全 文 ：2008年 5月第 31卷第 3期 陕　西　中　医　学　院　学　报
May.2008　Vol.31　No.3 JournalofShaanxiColegeofTraditionalChineseMedicine · 65　·
藤梨根总黄酮提取方法及含量测定研究＊
王小平＊＊　　白吉庆
(陕西中医学院 , 陕西 咸阳 712046)
摘　要:目的 筛选藤梨根中总黄酮的提取方法 , 为进一步研究总黄酮的最佳提取工艺 , 充分利用和开发藤梨
根资源提供科学依据。方法 以芦丁为对照品 ,用分光光度法测定不同方法提取的藤梨根中总黄酮的含量。 结果
甲醇索氏提取法所得的总黄酮的含量较高 ,以芦丁计为 7.93 %。结论 与甲醇回流提取法和甲醇超声提取法比
较 , 甲醇索氏提取法所得提取物的总黄酮含量最高。
关键词:藤梨根;总黄酮;分光光度法
中图分类号:R927.2　　文献标识码:A　　文章编号:1002-168X(2008)03-0065-02
TheExtractingMethodandContentAssayofTotalFlavonesinRadixActinidiaeArgutae
WangXiaoping　　BaiJiqing
(ShaanxiUniversityofChineseMedicine, Xianyang, Shaanxi, 712046)
AbstractObjective:ToscreentheextractingmethodoftotalflavonesinRaixactinidiaeargutae, andtoprovidescientificba-
sesforfurtherresearchofoptimizedextractingtechniqueoftotalflavonesandfulluseanddevelopmentofRaixactinidiaeargutaere-
sources.Methods:Weusedrutinasacomparison, andappliedspectrophotometrytodeterminethecontentoftotalflavonesinRaix
actinidiaeargutaewithdifferentextractingmethods.Results:ThecontentoftotalflavonesextractedwithSotexextractionwithmeth-
anolwasrelativelyhigher, andaccountedfor7.93% calculatedonrutin.Conclusion:Comparedwithmethanolrefluxmethodand
methanolultrasonicextraction, thetotalflavonescontentextractedbymethanolSotexextractionmethodisthehighest.
KeyWords:Raixactinidiaeargutae, totalflavones, spectrophotometry
　　藤梨根为猕猴桃科猕猴桃属植物中华猕猴桃
ActinidiaChinensisPlanch,或软枣猕猴桃 Actinidia
argutaPlanch的根。猕猴桃属全球约 54种 ,分布
于马来西亚至西伯利亚东部的广阔地带 ,我国是主
产区。近年发现该属植物均具有抗癌 、降血脂等活
性 ,预示有广阔的开发前景 [ 1] 。我省 (陕西省)广
泛栽培 ,栽植面积占全国一半以上。全株含猕猴桃
碱(actinidine),根含熊果酸 (ursolicacid)、齐墩果
酸(oleanolicacid)、琥珀酸(succinicacid)、胡萝卜
甙(daucosterol)以及精氨酸 、赖氨酸 、亮氨酸 、丙氨
酸等多种成分元素 ,现代药理研究表明:藤梨根具
有抗肿瘤 、调节免疫等作用 ,可用于治疗消化系统
癌症 、黄疸 、消化不良 、呕吐 、腹泻等症[ 2-5] 。作者
通过成分预试验 ,藤梨根的甲醇提取液黄酮的鉴别
反应呈阳性 。但对藤梨根中总黄酮的研究至今未
见报道 ,为此 , 笔者进行了本项研究。
1　仪器及试药
1.1　仪器　UV-2100紫外 -可见分光光度计
(成都科析电子商务有限公司);8953 Dietikon型
电子分析天平(瑞士 ,精度 0.1mg);AS2060B型超
声仪(天津奥特赛恩斯仪器有限公司)等。
1.2　试药　甲醇 、亚硝酸钠 、硝酸铝 、氢氧化钠等
均为分析纯;藤梨根(产地:汉中(野生),经马存德
鉴定为猕猴桃科软枣猕猴桃 (Actinidiaarguta(
Sieb.etZucc.)Planch的根);芦丁对照品(080-
9705)由中国药品生物制品检定所提供。
2　方法与结果
2.1　芦丁对照品标准曲线的制备 [ 6] 　精密称取
无水芦丁对照品适量 ,加甲醇制成每毫升含 0.268
mg的溶液 。吸取该溶液 0、1、2、3、4、5mL,分别置
25mL容量瓶中 ,加水至 6mL,加 5%亚硝酸钠溶
液 1mL,摇匀 ,静置 6min;加 10 %硝酸铝溶液 1
mL,摇匀 ,放置 6 min;加 4.3%氢氧化钠溶液 10
mL,加水稀释至刻度 ,摇匀 ,放置 15min,以相应试
剂为空白 ,按紫外 -可见分光光度法(《中国药典 》
2005年版一部附录 VA),在波长 500nm处测定吸
光度 。以浓度为横坐标 ,吸光度为纵坐标 ,绘制标
准曲线[ 7] ,结果见表 1和图 1。
表 1　芦丁标准曲线吸光度 -浓度值表
芦丁浓度(mg/mL) 0 0.0107 0.0214 0.0322 0.0429 0.0536
A吸光度 0 0.1408 0.2756 0.4342 0.5542 0.6956
＊
＊＊
基金项目:陕西省科技攻关项目(2006K16-G13(2))
