研究中发现，五指毛桃中香豆素类成
分和黄酮类成分具有良好的镇咳、祛痰、增强免疫力
等作用，这两类成分正是五指毛桃发挥功效的基础。
文献报道五指毛桃成分含量测定，以香豆素类成分
补骨脂素、异补骨脂素、佛手苷内酯居多，未有黄
酮类相关成分含量测定的报道。因此，选择五指毛
桃中香豆素类成分补骨脂素，黄酮类成分芹菜素作
为指标，评价五指毛桃质量，能够将五指毛桃成分
与质量、药效相结合，更加有利于全面、客观评价
五指毛桃的质量。
本实验考察了回流、冷浸、超声等多种提取方
法，结果表明超声提取可提取完全，且超声提取操
作简便、快捷。本实验对溶媒种类、溶媒用量、超
声时间等因素进行了考察，最后确定供试品溶液的
制备选择 A;; 7O乙醇超声提取 C; 7’*为宜。本法采
用同一条件同时测定五指毛桃中补骨脂素和芹菜素
的含量，方法简便、快捷、重现性好，可用于该药
材的质量评价。
参考文献：
R A S中华人民共和国药典委员会 ? 中华人民共和国药典 I一部 K R H S ? 北
京：人民卫生出版社，A
C! I! K：F L E?
I编辑：邹元平 K