全 文 ：·论著·
藤茶总黄酮对免疫性肝损伤小鼠的保护作用
欧贤红 1 ,郑作文 2
(1.广西省桂林医学院 ,广西 桂林 541004;2.广西省中医学院 ,广西 南宁 530001)
摘要　目的　探讨藤茶总黄酮(Tengchaflavonoids, TF)对卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)诱导的免疫性肝损伤小鼠的保护
作用。方法　采用 BCG加 LPS诱导免疫性肝损伤小鼠模型 ,测定血清中 ALT、 AST、MDA、SOD等肝功能指标 , 对肝组织进行
HE染色 , 光镜下进行组织病理学检查。结果　TF能明显降低肝损伤模型动物血清ALT、 AST、MDA,明显提高 SOD活性。不
同程度的改善肝损伤动物肝组织病理学改变。结论　TF对免疫性肝损伤有保护作用 , 降低自由基引起的氧化作用可能是其
机制之一。
关键词　藤茶总黄酮;免疫性肝损伤;抗氧化
[中图分类号 ] 　R575.1 [文献标识码 ] 　A 学科分类代码:　320.2499
文章编码:1001-8131(2011)01-0001-02
ProtectiveEfectofFlavonoidsfromAmpelopsisGrosedentataonImmunologicalLiverInjuryinMice
OUXianhong1 , ZHENGZuowen2
(1.GuilinMedicalUniversity, Guilin541004, China;
2.GuangxiTraditionalChineseMedicalUniversity, Nanning530001, China)
　　Abstract　ObjectiveToinvestigatetheeffectofTengchaflavonoids(TF)onimmunologicalliverinjuryinducedbyBCGplusLPSinmice.MethodsBCGplusLPSwereusedtoproduceimmunologicalliverinjurymodelinmice.Serumhepaticfunctionindexes,
suchasALT, AST, MDAandSODweremeasure.LivertissuesweredyedwithHEandhistopathologicalchangesinliverwereobserved
underlightmicroscope.ResultsTFinhibitedsignificantlytheincreaseofALT, ASTandMDAinserumwhileSODwasincreased.His-
topathologicalchangeswereimproved.ConclusionTFshowedsignificantprotectiveactiononimmunologicalliverinjuryinmice, and
theefectondepressiontheoxygenationoffreeradiclemaybeitsoneofprotectionlivermechanisms.
Keywords　Tengchaflavonoids;Immunologicalliverinjury;Anti-oxidation
　　藤茶系葡萄科蛇葡萄属植物显齿蛇葡萄科 Ampelosis
grossedentata(Hand.-Mazz.)W.T.Wang的嫩茎叶。经传统
加工揉制 、干燥而成。广泛分布于广西各地以及云南 、广东 、
湖南等地 [ 1] 。其性凉味甘 、淡 , 具有清热解毒 、消肿止痛 、祛
风湿 、强筋骨等功效 ,主治皮肤癣癞 、黄疸型肝炎 、感冒风热 、
咽喉肿痛 、急性结膜炎 、痈疔等 [ 2] 。 TF是从广西藤茶中提取
的主要化学成分 , 总黄酮是近年国内外研究热点 ,证实其有
多种生物活性。本文采用 BCG加 LPS诱导免疫性肝损伤小
鼠模型观察 TF对免疫性肝损伤的影响。
1　材料与方法
1.1　材料与仪器
TF由广西中医学院中药化学教研室提供 ,含量为 89%。
联苯双酯(BPD,广州市星群药业有限公司);D-GaLN(启
东市久丰工贸有限公司);LPS(Sigma公司);BCG(上海生物
制品研究所);ALT、AST试剂盒(南京建成生物工程公司)。
清洁级昆明种小鼠由广西壮族自治区食品药品检验所提供
(SCXK桂 2003-0001)。半自动生化仪(德国 Chem300)。
1.2　方法
1.2.1　分组及给药:18 ～ 22g小鼠 , ♀♂兼用 , 按体重随机
分成 A、B、C、D、E、F共 6组 , A、B组给常水 , C组给 BPD水
溶液 , D、E、F组均给 TF水溶液 , 均 ig给药 , 给药容量为 20
mL/kg, 各组均连续给药 10d。
1.2.2　模型制备 [ 3]:给药前除 A组注射等量水外 , 其余各
组尾静脉注射 BCG0.2mL/只。造模当日药物 , 第 10天再
次尾静脉注射 LPS4μg/只 , 10h后摘眼球取血 ,离心分离血
清 ,测定 ALT、AST、SOD及 MDA。
1.3　统计学方法:采用 SPSS11.0软件进行统计处理 , 两均
数间比较行 t检验。
2　结果
2.1　生化指标变化:表 1结果显示 TF高 、中剂量组可显著
性降低免疫性肝损伤小鼠血清 ALT、AST, TF低剂量组对
AST有显著降低作用 , 对 ALT的作用虽有降低趋势但无显
著性差异。 TF高 、中剂量还明显升高血清中 SOD值 , 对
MDA具有明显降低作用。
表 1　TF对 BCG加 LPS诱导的免疫性肝损伤小鼠血清中 ALT、AST、SOD和 MDA的影响(x±s, n=10)
组别 剂量mg·Kg-1
ALT
U· L-1