作者简介:王小平(1976-　), 女 ,执业药师 , 主要从事中药资源的开发利用及新药研究。
DOI :10.13424/j.cnki.jsctcm.2008.03.035
陕　西　中　医　学　院　学　报 2008年 5月第 31卷第 3期
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图 1　芦丁标准曲线
2.2　供试品总黄酮含量测定　精确移取各样品溶
液 1mL,置 25.0mL容量瓶中 , 加水至 6 mL,加
5%亚硝酸钠溶液 1mL,摇匀 ,静置 6min;加 10%
硝酸铝溶液 1mL,摇匀 ,放置 6min;加 4.3%氢氧
化钠溶液 10 mL, 加水稀释至刻度 , 摇匀 , 放置
15min,在波长 500nm处测定吸光度 ,根据标准曲
线算出样品中总黄酮含量 。
2.3　提取方法的研究
2.3.1　甲醇超声提取法 　将藤梨根用粉碎机粉
碎 ,分别精密称取 1.0006g、1.0018g、1.0014g藤
梨根粉末 ,置于具塞三角瓶中 ,加甲醇 50mL,超声
30min,倾出上清液 ,加甲醇 50mL,超声 20min,合
并 2次上清液 ,滤过 ,置 100mL量瓶中 ,加甲醇至
刻度 ,摇匀 ,即得 。
2.3.2　甲醇回流提取法　取藤梨根粉末 ,分别精密
称取 1.0018g、1.0028g、1.0004g, 95%甲醇回流两
次 ,每次加 95%甲醇 50mL,第 1次回流 2h,第 2次
回流 1.5h,回收溶剂至干 ,残渣用甲醇溶解并转移
至 100mL量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,即得。
2.3.3　甲醇索氏提取法　取藤梨根粉末 ,分别精
密称取 1.0060g、1.0092g、0.9995 g,置于索氏提
取器中 ,加甲醇 100mL,加热回流至提取液无色 ,
提取液转移至 100 mL量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇
匀 ,即得。
2.4　方法学考察
2.4.1　稳定性试验　取甲醇索氏提取法所得的供试
品溶液 ,按供试品总黄酮含量测定项下所述方法 ,分
别在 0h、1h、2h、3h、5h不同时间点进行检测 , SR为
0.79%,表明供试品溶液在 5h内是稳定的。
2.4.2　重复性试验　用甲醇索氏提取法平行制备
6份供试品溶液 ,按供试品总黄酮含量测定项下所
述方法 ,分别测定其吸光度 , SR为 0.58%,结果表
明重复性好 。
2.4.3　精密度试验　取甲醇索氏提取法所得的供试
品溶液 ,按供试品总黄酮含量测定项下所述方法 ,测
定其吸光度 ,连续测定 5次 ,其 SR为 0.35%。
2.4.4　回收率试验　精确移取 0.5mL样品溶液 5份
置 25mL容量瓶中 , ,分别准确加入芦丁对照品甲醇
液 0.5mL(0.268mg/mL),按供试品总黄酮含量测定
项下所述方法 ,分别测定其吸光度 ,并计算回收率 ,其
回收率为 100.08%(n=5), SR为 0.95%。
2.5　结果　按 2.2项下所列方法对各提取方法所得
样品进行总黄酮含量(以芦丁计)测定 ,结果见表 2。
表 2　各提取方法所得样品测定结果(n=3)
提取方法 n 样品量(g) 总黄酮含量(g) 总黄酮百分含量%(x) SR%
甲醇索氏提取法 3
1.0060
1.0092
0.9995
0.0830
0.0801
0.0786
7.93 0.71
甲醇回流提取法 3
1.0018
1.0028
0.0693
0.0743
1.0004
0.0699
7.11 0.53
甲醇超声提取法 3
1.0006
1.0018
0.0497
0.0490
1.0014
0.0548
5.11 1.06
注:结果说明甲醇索氏提取法所得的总黄酮的含量最高。
3　讨论
3.1　本实验对甲醇超声提取法进行比较研究 ,第
1次超声 30min,第 2、3次各超声 20min,分别将 3
次所得的提取液进行总黄酮含量测定 ,结果发现 ,
经两次提取得率已达 95%以上 ,因此 ,本实验采用
了甲醇超声提取两次 ,第 1次超声 30min,第 2次
超声 20min。
3.2　对甲醇回流提取法进行研究 ,第 1次回流 2h,
第 2、3次各回流 1.5h,分别将 3次所得的提取液进
行总黄酮含量测定 ,结果发现 ,经两次提取得率已达
95%以上 ,因此 ,本实验采用了甲醇回流提取两次 ,
第 1次回流提取 2h,第 2次回流提取 1.5h。
3.3　本次试验对藤梨根总黄酮的提取方法进行初
步研究 ,试验结果表明:甲醇索氏提取法最好 ,但对
藤梨根总黄酮的最佳提取工艺及其药理作用有待
进一步研究 。
参考文献
[ 1]梁畴芬.中国植物志(49- 2分册)[ M] .北京:北京出
版社 , 1984.
[ 2]南京药学院 《中草药学 》编写组.中草药学 (中册)
[ M] .南京:江苏人民出版社 , 1976:662-623.
[ 3]陈贯诚.猕猴桃 [ J] .中药材科技 , 1981, 4(1):30-31.
[ 4]陈德轩 , 潘立群.抗肿瘤植物药藤梨根 [ J] .中药材 ,
2004, 27(2):86-87.
[ 5]国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草(第三
册 ,第九卷)[ M] .上海:上海科学技术出版社 , 1999.
[ 6]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[ M] .
北京:化学工业出版社 , 2005:246-247.
[ 7]王小平 ,林励 , 陈震霖.不同产地蜂胶中总黄酮的含量
测定 [ J] .现代中医药 , 2007, 27(5):76-77.
(收稿日期:2008-01-04)