AST
U· L-1
SOD
kU·L-1
MDA
μmol· L-1
正常组 — 61.09±13.78② 133.12±9.14② 222.60±21.06② 8.44±2.45②
模型组 — 151.68±22.47 185.81±7.15 107.29±16.01 20.00±4.16
BPD组 600 113.67±36.06② 164.11±18.62② 196.32±16.35② 10.22±2.85②
TF组 200 105.34±20.26② 151.92±12.00② 162.50±17.23② 14.30±2.29②
TF组 100 123.77±22.26① 147.94±12.79② 138.23±17.01② 16.13±2.98①
TF组 50 142.29±50.66 162.77±9.31② 107.83±17.09 18.93±2.21
　　注:与模型组比较①P<0.05, ②P<0.01
2.2　病理变化:空白组肝细胞索排列规则 , 肝小叶结构清晰,
汇管区结构正常 , 未见炎症细胞浸润和肝细胞变性 、坏死等
明显的病理组织学改变 。BCG+LPS模型组无肝小叶结构 ,
[下转第 3页 ]
·1·　哈尔滨医药 2011年第 31卷第 1期
可达标。
表 1　治疗不同时间诊所血压的变化
时间 收缩压(mmHg)
降压幅度
(mmHg)
舒张压
(mmHg)
降压幅度
(mmHg)
治疗前 162.63±9.17＊ 102.14±3.61＊
治疗后 1周 145.83±5.61＊ 16.70 090.67±5.37＊ 11.47
治疗后 2周 135.61±9.75＊ 27.02 085.33±6.24＊ 16.81
治疗后 4周 133.78±7.12＊ 28.85 083.65±8.05＊ 18.49
治疗后 8周 129.38±5.42＊ 33.25 079.10±6.84＊ 23.04
　　注:与治疗前比较 , ＊P<0.01
表 2　治疗不同时间动态血压的变化
时间 治疗前 治疗后 4周 治疗后 8周
收缩压
　白昼 152.45±9.39 126.09±8.18＊ 122.44±6.35＊
　夜间 130.45±9.71 116.73±9.49＊ 110.25±5.91＊
　24h 143.59±8.81 119.68±7.49＊ 115.56±7.23＊
舒张压
　白昼 98.18±7.80 80.63±5.61＊ 76.85±6.23＊
　夜间 87.18±6.33 70.91±7.42＊ 68.25±7.21＊
　24h 95.59±7.12 78.45±5.00＊ 74.23±6.58＊
　　注:治疗前比较 , ＊P<0.01
表 3　治疗不同时间血压负荷的变化
时间 治疗前 治疗后 4周 治疗后 8周
收缩压
　白昼 44.75±30.65 15.24±21.53＊ 12.46±10.38＊
　夜间 68.60±25.69 22.06±23.65＊ 16.24±08.97＊
　24h 47.97±36.02 16.97±04.27＊ 14.35±06.24＊
舒张压
　白昼 56.60±27.57 26.36±24.34＊ 14.24±10.27＊
　夜间 54.39±25.55 27.88±27.29＊ 18.35±16.38＊
　24h 55.41±27.37 26.70±23.41＊ 16.54±12.35＊
　　注:与治疗前比较 , ＊P<0.01
表 4　治疗不同时间血压达标情况(<140/90mmHg)
时间 例数 达标率(%)
2周 48 60
4周 52 65
8周 72 90
2.3　随访中仅有 4例在治疗初期出现头晕及恶心等症状 ,
以后逐渐消失 ,未影响治疗 ,治疗前后肝功 、肾功 、血电解质 、
尿酸等均未见明显变化。
3　讨论
2级以上高血压往往需要 2种以上降压药联合治疗。RAS激活在高血压的病理生理机制中具有重要作用 ,由高血
压所致的各种靶器官损害如左心室肥厚 、心力衰竭 、心肌梗
死 、肾功能损害以及脑卒中等均与 AngⅡ的参与密切相关 ,
ARB类药物可以选择性阻止 AngⅡ与 AT1受体的结合 , 阻
断 AngⅡ的缩血管及其他心血管活性作用 , 进而降低血压与
靶器官损害的危险性 。厄贝沙坦具有与 AT1受体结合力
强 、生物利用度高 、半衰期长(11 ～ 15 h)以及不受食物影响
等优势 ,具有长效平稳的降压作用 , 同时厄贝沙坦具有可靠
的靶器官保护作用 , 能够保护肾脏 、降低尿蛋白以及逆转左
心室肥厚等 [ 3-5]。氢氯噻嗪降压证据充分 , 并且价格低廉 ,
虽然长时间大量应用可能对糖脂代谢与血液电解质产生一
定影响 ,但多项研究证实 , 应用中小剂量的噻嗪类利尿剂
(相当于 12.5 ～ 25mg/d的 HCTZ)对代谢的影响甚微 , 对患
者不会产生具有临床意义的不利影响 , 与 ARB联合应用时
尤为如此 [ 6-7] 。氢氯噻嗪通过排钠利尿减少血容量而降低
血压 ,但是在降压的同时可能会由于过量的排钾作用而导致
低钾血症;厄贝沙坦通过阻断 RAS系统阻断醛固酮的保钠
排钾作用 ,由此抵消氢氯噻嗪低钾血症的不良反应。本研究
采用国产固定复方制剂依伦平作为 2级高血压的初始治疗 ,
研究表明可以早期降压达标 , 而且降压平稳 , 可以有效控制
血压晨峰 ,降低血压负荷。在降压同时未发现明显的不良反
应。依伦平每日给药 1次 , 服药方便 , 有助于提高病人的依
从性 ,从而提高降压达标率。 由于各方面条件所限 ,本研究
纳入病例较少 ,且观察时间较短 , 对于长期服用该药的疗效
及安全性还需要更大规模临床试验加以验证。
参考文献
[ 1] 　中国高血压防治指南修订委员会.中国高血压防治指南(2005
年修订版)[J].中国卒中杂志 , 2006, 1:575-582.
[ 2] 　姜红 ,柯元南 ,孙宁玲 , 等.比索洛尔 /氢氯噻嗪复方片对血压
晨峰的影响 [ J].中华高血压杂志 , 2008, 16:412-416.
[ 3] 　何明海 ,杨文翔 ,张晋波.厄贝沙坦对糖尿病肾病患者尿蛋白
的影响 [ J] .华西医学 , 2004, 19:236-237.
[ 4] 　BurnKD.AngiotensinⅡ anditsreceptorsinthediabetickidney
[ J] .AmJKidneyDis, 2000, 36:449.
[ 5] 　郭晓曦 ,吴利平 ,何海潇 ,等.厄贝沙坦抗高血压疗效及其对左
室肥厚的逆转作用 [ J].中国心血管杂志 , 2008, 13:120-121.
[ 6] 　WeirMR, NeutelJM, BhaumikA, etal.Theeficacyandsafetyof
initialuseofirbesartan/hydrochlorothiazidefixed-dosecombina-
tioninhypertensivepatientswithandwithouthighcardiovascular
risk[J].JClinHypertens, 2007, 9:23-30.
[ 7] 　NeutelJM, SmithD.Ambulatorybloodpressurecomparisonofthe
anti-hypertensiveeficacyoffixedcombinationsofirbesartan/
hydrochlorothiazideandlosartan/hydrochlorothiazideinpatients
withmild-to-moderatehypertension[ J].JIntMedRes, 2005,
33:620-631.
收稿日期:2010-11-22
[上接第 1页 ]
肝细胞呈弥漫性中度至重度水肿 ,个别区域有肝细胞点状坏
死 , 汇管区炎细胞浸润明显 , 少数出现广泛的肝细胞坏死。
TF高剂量组肝脏病变较 BCG+LPS模型组明显轻 , 肝小叶
结构清晰 , 个别区域有肝细胞轻度水肿 、未见有肝细胞点状
坏死;TF中剂量组肝小叶结构尚清晰 , 见有肝细胞轻度水
肿 , 未见有肝细胞点状坏死;TF低剂量组肝小叶结构尚清
晰 , 肝细胞轻度水肿 ,未见有肝细胞坏死。
3　讨论
BCG+LPS被广泛用于免疫性肝损伤的实验研究模型 ,
其病理改变及肝细胞损伤机制均与病毒性肝炎相类似 , 被认
为是研究病毒性肝炎发病基理和治疗方法较为理想的模型
之一 [ 4] 。研究结果表明 , TF可显著抑制免疫性肝损伤模型
动物血清 ALT、AST活性的升高 , 不同程度的改善肝脏病理
学变化 ,提示 TF对免疫性肝损伤模型动物有明显的保护作
用。 TF可升高肝损伤小鼠血清中 SOD活性 , 降低 MDA含
量 ,提示 TF的保肝机制与加速自由基的清除 、减少脂质过氧
化的发生 、稳定细胞膜结构密切相关 , 但具体机制还有待进
一步研究。 参考文献
[ 1] 　广西中医药研究所编.广西药用植物名录 [ M] .南宁:广西人
民出版社 , 1986:300.
[ 2] 　全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编 ,下册 [ M] .北京:人
民卫生出版社 , 1978:789.
[ 3] 　徐叔云 ,卞如濂 ,陈修.药理实验方法学 [ M] .3版.北京:人民
卫生出版社 , 2002:1348-1350.
[ 4] 　王华 ,魏伟 ,岳莉 ,等.白芍总苷对卡介苗加脂多糖引起的小鼠
免疫性肝损伤的保护作用 [ J] .中国药理学通报 , 2004, 20(8):
875-878. 收稿日期:2010-11-02
·3·　哈尔滨医药 2011年第 31卷第 1期